全 文 ：大白刺不同部位中总黄酮的含量测定
舒尊哲 1, 2 ,姜秀娟 1, 2 ,孟庆艳1, 2 ,张 玲2, 3＊　(1.塔里木大学生命科学学院 ,新疆阿拉尔 843300;2.新疆生产建设兵团塔里木盆
地生物资源保护与利用重点实验室 ,新疆阿拉尔 843300;3.塔里木大学植物科技学院 ,新疆阿拉尔 843300)
摘要　[目的 ]分析大白刺不同部位中总黄酮的含量。 [方法]采用超声法提取总黄酮 ,以芦丁为对照品 ,采用紫外 -可见分光光度法于
500nm处测定总黄酮的含量。 [结果]对照品在 0～ 35.2mg/L浓度范围内与吸光度有良好的线性关系 ,回归方程为A=0.018 47C, r=
0.999 6(n=5)。大白刺不同部位中总黄酮的的含量分别为:茎 0.66%、叶 1.24%、花 1.43%,平均回收率为 97.38%, RSD为 2.19%(n=
9)。 [结论]超声法简便、快速、准确 ,可用于大白刺中总黄酮的含量测定。
关键词　大白刺;不同部位;总黄酮;超声法
中图分类号　S312　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2010)06-02936-01
DeterminationofTotalFlavonoidContentinDifientPartsofNitrariaroborowski
SHUZun-zheetal　(ColegeofLifeScience, TarimUniversity, Alar, Xinjiang843300)
Abstract　 [ Objective] TheresearchaimedtoanalyzethecontentoftotalflavonoidindifientpartsofNitrariaroborowski.[ Method] Total
flavonoidwasextractedbyusingultrasonicmethod.Withrutinasthecontrolsubstance, thecontentoftotalflavonoidwasdeterminedatthe
wavelengthof500nmbyusingUV-visiblespectrophotometry.[ Result] Theconcentrationofcontrolsubstancehadagoodlinearrelationship
withtheabsorbencyintherangeof0-35.2mg/L.TheregressionequationwasA=0.018 47C, r=0.999 6(n=5).Thecontentoftotalfla-
vonoidinthestems, leaves, flowersofNitrariaroborowskiwere0.66%, 1.24%, 1.43%respectively.Theaveragerecoverywas97.38%,
withRSDof2.19%(n=9).[ Conclusion] Ultrasonicmethodissimple, rapid, accurate.Anditcanbeusedinthecontentdeterminationof
totalflavonoidinNitrariaroborowski.
Keywords　 Nitrariaroborowski;Differentparts;Totalflavonoid;Ultrasonicmethod
基金项目　塔里木大学校长基金项目(TDZKSS07001)。
作者简介　舒尊哲(1979-),男 ,辽宁海城人 ,从事天然产物化学研究。
＊通讯作者。
收稿日期　 2009-11-16
　　白刺属(Nitraria)是蒺藜科 (Zygophylceae)的一个小
属 , 为落叶小灌木。在我国主要分布在新疆 、青海 、甘肃 、宁
夏和内蒙古等地 [ 1] ,其中新疆有 5种 ,分别是白刺(Nitraria
tangutorum)、大白刺(Nitrariaroborowski)、小果白刺(Nitraria
sibirica)、泡泡刺(Nitrariasphaerocarpa)、帕米尔白刺(Nitraria
pamirica),这其中以大白刺在新疆最为常见。黄酮是白刺属
植物中最主要的一类活性成分 , 这也是白刺属植物果实具
备降血脂 、降血压以及降血糖等功效的基础 。刘金荣等测定
