全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2014，29(3)∶314 ～ 316
基金项目:国家科技支撑计划项目(2012BAI30B02)
作者简介:李敏(1983—) ，女，新疆乌鲁木齐，硕士，讲师，从事新疆特色药材物质基础的研究工作。Email:995499186@ qq． com
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:renakasimu@ vip． sina． com
HPLC同时测定中亚沙棘中的原儿茶酸、芦丁和异鼠李素
李 敏，王晓梅，热娜·卡斯木*，刘园园，胡君萍
(新疆医科大学药学院，新疆 乌鲁木齐 830011)
摘要:目的 采用反相 HPLC法同时测定中亚沙棘中的原儿茶酸、芦丁、异鼠李素。方法 采用 Gemini C18色谱柱(150 mm ×
4． 6 mm，5 μm) ，柱温 25 ℃，流动相为甲醇 － 0． 05%磷酸梯度洗脱(5∶95→40∶60→60∶40) ，流速 1． 0 mL·min －1，检测波长
256 nm。结果 中亚沙棘中原儿茶酸 0． 019 ～ 0． 808 μg(r = 0． 9998)、芦丁 0． 022 ～ 0． 823 μg(r = 0． 9998)、异鼠李素 0． 014 ～
0. 443 μg(r = 0． 9999)与峰面积的线性关系良好;三者的平均加样回收率(n = 9)分别为 98． 57%(ＲSD = 1． 57%)、99． 13%
(ＲSD = 1. 17%)、96． 22%(ＲSD = 1． 81%)。结论 所用方法简单、快速、高效，可为中亚沙棘的质量控制提供依据。
关键词:中亚沙棘;原儿茶酸;芦丁;异鼠李素;含量测定;反相高效液相色谱
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2014)03 － 0314 － 03
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2014． 03． 027
Determination of protocatechuic acid，rutin and isorhamnetin in Hippophae rhamnoides by
ＲP －HPLC
LI Min，WANG Xiao － mei，ＲENA Kasimu* ，LIU Yuan － yuan，HU Jun － ping
(College of Pharmacy，Xinjiang Medical University，Urumqi，Xinjiang，830011 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To establish an ＲP － HPLC method for the simultaneous determination of protocatechuic acid，rutin and
isorhamnetin in Hippophae rhamnoides L． subsp． turkestanica Ｒousi in． Ann． ． METHODS The determination was carried out on a
Gemini C18 column(150 mm ×4． 6 mm，5 μm)with the column temperature at 25 ℃ ． The mobile phase was a mixture of methanol and
0． 05% phosphoric acid water solution with the gradient elution(5∶95→40∶60→60∶40)． The flow rate was 1． 0 mL·min －1 and the
detection wavelength was 256 nm． ＲESULTS The method showed a good linear relationship within the range of 0． 019 － 0． 808 μg for
protocatechuic acid(r = 0． 9998) ，0． 022 － 0． 823 μg for rutin(r = 0． 9998)and 0． 014 － 0． 443 μg for isorhamnetin(r = 0． 9999)． The
average recoveries(n = 9)were 98． 57% with ＲSD of 1． 57%，99． 13% with a ＲSD of 1． 17%，and 96． 22 % with a ＲSD of 1． 81%，
respectively． CONCLUSION The method is simple，rapid and efficient，which provides the basis for quality control of H． rham-
noides．
Key words:Hippophae rhamnoides L． subsp． turkestanica Ｒousi in． Ann．;Protocatechuic acid;Ｒutin;Isorhamnetin;Content determi-
nation;ＲP － HPLC
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2014)03 － 0314 － 03
中亚沙棘 Hippophae rhamnoides L． subsp．
turkestanica Ｒousi in． Ann． 是胡颓子科沙棘属植物
的亚种之一，主要分布于新疆和西藏地区［1 － 2］，药用
历史悠久，具有清除体内自由基、抗氧化、抗突变、抗
肿瘤、抗疲劳、抗缺氧、抗辐射、抗过敏等作用［3 － 6］。
