全 文 ：一 6 54 一 药物分析杂志 Chi n J bP ~ nA d Z (X) 5 , 25 ( 6)
T L C S 法测定苦玄参中苦玄参昔 I A 和 I B 的含量
邹节明’ ,王力生 ` ,2 ’ ,严海` ,尹文清 ` , 郭亚健 2
( 1
. 桂林三金药业股份有限公司 桂林 541 仪阵 ; 2 . 北京中医药大学中药学院 北京 10 10 2)
摘要 目的 :采用薄层扫描法测定不同产地苦玄参的根 、 茎 、 叶中苦玄参昔 I A和 I。的含量 ,为选择优质药材的产地和苦玄参药
材的精制提供依据 。 方法 : 以甲醇为溶媒 ,超声提取苦玄参各药用部位 ,提取物经大孔树脂 D 10 1精制后 ,点于含 l % CM C 一 Na
的硅胶 GF 254 板上 , 以氯仿 一 甲醇 一水 ( :4 1 : 0 . 1) 为展开剂展开后 ,用 CA M AG T L C l 型线性扫描仪测定 ,检测波长为 26 8 mn ,
狭缝尺寸为 8 m m x o . 6 ~
。 结果 :苦玄参昔 I A的点样量在 1 . 1 一 5 . 4 此 、苦玄参昔 I 。在 1 . 0 一 6 . 2 此范围内与各自峰面积呈
良好的线性关系 , : 分别为 0 . 9990 和 0 . 9992 ,加样回收率分别为 98 . 3% 和 97 . 5% ;在同一产地不同药用部位中 ,苦玄参昔 I A和
I B的含量 : 叶中最高 ,茎中次之 ,根中最低 ;在同一药用部位中 ,叶中苦玄参昔 I^ 含量高于 I : ,根和茎中苦玄参昔 I。含量高于 I A 。
结论 :本法简便 、 准确 ,可作为选择道地药材的一个依据 ;从苦玄参昔 I A和 I。的含量来看 ,可结合必要的药理实验 ,考虑只以苦
玄参的地上部分人药 。
关键词 :苦玄参 ;苦玄参昔 I A和 I 。 ;大孔树脂 D 10 , ;薄层扫描法
D e t e r m i n a it o n fO R c fe lat r r a e in nS I
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苦玄参 ( iP c iar fe 卜 at ~ 肠ur
.
)是玄参科苦玄
参属唯一一种植物 ,在广西民间已有 20 多年的药
用历史川 。 苦玄参昔 I A和 I。是苦玄参的主要成
分 2[J ,二者的母核均为苦玄参昔元 I , 仅在其双糖
链上有 1 个糖不同。 实验表明 ,苦玄参昔 I A和 I。具
有一定的抗补体作用 , 该作用可能与苦玄参具有抗
炎作用的临床表现相关 3j[ 。 因此有文献以苦玄参
昔 I , 的含量作为多种含苦玄参中成药的质量控制
标准 [4 ] 。
* 通讯作者 ( e o二 s p o n di n g a u ht o r )
DOI : 10. 16155 /j . 0254 -1793. 2005. 06. 010
药物分析杂志 i h Cn J Ph~ An吐 2(X ) 5
,
25 ( 6)
苦玄参以全草入药 , 在我国南方多个地方有种
植 ,在某些产地 ,也有只割取地上部位人药的情况 。
各产品的药材质量状况如何以及苦玄参人药部位选
用的合理性 , 尚未见文献报道 。 本文采集 5 个不同
产地的苦玄参 , 以薄层扫描法分别对其根 、 茎和叶中
的苦玄参昔 I A和 I。的含量进行了分析 。
1 仪器与试药
必能信 B U T 2 0 3 0 一 4 0 一 0 6 超 声 清洗 机
( 4 0 k H
z , 2 5 0 W )
。 瑞士 CA MA G TL C SCA NN E R l
薄层扫描仪 。 大孔树脂 D 10 : (天津农药股份有限公
司树脂分公司 ) 。 苦玄参昔 I A和 I B对照 品 (桂林三
金药业股份有限公司制备 ,纯度分别为 98 . 46 % 和
98
.
