全 文 ：第 18 期
第 51卷第 18期
2012 年 9 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 51 No.18
Sep．，2012
收稿日期：2012－07－02
基金项目：国家自然科学基金资助项目（30960207）；青海省重点攻关课题（2009－Z－705）
作者简介：包锦渊（1958－），男，甘肃通渭人，教授，主要从事植物化学研究，（电话）13897421878（电子信箱）baojinyuand＠126．com。
小花玄参（Scrophularia souliei Franch．）属玄参
科（Scrophulariaceae）玄参属细弱小草本，为我国特
有种，产于四川西部、青海东部和甘肃东南部。 玄参
科植物中含有皂苷类成分，主要为甾体皂苷，由此
推测小花玄参中含有甾体皂苷。 皂苷具有多种药理
学功能，如抗炎、抗肿瘤等［1］。因此，有必要对小花玄
参中的皂苷进行研究。 本研究通过化学试剂法和分
光光度法对小花玄参中总皂苷成分 ［3］进行定性 ［2］
和定量测定，为总皂苷的快速定性定量分析提供参
考。
1 材料与方法
1．1 材料
HH－4 数显恒温水浴锅 （常州国华电器有限公
司），RE 5285A 旋转蒸发器 （上海亚荣生华仪器
厂），TU－1221 型紫外分光光度计（北京普析通用有
限公司），索氏提取装置。
对照品：菝葜皂苷元（中国药品生物制品检定
所）；供试样品：小花玄参茎叶（2011 年 7 月采于青
海省玉树州代格村农作物地，中科院西北高原生物
研究所鉴定）；所用试剂均为分析纯。
1．2 方法
1．2．1 供试品溶液的制备 称取 0．5 g 小花玄参茎
叶粉末（100 目），精确到 0．000 1 g，置于索氏提取器
中，加适量石油醚脱脂 1 h，冷却后，倾出石油醚提
取液，残渣蒸干后加入甲醇 100 mL，提取至无色，回
收减压至干，加蒸馏水 10 mL 溶解，用饱和正丁醇
萃取 4 次（15、10、10 和 10 mL），合并正丁醇部分，
减压回收至干，加 20 mL 2 mol ／ L HCl，水浴回流 3 h
后冷至室温，用氯仿萃取 3 次，20 mL ／次，合并氯仿
提取液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转至 25 mL 容量瓶
中，定容，制得供试品溶液。
1．2．2 定性检识 ①醋酐－浓硫酸 （Liebermann－
Burchard）检测：取供试液 2 mL，沸水浴上蒸干，加入
浓硫酸－醋酐（1∶20，V/V）数滴，观察颜色变化情况；
②三氯醋酸检测：将供试液滴在滤纸上，喷洒 25％
小花玄参中总皂苷的定性定量分析
包锦渊，朱海旭，高 洁，桂光菊
（青海民族大学化学与生命科学学院，西宁 810007）
摘要：采用化学试剂法和分光光度法对小花玄参（Scrophularia souliei Franch．）中总皂苷成分进行定性、
定量分析。以菝葜皂苷元为对照品，于 311 nm 处比色测定，测得小花玄参中总皂苷含量为 11．05 mg ／ g，平
均回收率为 97．5％，RSD 为 1．59％（n＝6），该测定方法简便、准确，稳定性、重现性好。
关键词：小花玄参（Scrophularia souliei Franch．）；总皂苷；定性分析；定量分析
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2012）18－4109-02
Qualitative and Quantitative Analysis of Total Saponins in Scrophularia souliei
BAO Jin－yuan，ZHU Hai－xu，GAO Jie，GUI Guang－ju
（Nationalities Chemistry and Life Science College，Qinghai University，Xining 810007，China）
Abstract： Qualitative and quantitative analysis of total saponins in Scrophularia souliei Franch. was conducted by means of
chemical analysis and spectrophotometry. According to A311 nm of sample tested using Sarsasapogenin as reference substance．
The content of total saponins was 11．05 mg ／ g in Scrophularia souliei Franch.. The average recovery rate was 97．5％ ； and
RSD was 1．59％ （n＝6）． The methods were simple and accurate， with excellent stability and reproducibility．
Key words： Scrophularia souliei Franch； total saponins； qualitative analysis； quantitative analysis
