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野西瓜苗不同部位提取物对小菜蛾的活性作用方式研究



全 文 :收稿日期:2010-06-24
基金项目:国家自然科学基金项目(20565003);宁夏自然科学基金项目(NZ0719)
作者简介:左玲霞(1978-),女 ,宁夏中宁人 , 讲师 ,硕士 , 主要从事植物源农药方面的研究。 E-mail:zuo ling xia2007@126.com
野西瓜苗不同部位提取物对小菜蛾的
活性作用方式研究
左玲霞1 ,谢晓鹏2 ,杨敏丽3
(1.银川科技职业学院 ,宁夏 银川 750105;2.宁夏育才中学 , 宁夏 银川 756500;
3.宁夏大学 能源化工重点实验室 , 宁夏 银川 750021)
摘要:采用不同的活性测试方法 ,研究了野西瓜苗不同部位乙醇提取物对小菜蛾的触杀 、拒食和抑
制生长发育的作用。结果表明:野西瓜苗不同部位乙醇提取物对小菜蛾具有较为明显的触杀 、拒食
和抑制生长发育作用 ,触杀活性:籽>茎>根>叶;拒食活性:籽>茎>叶>根;抑制生长发育活性:
籽>茎>叶>根 。在 4个部位中 ,籽提取物的活性最强 ,当处理剂量为 12.5 g/L 时 ,小菜蛾 72 h的
校正死亡率达到 86.67%,48h 的拒食率达 85.94%, 48 h的生长发育抑制率达 79.05%。
关键词:野西瓜苗;不同部位;小菜蛾;活性作用方式
中图分类号:S567.21  文献标识码:A  文章编号:1004-3268(2010)12-0063-03
S tudy on Action Mode of the Dif ferent Par ts of
H ibiscus trionum L.against P lutel la xy lostel la
ZUO Ling-xia1 , XIE Xiao-peng2 , YANG Min-li3
(1.Yinchuan Science and Technolo gy Vocational Co llege , Yinchuan 750105 , China;
2.Ningx ia Yucai M iddle Schoo l , Yinchuan 756500 , China;
3.Key Labo rato ry of Ene rgy Sources &Chemical Engineering , Ningxia Univer sity , Yinchuan 750021 , China)
Abstract:The different par ts of w ild wa termelon seedling(Hibiscus trionum L .)were selected to
study contact ing , ant i-feeding and inhibi tion of g row th and development of 3th instar larvae of
P lutella x y lostel la.The results showed that e thano l ex t ract po ssessed high contacting , anti-
feeding and inhibi tion o f g row th and development.The contact ing activi ty w as seed >stem >
roo t>leaf;anti-feeding activi ty w as seed>stem >leaf>root;inhibit ion act ivity of g row th and
development w as seed>stem>leaf>ro ot.In the four parts o f Hibiscus trionum L., seed act ivity
w as the st rongest.When P lutella x y lsteua was t reated w ith concentration o f 12.50 g/L , the co r-
rected mo rtality rate for 72 h w as 86.67%, the anti-feeding rate for 48 h w as 85.94%, and
grow th inhibition rate fo r 48 h w as 79.05%.
Key words:Hibiscus trionum L.;Different parts;P lutella xy lostel la;Action mode
  野西瓜苗(Hibiscus trionum L.)为锦葵科木槿
属一年生草本植物 ,又叫香铃草[ 1] ,分布于全国大部
分地区 。据宁夏中药志记载 ,野西瓜苗味甜 ,性甘 ,
