全 文 ：乌蕨中抑菌活性成分核磁共振波谱分析＊
陶　晨1 , 2 , 杨小生1＊＊ , 罗载刚2 , 陈　明2 , 陈金秀2 , 邓先扩2
(1.中国科学院天然产物化学重点实验室 , 贵州贵阳　550002;2.黔南民族医学专科学校 , 贵州 都匀　558000)
[摘　要]目的:对乌蕨(Stenoloma chusanum(L)Ching)中活性成分进行分离提纯。方法:采用层析法对乌蕨乙醇
提取物的乙酸乙酯萃取部分化学成分进行分离纯化 , 再用质谱和核磁共振进行结构鉴定。结果:得到了 3 个具
有抗菌成分的化合物 ,(1)芹菜素 、(2)丁香酸和(3)原儿茶酸 ,其中芹菜素是在该植物成分中首次报道。结论:丁
香酸 、原儿茶酸和芹菜素为该植物的主要抑菌活性成分。
[关键词] 蕨类;细菌;抑制素类/分离和提纯;磁共振波谱学;光谱分析 ,质量
[中图分类号] TQ460.72　　[文献标识码] A　　[文章编号] 1000-2707(2004)06-0495-02
A Nuclear Magnetic Resonance Analysis of Bacteria-inhibiting Constiturnts
from Stenoloma chusanum (L)Ching
TAO Chen1 ,2 , YANG Xiao-sheng1＊＊ , LUO Zai-gang2 , CHEN Ming2 , CHEN Jin-xiu2 , DENG Xian-kuo2
(1.The Key Laboratory of Chemistry for Natural Products of Guizhou Province and Chinese Academy of Sciences , Guiyang 550002 ,
China;2.Qiannan Minority Medical School , Duyun , Guizhou 558000 , China)
[ Abstract] Objective:To study the chemical constituents of Stenoloma chusanum (L)Ching.Methods:
The chemical constituents of AcOEt-fraction from Ethanol-Extraction were separated and purified with chro-
matographic techniques , and tested with mass spectrographic technique and nuclear magnetic resonance.
Their structures were elucidated on the basis of special data analysis.Results:Three compounds were ob-
tained as apigenin(1), syringic acid(2), and protocatechuic acid(3).Among them , apigenin(1)was re-
ported in this plant for the first time.Conclusions:apigenin (1), syringic acid(2), and protocatechuic
acid(3)are the main bioactive constituents that can inhibit bacteria.
[ Key words] Ferns;bacteria;inhibins/isolation &purification;magnetic resonance spectroscopy spectrum
analysis ,mass
　　鳞始蕨科乌蕨属植物乌蕨(Stenoloma chusanum
(L)Ching),主要分布于我国长江以南各地 ,性苦 、
寒 ,具有清热解毒和利尿功效 ,主要用于感冒发烧 、
咳嗽 、扁桃体炎 、腮腺炎 、农药中毒等治疗[ 1 ,2] 。黔
南州少数民族常用该草药 ,治疗外伤感染。对黔南
产乌蕨的丙酮 、水 、酒精的提取物进行活性试验 ,发
现丙酮提取物具有较好的抑菌活性[ 3 ,4] 。为较全
面地阐述乌蕨活性成分 , 2002年 2月 ～ 8月从酒精
提取物的乙酸乙酯萃取物(此部分的成分经薄层层
析显示与丙酮提取物的大部分成分一致)中分离纯
化 3种化合物 ,并确证其结构分别是:芹菜素 、丁香
酸 、原儿茶酸 ,其中芹菜素为首次从该植物中分离
到。
1　材料与方法
1.1　仪器 、试剂和样品　熔点用XT-4双目显微测
定仪 ,温度未校正;质谱图用 HP-5973质谱仪测定;
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第29卷　第 6期