12 % )
。 薄层层析用硅胶 GF 254 (青岛海洋化工
厂 ) 。 所用试剂均为分析纯 。
苦玄参经桂林三金药业股份有限公司郑耀年高
级工程师鉴定 ,为玄参科植物苦玄参 尸比瓦a fe 卜 at 卜
aer 助ur . 的干燥全草 。
2 苦玄参药用部位分类
将广西梧州 、 南宁 、 龙州 、来宾以及越南等 5 个
产地的苦玄参的根 、 茎 、 叶分开 ,各部位的质量百分
比分别为 12 % 一 20 % , 32 % 一 63 % 和 36 % 一 50 % 。
3 供试品溶液的制备
将各药用部位分别粉碎 ,过 5 号筛 ,各取 5 . 0 9 ,
置索氏提取器中 ,加氯仿 50 mL ,加热回流 3 h , 药渣
挥去氯仿 ,移人具塞锥形瓶中 ,加人甲醇超声处理 2
次 ( 甲醇加人量均为 50 m L ) , 每次 20 而 n ,滤过 (第
2 次超声处理后的药渣再以 50 m L 甲醇分 3 次洗
涤 ) , 合并滤液 , 蒸干 , 残渣加 50 % 乙醇 5 m L 溶解 ,
过大孔吸附树脂 D 10 1柱 ( 15 m m x 15 0 un )
,依次以
水 、 0 . 5% 氢氧化钠的 20 % 乙醇溶液 、 水 、 80 % 乙醇
各 150 rnL 洗脱 , 收集 so % 乙醇洗脱液 ,蒸干 , 残渣
加甲醇溶解 ,滤过 ,定量转移至 5 m L 量瓶中 ,加甲醇
至刻度 ,摇匀 , 即得 5[] 。
4 T L C S 方法学研究
4
.
1 色谱条件 薄层板 :含 1 . 0% C M C 一 N a 的硅
胶 G F州薄层板 。 展开剂 : 氯仿 一 甲醇 一 水 (:4 :1
0
.
1 )
。 展距 : 1 0 c m o
4
.
2 扫描条件 单波长反射式线性扫描 ,狭缝尺寸为 8
~
x a 6 ~
。 苦玄参昔 I人和 IB的检测波长均为 2 68
nI
。 对薄层板上展开后的各斑点进行扫描 ,见图 1。
-一 - - ~一 J~ ~ ~ ~ ~ ~山 ~ ~
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B
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0 3.0 0 90
.
0 ` n刃。
图 1
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对照品 ( A )及梧州产苦玄参的根 ( B) 、茎 ( c) 、 叶 ( D )样品的色谱图
TL C S e
1
. 苦玄参普 l
h功m a t o目卫m . Of 此 fe er n e e o ub 日加口c es ( A )叨 d耐 ( B ) , 。 tem ( C ) an d le af ( D )加m w 妞山。
( pi cfe l切田 ar e in n l : ) 2
. 苦玄参昔 I A ( iP e fe l忱比 n比 in n l ^ )
由图 l 知 , 叶中苦玄参昔 I A的含量高于 I。 , 而 25 . 95 mg ,加甲醇溶解并定容至 25 m L , 作为对照品
根和茎中苦玄参昔 I A的含量则低于 I。 。 溶液 。
泌扫线性关 系考察
精密称取苦玄参普 I A 26 . 82 m g 和苦玄参 I。
分别吸取对照品溶液 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7
点于同一硅胶 G F州薄层板上 , 按色谱条件展开 ,
一 65 6 一 药物分析杂志 Ch i n J p hlarn An 以 2加 5 , 2 5 ( 6 )
描测定 。 以峰面积为纵坐标 , 点样量 ( 林g )为横坐
标 , 绘制标准曲线 。 苦玄参昔 I A的线性范围为 1 . 1
一 .5 4 林 g , 回归方程为 :
Y = 2
.
8 5 1 x 10 3X + 12 4 r = 0
.
9 9 9 0
苦玄参昔 IB的线性范围为 1 . 0 一 6 . 2 林g , 回归
方程为 :
Y 二 2
.
7 34 x 10 3X + 3 10 r = 0
.
