全 文 ：1 9 9 0年 5 月
第 5 卷第 2 期
中国粮油学报 V o l . 5
M
a y 19 9 0
J o u r n a l o f t h e C五i n e s e C e r e a l s a n d 0 11 5 A s s o e i a t i o n
含 r 一亚麻酸的新油源一
微孔草油中脂肪酸的分离和鉴定
中国科学院植物研究所
李京民 王静萍 于凤兰
摘 要
微孔草种子油中含有 8 . 1肠的具有重要的生理活性的 r 一亚麻酸 ( 顺式一6 , 9 , 1 2一十八碳
三烯酸 ) . 本文叙述分离 、 鉴定微孔草种子油化学成份的方法和结果 .
前 言
微孔草
紫草科一年 生草本植物 , 主要分布于我国西藏 、 甘肃 、 青海等地 , 常生长在粮油地里的
杂草之中 . 因此它适应性强 , 易于种植 . 青海海北自治州某些地区已 有食用含有微孔草种子
油的混合菜籽油的历史 。
微孔草种子油中的脂肪酸成份国内外至今尚未见报道 , 经分析其种子含油量高达 45 肠 ,
油中含 r一亚麻酸 (顺式一6 , 9 , 1 2一十八碳三烯酸 ) 8 . 1肠 . 据报道 仁4 ] , r 一亚麻酸在人体内容
易被吸收 , 并可调节血液中类脂物质 , 对降血脂和动脉粥样硬化有显著效 果 . 而且还可 以 治
疗肥胖症 , 风湿性关节 炎和皮肤湿疹等 .
经药理试验 , 已证实微孔草种子油具有较强的降血脂作用 , 经动物急性毒性试验 , 证明
无毒 . 为了开发利用我国高寒地区的植物资源 , 为营养保健药物事业 的发展 , 寻找更 多的含
r 一亚麻酸的新油源 , 因此 , 对微孔草利 ,子油中脂肪酸的成份做进一步和 全 面 的 分 析 , 力其
开发利用提供可靠的科学依据 。
实 验 与 结 果
一 、 种子油的提取及含油量的测定用索氏抽提器 , 石油醚 ( 3 0一 6 0o C ) 为溶剂 。
二 、 油的碘值 、 皂化值及不皂化物含量的测定均采用标准方法 〔` J .
三 、 脂肪酸甲醋的制备
油脂 皂化后 , 用乙醚提取不皂化物 , 水溶液酸化后用乙醚提取脂肪酸 。 混合脂肪 酸与三
氟化硼甲醇溶液回流加热制备成甲醋 1 ` l 。
四 、 气相层析
本所祝凤池同志协助进行红外光谱和高压液相 色谱的分析 , 冯丽洁同志测定紫外光谱 ,
在此一并致谢 .
4 2 中国校油学报 一9 9 0年 5 月
气相色谱仪为北京分析仪器厂 生产的 S P一 2 3 05 全型 , 配有 C D M C一 I A 色 谱 数 据处理
机 . 不锈 钢柱长 2米 , 内径 4毫米 . 固定相采用混合固定液 . 15 肠的二 乙二醇 琉 拍 酸聚酮和
15 肠的二乙二醇季戊四醇已二酸交联聚醋 . 担体为 C hr o m os or b . W . A W D M C S 。一 1 0
目 . 将这两种固定液分别涂溃后 , 以 4 : 6 ( W / W ) 比例混 合均匀后 装柱 . 柱温 Z 0 0 C . 氮
气为载气 . 氢 火焰鉴定器 , 温度 2 4 O O C . 汽化室·温度 3 O0o C 。 常见脂肪酸成份定性 与已知脂
肪酸保留值对照 , 定量按面积归一化法由数据处理机计算 。
五 、 种子 油中十八碳三烯酸和十八碳 四烯酸的分离鉴定
(一 ) 硝酸银硅 胶柱层析 : 脂肪酸甲醋样品在 15 倍量的 20 肠硝 酸银硅胶柱 中层析 , 先用
石油醚 ( 30 ~ 6 0 “ C ) 冲柱 , 冲下饱和酸 ; 再用 l肠 、 2呱乙醚的石油醚冲下单烯酸和二烯酸 :
用 5肠乙醚的石油醚冲下两个三烯酸 : 最后用 10 呱乙醚的石油醚冲柱 , 得到一个四烯酸 。
(二 ) 十八碳三烯酸的鉴定 : 将上述柱层析分离出的三烯酸部份进行气相层析 , 其 中一
个成份为亚麻酸 , 另一 个成份根据保留值初步定为 r一亚麻酸 .