2004年 12月 　　　 贵 阳 医 学 院 学 报JOURNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE　　　Vol.29　No.62004.12
＊[基金项目]贵州省科技厅基金资助项目(2001 ,3013)
＊＊通讯作者 0851-3805459
核磁共振光谱图用 INOVA-400超导核磁共振仪测
定(以 TMS 为内标);柱层析硅胶为青岛海洋化工
厂产品 ,分离用溶剂均为工业纯级经重蒸后使用 。
乌蕨样品采自贵州省都匀市马鞍山林场 ,经贵阳医
学院药学系赛明兰副教授鉴定为 Stenoloma chu-
sanum(L)Ching 。
1.2　提取和分离　13.5 kg 乌蕨(干品)经 75%酒
精室温浸提 3次 ,减压回收酒精 ,所得浸膏经适量
水分配后 ,用乙酸乙酯萃取 3次 ,回收溶剂得到萃
取物 158 g 。取其萃取物 50 g ,以CHCl31/2丙酮 1/
2MeOH 为洗脱溶剂 ,进行反复硅胶柱层析 ,得到 3
个成分 ,即化合物(1),(2)和(3)。
1.3　结构鉴定
化合物(1):淡黄色固体(甲醇作溶剂);EI/
MS:270 [ M+ ] , 253 , 242 [ M+ -CO ] , 213 , 153 ,
124。1HNMR(pyridine-d5)δ13.80(br.s , 1 H ,-OH),
12.90(W ,2 H ,-OH),7.91(d , J=8.4 Hz ,2 H),7.22
(d , J=8.8 Hz , 2 H), 6.92(s , 1 H), 6.81(d , J=1.6
Hz , 1H), 6.75(d , J=2.0Hz ,1 H);13CNMR(pyridine-
d5)δ182.8(CO), 165.9(s), 164.5(s), 163.2(s),
162.7(s),158.5(s),129.0(d),129.0(d), 122.3(s),
116.9(d),116.9(d), 105.0(s), 103.9(d),100.0(d),
94.9(d)。
以上光谱数据和文献[ 5]报道的芹菜素的数据
基本一致 ,故化合物(1)确定为芹菜素 。
化合物(2):无色针晶(甲醇), EI/MS:198
(M+),183 ,155 ,127。1HNMR(acetone-d6)δ8.02(w , 1
H ,OH), 7.31(s , 2 H , Ar-H), 3.87(s , 6 H ,-OMe ×
2);13CNMR(acetone-d6)δ167.5(s), 148.2(s),148.2
(s),141.5(s), 121.4(s), 108.0(d), 108.0(d), 56.6
(q)×2。
以上数据与丁香酸的文献[ 6]报道值基本一致 ,
故该化合物为丁香酸 。
化合物(3):无色片晶(丙酮),EI/MS∶154[M+] ,
137[M+-OH] , 109[M+-COOH] 。1HNMR (acetone-
d6)δ7.51(d , J=1.6 Hz , 1 H), 7.46(dd , J=1.6 ,8.4
Hz ,1H),6.87(d , J=8.4 Hz , 1 H);13CNMR(acetone-
d6)δ168.0(s), 150.7(s), 145.5(s), 123.6(d), 117.4
(d),115.7(d)。
以上数据与原儿茶酸的文献[ 7]报道值基本一
致 ,TLC显示其 Rf值与对照品原儿茶酸一致 ,故该
化合物为原儿茶酸。
2　结果与讨论
2.1　用核磁共振分析和质谱分析方法从乌蕨植物
的醇提 、乙酸乙酯萃取物中分离 、鉴定了 3个化合
物 ,3 个化合物的光谱数据与文献[ 5～ 7]基本一致 ,
即芹菜素 、丁香酸和原儿茶酸 ,其中芹菜素为在该
植物中首次报道。
2.2　原儿茶酸对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌 、肺
炎双球菌 、甲型链球菌 、流感嗜血杆菌 、绿脓杆菌 、变
形杆菌均有抑制作用[ 8] ,丁香酸具有抗细菌和真菌
的作用[8] ,芹菜素有抗菌 、消炎 、利尿 、降压活性[ 8] ,
这与丙酮粗提物(主要成分与乙酸乙酯萃取部分的
主要成分一致)具有较高抑菌活性的结论一致。
2.3　通过对乌蕨中化学成分的研究 ,可以认
为丁香酸 、原儿茶酸和芹菜素为乌蕨的主要抑菌活
性成分 ,为该药用植物的质量标准的建立奠定了一
定的物质基础 。
3　参考文献
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(2004-11-19收稿 , 2004-01-21 修回)
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贵 阳 医 学 院 学 报　　　　　　　　　　　　　　29卷