全 文 :2009 No.11
Serial No.212 China Brewing
食用色素是食品添加剂的主要组成部分,其不仅广泛
用于食品工业以改善食品的色泽,增加人们对美的享受,而
且广泛用于医药和化妆品工业,以增加商品的外在质量[1]。
近年来,人们陆续发现合成色素大多具有慢性毒性和致癌
作用,对健康所带来的严重威胁,各国开始限制合成色素
的使用[2]。天然色素不但无毒无害,还具有食品本身的色
泽并促进食欲,增加消化液的分泌,对人体有医疗保健作
用[3]。特别是从动植物、微生物中开发安全、无毒副作用及
兼有营养的药用保健功能的天然食用色素倍受人们关注。
白鹤藤(Argyreia acuta Lour.)别名合包叶、一匹绸,为旋花
科植物,聚伞花序,花白色;其味微苦、甘,性平,有止血生
肌、舒筋活络、止咳化痰作用[4]。本文对白鹤藤色素进行系
统的研究,旨在为其开发利用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料与设备
盐酸、氢氧化钠、苯甲酸钠、柠檬酸、醋酸、蔗糖、葡萄
糖、淀粉、过二硫酸铵、过氧化氢、硫代硫酸钠、抗坏血酸、
氯化钾、氯化镁、硫酸锌、硫酸镍、氯化钠、氯化铁、氯化钡、
硫酸锰等均为国产分析纯;白鹤藤:购自广西梧州市河东
区。722N可见分光光度计:上海分析仪器总厂;pHS-3C精
密pH计:上海雷磁仪器厂;HHsyzl-Ni6-C电热恒温水浴锅:
北京长源实验设备厂;HH-S型水浴锅:巩义市英峪予华仪
器厂;DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱:上海精宏实验
设备有限公司。
1.2 方法
1.2.1 白鹤藤色素的提取
取一定量干燥白鹤藤辗碎,称取5g,以水为提取剂[5],
室温浸泡24h,过滤、去渣,配制成4000mL的白鹤藤色素溶
液,作为白鹤藤色素原液。
1.2.2 白鹤藤色素的光谱特征
取白鹤藤色素原液,在室温条件下,以蒸馏水为参比
液,用厚度为1cm的比色皿,在波长305nm~570nm处测定
吸光度值。
1.2.3 平行试验
取适量白鹤藤色素原液,分别在不同的pH值、温度、
食品添加剂、氧化剂、还原剂、金属离子、光照等条件下做
单因子平行实验,经处理后在最大吸收波长下测定吸光度。
2 结果与分析
2.1 白鹤藤色素的光谱特征
经波谱扫描确定白鹤藤色素原液的最大吸收波长为
白鹤藤色素的提取及其稳定性研究
罗泳林1,唐燕青1,丘丹萍1,黄锁义2*
(1.右江民族医学院医学检验,广西 百色 533000;2.右江民族医学院药学系化学教研室,广西 百色 533000)
摘 要:研究白鹤藤色素的提取条件和稳定性。以水为提取剂,在室温下浸提24h,用紫外分析法研究色素的稳定性。该色素水溶性较
好,在330nm处有最大吸收峰。碱性物质对该色素稳定性有轻微影响,但热稳定性良好。柠檬酸、醋酸、可溶性淀粉对白鹤藤色素有增
色作用;苯甲酸钠、蔗糖、葡萄糖等食品添加剂对白鹤藤色素稳定性无明显影响;氧化剂、还原剂中除抗坏血酸对色素的影响明显外,
其他均无明显影响;金属离子除Co2+、Fe3+外均对白鹤藤色素影响较小。
关 键 词:白鹤藤;色素;提取;稳定性
中图分类号:O656.3 文献标识码:A 文章编号:0254-5071(2009)11-0066-02
Extraction and stability of the pigment from Argyreia acuta Lour.
