全 文 ：2011 年
第 31 卷
5 月
第 5 期
河 南 中 医
HENAN TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
May 2011
Vol． 31 No． 5
·方技囊秘
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秦岭柴胡根部柴胡皂苷 a的含量测定
刘 清，卫 昊，王西芳
(陕西中医学院，陕西 咸阳 712046)
摘要:目的:建立秦岭柴胡柴胡皂苷 a的含量测定方法。方法:采用 HPLC梯度洗脱法，用 Kromasil C18色谱柱(4． 6 mm × 250 mm，5 μm) ，以乙
腈∶ 水二元梯度洗脱［0 － 5 min(30∶ 70) ;5 － 10 min(40∶ 60) ;10 － 18 min(60∶ 40) ;平衡 5 min，检测波长为 210 nm，柱温室温，流速 1 mL /min。
结果:柴胡皂苷 a在 0． 699 － 4． 66 μg之间线性关系良好，r = 0． 9999，柴胡皂苷 a平均回收率为 99． 05%，RSD为 1． 36%。结论:秦岭柴胡皂苷 a
的 HPLC梯度洗脱法灵敏、准确，专属性强，重现性好。
关键词:秦岭柴胡;HPLC法;柴胡皂苷 a;含量测定
中图分类号:R284． 1 文献标识码:A 文章编号:1003 － 5028(2011)05 － 0549 － 02
秦岭柴胡(B． longicayle wall． es DC． var． giradii wolff)又
名金柴胡，为伞形科柴胡属植物的一种，多年生草本。味苦，
性微寒，主产于秦岭太白山、光头山及佛坪等地，在甘肃天
水、武山、青海民和、玉树和山西也有分布。具有发表祛风、
清肝利胆、清心火、通经之功效，主治感冒、虚劳骨蒸、月经不
调、肝气不舒、黄疸等症［1］，其功效与同属用药植物柴胡不完
全一致，有其独到之处。目前已知该药材根部主要含有柴胡
皂苷 a、c、d，此外根中尚含有挥发油，植物甾醇和有机酸
等［2 － 4］。秦岭柴胡作为地方草药，目前尚缺乏系统研究，也
无地方标准可供参考。鉴于此，本试验主要通过检测其主要
活性成分柴胡皂苷 a的含量，建立秦岭柴胡质量标准的研究
方法，为秦岭柴胡的进一步利用和开发提供依据。
1 材料和仪器
1． 1 药材及鉴定 秦岭柴胡:2008 年 8 月中旬采集于陕西
省太白县海拔约 2 800 m的西太白鳌山，取其带根全草，经王
西芳教授鉴定为伞形科(Umbelliferae)柴胡属(Bupleurum)秦
岭柴胡。
收稿日期:2011 － 02 － 28
基金项目:陕西省教育厅基金资助项目(编号:2010JK499) ;咸阳市科
技局基金资助项目［编号:2010K14 － 02(5) ］
作者简介:刘清(1982 －) ，女，山东临沂人，硕士学位，助教。
1． 2 仪器与试药 高效液相色谱仪 ALLIANCE600E(美国
沃特斯公司) ;GB － 204 电子分析天平(瑞士梅特勒 －托利
多) ;乙腈为色谱纯(Fish公司) ，其余试剂均为分析纯。柴胡
皂苷 a对照品(批号:11077 － 2000303，中国药品生物制品检
定所)。
2 实验方法与结果［5 － 7］
2． 1 色谱条件 色谱柱 Kromasil C18色谱柱(4． 6 mm ×
250 mm，5 μm) ，以乙腈 ∶ 水二元梯度洗脱［0 － 5 min(30 ∶
70) ;5 － 10 min(40∶ 60) ;10 － 18 min(60∶ 40) ;平衡 5 min］，检
测波长为 210 nm，柱温 25℃，流速 1 mL /min，在此条件下，样
品得到良好分离(见图 1) ，柴胡皂苷 a 的理论板数为 68536
(见图 2)。
图 1 秦岭柴胡样品图谱
2． 2 对照品溶液的制备 取柴胡皂苷 a 对照品适量，加甲
醇制成每 1 mL含柴胡皂苷 a 0． 233 mg的溶液。
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DOI:10.16367/j.issn.1003-5028.2011.05.058
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图 2 柴胡皂苷 a标准品图谱
2． 3 样品溶液制备 取柴胡根部药材 7 g，置合适圆底烧瓶
