全 文 ：药物分析杂志 C卜 l in Jp lr : l a ; 1 An a2 l 008, 8 ( l )
H P L C 法测定红药胶囊中三七皂普 R l 及人参皂普 R g l 的含量
童伟国 , 陈建清
( J
` 一东东方之子制药有限公司 , 清远 5 1 15 17)
摘要 目的 : 建立红药胶囊 ` }“三七皂茸 R I 及人参 皂有 R g ,的含量测定方法 。 方法 : 采用 lA ilt m a 一 C 18 (4 . 6 n ln / 巧 0 m l n , 5
协 m ) , 流动相为乙睛 一 0 . 1% 磷酸溶液 ( 20 : 80 ) , 流速为 1 . 0 m L · m in 一 ` , 检测波长为 2 03 n m ;柱温为 40 ℃ , 外标法测定 〔 . 结果 :
二七 皂什 R ,和人参皂首 R g ,进样量分别在 。 . 345 一 2 . 76 林g ( : = 0 . 9 99 )和 0 . 945 一 7 . 56 林g ( r 二 0 . 999 )范围内与峰面积呈 良
好线性关系 ;平均回收率 ( n = 6) 分别为 98 . 6% 和 9 . 2% 。 结论 :本法简便可靠 ,专属性强 , 可用于红药胶囊的质量检测 。
关键词 :红药胶囊 ; 二七皂葺 R 、 ;人参皂昔 R g , ; H P L c
中图分类号 : Rg 17 文献标识码 : A 文章编号 : 02 54 一 1 7 9 3 (2 0 0 8 )o r 一 0 1 26 一 0 2
H P L C d e t e r m i n a t i o n o f n o t o g i n s e n o s id e R I
a n d g i n s e n o s i d e R g
i
i n H o n g y a o c a P s ul e s
T O N G W
e i 一 g u o , C H E N J i a n 一 q i n g
( G
、 , a 、、 9 1。 ,、 9 D o 、、以a , , 9 2 1、 12 1 p l、 a 、 、 。 a o e u `i o a l C O . , I T T) . , Qi 、 、爵 u a , : 5 1 15 17 , C h i n a )
A b s t r a c t O bj e e t i
v e : T o e s t a l ) l i s h a m e t h o d f(
〕r th e d e t e r m i n a t i o n o f n o t o g i n s e n 。〕s i ol e R , a n d g i n s e n o s id e R g . i n
H o n g y a o e a p s u l
e s
.
M e t h o d s
: A n A l l ti m a 一 C I、 e o l u m n ( 4
·
6 m m x 1 5 0 m m
,
5 协 , n ) w a s u s e d w i t h t h e m o b i le p h a s e o f
a e e t o l l i tr i l e 一 0
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·
m i n
一 ’ ,
d e te e ti n g w a v e le n g th b e i n g
2 0 3 n m
,
w i t h e o l u m n t e m p e r a t u r e a t 4 0 ℃ . R e s u l t s : T h e l i n e a r r a n g e s w e r e 0 . 34 5 一 2 . 7 6 协9 fo l · n ( ) t ( ) g i n s e n o s id e R l
( r = 0
.
9 9 9 9 ) a : ,d o
·
9 4 5 一 7
·
5 6 林9 fo r g i n s e n o s id e R g , ( r = O · 9 9 9 9 ) . T h e a v e r a g e r e c o v e r i e s ( n = 6 ) o f n o t o g i; l s e n -
o s i d e R
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, w e r e 9 8
.
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.
2% r e s p e e r i v e l y
.
C o n e l u s i o n : T h e m e t h o d 15 s i n
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, a e e u r a t e
a n d h i g h s p e e i if e it y w i t h g o o d r
e p e a t a b il i t y
.
I t e a n b e u s e
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: o n t r o l o f H o n 群a o e a p s u le s .
