全 文 ：·生物技术 · 北方园艺 2010(2):166 ～ 168
作者简介:程军(1968-), 女 ,吉林四平人 , 硕士 , 实验师 , 现主
要从事遗传学实验教学工作。 E-mail:junjuncheng1990@so-
hu.com。
收稿日期:2009-09-20
重瓣长寿花花序离体快繁研究
程 　军
(吉林师范大学生命科学院 ,吉林四平 136000)
　　摘　要:为研究重瓣长寿花的离体快繁技术 ,选用重瓣长寿花的花序作为外植体 ,以
MS为基本培养基 ,比较添加 4种浓度的 6-BA 和 IAA 对重瓣长寿花丛生芽诱导的效果。
结果表明:花序在添加 6-BA 为 2.5 mg/ L 、IAA 为 1.0 mg/ L 的适宜培养基下可直接诱导
出大量丛生芽 ,经过继代培养 ,诱导生根 ,移栽可进行快繁 。
关键词:重瓣长寿花;花序;丛生芽;组织培养
中图分类号:S 681.903.6　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2010)02-0166-03
　　长寿花(K alanchoe blossf eldiana)为景天科伽
蓝菜属多年生短日照多浆植物 , 作为盆花栽培的多
为矮生性状较强的园艺杂交品种。花有红色 、粉红
色 、橙黄色 、黄色 、白色等 , 是优良的室内观赏花卉 。
重瓣长寿花(Double -ty pe K alanchoe blossf eldi-
ana)为近年来推出的新品种 , 现风靡欧洲 , 在零售
市场获得了巨大成功 , 目前已进入我国市场[ 1] 。重
瓣长寿花的繁殖多以扦插为主[ 2] ,关于长寿花组织培
养以及快繁方面的研究多以单瓣长寿花的叶 、茎为外
植体[ 3-4] ,很少有用长寿花花序进行组织培养的研
究[ 5] ,经查阅资料 ,还没有关于重瓣长寿花离体快繁
方面的研究。该研究以重瓣长寿花的花序为外植体 ,
进行组织培养 ,以期建立重瓣长寿花的离体快繁体系。
1　材料与方法
1.1　试验材料
2009年 3月初从花市上采购的健壮重瓣长寿
花 ,株高 20 cm 左右 ,红花品种 ,正在盛开。
1.2　消毒与接种
剪取5～ 6 cm长的花序 ,低温冷藏 24 h后 ,自来水冲
洗30 min以上 , 再用 75%酒精消毒 30 s , 移至超净工作
台上用 20%次氯酸钠消毒 5 ～ 8 min , 无菌水冲洗 5次。
将花序剪成带3 ～ 4朵花的小花序 ,形态学上端朝上接种
于4种诱导培养基中 ,每瓶3个 ,进行诱导培养。
1.3　培养基和培养条件
1.3.1　诱导培养基　以 MS 为基本培养基 ,加入蔗糖
30 g/L 、琼脂 6 g/L 、椰子水 5%和添加不同浓度的
6-BA 、IAA ,分别为1 、2、3、4号。
1.3.2　继代培养基　参照诱导培养基 ,添加不同浓度的
6-BA 、IAA ,分别为5 、6 、7号培养基 ,其中只有 7号添加
椰子水和活性炭 ,尝试比较研究椰子水和活性炭的作用。
1.3.3　生根培养基　以 1/2MS为基本培养基[ 4-5] ,加
入蔗糖 30 g/L 、琼脂 6 g/L 、椰汁 5%和不同浓度的
NAA ,分别为 8、9 、10号。
1.3.4　培养条件　培养温度(25±1)℃,光照2 500 lx ,
光照时间12～ 14 h/d。
2　结果与分析
2.1　丛生芽的诱导
3月 25日将外植体接种在含有不同浓度植物激素
的培养基上 ,13 d左右可观察到小花序萌动 ,花梗基部
略膨大 ,有微小的丛生芽萌生出来。30 d左右丛生芽明
显可见。45 d对培养物拍照 ,如图1。可见花儿鲜艳 、芽
丛嫩绿。对外植体萌生丛生芽情况进行统计 ,如表 1所
示 ,在添加不同浓度的6-BA 、IAA的培养基上 ,小花序
诱导形成丛生芽的情况差别很大。当 6-BA 为 2.5
mg/L ,IAA为1.0 mg/ L时 ,分化率最高。继续观察 ,发
现分化率越低 ,丛生芽发育越不好 ,没有诱导出丛生芽
的外植体最后都褐化了。估计丛生芽发育过程也出现
群体效应 ,即不定芽诱导发育越多 、效果越好[ 6] 。
　　表1　不同浓度的植物生长调节剂对花序丛生
芽形成的影响
培养基
序号
6-BA
/ mg·L-1
IAA
/mg·L-1 接种数 成活数 分化数
分化率
/ %
1 1 0.5 15 3 0 0
2 2 1.0 15 7 3 42.8
3 2.5 1.0 15 12 12 100
4 3 1.5 15 9 8 88.9
2.2　继代培养及壮苗
5月 4日将3月 25日接种在 3、4号培养基中的重
瓣长寿花丛生芽进行切割 ,每块丛生芽体大约含有 10
个芽 ,每瓶接种 4块 ,继代培养在 3种继代培养基中 ,植
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物激素及其它添加物如表2。表中5 、6号培养基是根据
诱导培养基配制 ,但无椰子水;7号培养基另添加了椰子
水和活性炭。20 d左右统计增殖率 ,增殖率=增殖芽苗
数/接种外植体数[ 3] ,结果见表 2。3种培养基中丛生芽
增殖率都较明显。但是丛生芽颜色 、形态差异较大。没
有添加椰子水和活性炭的 5、6号培养基中丛生芽的叶
片较小 ,颜色较淡 ,茎与茎界线不明显 ,许多不定芽基部
连在一起 ,如图 2;而添加了椰子水和活性炭的7号培养
基中 ,丛生芽的叶片相对较大 ,颜色浓绿 ,茎与茎界线明
显 ,平行直立于培养基中 ,外形较好。可见 ,在继代培养
基中添加椰子水和活性炭有利于不定芽的成型。
