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九里香不同部位九里香酮含量的比较



全 文 :第二十一卷第五册
2011 年 10 月
口 腔 护 理 用 品 工 业
ORAL CARE INDUSTRY 3
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九里香不同部位九里香酮含量的比较
林琼绎 宋 歌
(柳州高级中学 广西柳州 545006)
摘 要:采用高效液相色谱(HPLC)法,测定中药材九里香的根、茎、枝、叶四个不同
部位中的活性物———九里香酮的质量分数,比较这四个不同部位九里香酮质量分数的
大小,为九里香的应用提供可靠依据。结果:九里香的根、茎、枝、叶四个不同部位中,检
测了三次九里香酮的质量分数的平均值分别为:0μg /g、0. 8144μg /g、165. 1952μg /g、
1370. 2542μg /g。该结果表明,中药材九里香的叶子中九里香酮含量最高,为最佳用药
部位。
关键词:九里香 不同部位 九里香酮 HPLC法
九里香(Murraya paniculata L.)为芸香科九里
香属植物,始载于《岭南采药录》,主要分布于广西、
云南、贵州等地,是 2010 年版《中国药典》收载的品
种之一。该植物开白色花,散发出浓烈的芳香气味,
远距离可嗅其香气,故名九里香,别名千里香、满山
香等。据《中国药典》记载,九里香具有行气活血、
散瘀止痛、解毒消肿之功效,主治胃脘疼痛、风湿痹
痛、跌扑肿痛、疮痈、蛇虫咬伤、牙痛等;亦用于麻醉
止痛[1]。现代药理研究证明,九里香具有抗菌、消
炎、解痉、局部麻醉及增强免疫等功能[2 - 3]。它含有
黄酮、香豆素、挥发油及生物碱等多种化学成分,其
中的酮类化合物为主要功效成分,经研究发现,其黄
酮类成分含量较高,是该药材的主要活性成分之
一[4],而在黄酮类的物质中九里香酮又是其中的主
要化学成分。
九里香是一味常用中药,其安全性高,全株均可
入药,用途十分广泛,既可外用也可内服,国内每年
的需求量很大。它是“三九胃泰颗粒”、“两面针中
药牙膏”、“肤阴洁复方黄松洗液、湿巾”等多种国内
知名中成药制品的主要原料药材之一。
我们在日常生活中可以看到,人们在采收和使
用九里香药材时,有人用根;有人用茎;有人用枝;有
人用叶;有人各个部位混合用,这样的使用方法没有
一个明确的使用依据,导致用药存在一定的盲目性。
另外,不管单独用根、茎、枝、叶的哪一部位,其他部
位如果都当作废料丢弃,这样使用药材,既造成不必
要的资源浪费,也不利于药材原料成本的控制。
本研究采用高效液相色谱法,测定中药材九里
香的根、茎、枝、叶四个不同部位活性物———九里香
酮的质量分数,通过比较这四个不同部位九里香酮
质量分数的大小,为选择九里香的合理用药部位、对
使用原料的成本进行有效控制、保证产品质量等提
供可靠的理论依据。
1 材料部分
1. 1 药材
在柳州市郊区采挖到九里香药材三株,药材经
柳州两面针股份有限公司卢凯玲工程师鉴定为真
品。把药材放在实验室通风处摊开,自然阴干后,按
根、茎、枝、叶四个不同部位分开备用。
1. 2 提取工艺过程
取干燥的四个不同部位的九里香药材,分别用
粉碎机打成 100 目左右的细粉,各准确称取 50 克加
入到 1000 mL 的容量瓶中,分别加入 75%的酒精
500 mL,然后放在恒温水浴锅上,接上冷凝管,通冷
却水,调节水浴锅的温度至 90℃。从水温达 90℃开
始计算提取时间,至 2 小时后停止提取。提取液分
别用布氏漏斗进行真空抽滤,过滤后的提取液保存
备用。
2 实验部分
2. 1 实验仪器
Agilent 1200 高效液相色谱仪系统(配有色谱工