K e y w o r d s
: l王o n g y a o e a p s u l e s ; n o t ( ) g i n s e n o s i d e R ] ; g i n s e n o s i ( l e R g 一 ; H P LC
红药胶囊是广东东方之子制药有限公司根据国
家药品标准 (试行 ) W S 一 104 58 ( Z D 一 04 58 ) 一 2 0 2 红
药片研制而成 ,本品由三七 、 川芍 、 白芷 、 当归 、土鳖虫
和红花 6 味中药组成 ,具有活 血止痛 、 去癖生新的作
用 ,用于跌打损伤 、癖血肿痛 、 风湿麻木等症 〔’ 〕。 为 厂
有效控制本品质量 ,本文应用高效液相色谱法同时测
定三七皂昔 R ,和人参皂昔 R g 」的含量 ,此方法简便可
靠 ,专属性强 ,可用于红药胶囊的质量检测 。
1 仪器及试药
L c 一 10 AvT p 高效液相 色谱仪仁岛津仪器 ( 苏
州 )有限公司】, S PD 一 10 A v p 紫外检测器「岛津仪器
(苏州 )有限公司」, A an 、 ta : 色谱工作站 , 恒温箱 , H L
一
01 溶剂过滤器 ( 40 kH z , 120 W , 天津市恒奥科技
发展有限公 司 ) ;人参皂昔 R g , ( 1 10 7 03 一 2 0 0 3 2 2 ,含
量测定用 ) 、 三 七皂 价 R I ( 1 10 7 4 5 一 2 0 0 4 14 , 含量测
定用 )购 自中国药品生物制品检定所 ;红药胶囊 3
批样品由广东东方之子制药有限公司提供 ; 流动相
用乙睛为色谱纯 , 水为重蒸馏水 , 其余试剂为分析
纯 。
2 溶液制备
2
.
1 对照品溶液 精密称取对照品三七 皂昔 R I和
人参皂昔 R g :适量 ,加甲醇制成每 1 m L 含三七皂 阵
R
,
.0 1 m g
、 人参皂昔 R g 、 0 . 4 m g 的混合溶液 , 即得 。
2
.
2 供试品溶液 取本品内容物 1 . 0 9 ,精密称定 ,
置具塞锥形瓶中 , 精密加人甲醇 20 m L , 密寒 ,称定
重量 ,超声 ( 4 0 kH z , 12 O W )处理 3 0 m i n ,放冷 , 再称
定重量 ,用 甲醇补足减失的秉量 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤
液 , 即得 〕
2
.
3 阴性样品溶液 取缺三七的阴性样品按供试
品溶液制备方法操作 , 即得 。
3 色谱条件
色谱柱 : A l l te e h A l l tim a 一 C 1 8柱 ( 4 . 6 m m x 1 5 0
m m
,
5 林m ) ; 乙睛 一 0 . 1% 磷酸溶液 ( 2 0 : 8 0 ) 为流动
相 , 流速 1 0 m L · m in 一 ’ ;检测波长为 2 03 n m ; 柱温 :
第一作者 T e l : ( 0 7 6 3 ) 3 8 89 0 5 0 ; E 一 m a i l : Lw e g@ 5 0卜u
DOI : 10. 16155 /j . 0254 -1793. 2008. 01. 020
药物分析杂志 Cl l in J P h a,二 A , l a l 200 8 , 2 8 ( l )
40 ℃ ,进样量 10 卜 L 。 理沦塔板数按三七皂 什 R 、峰
计算不低于 4 0 0 。
取对照品: 溶液 、 供试品溶液及阴性样品溶液各
10 林L ,在 卜述色谱条件下进样 。 结果表明样品中其
他成分对红药胶囊中三七皂营 R ,及人参皂廿 R g ;的
测定无干扰 。 色谱图见图 1。
0 1 5 30 0 15 3 0 0 1 5 3 0 t / m i n
图 l 对照 「{了l ( A ) 、样 。 }}, ( B )及缺 : 匕阴性样 .异. ( C )色谱图
F ig I H p L C 〔4 , 1丫 ),。 a to g r a rn s `〕f , e fe r e n o .e , u l, , r a n o e s ( A )
, s a n l p l
e
( B ) a 。
`
I
。 e g a l i v e s a ,。 l〕 ] e w i t h o u t R a o l i x N o , 0 91: l s e , 19 ( (二)
一丫七皂自二 R . ( n o t.准i n s e n《 ,、 io l e R . ) 2 . 人参皂 {}二 Rg l (邵 , l s e , 1、 ) s i o l e Rg l )
4 线性关系考察
精密吸取对照品溶液 (二七皂 首 R , 0 . 138 m g ·
m L
一 ’ 、 人参皂 许 R g l 0 . 3 78 m g · m L 一 ’ ) 2 . 5 , 5 , 10 ,
15
,
2 0 林 L 分别注入高效液相色潜仪 , 测定峰面积 。
以峰面积 Y 为纵坐标 ,进样量 X ( 此 ) 为横坐标 ,进
行线性回归 。 结果三七皂昔 R ,及人参皂 阵 R g ,的回
归方程分别为 :
Y = 3
.
0 2 4 火 1O SX 一 9
.
4 6 8 x I O
3 r = 0
.