具有清热解毒 、祛风除湿 、止咳 、利尿的功能 ,其种子
具有润肺止咳 、补肾的功能[ 2] 。由于野西瓜苗具有
很好的生理活性[ 3] ,民间对其是自采自用。关于野
西瓜苗的杀虫活性至今未见报道 。西部荒漠农药植
物棉团铁线莲等活性成分研究课题组在研究中发
现 ,野西瓜苗对小菜蛾有较高的杀虫活性 。为了进
一步探索其作用方式和作用机制 ,以小菜蛾为试虫 ,
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河南农业科学
DOI :10.15933/j.cnki.1004-3268.2010.12.007
对野西瓜苗的各部位(根 、茎 、叶 、籽)95%乙醇提取
物分别进行了触杀 、拒食 、抑制生长发育活性测定 ,
以期明确最大活性部位与作用方式 ,为绿色农业产
品的开发与后续分离研究提供科学依据 。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 供试植物材料 野西瓜苗采自宁夏大学周
边农田。采集时间为 10月份 ,采集全草 。将全草按
照根 、茎 、叶 、籽 4 个部位分开 ,阴干 ,放入恒温箱烘
干(40 ~ 45℃)。磨碎 ,过 0.45mm 筛得干粉 ,装入
保鲜袋密封 ,贮于 4℃冰箱中保存备用 。
1.1.2  供试昆虫  小菜蛾(P lutella x y lostel la
L.)由宁夏大学能源化工重点实验室养虫室提供 ,
羽化后的成虫喂以蜜糖水 ,产卵材料为盆栽油菜苗 ,
幼虫用油菜苗饲喂(养虫室温度:18 ~ 23℃,湿度
75%~ 80%,光照 L∶D=12∶12 )。选择健康 、均
匀一致的三龄幼虫供试。
1.1.3 仪器 人工气候箱 、电子天平 、超声波清洗
器 、植物样品粉碎机 、旋转蒸发仪 、电热鼓风干燥箱 。
1.2 方法
1.2.1 野西瓜苗不同部位提取物的制备 将野西
瓜苗按照根 、茎 、叶 、籽 4 个部位 ,用 95%的乙醇提
取。由于野西瓜苗叶子的提取物中有大量的色素 ,
在 50%的丙酮中溶解度较差 ,因此 ,采取以下方法
制备不同部位提取物。将根 、茎 、叶 、籽干粉准确称
量 50 g ,分别放入 500mL 锥形瓶中 , 加入 8 倍量
95%乙醇溶液 , 浸泡 24h , 用超声波清洗器超声
40min ,真空泵抽滤 ,再重复 2次 ,合并 3次抽滤液 。
用旋转蒸发仪浓缩得浸膏 ,计算提取率 。
  提取率=浸膏质量干粉质量×100%。
将浓缩得到的浸膏用吐温∶二甲基亚砜∶蒸馏
水=1∶1∶8的溶剂配制成质量浓度为12.5 g/ L 的
溶液 ,放在 4℃冰箱中备用。
1.2.2 提取物生物活性测定
1.2.2.1 触杀作用测定 触杀作用采用浸渍法[ 4-6]
测定 。将小菜蛾三龄幼虫放入圆桶状滤网中 ,浸于
不同部位的乙醇粗提物处理液 , 10 s后迅速取出 ,用
滤纸吸干多余药液 ,置于放有新鲜甘蓝叶并垫有保
湿滤纸的培养皿(直径为 9 cm)中 。每处理 10头 , 6
次重复 ,对照用吐温∶二甲基亚砜∶蒸馏水=1∶
1∶8的溶剂做同样处理。将培养皿置于 24 ℃的智
能人工气候培养箱内 ,于 24 h 、48 h 、72 h后观察供试
虫的死亡情况 ,并计算死亡率和校正死亡率。
  死亡率= 死亡虫数供试总虫数×100%,
校正死亡率=处理组死亡率-对照组死亡率
1-对照组死亡率 ×100%。
1.2.2.2 拒食作用测定 采用浸叶法[ 7] 测定:将新
鲜的甘蓝叶用打孔器打成叶碟(直径 1.6 cm),放入
供试样品内浸渍 5 s ,取出晾干后放入滤纸保湿的培
养皿中 ,每皿一片叶碟 ,接入已饥饿 6h 的小菜蛾幼
虫 1 头 。每处理 10 头试虫 , 4 次重复 , 对照用
吐温∶二甲基亚砜∶蒸馏水=1∶1∶8的溶剂做同
样处理 。将培养皿置于 24℃的智能人工气候培养箱
内 ,于 24 h后用坐标纸测定取食面积 ,更换新鲜处
理叶碟 ,48 h后再次观察取食面积。根据平均取食
面积计算出拒食率 。
  拒食率=
对照组平均取食面积 -处理组平均取食面积
对照组平均取食面积 ×100%。
1.2.2.3 生长发育抑制作用测定 采用饲喂称重
法[ 8-10] 测定 。叶片处理同 1.2.2.2中的方法 ,每皿 2
片叶碟 ,接入 1头已饥饿 6 h 的小菜蛾幼虫 ,每处理
10头试虫 ,4次重复 ,对照用吐温∶二甲基亚砜∶蒸
馏水=1∶1∶8的溶剂做同样处理 。连续饲喂 48 h
后换新鲜无毒甘蓝叶继续饲养至幼虫化蛹 、羽化。
处理后 0 h 、24 h 、48 h分别称虫体质量(每天更换新
鲜处理叶碟),计算生长抑制率。
  生长抑制率=
对照组平均虫体质量增加量- 处理组平圴虫体质量增加量
对照组平均虫体质量增加量 ×100%。
2 结果与分析
2.1 野西瓜苗不同部位提取物的制备效果
由表 1可以看出 ,野西瓜苗不同部位 95%乙醇
超声提取率之间存在差异 ,其中籽和叶的提取率较
