全 文 ：Study on Preparation Technology of Jiluoning Film Coating Tablets
SHI Zhi-qi1, WANG Luo-lin1, JIANG Zhi-qiang2
1Guangdong Provincial Institute of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510095；
2Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405
ABSTRACT Objective: To study the formulation and preparation of Jiluoning film coating tablets.
Methods: With yield of the active ingredient paeoniflorin in powdered extracts as index, the best extraction
process was evaluated by an orthogonal experimental design． The tablet formulation was selected by degree
of surface smoothness, hardness, friability and disintegration. Results: The most favorable extraction
conditions were as follows: adding 10 times the quantity of medicinal materials into Chinese medical
materials and boiling for 2 times (2 hours each time). The optimum ratio of starch and lactose at 1 ∶1 and
through wet -granulating, tabletting and film coating, the Jiluoning tablets were prepared successfully.
Conclusion: The formulation of Jiluoning film coating tablets is reasonable and the processing technique is
simple and feasible, which conforms to the general requirements of production.
KEY WORDS Jiluolin tablets; Film coating; Process technical
HPLC法测定不同产地莕菜中齐墩果酸和熊果酸的含量
蔡 颖
南京市白下建中中医院，南京 210004
作者简介 蔡颖，女，主管药师 Tel: 025-84463426
E-mail: njcyworld@sina.com
收稿日期 2011-10-19 修回日期 2011-12-26
莕菜 Nymphoides Peltatdum（Gmel.） O.Kunt.又
称荇菜、水葵、水镜草、水荷叶，为睡菜科植物莕菜
的全草。 具有清热、解毒、消肿、利尿之功效，临床主
要用于治疗寒热、热淋、痈肿、火丹[1]。 主要有效成分
为三萜﹑甾醇﹑黄酮等。 其中三萜类齐墩果酸具有保
肝﹑消炎﹑降糖﹑抗 HIV 的作用 [2]；熊果酸具有抑制血
管生成﹑抗肿瘤﹑抗炎﹑抑菌[3]等作用。 具有重要的药用
开发价值。 目前有文献对中药夏枯草[4]﹑枇杷叶[5]﹑木
瓜 [6]及中成药六味地黄丸 [7]中的齐墩果酸和熊果酸
进行测定，而未见对莕菜中三萜类有关成分测定的
报道。 本文建立了 HPLC法同时测定莕菜中齐墩果
酸和熊果酸（结构见图 1）含量的方法，为控制其药
材质量提供科学根据。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent1100 高效液相色谱议 ，Agilent 1100
VWD检测器 Chem-stations工作站 （Agilent公司，美
国）；梅特勒-托利多 AB135-S电子分析天平（瑞士梅
摘 要 目的：建立 HPLC 法测定莕菜中齐墩果酸和熊果酸的含量的方法，并对不同产地的
药材进行测定。 方法：采用 Shim-pack CLC-ODS（M）（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱；流动相为
甲醇-水-磷酸（86∶14∶0.02）；检测波长为 210 nm；流速为 1.0 mL·min-1；柱温为 20℃。 结果：齐墩果
