全 文 ：包块的进一步研究还有待今后开展大样本、多中心、长期
的观察。
参考文献
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社 .
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［6］ 高学敏 . 中药学［M］. 北京:中国中医药出版社，2002:139 －
140，385.
* 通讯作者:靳凤云，女，贵阳中医学院教授，国家中医药管理局西部重点学科中药生药学学科质量控制研究学术带头
人;硕士研究生导师;研究方向:中药质量控制与新药开发;E － MAIL，gyjfy01@ 163. com. TEL:0851 － 5615344。
收稿日期:2010 － 10 － 31
HPLC法测定吉贝咳喘胶囊中黄芩苷的含量
章 誉1，靳凤云2* ，马克芹2，张 欣2，周 赢2
(1. 贵阳中医学院 2010 级研究生，贵州贵阳 550002;2. 贵阳中医学院，贵州贵阳 550002)
摘要:目的:建立测定吉贝咳喘胶囊中黄芩苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法，以 C18 为固定相，流动相为甲
醇 －水 －磷酸(47:53:0. 2) ，检测波长为 280nm。结果:黄芩苷在 0. 062?g ～ 0. 372?g范围内线性关系良好，r = 0. 9999，平
均回收率为 100. 42%，(RSD为 0. 97%，n = 9)。结论:本法简单、快速、专属性强、重现性好，能够控制产品的质量。
关键词:吉贝咳喘胶囊;HPLC法;黄芩苷
Doi:10. 3969 / j. issn. 1002 － 1108. 2012. 03. 105
中图分类号:R927. 2 文献标识码:A 文章编号:1002 － 1108(2012)03 － 0187 － 03
吉贝咳喘胶囊由吉祥草、黄芩、浙贝母、蛤壳等十一味
药材组成。具有清热宣肺，化痰散结，平喘止咳之功效，处
方来源贵阳中医学院第二附属医院呼吸内科以协定处方
形式在院内使用，但其质量标准不完善，无含量测定指标。
方中黄芩有清热燥湿，泻火解毒之效，黄芩苷是黄芩中有
效成分之一，为有效控制吉贝咳喘胶囊的质量本文建立了
高效液相色谱法对其中黄芩所含有效成分黄芩苷进行含
量测定［1，2］。本法专属性强、稳定、重复性好，阴性试验表
明制剂中其他成分对黄芩苷的测定无干扰。
1 仪器与试药
Agilent － 1100 高效液相色谱仪(包括 G1312 二元泵，
G1315B二极管阵列检测器，G1313 自动进样器，G1316A真
空脱气机，Agilent － A. 08. 03［847］化学工作站) ;梅特勒 －
托利多 AE 电子分析天平(METTLER TOLEDO 十万分之
一) ;黄芩苷对照品(批号:110715 － 200212)由中国药品生
物制品检定所提供;甲醇为色谱纯，水为娃哈哈纯净水，其
它试剂均为分析纯。
2 实验方法与结果
2. 1 色谱条件与系统适用性试验［3］ 检测波长:280nm，
理论板数按黄芩苷计算不低于 5000。色谱柱为 Diamonsil
TM(钻石) (4. 6 × 250mm，5μm) ，流动相:甲醇 －水 －磷酸
(47∶ 3∶ 0. 2) ，柱温:30℃，流速:1mL /min，黄芩苷分离度
大于 1. 5。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量，
在 60℃下减压干燥 4 小时，加甲醇制成每 1mL 含 60μg 的
对照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备 取本品内容物约 0. 3g，精密称
定，置烧瓶中，加 70%乙醇 40ml，加热回流 3h，放冷，滤过，
滤液置 100ml量瓶中，用少量 70%乙醇分次洗涤容器和残
渣，洗液滤入同一量瓶中，加 70%乙醇至刻度，摇匀。精密
量取 1ml，置 10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2. 4 阴性对照试验 取缺黄芩的阴性样品，照“2. 3”项下
方法制备阴性对照溶液，按上述色谱条件分别对供试品溶
液、阴性对照溶液及黄芩苷对照品溶液测定比较，结果表
明;在此色谱条件下，黄芩苷峰与其他组分峰完全分离，在
与黄芩苷峰相同的保留时间内，阴性对照无干扰，见(图 1
－ 4)。
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第 34 卷 第 3 期
2012 年 5 月
贵阳中医学院学报
JGCTCM
No. 3 Vol. 34
May 2012
2. 5 线性关系考察 精密称取黄芩苷对照品 15. 5mg，置
250ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成含黄
芩苷 62μg /ml的对照品溶液，分别精密吸取上述溶液 1μl、
