全 文 ：保护作用 。对小鼠采用灌胃给药 ,将其断头 ,记录断
头小鼠的喘息时间 。将60只小鼠随机分成6组 ,雌雄
各半 ,每组 10只 ,分别为阴性对照组 、阳性对照组 、干
膏②组 、干膏③组和干膏④组。按照 0.02 mL· g-1的
剂量给小鼠采用灌胃给药 ,1天 1次 ,共 3次 ,在最后
1次给药 1 h后 ,自小鼠耳后快速断头 ,记录从断头
开始到最后 1次的喘息时间 ,结果见表 3。组间进行
t检验 ,双样本等方差假设 ,与阴性对照组进行比较 ,
P >0.01。由数据分析可知 ,各个工艺的倒卵叶五加
提取物均对脑缺血有一定的保护作用。
表 3　小鼠脑缺血喘息试验结果(n=10 , x±s)
　组别 喘息时间/ s
阴性对照组 12.05±4.890
水提上柱组 16.6 ±3.878＊＊
水提醇沉组 18.3 ±2.722＊＊
醇提组 17.7 ±3.976＊＊
阿司匹林组 17.6 ±3.826＊＊
　注:＊＊P <0.01
3　结论
在 4种干膏的制备工艺中 ,水提的样品成本最
低 ,操作最为简便 ,而且干膏率也是最高的。但是在
后续的药理实验中反映其作用效果在 4种样品中是
最差的 ,提示可能含有无效成分最多 ,因此该工艺可
能没有应用的必要。
通过药理实验还可以看出 ,水提醇沉的样品在抗
血栓方面的作用是最强的 ,而水提上柱的样品虽然药
效并不明显逊色于水提醇沉的样品 ,但是在提取分离
过程中 ,水提醇沉组样品的成本明显低于水提上柱 ,
从而说明水提醇沉工艺在以后的实验和生产中可能
拥有非常广阔的前景 。另外 ,乙醇提取的产物成本较
高 ,而且药理实验证明其抗血栓活性也不理想 ,应用
前景不容乐观。
参考文献:
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用及机制探讨[ J] .中国药理学通报 , 1999 , 15(6):534-
536.
(收稿日期:2008-10-13)
羊红膻药材中总黄酮的含量测定
方法研究
石会丽 ,冯一凡 ,刘　珍 ,李富贤 , 米彩峰(陕西省中医
药研究院中药所 ,陕西 西安 710003)
摘要:目的　建立一种测定羊红膻中总黄酮的含量测定方法。
方法　以芦丁为对照品 ,采用比色法在波长 500 nm 处测定羊红
膻中总黄酮。结果　芦丁在 7.984～ 47.90 g· L-1质量浓度范围
内线性关系良好 ,平均回收率为 99.99%, RSD为 1.4%(n =6)。
结论　所建立的羊红膻药材中总黄酮的测定方法操作简便 ,结果
可靠,重复性好 ,可作为羊红膻药材的质控标准之一。
关键词:比色法;羊红膻;总黄酮;芦丁
中图分类号:R927.2　　　文献标识码:A　　　
文章编号:1004-2407(2009)01-0018-02
基金项目:陕西省中医管理局资助课题(编号 2005-91)
　　羊红膻为伞形科茴芹属植物缺刻叶茴芹(Pim-
pinel la thellungiana Wolff),药用全草 。主要分布于
陕西北部地区 ,为一民间草药 ,别名六月寒。很早就
用于防治家畜劳伤 、乏瘦 、倒毛 ,素有“家有羊红膻 ,老
牛老马养满圈”之说 ,常作为“复壮药” , “太平药” 。
陕北人用于治疗家畜伤力 、倒毛及仔猪白痢等症[ 1] 。
羊红膻主治克山病 、心悸气短 、咳嗽[ 2] 。研究者曾从
中分析鉴定了 18种挥发油类成分[ 3] ,芹黄素-7-葡萄
糖醛酸甲酯苷等 6种黄酮类成分 。现代药理研究表
明 ,具有降压 、降低心肌耗氧量 、增加心肾血流量 、预