LUO Yonglin1, TANG Yanqing1, QIU Danping1, HUANG Suoyi2*
(1. Department of Clinical Laboratory Medicine, Youjiang Medical Institute for Nationalities, Baise 533000, China; 2. Teaching
and Research Section of Chemistry, Department of Pharmacy, Youjiang Medical Institute for Nationalities, Baise 533000, China)
Abstract: Extraction of the pigment from Argyreia acuta Lour. and its stability were studied in this paper to provide important raw material for all
kinds of new pigments used in food products, cosmetic and leechdom, etc. Water was used as extractant during the extraction for 24 h, and the pig-
ment stability was vestigated by UV spectrum. The results showed that the λmax for the pigment was 330 nm, which has good solubility and excellent
thermal stability within wide temperate range in water; the alkaline substance has a little effect on the stability of pigment; citric acid, acetic acid and
soluble starch had hyperchromic effect on the pigment; some common food additives, such as sodium benzoate, sucrose, glucose had little effect on
the stability of the pigment; oxidizing agent, reducing agent, except ascorbic acid, and metallic ions, except Co2+、Fe3+ also had little effect on the sta-
bility of the pigment. At the same time,
Key words: Argyreia acuta Lour.; pigment; extraction; stability
收稿日期:2009-05-08
基金项目:右江民族医学院2007-2009年度普高学生科研项目立项资助课题(右医科字[2008]4号),学生民族医药协会课题。
作者简介:罗泳林(1986-)男,广西梧州人,在读本科生,研究方向为中草药有效成分提取;黄锁义*,教授,通迅作者。
Research Report66· ·
中 国 酿 造
2009年 第 11期
总第 212期
表7 光对白鹤藤色素稳定性的影响
Table 7. Effect of light on Argyreia acuta Lour. pigment
光照条件 l∶5 l∶l0 l∶20
自然光 0.111 0.057 0.029
太阳光 0.087 0.042 0.026
330nm,结果见表1。
2.2 不同pH值对白鹤藤色素稳定性的影响
各取30mL白鹤藤色素原液,用5mol/L HCL和2mol/L
NaOH,通过酸度计调节溶液pH值分别为1、3、5、7、9、11、
13。以水为参比,用1cm比色皿,在波长330nm处测定吸光
度值,结果(表2)可知,在pH值为1~5时,其吸光度值变化
不大;在pH值为7~13时,内其吸光度值有轻微变化,即碱性
物质对该色素稳定性有轻微影响。
2.3 热对白鹤藤色素稳定性的影响
将上述配制好的pH值为1、3、5、7、9的白鹤藤色素溶
液各取5份,每份5mL置于大试管中,将各个大试管置于不
同温度恒温水浴锅内,恒温0.5h,取出冷却至室温后,在波
长330nm处测定吸光度值。结果(表3)可知,随着温度的升
高,吸光度值变化不大,即此色素对热具有较好的稳定性。
2.4 食品添加剂对白鹤藤色素稳定性的影响
各取5mL白鹤藤色素原液于7支试管中,分别加入5mL
水(对照液)、3%苯甲酸钠、3%柠檬酸、3%醋酸、3%蔗糖、
3%葡萄糖、3%可溶性淀粉等食品添加剂,振荡,放置25min。
在波长330nm处测定吸光度值。由表4可知,经食品添加剂
处理的色素原液与对照液相比,吸光度值无明显变化,该
色素对上述添加剂有较好的稳定性。
2.5 氧化剂、还原剂对白鹤藤色素稳定性的影响
取白鹤藤色素溶液各3mL置5支试管中,分别加入3mL
的水(混合液为对照液)、(NH4)2S2O8、H2O2、Na2S2O3、抗坏