采用高碘酸钠和高锰酸钾氧化裂解的方 法 [ “ ; 进行确证 . 方法有所改进 . 具体步骤如下 :
高碘 酸钠 1 . 1克 , 溶于 15 毫升水中 , 加入高锰酸钾 24 . 7毫克 , 无水碳酸钠 。 . 12 克 , 叔 丁醇25
毫升 , 样品 20 毫克 , 回流加热 2小时 , 冷却 。 加氢氧化钠 0 . 1克 , 2肠亚钾酸钠溶液至 紫 色消
失 , 变成棕色 . 减压蒸馏至约 5 毫升 的混浊液 . 加水 25 毫升和亚硫酸氢钠粉末至溶液呈 浅 黄
色 . 加乙醚 2 。毫升 , 用6 N 盐酸至溶液呈酸性 . 振摇后 , 分 出醚液 , 用水洗去酸性 溶 液 , 用
无水硫酸钠干燥 过夜 . 蒸去溶剂 , 加 三氟化硼甲醇溶液 3毫升 , 回流加热 10 分钟 , 加饱 和氛
化钠溶液 3毫升 , 加 少量石油醚振摇 , 取出石油醚液 , 浓缩后进行气相层析 .
氧化裂解产物有丙酸 、 己酸 、 丙二酸 、 己二酸和壬二酸 . 因此证实了除亚麻酸 (顺式一 9 ,
12
,
15一十八碳三烯酸 )外 , 另一个三烯酸为 r 一亚麻酸 (顺式一6 , 9 , 1 2一十八碳三烯酸 ) .
(三 ) 十八碳四烯酸的鉴定:
1
. 红外光谱 : K B r e m 一 , 5 5 0 , 1 1 6 0 , 1 2 6 0 , 1 3 5 0 , 一` 2 0 , 16 2 0 , 1 7 2 0 , 2 5 4 0 , 2 9 1 0 ,
2 9 9 .0
` 无 9 7 o c m 一 ’ 反式吸收峰 。
2
. 紫外光谱 : 根据 文献报道 [ “ i , 共扼 四烯 酸应该在 2 3 3 、 2 68 、 3 15 毫微米处有吸 收峰 。
但是此脂肪酸无共辘吸 收峰 .
3
. 质谱 分析 : M S nt / e 2 9 o ( M 十 ) , 2 6 2 , 2 2 1 , 19 4 , 一6一 , 1 4 7 , 23 5 , 1 1 9 , 1 05 , 9 3 ,
9 1
,
5 1
,
7 9 (基峰 ) , 6 7 , 5 5 .
4
. 氧化裂解和气相层析 : 方法同上 。
十八碳四烯酸的氧化裂解产物有丙酸 、 己二酸 。 说明第一个双键的位置在 6位 , 最 后一
个双键是在 15 位 . 根据 以上分析确定它为顺式一6 , 9 , 1 2 , 1 5一十八碳四烯酸 .