　　表2　不同浓度激素及添加物对丛生芽继代
培养的影响
培养基
序号 6-BA
IAA
/ mg·L-1
椰子水
/ %
活性炭
/ g·L-1
接种
芽数
20 d后
芽数 增殖率
5 2 1.0 40 约240 5
6 1.5 1.0 40 约210 4.25
7 2 0.5 20 0.5 40 180 3.5
2.3　生根培养
配制3种生根培养基 8 、9 、10号 ,5月 26日接种继
代培养在 5 、6号培养基中的不定芽。6月 8日观察都生
根 ,萌生出绒毛状根;6月12日观察 ,NAA 为 0.2 mg/L
的生根培养基中出现少量细长根 ,NAA 为0.5 mg/L 的
生根培养基中没有细长根出现 ,但有愈伤组织出现 ,
NAA 为 0.3 mg/L 的生根培养基中不定芽生根情况则
介于二者中间 ,如表 3。同时观察前面 5号继代培养基
中的不定芽也有根发出 ,根细长 ,没有绒毛状根。
　　表3　不同浓度的 NAA对花序丛生芽生根的影响
培养基序号 NAA/mg·L-1 生根形态特点
8 0.2 大多数绒毛状根,少量细长根
9 0.3 绝大多数绒毛状根 ,极少细长根
10 0.5 几乎都是绒毛状根 ,周围还出现愈伤组织
2.4　驯化与移栽
6月19日开始练苗 ,将瓶苗由培养箱移至通风明亮
的室内 ,放置2 d ,然后打开瓶盖 ,再锻炼 1 d。6月 22日
先用清水洗去残留的培养基[ 7] ,再用0.1%的高锰酸钾
图 1　花序进行诱导产生丛生芽 图2　花序诱导的丛生芽继代
图 3　花序丛生芽诱导生根 图4　花序诱导的小苗进行土培
浸泡小苗2 min ,移至小花盆中进行土培 ,花土为一般沙
质土壤 ,6月25日观察已成活。7月19日拍照如图4。
3　讨论与小结
重瓣长寿花的花序在适宜的条件下可以直接诱导
出丛生芽。以MS为基本培养基 ,激素含量为 2.5 mg/L
的6-BA和1.0 mg/L的 IAA组合 ,另添加5%椰子水 ,
可以直接诱导丛生芽产生。在丛生芽的诱导过程中发
现 ,若刚开始丛生芽长势不佳 ,分离出去继代效果也不
好;若开始丛生芽诱导数量多 ,分离出去继代的效果也
好 ,并且原培养瓶中继续有芽萌生 ,4个多月后仍有新的
丛生芽萌发 ,似乎培养基不枯竭 ,它就有源源不断萌生
的趋势。在长寿花的快繁研究中 ,外植体的选择多以叶
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和茎为主 ,该试验证明花序经过诱导也能进行快繁。以
花序为外植体直接诱导丛生芽繁殖周期短 , 不伤害母株
并保持母体优良性状 ,是较为理想的外植体。
适当的添加物可以改善重瓣长寿花丛生芽的生长
状况。继代培养中 ,培养基中去掉椰子水和活性炭的情
况下 ,丛生芽的叶片小 ,颜色淡 ,许多不定芽基部不分
开 ,这样对下一步诱导生根 、移栽造成难度;而对比添加
了椰子水和活性炭的培养基中 ,丛生芽叶片增大 ,颜色
浓绿 ,茎独立 ,不定芽形态好 ,便于生根 、移栽。可见 ,在
继代壮苗培养基中添加椰子水和活性炭 ,效果更好。添
加较低浓度的 NAA诱导生根情况效果好。以 1/2MS
培养基为基础 ,在分别添加了浓度为 0.2、0.3、0.5 mg/L
NAA的情况下 ,以NAA浓度为 0.2 mg/L 的培养基诱
导生根效果最好。值得一提的是 ,在 5号培养基中既有
不定芽的增殖 ,也有根的萌生。此培养基能否进一步加
速重瓣长寿花的快繁 ,这有待于进一步的研究。
参考文献
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生[ J] .园艺学报, 2004 ,31(2):249-252.
Research on in vitro Rapid Propagation of Inflorescence of Double-type Kalanchoe blossfeldiana
CHENG Jun
(Biology College of Jilin Normal University , Siping , Jilin 136000 ,China)
Abstract:With inflorescence as explants andMS as basic medium in tissue culture the effects of adding 4 concentrations of
6-BA and IAA on the induction of buds were compared to investigate the in vitro rapid propagation technology of
Double-type Kalanchoeblossfeldiana.The results show ed that the preferable medium of differentiation was MS supple-
mented with 2.5 mg/L 6-BA and 0.5 mg/L IAA.Then by secondary culture , rooting culture and transplanting the
rapid propagation w as established.
Key words:Double-type Kalanchoe blossfeldiana;inflorescence;bud;tissue culture
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