血酸,振荡,放置25min,在波长330nm处测定吸光度值。由
表5可知,(NH4)2S2O8、H2O2、Na2S2O3对色素的影响不明
显,抗坏血酸对色素有较大的影响。
2.6 金属离子对白鹤藤色素稳定性的影响
取3mL色素溶液,分别加入等体积1g/L离子溶液,对照
中加等量水,振荡,放置25min,观察颜色变化,在波长
330nm测定吸光度值。从溶液颜色变化来看,加Co2+、Fe3+使
其颜色发生变化,对色素影响最大。
2.7 光照对白鹤藤色素稳定性的影响
分别配制白鹤藤原液∶水(体积比)为1∶5、1∶10、1∶20的
不同浓度的色素液,分别分成2份,一份放在太阳光底下,
一份放在室内自然光下(对照)。6h后,在波长330nm处测
定吸光度值。由表7可知,太阳光紫外线对白鹤藤色素稳定
性的影响较小。
3 结论
白鹤藤色素是水溶性色素,用水作提取剂可获得稳定
的鲜艳的提取液。碱性物质对该色素稳定性有轻微影响,
故在应用时应注意碱性物质对食品色泽的影响。白鹤藤色
素具有良好的热稳定性,但高温可加快变色反应,应置低
温或室温环境贮存。柠檬酸、醋酸、可溶性淀粉对白鹤藤色
素有增色作用,而苯甲酸钠、蔗糖、葡萄糖等食品添加剂对
表1 白鹤藤色素的光谱特征
Table 1. Spectralsignatureof Argyreia acuta Lour. pigment
表2 pH值对白鹤藤色素稳定性的影响
Table 2. Effect of pH on Argyreia acuta Lour. pigment
λ/nm 310 320 330 340 350 360
吸光度值A 0.448 0.606 0.640 0.507 0.377 0.276
λ/nm 410 430 450 470 490 510
吸光度值A 0.086 0.071 0.059 0.051 0.044 0.036
370
0.192
530
0.032
390
0.115
550
0.028
570
0.026
吸光度值A 0.633 0.633 0.605 0.585 0.482 0.455 0.543
1 3 5 7 9 11 13
项目
pH值
表3 热对白鹤藤色素稳定性的影响
Table 3. Effect of temperature on Argyreia acuta Lour. pigment
20 0.633 0.633 0.605 0.585 0.482
40 0.632 0.636 0.609 0.589 0.480
60 0.637 0.636 0.633 0.475 0.489
80 0.600 0.641 0.631 0.584 0.499
100 0.672 0.645 0.629 0.586 0.509
1 3 5 7 9
温度/℃
pH值
表4 食品添加剂对白鹤藤色素稳定性的影响
Table 4. Effect of food additives on Argyreia acuta Lour. pigment
项目 对照液 苯甲酸钠 柠檬酸 醋酸 蔗糖 葡萄糖 淀粉
吸光度值A 0.307 0.318 0.350 0.337 0.312 0.314 0.337
表5 氧化剂、还原剂对白鹤藤色素稳定性的影响
Table 5. Effect of oxdising agent and reducing agent on Argyreia
acuta Lour. pigment
项目 对照液 (NH4)2S2O8 H2O2 Na2S2O3 抗坏血酸
吸光度值A 0.306 0.320 0.397 0.323 1.501
表6 金属离子对白鹤藤色素稳定性的影响
Table 6. Effect of metallic ions on Argyreia acuta Lour. pigment
项目 对照液 K+ Mg2+ Zn2+ Ni2+ Na+ Fe3+ Mn2+ Ba2+ Co2+
颜色 淡黄 淡黄 淡黄 淡黄 淡黄 淡黄 棕黄 淡黄 淡黄 淡红
吸光度值A 0.286 0.291 0.295 0.231 0.298 0.226 1.181 0.304 0.310 0.235
研究报告 67· ·
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Serial No.212 China Brewing
白鹤藤色素稳定性无明显影响,故苯甲酸钠、蔗糖、葡萄糖
可以与白鹤藤色素相混合制作商品,而柠檬酸、醋酸、可溶
性淀粉则不行。金属离子中除Co2+、Fe3+外,K+、Mg2+、Zn2+、
Ni2+、Na+、Mn2+、Ba2+等离子对色素的影响均不明显,所以
不宜用铁、钴制品加工或盛装色素溶液,但总的来看,大多
数金属离子对白鹤藤色素的稳定性无明显影响。太阳紫外
线对白鹤藤色素影响较小,白鹤藤色素的抗氧化性、还原
性均较强,在运输贮存过程中除温度外对环境要求不高。
白鹤藤色素色调自然,原料来源丰富且环保,是一种具有
开发前景的食用色素品种。利用本文的提取方法,方法简
便提取率高且无污染。
参考文献:
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北大学学报:自然科学版,2004,34(6):677-679.
