全 文 ：牡丹江医学院学报 2014 年 第 35 卷 第 6 期
参考文献
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收稿日期:2014 － 10 － 15
紫外分光光度法测定小白花地榆总皂苷含量
韩婼伊1 李 洁2 丑亚杰1 李 丽2 李怡潼3 李元昊4 孟令锴* 1
(1．牡丹江医学院 2011 级药学 黑龙江 牡丹江 157011;2．牡丹江医学院附属红旗医院 黑龙江 牡丹江 157011;
3．四川大学华西药学院 2012 级药学 四川 成都 610041;
4．牡丹江医学院 2011 级临床医学专业本科 黑龙江 牡丹江 157011)
【基金项目】 黑龙江省大学生创新创业训练计划项目(201410229025) ;牡丹江医学院学生科研项目(201407) ;黑龙江省卫生厅科研项目
(2013201) ;牡丹江医学院科研项目(ZS201307) * 通讯作者:孟令锴，E － mail:mlk720@ 163． com
【摘 要】 目的:测定小白花地榆中总皂苷的含量。方法:以地榆皂苷Ⅰ为对照品，采用紫外分光光度法，在波长 323nm 处，
测定总皂苷含量。结果:小白花地榆中总皂苷含量为 6． 44%。结论:该方法速度快、重现性好，结果可靠。
【关键词】 小白花地榆;总皂苷;含量测定;紫外分光光度法
中药地榆作为药用已有 2000 多年的历史，地榆以根入
药，始载于《神农本草经》［1］。具有凉血止血，解毒敛疮的功
效。临床上可用于治疗血痢、崩漏、水火烫伤、便血［2］。黑龙
江省野生地榆属资源主要有地榆(Sanguisorba officinalis
L．)、小白花地榆(Sanguisorba parviflora (Maxim．)Takeda)、
垂穗粉花地榆(Sanguisorba tenuifolia Fish． ex Link)等物种。
《中华本草》中记载，地榆属植物小白花地榆、粉花地榆功效
同药用地榆，产地替代地榆入药［3］。地榆主要含有鞣质及皂
苷类成分［4］，其所含地榆总皂苷具有单独或协同细胞因子的
促造血细胞增殖作用［5］。目前，对于小白花地榆的相关研究
鲜有报道。本实验对黑龙江省野生小白花地榆的所含地榆
皂苷成分进行含量测定，为进一步开发利用黑龙江省野生地
榆属植物奠定基础。
1 仪器与试剂
浓硫酸、甲醇、浓氨水、正丁醇为分析纯，地榆皂苷 I 对
照品为分析纯，成都瑞芬思生物科技有限公司生产。KQ －
500DE型数据超声波清洗型、电热恒温水浴锅、高速万能粉
碎机、752N －紫外可见分光光度计、AX200 万分之一电子天
平。小白花地榆采于牡丹江市横道河子地区，经鉴定为蔷薇
科地榆属小白花地榆(Sanguisorba parviflora (Maxim．)Take-
da)
2 方法与结果
2． 1 测量波长的选择 精密称取 2mg已干燥恒重的地榆皂
苷 I对照品，以浓硫酸定容至 50mL，70℃水浴 40 min ，冰
水浴中冷却至室温，以浓硫酸为参比液，用紫外分光光度计，
在 190 ～ 400nm范围内进行扫描，该体系在紫外 323nm 处有
特征吸收峰。确定测定波长为 323nm。
2． 2 反应温度与反应时间的优化 精密称取 2mg已干燥恒
重的地榆皂苷 I对照品，以浓硫酸定容至 50mL，置于设定温
度(40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90 ℃)水浴中，定时取样，
测定 323nm处的吸光度。至吸光度不再升高，即可认为反
应已达完全。平行试验 3 次，最终结果显示在 40℃、50℃、
60℃、70℃、80℃、90 ℃条件下，总皂苷完全反应所需的时间
分别为 100、80、60、40、20、10 min。在反应温度 70℃，反应时
间 40 min时，OD323nm值最大，故确定其为最佳反应反应温度