999 2
6 精密度试验和稳定性考察
分别吸取对照品溶液 5 份 , 每份 4 林L , 点于同
一块硅胶 G F254 薄层板上 , 依法展开并测定 ,苦玄参
昔 I A和 I B峰面积的 RSD 值分别为 1 . 2% 和 1 . 8% 。
分别吸取对照 品溶液 5 份 , 每份 4 协L , 分别点于 5
块硅胶 G F254 薄层板上 , 依法展开并测定 , 苦玄参昔
I
A和 I。峰面积的 R SD 值分别为 2 . 5% 和 2 . 8% 。
对同一对照品溶液展开所得的 I A和 I B两斑点 ,
分别于 0 , 1 , 2 , 4 , 6 h 扫描测定 。 结果表明 ,在 6 h
内 ,苦玄参昔 I A和 I B的峰面积均保持稳定 。
7 加样回收试验
取梧州产苦玄参叶 (苦玄参昔 I A和 I。 的含量分
别为 0 . 223 % 和 0 . 2 18 % ) 5 份 , 每份 1 . 0 9 ,分别精
密加人对照品溶液 2 m L , 按本文样品处理方法处
理 ,展开 ,测定 ,测得苦玄参昔 I A和 I B的平均回收率
(
n = 5 ) 分别为 9 8 . 3% ( R SD 二 2 . 5% ) 和 9 7 . 5%
( R SD
= 3
.
1% )
。
8 样品测定
精密吸取各叶的供试品溶液 2 卜L ,茎的供试品
溶液 4 林L ,根的供试品溶液 6 林L ,对照品溶液 2 及 4
卜L ,分别点于同一硅胶 G F 25 4薄层板上 , 按色谱条件
展开 ,扫描测定 ,用外标两点法计算 ,结果见表 1。
, 讨论
,
.
1 比较了 5个不同产地的苦玄参不同部位中苦
玄参昔 I A和 I。的含量 ,其中 4 个产地的薄层图谱比
较接近 。 采自广西来宾县的苦玄参样品 , 外观和其
他产地的药材相似 ,但叶和茎均明显粗大 ,其叶中苦
玄参昔 IA和 I B的含量只有其他产地的 1/ 10 左右 ,而
其茎的供试品溶液 TCL 检识不出皂昔斑点 , 初步判
定该样品不宜作为苦玄参使用 。
,
.
2 对于同一产地的苦玄参 , 苦玄参昔 I A和 IB含
量 :叶中最高 ,茎中次之 ,根中最低 。 由于根中苦玄
参昔的含量明显低于茎和叶 ,且其在药材中所占比
例较小 , 而夹杂的泥沙较多 ,可根据药政法规和具体
的开发 目标 ,结合药理实验结果对根进行取舍 。 有
趣的是 , 叶中苦玄参昔 IA含量大于苦玄参昔 I。 , 而
表 1 样品测定结果 (% , 介 = 3)
aT b I R翻ul 妇 of amS
P】e ds et n山皿廿。 n
产地
( p l
a . it n g o
a )
部位
( p ar t )
苦玄参甘 l^
( ip
。企1加口旧 e 妞的 IA )
苦玄参昔 I B
( p icfe l
切旧ar e in n I B )
梧州
(W皿卜叫 )
南宁
( Nauzn gn )
龙州
(肠 n砂 o u )
越南
( Y
u
ean
)
根 ( m o t )
茎 ( s et m )
叶 ( l e af )
根 ( or t )
茎 ( 。沈m )
叶 ( 1创妊 )
根 ( m优 )
茎 ( s t e m )
叶 ( leaf )
根 ( n 旧 t )
茎 ( set m )
叶 ( l耐 )
根 ( m加 )
茎 ( set m )
叶 (】创江)
0
.
0 19 ( 2
.
3 )
0
. 以6 ( 3 . 1 )
0
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.
03 2 ( 2
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.
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0
.
0 23 ( 2
.
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0
.
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.
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.
03 7 ( 1
.
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0
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0
.
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.
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0
.
184 ( 1
.
8 )
0
.
03 4 ( 1
.
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. 肠 1 ( 2 . 0 )
0
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0
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.
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0
.
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.
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来宾
L aj b i n
0
.
0 22 ( 3
.
1 ) 0
.
0 19 ( 2
.
5 )
注 : 括号内为 RS D (% ) 。
NOte
: RS D in th
e 四 e n th e s 翻
根和茎中苦玄参昔 IB含量大于 I A 。
,
.
3 苦玄参昔 I A和 I。的母核相同 , 只是糖链有差
异 ,其最大吸收波长均为 268 n m ,无需显色便可测
定 ,使本法测定相对简单 。
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(本文于 2 X( 抖 年 1 月 18 日修改回 )