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2005,26(3):106-107.
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大学学报:自然科学版,2006,25(1):52-55.
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[5]郝桂霞,郑惜珠.光叶子花红色素的稳定性研究[J].广州食品工业科
技,2004,20(2):73-74,67.
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纤维素酶是指能水解纤维素β-1,4葡萄糖苷键,使纤
维素转变为纤维二糖和葡萄糖的一组酶的总称[1],其应用
前景十分广阔[2]。目前,纤维素酶应用的领域已经扩展到
发酵、日用化工、饲料生产、纺织行业、废水处理及石油开
采等各个领域。能源危机的出现使国际研究的热点转向了
利用天然纤维素生产燃料酒精,其中关键技术之一是如何
提高纤维素酶的活力。此外,在纤维素的其他应用领域中
也都涉及有效利用纤维素酶、降低生产成本的问题。在实
际应用中,不同来源的纤维素酶分子结构和催化特性也有
差别。绿色木霉是一种纤维素酶系较全的真菌,分解纤维
素的能力突出,但是其生产的酶活仍然不够高,阻碍了大
规模生产使用。实验就绿色木霉RW-2固态发酵所产纤维
素酶的热稳定性及不同因素对酶活的影响等主要酶学性
质进行了初步研究,为纤维素酶的应用提供一定的依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
实验菌种:绿色木霉RW-2,本实验室保藏。
固体发酵培养基:以稻草麦麸分别占60%、40%,按照
1∶1.6(质量比)加入蒸馏水,每1000g固体发酵培养基加入
微量元素液1mL,在250mL三角瓶中装入约10g,厚度为
1cm~2cm,于121℃灭菌60min备用。
微量元素液:氯化钙 0.3 g/L,磷酸二氢钾 2 g/L,硫酸
铵 1.4 g/L,氯化锌(1%)1.8 mL/L,硫酸锰(1%)1.6 mL/L,
硫酸镁 0.3 g/L,氯化钴(1%)2.0 mL/L,硫酸铁0.005 g/L。
试剂:3,5-二硝基水杨酸试剂(DNS试剂),醋酸钠,葡萄
糖,羧甲基纤维素钠,硫酸锌,硫酸铜,氯化钙,碘化钾等。
绿色木霉RW-2纤维素酶的酶学性质研究
武秀琴
(河南工程学院,河南 郑州 451191)
摘 要:对由绿色木霉RW-2固态发酵产生的纤维素酶的主要酶学性质进行了研究。结果表明:纤维素酶在40℃和50℃时稳定性较好,
当温度高于50℃后,酶的热稳定性显著降低;表面活性剂吐温-80在一定的范围内对纤维素酶有激活作用,最佳作用浓度为0.05%;金
属离子K+、Ca2+纤维素酶呈现抑制作用;Cu2+、Zn2+对纤维素酶有激活作用;阴离子I-、CH3COO-对纤维素酶有明显的抑制作用。
关 键 词:绿色木霉RW-2;纤维素酶;稳定性
中图分类号:Q556 文献标识码:A 文章编号:0254-5071(2009)11-0068-04
Study on cellulase activity of Trichoderma viride Rw-2
WU Xiuqin
(Henan College of Engineering, Zhengzhou 451191, China)
Abstract: The main properties of cellulose produced by Trichoderma viride RW-2 solid-state fermentation were studied. The results showed that the
cellulase were stable when the temperature is in the range of 40℃ and 50℃ , while less stable when it was higher than 50℃ ; In a certain range,
Tween-80 was shown that it can activate the enzyme activity of cellulose and the results indicated the optimal concentration of Tween-80 was 0.05%;
K+ and Ca2+ showed inhibitory effect on cellulase; Cu2+ and Zn2+ play important role on activation of cellulase; I- and CH3COO- were significant in-
hibitors on the activity of cellulase.
Key words: Trichoderma viride Rw-2; cellulose; stability
收稿日期:2009-05-19
作者简介:武秀琴(1968-),女,讲师,主要从事微生物资源的开发与应用研究工作。
Research Report68· ·