防外援性三酰甘油升高等作用[ 4] 。黄酮苷均能提高
正常或病态的耐缺氧能力;同时对心 、脑组织琥珀酸
脱氢酶体系有改善 ,特别是对实验性心肌梗塞模型 、心
肌呼吸酶改善明显 ,即在有氧代谢中 ,提高细胞对氧的
利用率 ,有利于机体内的生物氧化 ,改善心肌的能量代
谢[ 5-6] ,本试验对其中总黄酮的含量进行方法学研究。
1　仪器与试药
1.1　仪器　恒温水浴锅(上海医疗器械五厂);UV-
721-分光光度计(上海第三分析仪器厂);KQ-250 超
声波清洗仪(上海);BS210S-SARTORIUS(北京赛多
利斯电子天平有限公司 ,d=0.01 mg)。
1.2　试药　亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠 、甲醇 、乙醇
均为分析纯;水为蒸馏水和自来水;芦丁对照品(中国
药品生物制品检定所 ,批号 0080-9504);羊红膻药材
7月下旬至 9月下旬采自陕北黄龙(经本科室鉴定)。
2　方法与结果
2.1　最大吸收波长的选择　羊红膻中含有芹黄素-
7-葡萄糖醛酸甲酯苷等多种黄酮类化合物 ,其黄酮母
核所含的游离羟基 ,在适当的介质条件下 ,能与金属
铝离子形成络合物而显色 ,显色后的对照品溶液和供
试品溶液 ,均在 500 nm 波长处有最大吸收 。
18 西北药学杂志　2009 年 2 月　第 24 卷　第 1 期
2.2　对照品溶液的配制　精密称取 60 ℃减压干燥
至恒重的芦丁对照品49.90 mg ,置于25 mL 量瓶中 ,
加甲醇适量 ,置水浴上微热使溶解 ,放冷 ,加甲醇至刻
度 ,摇匀。精密量取 10 mL 置于 100 mL 的量瓶中 ,
加甲醇至刻度 ,摇匀即得 。
2.3　标准曲线制备　精密吸取上述对照品溶液 1.0 ,
2.0 , 3.0 , 4.0 ,5.0和 6.0 mL ,分别置 25 mL 量瓶中 ,
各加水至 6 mL ,加 5%的亚硝酸钠溶液 1 mL ,混匀 ,
放置 6 min;加 10%硝酸铝溶液 1 mL ,摇匀 ,放置 6
min;加氢氧化钠试液 10 mL ,再加水至刻度 , 摇匀 ,
放置 15 min;以相应试剂为空白 ,照紫外-可见分光度
法[ 7] ,在500 nm的波长处测定吸光度 ,以吸光度为纵
坐标 ,质量浓度为横坐标 ,绘制标准曲线 ,得线性方程
为Y =85.5X -1.914 1 , r =0.999 1 , 芦丁在7.984 ～
47.90 g ·L -1质量浓度范围内线性关系良好。
2.4　样品的测定　精密称取粉碎至 40目的羊红膻
药材约 0.38 g ,置圆底烧瓶中 ,加体积分数 50%乙醇
25 mL ,精密称定质量;加热回流 2 h ,放至室温 ,称定
质量;用体积分数 50%乙醇补足减失质量 ,混匀 ,过
滤;取续滤液 2 mL ,于 25 mL 的量瓶中 ,加水 4 mL ,
以下自“加入 5%的亚硝酸钠……”起 ,照 2.3项下在
500 nm 波长处测定其吸光度 。结果见表 1。
表 1　羊红膻药材含量测定结果
药材采集月份 7月 9月
总黄酮含量/% 3.319 3.214 3.388 3.512 3.528 3.507
2.5　提取溶剂及方法考察　为研究羊红膻中总黄酮
的最佳提取工艺 ,在充分预试验的基础上 ,以总黄酮
含量为考察指标将各因素进行多因素单水平试验 。
2.5.1　选择提取溶剂　利用传统热回流提取方法 ,
选择黄酮类化合物的常用提取溶剂(甲醇 、乙醇 、70%
乙醇 、50%乙醇)进行试验比较 ,其总黄酮含量结果分
