全 文 ：［收稿日期］ 20121025(553)
［基金项目］ 广西科技厅攻关项目(桂科攻 0235022-4) ;国家中医药管理局民族项目课题(04-05ZM01) ;广西教育厅课题(桂教科研
( ［2003］22 号)
［第一作者］ 丘琴，博士，从事药学和中药学的教学和科研，Tel:0771-3124407，E-mail:12031983@ 163． com
［通讯作者］ * 甄汉深，教授，博士生导师，从事药学和中药学的教学和科研，Tel:0771-2918239，E-mail:8zhen@ 163． com
不同生产期苦玄参中苦玄参苷 IA 含量测定
丘琴，苏春妹，甄汉深* ，吴滨滨
( 广西中医药大学，南宁 530001)
［摘要］ 目的:测定同一产地不同生长期的苦玄参药材不同药用部位叶、茎、根中苦玄参苷 IA 的含量。方法:采用高效
液相色谱法(HPLC) ，C18柱分离分析，以乙腈-0. 1%冰醋酸溶液(36∶ 64)为流动相，流速 1 mL·min
－1，检测波长 264 nm，柱温 25
℃。结果:苦玄参叶中苦玄参苷 IA 的平均含量从头年 6 月份到次年 1 月份分别为 0. 37%，0. 66%，0. 59%，0. 45%，0. 35%，
0. 34%，0. 31%，0. 23%;苦玄参茎中苦玄参苷 IA 的平均含量从头年 6 月份到次年 1 月份分别为 0. 24%，0. 38%，0. 36%，
0. 24%，0. 13%，0. 08%，0. 03%，0. 02%;苦玄参根中苦玄参苷 IA 的含量在 7 月份最高，为 0. 18%，其余月份均未检测到。结
论:以苦玄参苷 IA 的含量为参考，苦玄参不同药用部位的苦玄参苷 IA 均在 7，8 月份的含量最高，可初步确定苦玄参的最佳采
收时间为 7，8 月份，结果为苦玄参药材的采收加工和规范化种植提供了科学依据。
［关键词］ 苦玄参;苦玄参苷 IA;高效液相色谱法
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)05-0108-03
Determination of Piefeltarraenin IA of Picria fel-tarrae
in Different Growth Periods
QIU Qin，SU Chun-mei，ZHEN Han-shen* ，WU Bin-bin
(Guangxi University of Chinese Medicine，Nanning 530001，China)
［Abstract］ Objective:To determine the content of piefeltarraenin IA in different medicinal parts of Picria
fel-tarrae in different growth periods． Method:High performance of liquid chromatography (HPLC)was adopted，
the separation was performed on C18 column with acetonitrile-0. 1% aqueous acetic acid solution (36∶ 64)as mobile
phase，the flow rate was 1 mL·min －1，the detection wavelength was set at 264 nm and the column temperature was
kept at 25 ℃ ． Result:From the last year in June to the next year in January，average content of piefeltarraenin IA
in leaves were listed monthly as follows:0. 37%，0. 66%，0. 59%，0. 45%，0. 35%，0. 34%，0. 31%，
0. 23%;and in the stems:0. 24%，0. 38%，0. 36%，0. 24%，0. 13%，0. 08%，0. 03%，0. 02%;the content
of piefeltarraenin IA in roots was 0. 18% in July and was not detected in other times of the whole year．
Conclusion: The content of piefeltarraenin IA was highest in July and August， regarded the content of
piefeltarraenin IA as standard，the optimum collection time of Picria fel-tarrae was in July and August． This research
could provide scientific basis for optimizing the collection time and actualizing standard planting of Picria fel-tarrae．