六 、 种子油中 C Z 。 、 C 2 2和 C : . 烯酸的 分离、 维定
(一 ) C : 。 、 C 2 2和 C : `烯酸的分离:
1
. 硅胶柱层析: 取混合脂肪酸甲脂 4克 , 在 1 20 克硅胶柱 中层析 。 先用石油醚 ( 3 。一60 O C )
冲柱 , 冲下饱和酸 , 再依次用 1肠 、 1 . 5肠和 2肠苯的石油醚冲柱 , 得到混 合单 烯 酸 的甲醋 。
2
、 高压液相色谱制备 分离: 把混合单烯酸甲醋进行反相液相色谱 。 制备色谱柱为 W a 一
t e r s 件 B o n d a p a k C : : s ~ 2 0 协 , 柱长 3 0厘米 , 内径 7 . 8毫米 . 流动相 为 9 0肠 甲 醇的水 , 流
速 3毫升 / 分 . 检测器为示差折光检测器 . 每次收集约 10 毫升 , 气相层析检查 , 合并相似姗份 ,
先后得到以 C : 。 、 C : : 和 C : ; 烯酸为主的各个馏份 .
第 5 卷 第 2 期 李京民等 含丫一亚麻酸的新油源
( 二 ) C Z 。 、 C 2 2 和C Z 。烯酸的鉴定 :
1
. 红外光谱 : 无 9 7 0 。 m 一 ’ 反式吸收峰 .
2
. 氧化裂解 : 方法同上 .
各单烯酸氧化裂解产物的测定用气相层析与标准脂肪酸保留值对照 。 二十二碳烯酸产生
壬酸和十三碳二酸 : 二十四碳烯酸产生壬酸和十五碳二酸 . 二十碳烯酸产生壬酸和一个二元
酸 。 根据 同条件下同系物的比保留体积 V g 的对数和分子 中的碳数成线性关系 〔 ’ ) , 对几个二元
酸进行了渺定 . 见图 . 二十碳烯酸产生的二元酸按其相对保留伎 2 . 93 应是十一碳二酸 .
根据以上分析 , 此三 种单烯酸分别确定为顺式一 l 卜二十碳烯酸 , 顺式一 1 3 一二十二碳烯酸
和顺式一 15一二十四碳烯酸 .
小 结
微孔草 种子理化常数及各脂肪酸组成 的含量见下表 .
橄孔草种子油的分析致据
含
油
率
( 肠 )
油的理化常数 脂 肪 酸 组 成 (务 )
2
{
1
;{ ( [ 5)骂一|l.l6esl不化皂物务值皂化竺尘些巨}19旦圣 _ ” .9J 了一 5 } ` ·另含肉豆盏酸 , 十六碳烯酸 , 十七碳酸 ,,r 一 亚麻酸 13 , · 8 }2` · ` { 3 · ` 1` 3 · 6 }花生酸和山苗酸微 t (微 里 < 。 . 1肠 ) 1 2 2 : 1…“ 3 ,} ` . 6
微孔草种子油经药理试验 , 具有很强的降血脂作用 . 据青海部份地区民间的食用情况和
动物试验 , 无急性中毒的现象 , 说明微孔 草油有应用前景 . 因此微孔草种子油有可能做为有
医疗价值的含 r 一亚麻酸的新油源。
乙口夕 冷
2
} ,
参 考 文 献
①中国油脂植物编写委员会 , 19 8 7 ` 中国
油脂植物 . 科学出版社 , 北京 , 5 70 一 5 75 页 .
②中国科学院大连化学物理研究所 ,
19 7 2 : 气相色谱 . 科学出版社 , 北京 , 14 9一
1 5 0页 。
③林启寿编著 , 中草药成份化学 。一 ④俞德俊 , 19 82 : 新油椰树赚 .7 9 ` , 户 ’ 5 七碳教 ) 植物杂志 , ② 28 页 .E q u i v a l e n , c a r b o n c h a i” ⑤ P r i , e t t 0 . 5 . a n d N i e k e l l E .脂肪酸同系物保留值和碳数的关系 C h r i s t e n s e , 1 9 6 3 : P r e p a r a t i o n o f h i g h l yp u r i f i e d f a t t y a e i d s v i a l i q u i d p a r t i -t 10 0 e h r o m a t o g r a p h y . J A O C S , 4 0 ( 5 ) 一5 9一 19 3 .