与反应时间。
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牡丹江医学院学报 2014 年 第 35 卷 第 6 期
2． 3 总皂苷含量测定
2． 3． 1 对照品溶液配制 精密称取 5． 02mg 地榆皂苷 I 于
25mL容量瓶中，加浓硫酸定容至刻度，超声溶解，置于 70℃
水浴中加热 40min 后，冰水浴中冷却至室温，即得(每 1mL
中含 0． 2008mg)。
2． 3． 2 供试品溶液的配制 精密称取 250mg小白花地榆药
材粉末，加入 25mL 甲醇，超声提取 30min，将滤液浓缩至干
后，30%的氨试液 15mL 溶解，转移至分液漏斗中，加入
15mL水饱和正丁醇，充分振摇，静置，分层，重复正丁醇萃取
操作 1 次。合并 2 次萃取液于烧瓶中，减压浓缩至干。残渣
用适量浓硫酸超声溶解，并转移到 100mL 容量瓶中，加浓硫
酸定容至刻度，按照 2． 2 项下优化后反应条件进行后，冰水
浴中冷却至室温，得供试品溶液。
2． 3． 3 方法学考察
2． 3． 3． 1 标准曲线的建立 精密吸取地榆皂苷 I对照品储
备液 0． 5、1． 0、2． 0、3． 0、4． 0mL 分别置于 5mL 容量瓶中，加
入浓硫酸稀释定容至刻度，摇匀，备用。分别精密吸取上述
各浓度对照品溶液 2mL，按紫外分光光度法，在 323nm 波长
处测定吸光度值，以吸光度(Y，OD323nm)为纵坐标，浓度(X，
μg / mL)为横坐标，绘制标准曲线，进行回归分析，得回归方
程:Y =0． 048X + 0． 2977，r = 0． 9980。结果表明，对照品溶液
在 20． 08 ～ 160． 64μg / mL浓度范围内线性良好。
2． 3． 3． 2 精密度试验 精密吸取对照品储备液(0． 0201mg /
mL)2mL，重复测定 6 次 OD323nm，ＲSD = 0． 68% (n = 6)。表
明仪器精密度良好。
2． 3． 3． 3 对照品稳定性试验 取对照品溶液(0． 0201mg /
mL)2 mL，放置 0，1，2，4，8 h，测定 OD323nm，测得 ＲSD = 0．
89%，表明对照品溶液在 8h内稳定。
2． 3． 3． 4 样品重复性试验 取 50mg药材样品平行 5 份，照
制备供试品溶液方法，测 OD323nm，ＲSD = 1． 43%。表明该方
法重复性良好。
2． 3． 3． 5 加样回收率试验 精密称取已测知含量的药材样
品，分别精密加入一定量对照品溶液(0． 0201mg / mL)，按照
样品制备与测定方法，平行做 6 组，结果见表 1。
表 1 回收率测定结果
序号
样品含量
(mg)
加入量
(mg)
测得总量
(mg)
回收率
(﹪)
平均回收率(﹪)
ＲSD
(﹪)
1 0． 8851 0． 2010 1． 0754 99． 0148
2 0． 8863 0． 2010 1． 0732 98． 7032
3 0． 8456 0． 2010 1． 0214 97． 5922
99． 13 1． 42
4 0． 8333 0． 2010 1． 0321 99． 7873
5 0． 8814 0． 2010 1． 0621 98． 1245
6 0． 8757 0． 2010 1． 0934 101． 5510
结果如表 1 所示，地榆皂苷 I 的加样回收率为 99． 13%，
ＲSD值为 1． 42%，表明该方法的准确度良好。
2． 3． 3． 6 样品测定 取样品药材 6 份，按照上述方法进行
测定，结果见表 2。
表 2 样品中的总皂苷含量
序号 样品质量(mg) 含 量(﹪) 平均值
1 250． 12 6． 57
2 252． 24 6． 41
3 250． 02 6． 38
6． 44