了新疆产西伯利亚白刺(小果白刺)果实中的总黄酮 , 含量
为 1.07%[ 2] 。为了探究白刺属植物黄酮的富集 、分布情况 、
为白刺属植物开发利用提供研究基础 ,笔者设计了提取和测
定大白刺茎 、叶 、花中的总黄酮的新方法 ,并测定其含量。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　原料。原料采于新疆阿拉尔市十二团 ,经鉴定为蒺
藜科白刺属大白刺(Nitrariaroborowski)。
1.1.2　仪器 。紫外 -可见分光光度计(澳大利亚 , Varian
AustraliaPTYLTD),超声波发生器(SK3200H,上海科导超声
仪器公司), Sartorious电子天平(北京赛多利斯天平有限
公司)。
1.1.3　试剂。甲醇 ,三氯化铝 ,亚硝酸钠 ,硝酸铝 ,氢氧化钠
等 ,均为国产分析纯;芦丁对照品(德国生产)。
1.2　方法
1.2.1　供试品溶液的制备。
1.2.1.1　对照品溶液的制备。精密称取 120 ℃干燥至恒重的
芦丁对照品 11.0 mg,置于 100 ml容量瓶中 ,加 75%乙醇溶解 ,
定容至刻度 ,摇匀 ,即得芦丁对照品的浓度为 0.11mg/ml。
1.2.1.2　样品溶液的制备。称取样品粉末约 1.0 g,精密称
定 ,置于 100 ml具塞锥形瓶中 ,精密加入 75%乙醇 30 ml,超
声处理 30 min,重复 3次 ,合并 3次滤液于 100 ml容量瓶中 ,
定容至刻度 ,摇匀即可。
1.2.2　标准曲线的绘制。精密吸取芦丁对照品溶液 0、
1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00、7.00、8.00ml,分别置于具
塞锥形瓶中 ,加 75%乙醇补到 12.00ml。以第 1份溶液为空
白 ,在 500nm波长处测定吸光度 ,以吸光度(A)为纵坐标 ,浓
度(C)为横坐标 ,绘制标准曲线。
1.2.3　方法学考察。
1.2.3.1　精密度试验 。精密吸取 “1.2.1.1”项下对照品溶
液 5份 ,并按 “1.2.2”项下方法显色 ,测定吸光度值。
1.2.3.2　重现性试验。精密吸取 “1.2.1.2”项下样品溶液 5
份 ,按照 “1.2.2”项下方法显色 ,测定吸光度值。
1.2.3.3　稳定性试验。精密吸取 “1.2.1.2”项下样品溶液 5
份 ,按照 “1.2.2”项下方法显色 ,测定吸光度值。
1.2.3.4　加样回收试验。称取大白刺茎 、粉 、末各 3份 ,每
份均重约 1.0g,共 9份 ,精密称定 ,分别置于 9个 100 ml的
具塞锥形瓶中 ,分别精密添加入不同量芦丁对照品(相当于
大白刺中总黄酮含量的 80%、100%、120%),按照 “1.2.1.2”
项下方法制备 ,并按 “1.2.2”项下方法显色 ,测定吸光度值。
1.2.4　样品的测定。分别称取茎 、叶和花样品粉末各 1.000
g,精密称定 ,按照 “1.2.1.2”项下样品处理方法制备 ,按照
“1.2.2”项下方法显色 ,测定吸光度值。
2　结果与分析
2.1　标准曲线的绘制　试验得出(图 1),标准曲线和回归
方程 A=0.018 47C(已校正), r=0.999 6,表明样品检测浓度
在 0 ～ 35.2 mg/L的范围内与吸光度线性关系良好 。
2.2　精密度试验　试验结果得出 , RSD=1.25%(n=5),表
明精密度良好。
(下转第 2948页)
责任编辑　李菲菲　责任校对　卢瑶安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(6):2936, 2948
2.4　稳定性考察　取同一供试品溶液于 0、2、4、6、8、10、12
h各进样一次 ,测定峰面积 ,得 RSD=2.3%。表明在测定时
间 12 h内样品稳定性良好。
2.5　重复性考察　取同一样品约 0.5 g,精密称定 ,按 “1.3
供试品溶液的制备 ”方法平行制备 6份 ,依法测定各峰面积 ,
计算出芒果苷的含量 ,得 RSD=1.0%,表明该方法重复性
良好。
2.6　加样回收率试验　精密称定已知含量的样品粉末 5
份 ,均加入芒果苷对照品 10 mg,依法测定各份样品中芒果苷
的含量 ,计算得该法平均回收率 =98.5%, RSD=1.42%
(表 1)。
表 1　样品加样回收率
Table1　Theaveragerecoveryrateofsamples
序号No.