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2012.18.023
湖 北 农 业 科 学 2012 年
（m ／ V） 三氯醋酸－乙醇溶液， 加热并观察 60 ℃和
100 ℃时颜色变化情况；③氯仿－浓硫酸（Salkowski）
检测：将供试液水浴蒸发所得样品溶于氯仿后加入
浓硫酸，观察氯仿层和硫酸层颜色和荧光。
1．2．3 对照品溶液的制备 称取 7．5 mg 菝葜皂苷
元对照品以甲醇定容于 25 mL 容量瓶中， 配制成
0．3 mg ／ mL 的对照品溶液。
1．2．4 测定波长选择 分别精密吸取对照品溶液
0．2 mL、 供试品溶液 0．1 mL 置 10 mL 具塞试管中，
挥尽溶剂， 加入 5 mL 高氯酸，70 ℃水浴 15 min，冰
水冷却后，在 210～450 nm 范围内扫描，取最大吸收
波长为检测波长。
1．2．5 标准曲线制备 精密吸取不同体积的对照
品溶液于 10 mL 具塞试管中， 挥干后加入 5 mL 高
氯酸， 于 70 ℃水浴 15 min，冰水冷却，最大吸收波
长处测定吸光度，以浓度为横坐标（C），吸光度为纵
坐标（A），绘制标准曲线。
1．2．6 精密度试验 取对照品溶液 4．0 mL，以甲醇
调零， 在最大吸收波长处测定吸光度， 重复测定 6
次。
1．2．7 稳定性试验 取供试品溶液 0．6 mL，定容至
10 mL，间隔 10 min测定吸光度，重复测定 6次。
1．2．8 重复性试验 精密称取 5 份同一供试样品，
同上方法处理，测定吸光度。
1．2．9 加标回收试验 称取 0．100 0 g 已知含量的
供试样品粉末 6 份， 分别准确加入对照品溶液，测
定吸光度，计算含量。
1．2．10 样品测定 称取 0．5 g 小花玄参茎叶粉末，
精确到 0．000 1 g，制得供试品溶液，测定吸光度，根
据回归方程计算总皂苷含量。
2 结果与分析
2．1 定性结果
通过定性试验可判断小花玄参茎叶中主要含
有甾体皂苷类成分，可能含有三萜类化合物。
2．2 定量检识结果
2．2．1 选择测定波长并绘制标准曲线 在 210～450
nm 进行扫描，选择测定波长，发现对照品和供试品
溶液均在 308～315 nm 处有最大吸收， 选择 311 nm
作为测定波长。 在此波长下测吸光度绘制标准曲
线，得回归方程：A＝0．103 2C＋0．194，r＝0．999 1。 结果
表明，菝葜皂苷元在 0．293 5～0．714 7 mg ／ mL 范围内
线性关系良好。
2．2．2 方法评价 精密度试验中，6 次测定吸光度
的 RSD 为 1．04％，表明仪器精密度良好；稳定性试
验中， 每隔 10 min测定吸光度的 RSD 为 1．12％，表
明在 60 min内样品溶液的稳定性良好。重复试验的
RSD为 1．08％，表明本方法重现性较好。
加样回收试验结果见表 1。由表 1可知，该方法
的平均回收率为 97．5％， 符合回收率要求 （95％～
105％），RSD为 1．59％。
2．2．3 样品测定结果 样品的总皂苷平均含量为
1．105％，RSD为 2．40％，结果见表 2。
3 讨论
预试验分别对提取溶剂（不同浓度乙醇和甲醇）、
提取方法（超声和回流）及提取时间进行了单因素
和正交试验分析［4，5］，最后确定了文中供试液的制备
方法。 小花玄参茎叶中主要含有甾体皂苷，菝葜皂
苷元为各类甾体皂苷的母核皂苷元，故可采用该化
合物作为对照品；本试验采用分光光度法测定小花
玄参中总皂苷含量，线性关系好，方便快速。 本结果
表明，小花玄参茎叶中总皂苷含量较高，为开发小
花玄参中的皂苷提供了依据。
参考文献：
［1］ 孙耀军，邹 建．皂苷不同测定方法的比较［J］．江西食品工业，
2009（2）：30－31．
［2］ 宋晓凯 ．天然药物化学 ［M］．北京：化学工业出版社，2010．188－
231．
［3］ 郭秋平，吴湖坤，关红晖，等．不同产地的知母中总皂苷和菝葜皂
苷元的含量测定［J］．时珍国医国药，2008，19（6）：1410．
［4］ 王莹莹，寇永奎，朱建松．甾体皂苷提取分离及结构研究方法［J］．
华中师范大学研究生学报， 2007，14（1）：143－147．
［5］ 奚广生，张 影．玉竹中甾体皂甙提取工艺研究［J］．湖北农业科
学，2011，50（1）：140－142．
（责任编辑 周有祥）
表 1 加标回收率测定结果
称样量
g
0.105 8
0.105 4
0.109 7
0.107 9
0.108 3
0.104 9
总皂苷含量
mg
1.17
1.16
1.21
1.19
1.20
1.16
对照品加入量
mg
0.50
0.50
0.80
0.80
1.10
1.10
实测含量
mg
1.66
1.65
1.96
1.99
2.29
2.21
回收率
%
98.1
97.2
96.1
99.5
98.8
95.5
表 2 样品中总皂苷含量测定结果（n=3）
样品号
1
2
3
样品吸光度
0.307 9
0.308 0
0.308 1
总皂苷含量//g/100 g
1.113
1.105
1.097
平均含量//g/100 g
1.105
RSD//%
2.40
4110