酸和熊果酸分别在 1.02～20.40 μg·mL-1、0.53～10.60 μg·mL-1范围内峰面积与浓度呈良好的线性
关系。 结论：该方法简便、准确，可以用于莕菜药材的质量控制。
关键词 HPLC法；莕菜；齐墩果酸；熊果酸
中图分类号 R927.2 文献标志码 A 文章编号 1673-7806（2012）01-094-03
图 1 齐墩果酸和熊果酸的结构式
2012
Feb;20(1)
94
DOI:10.13664/j.cnki.pcr.2012.01.009
图 2 齐墩果酸对照品和熊果酸对照品（A）和样品（B）的
HPLC 色谱图
1:齐墩果酸；2：熊果酸
特勒公司）；SG1200H超声波清洗器（上海冠特超声仪
器厂）；DL-1溶剂过滤器（天津市东康科技有限公司）。
1.2 试药
莕菜药材从太湖湿地﹑杭州西湖﹑山东滕州湿
地﹑安徽开金湖﹑西藏米拉山口等地区采摘，经南京
中医药大学中药鉴定教研室鉴定为为睡菜科植物
莕菜 Nymphoides peltatdum（Gmel.） O.Kunt.的全草。
齐墩果酸对照品（批号：110709-200505）、熊果
酸对照品（批号：110742-200516）均由中国药品生
物制品检定所提供；甲醇为色谱纯；其他试剂均为
分析纯；水为高纯水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Shim-pack CLC-ODS（M）柱（4.6 mm×
250 mm，5 um）； 流动相： 甲醇-水-磷酸 （86 ∶14 ∶
0.02）；流速：1.0 mL·min-1；柱温：20℃；检测波长:210
nm；进样量：10 μL。采用此色谱条件，供试品及对照
品色谱分离度良好，见图 2。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液 精密称取经五氧化二磷减压
干燥 36 h 的齐墩果酸对照品 10.2 mg、 熊果酸对照
品 5.3 mg，分别置于 100 mL量瓶中，加入甲醇溶解，
并稀释至刻度，振荡摇匀。 得齐墩果酸对照品溶液，
浓度为 0.102 mg·mL-1；熊果酸对照品溶液，浓度为
0.053 mg·mL-1。
2.2.2 供试品溶液 取莕菜粉末约 1.0 g，过 40目筛，
精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加甲醇 100mL，密
塞，称定重量，超声辅助提取 30 min，冷却，再称定重
量，加甲醇补足减失重量，摇匀，经0.45 μm 微孔滤膜
滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.3 标准曲线的测定
分别精密吸取齐墩果酸对照品溶液（0.102μg·
μL-1） 和熊果酸对照品溶液 （0.053μg·μL-1）1.0、2.0、
6.0、10.0、14.0、18.0、20.0 mL 置 100 mL 量瓶中 ，加
甲醇稀释至刻度，摇匀，即得系列齐墩果酸和系列
熊果酸的对照品溶液。 分别精密吸取各混合对照品
溶液 10 μL，按照上述色谱条件进行测定，并以各对
照品峰面积为纵坐标（Y），浓度为横坐标（X），绘制
标准曲线， 得回归方程为： 齐墩果酸 Y=12.19X-
17.08 r=0.9997；熊果酸 Y=13.45X-5.389 r=0.9998。
结果表明， 在上述色谱条件下， 齐墩果酸在 1.02～
20.40 μg·mL-1、 熊果酸在 0.53～10.60 μg·mL-1范围
内与峰面积呈良好的线性关系。
2.4 精密度试验
精密量取上述对照品溶液 10 μL，按上述色谱条
件重复进样 5次测定， 结果齐墩果酸、 熊果酸 RSD
分别为 0.61%（n=5）、0.52%（n=5），表明精密度良好。
2.5 稳定性试验
取莕菜粉末 1.0 g，按“2.2.2”项下方法制备供试
品溶液，按“2.1”项下色谱条件于 0、2、4、6、8、12、24
h 分别精密吸取供试品溶液 10 μL 进行测定， 计算
齐墩果酸、熊果酸的峰面积，其 RSD 分别为 0.8%、
0.7%，表明供试品溶液在 24 h内稳定。
2.6 重复性试验
取同一批莕菜粉末 5 份， 每份 1.0g， 过 40 目
筛， 分别按 “2.2.2” 项下方法制备供试品溶液，按
“2.1”项下色谱条件测定峰面积，齐墩果酸、熊果酸
的 RSD分别为 1.21%、0.63%。表明该方法的重复性
较好。
2.7 加样回收试验
精密称取已知含量的莕菜样品适量，精密测定
后，分别以高﹑中﹑低 3 个浓度水平准确加入齐墩果
酸对照品和熊果酸对照品，按“2.2.2”项下方法制成
供试品溶液，并按上述色谱条件进行分析，分别测
定齐墩果酸、熊果酸含量，结果见表 1。
表 1 齐墩果酸和熊果酸加样回收试验结果（x±s，n=3）
名称 样品中含量（mg） 加入量（mg） 测得量（mg） 平均回收率（%） RSD（%）