沙棘中含有维生素、类胡萝卜素、黄酮类、甾醇、挥发
油、5 －羟色胺、超氧化物歧化酶、氨基酸、脂肪酸、有
机酸、糖及微量元素等多类天然活性成分［7 － 8］。为
更好地开发利用中亚沙棘，课题组对中亚沙棘的化
学成分进行了系统研究，发现其中含量较高的多酚
类化合物主要为原儿茶酸、芦丁、异鼠李素［9］。目
前对沙棘的研究报道多以青海、甘肃、黑龙江等地所
产沙棘为主，对新疆产中亚沙棘的研究报道较少，对
中亚沙棘多酚类化合物的含量测定尚未见报道。为
开发利用新疆特有的资源植物，完善对新疆中亚沙
棘的研究，现采用 ＲP － HPLC 法同时测定了中亚沙
棘中原儿茶酸、芦丁、异鼠李素的含量，所用方法简
单、快速、高效，可为中亚沙棘的质量控制提供依据。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
1100 高效液相色谱仪(美国 Agilent)。原儿茶
酸、异鼠李素(上海同田生物技术有限公司，批号分
别为 09032021、09102711)、芦丁(中国生物制品检
定所，批号:100080 － 200707) ;中亚沙棘药材采自新
疆阿克苏乌什县野生沙棘林，由帕丽达·阿不力孜教
授鉴定为中亚沙棘;甲醇为色谱纯;水为去离子水;
其余试剂为分析纯。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 色谱条件 采用 Gemini C18 色谱柱
(150 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，流动相为甲醇 － 0． 05%
磷酸梯度洗脱(5∶95→40∶60→60∶40) ，流速 1． 0
mL·min －1，柱温 25 ℃，检测波长 256 nm，进样量 10
μL。对照品及供试品的色谱图见图 1。
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A B
0 10 20 30 40 50 0 10 20 30 40 50
t/min
图 1 混合对照品(A)和供试品(B)溶液的色谱图
Figure 1 HPLC chromatograms of mixed control solution(A)and
sample solution(B)
1． 2． 2 溶液的制备 分别精密称取干燥至恒重的
对照品原儿茶酸、芦丁、异鼠李素各 10． 0 mg，置 50
mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，作为混合对照品溶
液。取约 1． 0 g中亚沙棘药材粉末(过 60 目筛) ，精
密称定，置 100 mL 圆底烧瓶中，精密加入 30 mL
60%甲醇，称重，回流提取 3 h，冷却后再称重，用
60%甲醇补足失重，过滤，滤液置 50 mL 量瓶中，加
60%甲醇定容，用 0． 45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤
液，即得供试品溶液。
1． 2． 3 线性关系的考察 精密量取 0． 5、1、2、4、6、
8、10 mL混合对照品溶液，分别加流动相定容至 10
mL，按“1． 2． 1”项下色谱条件进样测定。以峰面积
对进样量进行线性回归，得回归方程为:Y原儿茶酸 =
3. 4065 × 103X － 16． 06 (r = 0． 9998)、Y芦丁 =
1． 7407 × 103X － 43． 70 (r = 0． 9998)、Y异鼠李素 =
3. 8159 × 103X － 6． 47(r = 0． 9999)。原儿茶酸
0. 019 ～ 0． 808 μg、芦丁 0． 022 ～ 0． 823 μg、异鼠李
素0． 014 ～ 0． 443 μg与峰面积的线性关系良好。
1． 2． 4 精密度试验 分别精密吸取 10 μL 混合对
照品溶液，重复进样 6 次，测定峰面积。计算原儿茶
酸、芦丁、异鼠李素峰面积的 ＲSD 分别为 1． 22%、
1. 74%、1． 51%，保留时间的 ＲSD 分别为 1． 15%、
0. 96%、1． 28%，表明仪器的日内精密度良好。精密
吸取混合对照品溶液 10 μL，每隔 1 d 进样 1 次，连
续 5 d。计算得原儿茶酸、芦丁、异鼠李素峰面积的
ＲSD分别为 2． 28%、1． 95%、1． 63%，保留时间的
ＲSD分别为 1． 57%、1． 24%、1． 39%。
1． 2． 5 稳定性试验 取供试品溶液，室温下放置，
分别于 0、1、2、4、6、8、12、16、20、24 h时进样 10 μL。
计算原儿茶酸、芦丁、异鼠李素峰面积的 ＲSD 分别
为 1. 69%、0． 53%、1． 25%，表明供试品溶液稳定性
良好。
1． 2． 6 重复性试验 取同一批次中亚沙棘药材，按
“1． 2． 2”项下方法平行制备供试品溶液 6 份，分别
精密吸取 10 μL进样测定。计算得原儿茶酸、芦丁、
异鼠李素含量的 ＲSD 分别为 1． 72%、1． 00%、
1. 84%，表明方法重复性良好。
1． 2． 7 加样回收率试验 精密称取 40 mg 同一批
次已知含量的中亚沙棘药材粉末 9 份，分别精密加
入适量原儿茶酸、芦丁、异鼠李素的对照品，按
“1. 2. 2”项下方法制备供试品溶液，进样 10 μL，测
定峰面积，计算回收率(表 1)。
表 1 回收率试验的结果(mg，n =9)
Table 1 Ｒesults of recovery test(mg，n =9)
Compounds Original Added Detected Ｒecovery /% 珔X /% ＲSD /%
Protocatechuic 0． 7518 0． 4000 1． 1498 99． 50 98． 57 1． 57
acid 0． 7258 0． 8100 1． 5204 98． 10
0． 7241 1． 2100 1． 9111 98． 10