［Key words］ Picria fel-tarrae;piefeltarraenin IA;HPLC
苦玄参又名苦草、蛇总管、鱼胆草、苦胆草，为广
西道地药材，主要分布于广西、广东、贵州及云南等
地［1］。在广西民间作为药用已有很长历史，传统中
医认为其性寒味苦，具有清热解毒、凉血消肿的功
·801·
第 19 卷第 5 期
2013 年 3 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 5
Mar．，2013
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2013.05.054
效，可用于风热感冒，咽喉肿痛，胃痛，消化不良，痢
疾、毒蛇咬伤、跌打损伤，淋巴结炎等［2］。苦玄参苷
IA 为苦玄参的主要有效成分，具有抗补体作用
［3］，曾
有对苦玄参全草中苦玄参苷 IA 含量动态积累研究的
报道［4-7］，但对于苦玄参苷 IA 在苦玄参不同药用部位
的分布及动态积累研究未见有公开报道。本实验采
用高效液相色谱法测定不同生产期苦玄参不同药用
部位苦玄参苷 IA 的含量，以探导苦玄参苷 IA 在不同
生产期和不同药用部位的含量变化规律。
1 仪器与试药
Agilent1100 型高效液相色谱仪(美国安捷伦科
技公司) ，在线真空脱气机(G-1322A) ，高压四元梯
度泵(G-1311A) ，可变波长检测器(G-1314A) ，二极
管阵列检测器，标准自动进样器(G-1313A 型) ，智
能化柱温箱(G-1316A) ，Agilent1100 series 色谱工
作站(美国安捷伦科技公司) ，CG-16W 型高速微量
离心机(北京医用离心机厂) ，SB3200-T型超声波提
取器(上海能信超声有限公司) ，Millipore Simplicity-
185 型超纯水器(美国密里博公司) ，BP211D型电子
分析天平(德国赛多利斯)
苦玄参药材采自广西中医药大学药用植物园，
经广西一心药业马利飞副主任药师鉴定为 Picria
fel-tarrae Lour．的干燥全草，将全草洗净，分别分取
叶、茎、根，于烘箱 50 ℃烘干，粉碎，过 50 目筛，可分
别得到苦玄参叶、茎、根粗粉;苦玄参苷ⅠA 由广西
桂林植物研究所植化室提供，含量 ＞ 98. 0%;甲醇、
乙腈、冰醋酸(天津市四友生物医学技术有限公司，
色谱纯)、甲醇(北京化工厂，优级纯) ，其他试剂均
为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液的制备 取苦玄参苷 IA 对照品适
量，精密称定，置 10 mL 量瓶中，用适量甲醇溶解并
定容至刻度，摇匀，即得浓度为 2. 365 g·L －1的对照
品溶液。
2. 2 供试品溶液的制备 分别取苦玄参叶、茎、根
粗粉 1 g，精密称定，分别置 100 mL 具塞锥形瓶中，
精密加入 75%甲醇 50 mL，称重，超声提取 30 min，
放冷，补足损失质量，滤过，取滤液，滤液于微型离心
管中以 10 000 r·min －1离心 10 min，取上清液，以微
孔滤膜(0. 45 μm)滤过，即得。
2. 3 确定的色谱条件 日本 GL science Inerstil C18
色谱柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，检测波长 264
nm，流动相乙腈-0. 1%冰醋酸水溶液(36∶ 64) ，流速
1 mL·min －1，柱温 25 ℃，进样量 10 μL，理论塔板数
以苦玄参苷 IA 计不低于 5 000。
2. 4 线性关系考察 分别精密吸取上述苦玄参苷
IA 对照品溶液 0. 1，0. 4，0. 8，1. 2，2 mL置 10 mL量
瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得 1 ～ 5 号苦
玄参苷 IA 对照品溶液。分别吸取 1 ～ 5 号苦玄参苷
IA 对照品溶液 10 μL 注入液相色谱仪，按 2. 3 项下
的色谱条件测定峰面积。以峰面积值为纵坐标，对
照品进样量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，回归方
程为 Y = 714. 87X － 1. 317 3(r = 0. 999 8)。结果表
明苦玄参苷 IA 进样量在 0. 236 5 ～ 4. 730 μg呈良好
线性关系。
2. 5 精密度试验 分别取同一苦玄参叶(批号
200608)供试品溶液 10 μL，注入液相色谱仪，连续
进样 5 次，测定苦玄参苷 IA 峰面积，RSD 0. 05%，表
明仪器精密度良好。
2. 6 稳定性试验 取苦玄参叶(批号 200608)供试
品溶液 10 μL，于制备后 0，2，4，8，12，24 h 分别进
样，测定苦玄参苷 IA 峰面积，RSD 0. 21%，表明供试
品溶液在 24 h内保持稳定。
2. 7 重复性试验 取 1 g的苦玄参叶干燥粗粉(批
号 200608)6 份，精密称定，按 2. 2 项方法制备供试
液，按 2. 3 项的色谱条件测定苦玄参苷 IA 含量，
RSD 1. 63%，表明方法重复性良好。
2. 8 加样回收率试验 取已知含量的苦玄参叶