样品原含量∥mgOriginalcontentofsamples
加入量mgAddition
测得量∥mgMeasuredamount
回收率∥%Recoveryrate
1 14.30 10.00 23.96 96.6
2 15.31 10.00 25.11 98.0
3 20.23 10.00 30.08 98.5
4 34.86 10.00 45.26 100.4
5 38.59 10.00 48.50 99.1
　　各样品按照 “1.3供试品溶液的制备 ”方法平行制备 3
份 ,依法测定各供试品溶液的峰面积 ,计算芒果苷的含量 ,得
各样品含量的平均值 。结果见表 2。由表 2可知 , 8个品种
中芒果苷含量为 1.52%～ 7.71%, RSD为 0.4%～ 2.8%。
3　讨论
(1)提取溶剂的选择 。试验选取甲醇和 50%、75%、95%
乙醇为溶剂超声提取 30 min,结果表明 ,甲醇和 75%乙醇含
量相对较高 ,两者对芒果苷的提取率差异不显著 ,考虑到甲
表 2　不同品种芒果叶中芒果苷的含量
Table2　Thecontentofmangiferinintheleavesofmangovarieties
序号No. 品种Variety
产地Producingarea
芒果苷含量∥%Contentofmangiferin
RSD%
1 金穗芒叶 广西百色 3.06 1.1
2 金花芒叶 广西百色 3.63 2.3
3 泰国芒叶 广西百色 6.97 2.8
4 紫花芒叶 广西百色 7.71 0.4
5 双定 1号芒叶 广西南宁 2.75 1.6
6 双定 3号芒叶 广西南宁 4.04 2.6
7 红芒叶 广西南宁 1.52 2.1
8 红象牙芒叶 广西南宁 2.86 2.7
醇的毒性因素 ,故选取 75%乙醇为提取溶剂。
　　(2)提取方法的选择。分别采用 75%乙醇为提取溶剂 ,
考察浸渍 24 h、回流提取 2 h和超声提取 30min3种提取方
法 ,测定可得 ,超声提取 30 min芒果苷含量相对较高 ,且提取
时间短 ,操作安全简便 ,故选取超声提取法 。
(3)流动相的选择。选用甲醇 -水(30∶70,冰乙酸调 pH
=3.5)、甲醇 -水(20∶80,磷酸调 pH=2.5)和甲醇-0.3%磷
酸 -三乙胺(28∶72∶0.25)等作为流动相条件 ,结果表明 ,后者
作为流动相时 ,与相邻峰分离度好 ,峰形好 ,拖尾小 ,能满足
色谱定量要求。
参考文献
[ 1] 邓家刚 ,郑作文 ,曾春晖.芒果苷的药效学实验研究[ J] .中医药学刊,
2002, 7(12):37.
[ 2] 邓家刚 ,杨柯,阎莉 ,等.芒果苷对免疫抑制小鼠T淋巴细胞增殖的影
响[ J] .中药药理与临床, 2007, 23(5):64-65.[ 3] 邓家刚 ,杨柯,郑作文,等.芒果苷在鸭体内抑制鸭乙型肝炎病毒感染
的实验研究 [ J].广西中医学院学报 , 2007, 20(1):1-3.
[ 4] 程鹏,彭志刚,杨杰 ,等.芒果苷对白血病 K562细胞端粒酶活性和凋亡
的影响 [ J] .中药材, 2007, 30(3):306-309.
(上接第 2936页)
图 1　标准曲线
Fig.1　 Thestandardcurve
2.3　重现性试验　重现性试验得出 , RSD=1.53%(n=5),
表明重现性良好。
2.4　稳定性试验　稳定性试验得出 , RSD=2.12%(n=5),
表明稳定性良好。
2.5　加样回收试验　加样回收试验结果得出 ,平均回收率
为 97.38%, RSD=2.19%(n=9),表明加样回收率良好 。
2.6　样品测定结果　试验最后得出 ,大白刺不同部位中总
黄酮的含量为花(1.43%)>叶(1.24%)>茎(0.66%)。
3　讨论
该试验采用超声法提取 ,以芦丁为对照品 ,用紫外可见
分光光度法于 500 nm处测定吸光度值。首次评价建立了该
类植物中总黄酮的含量测定方法 ,该方法简便 、快捷 ,可用于
大白刺中总黄酮的含量测定 。
经试验测定得大白刺中花部位总黄酮的含量大于其他
部位 ,而花 、叶部位的含量约茎部位约 2倍 ,可对这 2个部位
作进一步的研究 。
参考文献
[ 1] 赵克昌 ,屈金声 ,郭劲玲.治沙保土灌木白刺开发利用现状及发展前景
[ J].中国水土保持, 1995(1):38-40.
[ 2] 刘金荣 ,阎平,李艳 ,等.西伯利亚白刺果实微量元素及总黄酮含量测
定 [ J].中国现代应用药学杂志 , 2002, 19(5):385-386.
2948 　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2010年