齐墩果酸 低浓度 0.1104±0.0003 0.1010 0.2105±0.0006
98.9±0.6中浓度 0.1365±0.0005 0.1265 0.2620±0.0010 0.16
高浓度 0.1606±0.0003 0.1518 0.3104±0.0004
熊果酸 低浓度 0.0665±0.0005 0.0610 0.1269±0.0001
99.1±0.7中浓度 0.0824±0.0005 0.0765 0.1584±0.0004 0.42
高浓度 0.0983±0.0003 0.0918 0.1895±0.0005
药学与临床研究
Pharmaceutical and Clinical Research
经 验
交 流
95
表 2 不同产地莕菜中齐墩果酸和熊果酸含量测定结果（n=3）
产地
齐墩果酸平均
含量（mg·g-1）
RSD
(%)
熊果酸平均
含量（mg·g-1）
RSD
（%）
太湖湿地 0.1360 1.16 0.0658 0.70
杭州西湖 0.1288 1.24 0.0643 1.20
山东滕州湿地 0.1369 1.32 0.0653 0.90
安徽开金湖 0.1340 1.42 0.0650 1.50
西藏米拉山口 0.1580 1.41 0.0676 1.80
Simultaneous Determination of Oleanolic Acid and Ursolic Acid in Herba
Nymphoides peltatdum from Different Habitats by HPLC
CAI Ying
Jianzhong Traditional Chinese Medicine Hospital of Baixia Area, Nanjing 210004
ABSTRACT Objective: To establish the HPLC method for simultaneously determination of oleanolic acid
and ursolic acid in Herba Nymphoides peltatdum (Gmel.) O.Kuntze from different habitats. Methods: A
shim-pack CLC-ODS (M) column (4.6 mm×250 mm, 5 μm) was used, the mobile phase was as methanol-
water-phosphate(86∶14∶0.02), the detection wavelength was at 210nm, the flow rate was at 1.0 mL·min-1, the
column temperature was at 20℃. Results: The linear rang of oleanolic acid was 1.02~20.4 μg·mL-1 (r=
0.9997), the linear rang of ursolic acid was 0.53～10.60 μg·mL-1 (r=0.9998). Conclusion: The method is
simple, rapid and accurate. It can be used for quality control of Herba Nymphoides peltatdum (Gmel.) O.
Kuntze.
KEY WORDS HPLC; Nymphoides peltatdum; Oleanolic acid; Ursolic acid
2.8 样品测定
取不同产地莕菜药材粉末，按“2.2.2”项下方法
制备供试品溶液，精密取对照品溶液及供试品溶液
各 10 μL 进样，平行 3 次，精密测定，并按外标法计
算齐墩果酸和熊果酸含量，测得样品中齐墩果酸和
熊果酸的含量。 结果见表 2。
3 讨 论
3.1 流动相的筛选
齐墩果酸和熊果酸为同分异构体， 性质相近，
较难分离。 比较了甲醇-水﹑甲醇-0.1%冰醋酸水溶
液、 甲醇-0.1%磷酸液、 甲醇-0.1%甲酸水溶液、乙
晴-0.1%磷酸等流动相，结果表明，以甲醇-水-磷酸
（86∶14∶0.02）为流动相时，分离效果较好[8]。
3.2 检测方法的确定
齐墩果酸、 熊果酸分子结构中存在孤立双键，
最大吸收波长约在 205 nm， 处于紫外末端吸收区。
比较了蒸发光散射检测和紫外检测，发现前者信号
不稳定，故选择紫外法检测方法。 为了消除背景，提
高信噪比，提取不同波长的色谱图进行比较，选择
了 210 nm 作为检测波长[8]。
3.3 药材产地成分含量比较
通过对莕菜中齐墩果酸和熊果酸含量测定，发
现不同产地两成分含量差别不大，以西藏米拉山口
莕菜中两成分含量稍高。
参考文献
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