别为 2.195%,2.123%,3.299%和 3.487%。实验证
明 50%乙醇作为提取溶剂较为合适。
2.5.2　选择不同提取方法　选用常用中药提取的方
法(回流法 2 h 、超声法 1 h 、振摇法 24 h)进行比较 ,
溶剂用 50%乙醇 ,结果总黄酮含量分别为 3.510%,
2.968%和 2.934%。
2.6　重复性试验　按2.4项下样品测定方法重复5次
测定 ,其结果分别为3.522%,3.528%, 3.545%,3.496%
和3.526%,平均值3.524%,RSD为 0.78%。结果表明
试验方法重复性较好。
2.7　稳定性试验　精密称取粉碎至 40目的羊红膻
粉末适量 ,按 2.4项下样品的测定方法 ,间隔一定时
间测其吸光度。结果表明吸光度在 30 min内较为稳
定 ,故测定在 30 min内完成较好 。
2.8　回收率试验　精密称取已知含量(3.511 1%)
粉碎至40目的药材约 0.18 g ,共 6份 ,加入一定量的
芦丁对照品 ,按 2.4项下样品的含量测定方法测定其
含量 ,计算回收率和 RSD值 。结果见表 2。
表 2　芦丁加样回收率试验结果
编号 样品量/g
样品中总黄酮
含量/mg
加入标品
量/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均
回收率/ %
RSD
/ %
1 0.188 8 6.629 0 2.02 8.689 0 101.98
2 0.185 0 6.495 5 2.02 8.489 1 98.69
3 0.184 8 6.488 5 4.04 10.483 5 98.89 99.99 1.4
4 0.186 4 6.544 7 4.04 10.637 0 101.29
5 0.187 2 6.572 8 6.06 12.580 0 99.13
6 0.187 9 6.597 4 6.06 12.657 0 99.99
3　讨论
因为羊红膻为全草入药 ,且在各个不同部位的总
黄酮含量不一致 ,为使取样均一性 ,且保证其全草入
药使药性一致 ,故将药材一定要粉碎混合均匀后称
取 ,以消除取样不均匀带来的误差。
测定表明 7月份所采药材含总黄酮量略低于 9
月份 ,且其中叶绿素含量却高于 9月份 ,表明采药时
间 9月份为好。稀乙醇提取总黄酮得率较高 ,故选用
稀乙醇为提取溶剂;回流提取法提取得率较高 ,故选
用回流提取法。
参考文献:
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(收稿日期:2008-09-11)
近红外光谱结合人工网络鉴别大黄
王贵杰 ,杨　帆(陕西省宝鸡市千阳县妇幼保健院 , 陕西
千阳 721100)
摘要:目的　探讨正品与非正品大黄的鉴别方法。 方法　使
用近红外光谱仪对 52 种不同产地的大黄样品进行图谱扫描 ,
采用反向传播多层前向神经网络对大黄的近红外图谱进行分
类判别。结果　大黄样品的近红外光谱非常相似 , 不能用直
接观察的方法对正品和非正品大黄做出鉴别 ,但结合使用人工
网络方法就能够提高对正品和非正品大黄样品的分类识别率 ,
使正品和非正品大黄样品的分类识别率达 96%。结论 　近红
外光谱分析结合人工网络可提高正品和非正品大黄的识别
率 , 是一种很有发展前景的鉴别中草药的方法。
关键词:大黄;近红外光谱技术;鉴别
中图分类号:R282.5　　　文献标识码:A　　　
文章编号:1004-2407(2009)01-0019-03
19西北药学杂志　2009 年 2 月　第 24 卷　第 1 期