作站和 DAD 检测器) ,美国 Agilent 公司;AND HM
-200 电子天平,日本 AND公司。
2. 2 实验试剂
34 林琼绎,等:九里香不同部位九里香酮含量的比较 2011 年第 5 期
九里香酮对照品(中国药品生物制品检定所,
批号:111552 - 200602) ;药水(本课题组提供) ;乙
腈为色谱纯,国药集团化学试剂有限公司;甲醇为色
谱纯,Fisher 公司;磷酸,分析纯,广州化学试剂厂;
超纯去离子水,电阻率 18 MΩ·cm。
2. 3 检测
2. 3. 1 色谱条件
色谱柱:Agilent ZORBAX Eclipse XDB - C18
(Analytical 4. 6 mm × 250 mm 5 - Micron) ;流动相:
A为质量分数 0. 3%的磷酸,B 为乙腈;采用分段梯
度洗脱:0 min 为 10% B,0 ~ 10 min 为 10 ~ 40% B,
10 ~ 20 min 内为 40 ~ 100% B,20 ~ 25 min 内为
100% B;流速 1. 0 mL /min;柱温 40 ℃;检测波长 322
nm;进样量 20 μL。外标法定量。
2. 3. 2 求标准曲线和线性回归方程
准确称取 0. 0108g 九里香酮对照品,用甲醇溶
解后定容于 100 mL的容量瓶中,摇匀后作为对照品
贮备液。
准确量取对照品贮备液 0. 10 mL、0. 50 mL、
1. 00 mL、1. 50 mL 和 2. 00 mL 于 10. 00 mL 容量瓶
中,用甲醇定容至标线,摇匀,得对照品溶液。
取各浓度的对照品溶液 20μL 进样测定,每个
浓度进样 3 次,以平均峰面积为纵坐标,以对应的浓
度 c(g /mL)为横坐标作标准曲线和线性回归方程,
结果:在 1. 08 ~ 21. 6μg /mL 范围内线性关系良好。
九里香酮对照品的标准曲线见图 1。线性回归方
程:
y = 0. 04900x - 0. 0544
R2 = 0. 9999
图 1 对照品九里香酮的标准曲线
2. 3. 2 样品测定
将每次按同一提取工艺提取得的提取液分别转
移至 500 mL 的容量瓶内,用 75%的酒精定容后摇
匀,作为待测液。再将待测液用 0. 45 μm 有机滤膜
过滤后上液相色谱进行测定。对照品溶液的色谱图
见图 2,九里香提取液的色谱图见图 3。
图 2 九里香酮对照品的色谱图
图 3 九里香提取液的色谱图
2. 4 结果
使用高效液相色谱法并按以上的检测条件分别
检测三株不同九里香药材的四个不同部位所得提取
液中九里香酮的含量,每个部位的提取液分别检测
三次,最终结果取平均值。结果见表 1。
表 1 九里香四个不同部位提取液中九里香酮的含量
质量分数
部位
W1(μg /g)W2(μg /g)W3(μg /g)平均值(μg /g)
根部
茎部
枝部
叶部
1 0 0 0
2 0 0 0
3 0 0 0
1 0. 7742 0. 7852 0. 7796
2 1. 1689 1. 1752 1. 1712
3 0. 4809 0. 4997 0. 4951
1 170. 9321 170. 9048 170. 4716
2 157. 0028 157. 1247 156. 7526
3 167. 7577 167. 2586 168. 5515
1 1379. 5998 1379. 3042 1379. 5880
2 1363. 6065 1363. 5436 1363. 8992
3 1367. 7776 1367. 4125 1367. 5563
0
0. 8144
165. 1952
1370. 2542
3 讨论
九里香是一味常用的中药,具有行气活血,散瘀
止痛,解毒消肿等多种功效,用途十分广泛。但是人