Ｒutin 4． 4802 1． 9700 6． 4246 98． 70 99． 13 1． 17
4． 5400 4． 0300 8． 6260 101． 39
4． 3512 6． 0300 10． 2179 97． 29
Isorhamnetin 0． 0997 0． 0500 0． 1484 97． 40 96． 22 1． 81
0． 1046 0． 0900 0． 1898 94． 67
0． 0925 0． 1500 0． 2374 96． 60
1． 2． 8 样品的测定 精密称取中亚沙棘药材粉末，
按“1． 2． 2”项下方法制备供试品溶液，精密吸取 10
μL进样，测定各色谱峰的峰面积，每份样品重复测
定 3 次。计算原儿茶酸、芦丁、异鼠李素的平均含量
分别为 1． 91%、11． 34%、0． 25%，ＲSD 分别为
1. 13%、1． 67%、1． 93%。
2 讨论
曾考察了提取方法、提取溶剂及用量和提取时
间等实验条件，以 60%甲醇回流提取最佳，用 30 倍
溶剂回流提取 3 h 已能将有效成分基本提取完全。
分别考察了甲醇 －水、甲醇 －不同浓度的磷酸水溶
液等多个流动相的分离效果，在流动相中加入一定
的磷酸溶液对改善峰型具有明显的效果，流动相为
甲醇 － 0． 05%磷酸梯度洗脱(5∶95→40∶60→60∶
40)时，可达到理想的分离效果。在 190 ～ 400 nm对
原儿茶酸、芦丁、异鼠李素进行紫外吸收扫描，发现
原儿茶酸在 256 nm 有最大吸收，芦丁在 206、258、
358 nm有最大吸收，异鼠李素素在 370 nm 有最大
513第 3 期 李 敏，等。HPLC同时测定中亚沙棘中的原儿茶酸、芦丁和异鼠李素
华西药学杂志
W C J·P S 2014，29(3)∶316 ～ 317
吸收，为了兼顾 3 种物质的最大吸收，选择 256 nm
作为检测波长。
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收稿日期:2013 － 04 － 14
作者简介:李冰(1981—) ，女，主管中药师，从事药品检验工作。Email:roudoukou@ 126． com
气相色谱法测定海珠喘息定片中的冰片
李 冰
(阿坝州食品药品检验所，四川 阿坝 624000)
摘要:目的 采用气相色谱法测定海珠喘息定片中的冰片。方法 采用 PEG － 20M毛细管柱(30 m × 0． 32 mm，0． 5 μm) ，柱温
130 ℃，气化室和检测器温度均为 200 ℃，分流比 20∶1。结果 0． 01 ～ 5． 00 mg·mL －1冰片与峰面积之和的线性关系良好(r =
0. 9999) ;平均回收率为 97． 62%，ＲSD =1． 05%(n =6)。结论 所用方法准确、可靠，线性范围宽，重复性好。
关键词:海珠喘息定片;冰片;超声提取;气相色谱
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2014)03 － 0316 － 02
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2014． 03． 028
Determination of borneol in Haizhu Chuanxiding tablet by GC
LI Bing
(Aba Institute for Food and Drug Control，Aba，Sichuan，624000 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To establish the method of determination for borneol in Haizhu Chuanxiding tablet by GC． METHODS
Chromatographic condition included a PEG － 20M capillary column(30 m × 0． 32 mm，0． 5 μm)． The column temperature was 130 ℃，
the inlet and detector temperature were 200 ℃，and the split ratio was 20∶1． ＲESULTS This method was linear in the concentration
range of 0． 01 － 5． 00 mg·mL －1(r = 0． 9999)． The average recovery rate was 97． 62% with ＲSD of 1． 05%(n = 6)． CONCLUSION
The method is accurate and the linear range is wide，the repeatability is good．
Key words:Haizhu Chuanxiding tablet;Borneol;Ultrasonic;GC
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2014)03 － 0316 － 02
海珠喘息定片为中西药复方制剂，具平喘、祛
痰、镇静、止咳等作用，处方中含盐酸氯喘、盐酸去氯
羟嗪、冰片及其他中药成分［1］。在抽验中，发现两
个不同生产企业生产的两批海珠喘息定片中冰片产
生的辛凉感强度差异很大。部颁标准未在海珠喘息
定片的质量标准中规定冰片的含量。现采用 GC 法
测定海珠喘息定片中冰片的含量。所用方法准确、
可靠，线性范围宽，重复性好，可用于检测海珠喘息
定片中的冰片。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
7890A气相色谱系统(美国 Agilent)。冰片对
照品(中国药品生物制品检定所，批号:110708 －
200505) ;海珠喘息定片两批(市售) ;其余试剂为分
析纯。