9 9 9 9
Y 二 3 . 8 5 2 x I O SX 一 2
.
2 3 8 x I 0
4 r = 0
.
9 9 9 9
线性范围分别为 0 . 3 45 一 2 . 76 卜g 和 0 . 94 6 一 7 . 56 林g 。
5 精密度试验
精密吸取上述对 照 .钻溶液 10 林 L , 按土述色谱
条件重复进样 5 次 ,测定 。 结果 三七皂昔 R : 及人参
皂什 R g ,峰面积位的 R S D 分别为 1 . 6% 和 1 . 1% ,表
明三七皂昔 R ,及人参皂昔 R g : 在该试验条件下具有
良好精密度 。
6 重复性试验
精密称取同一批号红药胶囊 (批号 0 6 0 2 0一) 5
份 ,按供试品溶液制备方法操作 ,并按上述色谱条件
测定 ,测得峰面积伉并计算含量 。 三七皂首 R ,平均
含量为 3 . 18 m g · g 一 ’ , R SD 为 1 . 4% ; 人参皂昔 R g]
平均含量为 1 . 27 m g · g 一 ’ , R SD 为 1 . 3% 。 结果表
明重复性良好 。
7 稳定性试验
取同一供试品溶液 (批号 0 60 2 0 ] )分别于 。 , 4 ,
s h 进样 10 协L , 测定峰面积 , 结果样品中三七皂 阵
R
I和人参皂 曹 R g , 峰面积的 R SD 分别为 1 . 1% 和
0
.
% %
,表明供试品溶液在 s h 内稳定 。
8 加样回收试验
精密称取 已 知含 量 (三 七皂曹 R : .3 18 m g ·
g
一 ’ ,人参皂昔 R g l 1 . 27 rgn · g 一 ’ )的同一批红药胶
囊 (批号 0 6 0 20 1 )内容物约 0 . 6 9 共 6 份 ,平均分为
3 组 , 每组分别精密加人对 照品溶液 ( 三七皂昔 R ,
0
.
12 9 gln
·
m L
一 ’ , 人参皂营 R g , 0 . 53 1 m g · m L 一 ’ )
9
,
10
,
1 m L
,按供试品溶液制备方法操作 , 进样 10
林 L , 以测得 加样量与实际加样量 的 比值计算 回收
率。 结果三七皂昔 R ,低 、 中 、 高 3 个加入量的回收
率 ( n 二 2) 分别为 9 . 6% , % , 6% , 9 . 8% ;相对平均
偏差为 0 . 4 % , 0 . 8% , 0 . 7 % ;平均回收率 ( n = 6) 为
98
.
6%
。 人参皂 甘 R g l低 、 中 、高 3 个加人量的回收
率 ( , , 二 2 )分别为 9 9 . 3% , 10 0 . 4% , 9 8 . 0% ; 相对平
均偏差为 1 . 2% , 1 . 7% , 1 . 2% ;平均 回收率 ( n = 6)
为 9 . 2% 。 试验结果表明 ,该法测定准确 。
9 样品含量测定
取 3 批 红 药 胶 囊 ( 批 号 0 6 0 2 0 1 , 0 60 2 0 2 ,
0 60 20 3 )
,按供试 .钻溶液制备方法操作 ,按本文色潜
条件进样 ,记录色谱图并用外标法计算含量 ,结果 3
批样 .钻中三七皂 许 R ,含量分别为 3 . 18 , 3 . 12 , 3 . 47
m g
·
g
一 ’ ;人参皂什 R g , 含 量分别为 1 . 27 , 1 . 06 ,
1
.
75 m g
·
g
一 ] 。
1 0 讨论
1 0
.
1 曾分别采用加热回流 [ ’ 1及超声 ( 4 0 k H z , 一2 0
w )l
2 }各 30 n il 。 提取本品 , 结果 两者没有显著性差
别 ,根据检验快速 、简便 、 准确的原则 ,我们选择超声
法作为本品供试液的制备方法 。
1.0 2 参考有关文献 ,分别采用 甲醇 一 水 ( 5 :0 5 0 ) 〔’ {
和乙睛 一 0 . 1% 磷酸溶液 ( 20 : 80 )l ` }作流动相 ,结果乙
睛 一 0 . 1% 磷酸溶液 ( 20 : 80 )作为流动相检测峰形相
对较好 ,保留时间适中 ,分离效果满意 ,样品测定中理
论塔板数按三七皂营 R 、峰计算超过 4以 x〕。
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(本文 于 20 0 6 年 1 1 月 2 7 日收到 )