高 ,分别为 10.97%、10.57%;其次是根的提取率 ,
为 8.75%,茎的提取率最低 ,为 4.56%。
表 1 野西瓜苗不同部位提取物的制备效果
项目 根 茎 叶 籽
滤液颜色 淡黄色 草绿色 墨绿色 深绿色
提取率/ % 8.75 4.56 10.57 10.97
2.2 野西瓜苗不同部位提取物对三龄小菜蛾的触
杀作用
由表 2可以看出 ,野西瓜苗的根 、茎 、叶 、籽 4个
部位 95%乙醇提取物对三龄小菜蛾均有触杀活性。
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2010年第 12期
其中籽提取物对三龄小菜蛾的触杀活性最强 ,72 h
的死亡率和校正死亡率均为 86.67%。其次是茎提
取物 , 72 h 的死亡率和校正死亡率均为 83.33%。
野西瓜苗的根 、叶提取物对小菜蛾幼虫的触杀活性
相对较低 ,其中叶提取物的触杀活性最低 , 72 h的死
亡率和校正死亡率均为 60.00%。
表 2 野西瓜苗不同部位乙醇提取物对
三龄小菜蛾幼虫的触杀活性
供试
样品
死亡率/ %
24h 48h 72h
校正死亡率/ %
24h 48h 72h
根 63.33 70.00 73.33 63.33 70.00 73.33
茎 76.67 76.67 83.33 76.67 76.67 83.33
叶 56.67 60.00 60.00 56.67 60.00 60.00
籽 83.33 83.33 86.67 83.33 83.33 86.67
CK 0.00 0.00 0.00 - - -
 注:表中数据为 6次重复平均值
2.3 野西瓜苗不同部位提取物对三龄小菜蛾的拒
食作用
从表 3可以看出 ,野西瓜苗不同部位 95%乙醇
提取物对三龄小菜蛾均具有一定的拒食活性 ,其中
野西瓜苗的籽提取物对小菜蛾幼虫的拒食活性最
强 ,小菜蛾 24 h 、48h 的拒食率分别为 85.09%、
85.94%。其次是茎提取物 ,小菜蛾 24 h 、48 h 的拒
食率分别为 68.20%、75.71%。再次是叶提取物 ,
小菜蛾 24 h 、 48 h 的拒食 率分别 为 60.30%、
73.30%。根提取物拒食活性相对最弱 , 小菜蛾
24 h 、48 h的拒食率分别为 54.20%、65.54%。从表
3还可以看出 ,野西瓜苗的根 、茎 、叶 、籽提取物对小
菜蛾的拒食率 48 h大于 24 h 。
表 3 野西瓜苗不同部位乙醇提取物对三龄小菜蛾
幼虫的拒食活性
供试样品
24h
取食面积/
mm 2
拒食率/
%
48h
取食面积/
mm2
拒食率/
%
根 11.12 54.20 13.14 65.54
茎 7.72 68.20 9.26 75.71
叶 9.64 60.30 10.18 73.30
籽 3.62 85.09 5.36 85.94
CK 24.28 - 38.13 -
 注:表中数据为 4次重复平均值 ,下同
2.4 野西瓜苗不同部位提取物对三龄小菜蛾的生
长发育抑制作用
由表 4可以看出 ,野西瓜苗不同部位乙醇提取
物对三龄小菜蛾幼虫均具有一定的抑制生长发育活
性 ,其中籽提取物对小菜蛾生长发育的抑制活性最
强 ,24h 、48 h生长抑制率分别为 85.41%、79.05%。
其次是茎提取物 , 24h 、48 h 生长抑制率分别为
72.91%、61.49%。再次是野西瓜苗的叶 ,24h 、48 h
生长抑制率分别为 67.70%、54.73%。野西瓜苗根
的乙醇提取物对小菜蛾幼虫的生长发育抑制活性最
低 ,24 h 、48 h生长抑制率分别为 56.25%、40.54%。
表 4 野西瓜苗不同部位乙醇提取物对三龄小菜蛾
幼虫的生长发育抑制活性
供试样品 虫体质量/mg
0h 24h 48h
生长抑制率/ %
24 h 48h
根 2.98 3.40 3.86 56.25 40.54
茎 2.88 3.14 3.45 72.91 61.49
叶 3.05 3.36 3.72 67.70 54.73
籽 2.88 3.02 3.19 85.41 79.05
CK 3.02 3.98 4.50 - -
3 结论与讨论
野西瓜苗不同部位乙醇提取物对小菜蛾幼虫具
有较为明显的触杀 、拒食和抑制生长发育作用。对
野西瓜苗不同部位的 3种作用方式进行比较 ,结果
表明:触杀活性表现为籽>茎>根>叶;拒食活性表
现为籽 >茎 >叶 >根;抑制生长发育活性表现为
籽>茎>叶>根。籽提取物在上述 3种作用方式中
活性都是最强的 ,因此 ,在后续的试验中可选择野西
瓜苗的籽作为研究对象。在进行活性成分分离时 ,
可以根据试验条件选择 3种作用方式的任意一种作
为活性追踪方式。
本研究结果将为野西瓜苗的进一步开发和应用
以及新型植物源农药的研究提供一定的参考。
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河南农业科学