们在日常使用该药材时存在一定的盲目性,有人单
独使用根、茎、枝、叶;有人各部位混合用,总之各种
用法的都用,并没有一个明确的使用依据。
本研究将三株不同的九里香药材按根、茎、枝、
第二十一卷第五册
2011 年 10 月
口 腔 护 理 用 品 工 业
ORAL CARE INDUSTRY 3
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牙线可防“邻面龋”发生
即使六岁小儿,现在也知道牙齿要进行窝沟封闭,因为
牙齿窝沟最易生龋。但专家提醒说:其实牙齿邻面也非常容
易生虫牙,而且很难发现,应加强警惕,餐后多用牙线可有效
预防。
刷牙难以顾及牙齿间隙
中山大学孙逸仙纪念医院口腔科的医师介绍,在日常生
活中,通过刷牙可以清洁牙齿的外侧面、内侧面和咬合面,但
由于牙刷的刷毛无法有效进入相邻两牙之间的间隙,刷牙后
仍有食物残渣等残留于牙齿邻面部位,导致邻面龋坏。邻面
龋在临床非常多见,由于发生在牙齿的邻面,患者自己难以
发现,往往等到有自觉症状(如牙体缺损、疼痛等)时才到医
院就诊,此时病变已较严重,甚至发展成牙髓炎和根尖周炎,
危害较大。
邻面龋与牙周病、食物嵌塞有关
邻面龋的发生主要与牙周病变、食物嵌塞和不良修复体
等因素有关。牙周病患者相邻牙齿间多有骨质丧失、牙龈萎
缩,进食后易有食物、软垢和菌斑黏附残留,造成牙齿龋坏。
食物嵌塞是指由于相邻牙之间邻接关系不良或间隙异常,导
致进食、咀嚼时食物嵌塞或滞留于相邻牙间隙内,不易去除
和清洁。
嵌塞的食物会被细菌分解,腐败变质,促发邻面龋坏。
邻面龋也与不良充填体、不良修复体等密切相关,如充填物
存在悬突、修复体密合性差、修复体凸度过大等情况,均易使
邻面菌斑积聚,造成牙齿邻面龋坏。活动牙制作不良及不良
戴牙习惯(如不清洗义齿及夜间不取出义齿等)同样容易导
致邻面龋。
使用牙线、牙缝刷可有效清洁
邻面龋的发生位置隐匿,治疗起来比较困难,充填的效果
也较差,因此防治邻面龋重点在于预防。维护口腔健康是一
项长期工作,要建立终身呵护口腔的观念,每半年做一次口腔
卫生检查,使用牙线、牙缝刷等清洁牙齿邻面,促进口腔健康
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叶四个不同部位进行分类,按同一提取工艺分别提
取,然后以九里香的主要活性成分九里香酮作为检
测指标,使用高效液相色谱法,分别检测各提取液中
九里香酮的质量分数,每种提取液检测三次,结果取
平均值。结果发现,九里香的根、茎、枝、叶提取液中
九里香酮的质量分数分别为:0μg /g、0. 8144μg /g、
165. 1952μg /g、1370. 2542μg /g,即叶子中九里香酮
含量最高,其次枝部,然后是茎部,根部的检测的结
果为 0。该研究结果表明,根部中的九里香酮含量
没有或者很低,以致无法检测得出,茎部也非常低,
可以忽略不计,枝部比较高,最高的是叶部。因此,
如果以九里香酮质量分数的高低作为指标来衡量九
里香药材质量,那么叶子的质量最好,为最佳用药部
位。
由于九里香药材中的化学成分很复杂,其主要
活性成分中又包含有黄酮类、香豆素、挥发油及生物
碱等多种化学物质,而九里香酮只是多种活性成分
中的一种,因此,仅以九里香酮含量这一个指标作为
评价其质量优劣的标准难免存在一定的局限性,至
于还需检测其他哪些化学成分才能更全面地评价其
质量优劣,还需进一步进行深入探讨和研究。
(致谢:本研究得到了柳州两面针股份有限公
司卢凯玲工程师的大力支持和帮助,在此表示感
谢!)
参考文献
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(收稿日期:2011 年 9 月 25 日)