(批号 200608)干燥粗粉 0. 5 g，精密称定，分别精密
加入苦玄参苷 IA 对照品溶液(1. 497 g·L
－1)2 mL，
按 2. 2 项方法制备供试液，按 2. 3 项的色谱条件测
定，计算加样回收率，结果见表 1。
表 1 苦玄参苷 IA 加样回收率试验
No
原有量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回
收率 /%
RSD
/%
1 2. 952 5. 901 98. 61
2 2. 842 5. 804 99. 01
3 2. 884 5. 765 96. 22
98. 03 1. 25
4 2. 936 5. 892 98. 84
5 2. 892 5. 787 96. 71
6 2. 796 5. 752 98. 78
注:苦玄参苷 IA 对照品加入量均为 2. 99 mg。
2. 9 样品测定与结果 分别取不同生产期的苦玄
参叶、茎、根干燥粗粉 1 g，精密称定，按 2. 2 项方法
制备供试液，按 2. 3 项的色谱条件进行测定。通过
测定从种植头年 6 月起至次年 1 月间的苦玄参叶、
茎、根中苦玄参苷 IA 的含量，结果表明同一月份中，
·901·
丘琴，等:不同生产期苦玄参中苦玄参苷 IA 含量测定
叶中苦玄参苷 IA 的含量最高，茎中苦玄参苷 IA 的
含量次之，根中苦玄参苷 IA 的含量最低。其中苦玄
参叶和茎中的苦玄参苷 IA 的含量随月份的变化而
变化:6 月至 7 月含量增加很快，到 7，8 月含量达到
最高，8 月份后含量下降较快，10，11 月含量变化不
大，相比 9 月略有下降，11 月后含量下降最明显;苦
玄参根中苦玄参苷 IA 只有在 7 月份测出含量，其余
月份含量极低，测不出含量。苦玄参苷 IA、7 月份的
苦玄参叶、茎、根的 HPLC 图分别见图 1 ～ 4，含量测
定结果见表 2。
图 1 苦玄参苷 IA 对照品 HPLC
图 2 苦玄参叶 HPLC(a为苦玄参苷 IA)
图 3 苦玄参茎 HPLC(a为苦玄参苷 IA)
图 4 苦玄参根 HPLC(a为苦玄参苷 IA)
表 2 不同生长月份的苦玄参中苦玄参苷 IA 的含量(n = 3) %
采收时间 批号 叶 茎 根
2006-06 200606 0. 37 ± 0. 006 4 0. 24 ± 0. 002 5 －
2006-07 200607 0. 66 ± 0. 008 1 0. 38 ± 0. 002 6 0. 18 ± 0. 0040
2006-08 200608 0. 59 ± 0. 006 4 0. 36 ± 0. 003 6 －
2006-09 200609 0. 45 ± 0. 006 6 0. 24 ± 0. 002 9 －
2006-010 200610 0. 35 ± 0. 006 6 0. 13 ± 0. 003 2 －
2006-011 200611 0. 34 ± 0. 007 0 0. 08 ± 0. 001 5 －
2006-012 200612 0. 31 ± 0. 006 4 0. 03 ± 0. 000 5 －
2007-01 200701 0. 23 ± 0. 005 5 0. 02 ± 0. 000 6 －
注:－:未检测到。
3 讨论
本研究初步表明，同一生产期，苦玄参苷 IA 在
不同药用部位分布不同，其在叶中含量最高，根中
含量最低;不同生产期，苦玄参苷 IA 的含量随着时
间的不同而有所变化，苦玄参叶、茎中苦玄参苷 IA
的含量在 7，8 月份含量最高，根中苦玄参苷 IA 的含
量在 7 月份最高，其余月份含量极低，检测不出
含量。
苦玄参的采收，传统一般在秋季，但为了进一步
确定苦玄参的最佳采收月份，还应采收更多产地的
苦玄参进行研究，为苦玄参的采收加工和建立规范
化种植基地提供科学依据。
［参考文献］
［1］ 广西壮族自治区卫生厅． 广西中药材标准(1990)
［M］． 南宁:广西科学技术出版社，1992:225.
［2］ 黄泰康，丁志遵，赵守训，等． 现代本草纲目(上)
［M］． 北京:中国医药科技出版社，1990:1477.
［3］ Huang Y，Tess D，Sandma A，et al． Complement
inhibiting cucurbitacin glycoaidea from fe-l tarrac［J］． J
Nat Prod，1998，61(6) :757.
［4］ 蒋明廉．苦玄参中苦玄参苷 IA 的含量测定［J］． 桂林
医学院学报，1997，10(6) :698．
［5］ 陈勇，甄汉深，刘婧． HPLC 法测定苦玄参中苦玄参苷
IA的含量［J］． 世界科学技术———中医药现代化，
2006，8(2) :28．
［6］ 陈勇，刘婧，李兵，等． 苦玄参药材有效成分含量积累
动态的研究［J］．时珍国医国药，2010，21(2) :371.
［7］ 宁德生，方宏，梁小燕，等． 苦玄参苷类成分的积累动
态研究［J］．广西植物，2012，32(1) :134.
［责任编辑 顾雪竹］
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第 19 卷第 5 期
2013 年 3 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 5
Mar．，2013