2μl、3μl、4μl、5μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，
以峰面积为纵坐标，含量为横坐标进行线性回归，绘制标
准曲线。回归方程为:y = 3450. 5x － 11. 767(r = 0. 9999)。
结果表明，在此色谱条件下，黄芩苷在 0. 062μg ～ 0. 372μg
范围内呈良好的线性关系。
2. 6 精密度试验 精密吸取对照品溶液 5μl，在“2. 1”项
色谱条件下连续进样 6 次，测定黄芩苷峰面积，结果 RSD
值为 0. 26%，说明仪器的精密度良好。
2. 7 稳定性考察 取同本供试品溶液，分别于 0，2，4，6，
8，12h在“2. 1”项色谱条件下各吸取供试品溶液 5μl，注入
高效液相色谱仪，RSD 值为 1. 6%。结果表明本供试品溶
液在 12h内稳定。
2. 8 重复性试验 取同一批号本品的内容物 6 份，按
“2. 3”项下操作，吸取供试品溶液 10?l，注入高效液相色
谱仪测定个样品峰面积，RSD 值为 1. 45%，说明本方法重
现性良好。
2. 9 回收率试验 取本品内容物约 0. 15g，9 份，精密称
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定，分别按相当于胶囊中黄芩苷的 80%、100%、120%的量
加入对照品溶液，按“2. 3”项下操作，配置成低、中、高 3 个
水平的加样供试品溶液，在“2. 2”项色谱条件下进样分析，
计算回收率。平均回收率为 100. 42%，RSD 为 0. 97%，结
果表明黄芩苷的回收率良好，见(表 1)。
表 1 加样回收实验结果表
编号
称样量
(g)
样品中黄芩
苷量(mg)
对照品加
入量(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
1 0. 1632 6. 0923 4. 6504 10. 779 100. 78 100. 42 0. 97
2 0. 1615 6. 0288 4. 6504 10. 627 98. 88
3 0. 1613 6. 0213 4. 6504 10. 711 100. 84
4 0. 1532 5. 7190 5. 8130 11. 523 99. 85
5 0. 1578 5. 8907 5. 8130 11. 654 99. 15
6 0. 1582 5. 9056 5. 8130 11. 736 100. 30
7 0. 1612 6. 0176 6. 9756 13. 127 101. 92
8 0. 1626 6. 0699 6. 9756 13. 119 101. 05
9 0. 1625 6. 0661 6. 9756 13. 114 101. 04
2. 10 样品含量测定 取 10 个批号的本品按“2. 3”项下
方法操作，吸取对照品溶液和供试品溶液各 5?l、10?l，注
入高效液相色谱仪，按“2. 1”项下色谱条件测定峰面积，计
算出各批样品中黄芩苷含量，结果见(表 2)。
表 2 10 批样品中黄芩苷含量测定结果(n = 10)
编号 批号
黄芩苷含量(mg /g)
1 2
平均含量
(mg /g)
1 20040201 37. 55 36. 98 36. 03
2 20040202 35. 75 36. 10
3 20040203 37. 54 37. 13
4 20040204 36. 71 36. 67
5 20040205 34. 33 34. 44
6 20040206 36. 58 36. 59
7 20040207 35. 89 35. 76
8 20040208 35. 83 35. 71
9 20040209 35. 96 36. 15
10 20040210 34. 63 34. 37
上述 10 批样品测得黄芩苷平均含量为 36. 03mg /g。
从大批量规模生产考虑，以本品每克黄芩苷的含量其限度
以 80% 计算，黄芩苷的含量为 36. 03 × 0. 8 × 0. 48 =
13. 8mg /粒，故本品的限度定为:每粒含黄芩以黄芩苷(C21
H18O11)计，不得少于 13. 8mg。
3 讨论
3. 1 在进行色谱条件选择时，参考了《中国药典》2010 版
一部黄芩项下的含量测定色谱条件，并对波长进行了筛
选，比较了 270nm 和 280nm 检测波长下的谱图情况，结果
表明 280nm波长下黄芩苷色谱峰型较好，故采用 280nm检
测波长。
3. 2 在样品提取过程中，比较了 50%、60%和 70%三种浓
度乙醇的提取效果，结果表明 70%乙醇提取效率高于另外
2 种溶剂;以 70%乙醇为提取溶剂，比较了回流提取法和超
声提取法，结果热回流提取法提取率高于超声提取法;以
70%乙醇为溶剂，采用回流提取法，分别考察了提取 1h、
2h、3h、4h和 5h的提取效率，结果表明提取 3h与提取 4、5h
黄芩苷含量无明显差异，故提取时间选择 3h。
3. 3 本方法可对吉贝咳喘胶囊的质量进行有效控制。
参考文献
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