中，加入 10 倍量 65%乙醇，回流提取 2 次，每次约 2 h，合并
提取液，减压回收溶剂，挥发至无醇味，冷冻干燥，干粉用色
谱甲醇溶解，过滤后溶于 50 mL容量瓶中。
2． 4 标准曲线及线性范围 精密吸取上述柴胡皂苷 a 对照
品溶液 3 μL、5 μL、10 μL、15 μL、20 μL，按上述色谱条件，注
入高效液相色谱议，记录峰面积，以面积对进样量(μg)回
归，得回归方程 Y = 288716X － 3916． 31，相关系数 r = 0．
9999，表明柴胡皂苷 a 在 0． 699 － 4． 66 μg 之间线性关系良
好。
2． 5 精密度试验 吸取供试品溶液 10 μL，连续进样 5 次，
记录峰面积，RSD为 1． 08%，表明本法精密度良好。
2． 6 重复性试验 取秦岭柴胡根部药材 5 份，按供试品制
备方法制备样品，测定含量，RSD为 1． 37%，表明本法重复性
良好。
2． 7 稳定性试验 取重复性试验中的 1 号样，于不同时间
进样 10 μL，记录峰面积，RSD 为 1． 88%，表明本品在 8 h 内
稳定性良好。
2． 8 回收率试验 取已知含量的样品(C = 2． 5404 mg /g)加
入一定量对照品，按供试品制备方法制备样品，测定总量，以
下式计算回收率，结果见表 1。
加收率(%)=测得总量(mg)－样品含量(mg)
加入对照品的量(mg)
× 100%
表 1 回收率试验结果
序
号
取样量
(g)
相当于
柴胡
皂苷 a
的量(mg)
加对照品
量(mg) 峰面积
测得总量
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
1 3． 9248 9． 9705 1． 06 632141 11． 0153 98． 56
2 3． 8827 9． 8636 1． 06 626465 10． 9170 99． 38
3 3． 9233 9． 9666 1． 06 633562 11． 0399 101． 25 99． 052 1． 36
4 3． 9623 10． 0658 1． 06 637239 11． 1036 97． 9
5 3． 8606 9． 8076 1． 06 622493 10． 8482 98． 17
结果表明，本方法回收率良好。
2． 9 样品测定 取三批秦岭柴胡根部药材样品，按供试品
制备方法和前述色谱条件测定，结果见表 2。
表 2 样品测定结果
批次 称样量(g) 峰面积 含量(mg /g) 平均含量(mg /g)
1 7． 0041 1004375 2． 4931
2 7． 0189 1048537 2． 5968 2． 5417
3 6． 9715 1016665 2． 5352
3 讨论
据文献报道［1］，秦岭柴胡中含有一定量的柴胡皂苷 d，
在薄层鉴别中，样品在柴胡皂苷 d 对应位置处斑点较为清
晰，但在 HPLC检测中，响应值比较低，无法计算含量，初步
表明秦岭柴胡药材中柴胡皂苷 d 含量相对甚微。而柴胡皂
苷 a峰形较好，含量较高，故列为检测指标;柴胡皂苷 c 活性
较低，甚至在某些方面没有活性，且其标准品不易购买，所以
未将其列入。从最终试验结果可以看出，秦岭柴胡根部柴胡
皂苷 a含量远远高于地面部分。
另外，含量测定结果显示，秦岭柴胡中柴胡皂苷 a 含量
为 2． 5417 g /g，即 0． 2547%，此结果和其他文献资料相关报
道中的柴胡皂苷 a 含量存在一定差异。马林等［8］研究结果
显示，秦岭柴胡中柴胡皂苷 a 含量为 0． 45%，笔者的色谱条
件，样品未得到有效分离，分离度小于 1． 5。至于含量差异，
本研究认为可能与秦岭柴胡采收季节有关，同时产地、提取
工艺的不同，也可能对含量造成一定影响。另外，本试验所
用样品均于 7 月份采集于宝鸡市太白县，样品采收地域、时
间过于单一，药材样本数量偏少，而试验样品采收地域、季
节，数量均是影响秦岭柴胡有效成分含量的重要因素，故下
一步研究应考虑选择不同地域，不同生长期的秦岭柴胡进行
含量比较研究，同时增加样本数量，以便更客观准确的分析
地域、时间对其有效成分含量积累变化的影响。
参考文献:
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(编辑:孙 铮)
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