4 251． 09 6． 36
5 253． 15 6． 60
6 251． 04 6． 31
3 讨 论
3． 1 关于皂苷成分的含量测定方法，文献中采用较常用的
显色体系有香草醛 －冰醋酸 －高氯酸［6］、甲醇 －浓硫酸［7］、
香草醛 －硫酸［8］、香草醛 －高氯酸［9］、高氯酸［10］等，本实验
根据地榆皂苷具有的糖基能被浓硫酸氧化脱水成糠醛衍生
物性质，采用浓硫酸作为显色试剂，与其他显色体系相比具
有操作简便、反应灵敏、重现性好的优势。
3． 2 采用紫外分光光度法测定小白花地榆中总皂苷含量，
以浓硫酸为显色试剂，反应条件为反应温度 70℃，反应时间
40min，该方法简便、准确、灵敏、重现性好。
3． 3 测定小白花地榆中总皂苷含量可为下一步开发利用小
白花地榆提供理论依据。为黑龙江省野生地榆属资源的开
发奠定基础。
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收稿日期:2014 － 11 － 20
原材料川芎提取工艺研究
刘 兵 孔德东
(牡丹江友搏药业股份有限公司 黑龙江 牡丹江 157011)
【摘 要】 据文献报道川芎的总生物碱和酚性成份有明显的扩张冠脉、抑制 ADP 诱导的血小板凝集［1］，对已凝集的血小板
有解聚作用、降低血小板的表面活性生平药理作用，川芎中较强生理活性的有效成分川芎嗪、阿魏酸等，水体效果远远小于醇
提效果，因此采用醇提。由于川芎中的有效成分川芎嗪、阿魏酸等均为热敏性无知，高温对其有破坏，故采用了超声波低温提
取的方式，利用超声波在液体介质中传播的特性和“空化效应”，低温情况下就可以将有效成分从药材中提取出来［2］。
【关键词】 川芎;阿魏酸;超声提取;浸膏率
1 材料与仪器
1. 1 川芎片，乙醇，离心机，高效液相仪。
2 方法和结果
2. 1 溶媒选择
2. 1. 1 以川芎有效成分阿魏酸的提取率来进行川芎提取溶
媒的选择。
2. 1. 2 称取川芎片 7 份，每份 50. 0g，按以下条件浸泡 30min
后 10 倍量溶媒常温超声提取 2 次，每次 30min，提取液过滤，
离心，定容，测阿魏酸提取率。
2. 1. 3 阿魏酸的测定:高效液相法测定［3］。流动相:甲醇 －
1%Hac(30:70) ;检测波长:323nm。结果见表 1。
表 1 不同溶媒的阿魏酸提取率
1 2 3 4 5 6 7
乙醇含量 0 30% 50% 60% 70% 80% 90%
阿魏酸提取率
(mg /g)
0. 2060. 3540. 4150. 5720. 5080. 4390. 324
根据结果，选取 60%的乙醇作为提取溶媒。
2. 2 川芎提取条件的优选
2. 2. 1 以浸膏得率和阿魏酸提取率对溶媒量、提取时间和
提取温度进行优化，以选取川芎的最佳提取工艺。
2. 2. 2 水平因素，见表 2。
表 2 水平因素
水
平因素
A药材:溶媒量
B提取时间
(分钟) C提取温度
1 1:8 /1:6 30 /30 25℃
2 1:10 /1:8 40 /40 40℃
3 1:12 /1:10 60 /40 55℃
2. 2. 3 实验方法和结果 依表 20，用 L9(34)安排实验，称
取川芎片 9 份，每份 50. 0g，按以下因素水平浸泡 30min后提
取，提取离心液，上清液定容至 1000mL，测 阿魏酸提取率测
浸膏得率。
2. 2. 3. 1 浸膏率的测定 各吸取 20mL 置于干燥至恒重的
蒸发皿，水浴干溶媒，105℃烘 3h，干燥器中放凉，迅速称定。
测浸膏率，结果见表 3。
2. 2. 3. 2 阿魏酸测定 用高效液相法测定。流动相:甲醇
－ 1%Hac(30:70);检测波长:323nm。结果见表 4。
3 川芎提取正交实验和结果
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