全 文 ：药 物 研 究
The medicine study
基金项目:云南省应用基础研究面上项目 2010CD142。
作者简介:张晓南 (1981 －)，女，云南昆明人，工程师，硕士，主要研究方向:天然药物开发和质量控制，E － mail:xiaonan1242
@ 126. com。
云南食用葛中大豆苷的含量测定
张晓南 徐 怡 牛延菲 符德欢 周培军 毛宏云
云南省药物研究所，云南 昆明 650111
【摘 要】 目的:测定食用葛中大豆苷的含量，并进行方法学考察，以期为其质量标准的建立提供可靠依据。方法:样品以甲醇
(70%)超声提取，采用高效液相色谱法测定，色谱条件为:色谱柱为 Agilent ZOＲBAX SB － C18 柱，流动相为 0 ～ 30min，甲醇 －水 (20∶80
→65∶35)线性梯度洗脱，检测波长为 250nm，柱温为 30℃。结果:建立了食用葛中大豆苷含量的测定方法，进行了方法学考察，并测定了
三个产的食用葛药材中的大豆苷含量，其中产于昆明的食用葛含有的大豆苷 0. 84%，产于大理的含 1. 12% ，产于香格里拉的含 1. 87%。
结论:测定结果表明各产地间大豆苷含量有明显差异，本方法能有效测定食用葛中的大豆苷含量，且较为稳定，所得数据可为将来建立食
用葛药材标准提供依据。
【关键词】 食用葛;大豆苷;含量测定;高效液相色谱法
【中图分类号】Ｒ284. 1 【文献标志码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2014)17 － 0017 － 02
The Quantitative Determination of Daidzinn From Ethnomedicine Pueraria edulis Pamp． in Yunnan
ZHANG Xiao-nan XU Yi NIU Yan-fei MAO Hong-yun
Yunnan Institute of Materia Medica，Yunnan，Kunming，650111
Abstract:Objective To determine and analyze the content of daidzin from Ｒadix Pueraria edulis Pamp． Methods HPLC method
was used to determine and analyze the content of daidzin which were extracted by ultrasonic extraction． Ｒesult The results of the sam-
ples for the test have shown that the samples from Kunming contain Daidzin 0. 84%，the samples from Dali contain 1. 12%，the sam-
ples from Shangri － La contain 1． 87% ． Conclusion This method is efficient and stable，can be used in the future quality standards．
Key words:Pueraria edulis Pamp．;daidzin;quantitative determination;HPLC
食用葛为豆科葛根属植物食用葛 (Pueraria edulis
Pamp.)的根，主要分布云南、四川、广西等地区，在云
南、四川有时作粉葛药用，其资源量较为丰富，但现有研
究比较薄弱。据《滇南本草》载“葛根 (味甜者甘葛，味
苦者苦葛)，味甘，性微寒。入阳明经。治胃虚消渴，伤
风、伤暑，伤寒，解表邪，发寒热往来，湿疟，解中酒热
毒。小儿痘疹初出要药。”［1］。食用葛根中含有尿囊素，二
十四酸 － α －甘油酯，β －谷甾醇，大豆苷元，染料木苷，
大豆苷，葛根素，大豆苷元 － 8 － C －芹菜糖 (1→6)葡萄
糖苷等成分。［2］在其有效成分中，最受关注的是异黄酮类，
也是其主要活性成分，本文选取其含量较高的异黄酮类成
分大豆苷，建立其含量测定方法，以期为其质量评价提供
可靠依据。
1 药材、仪器、药品与试剂
1. 1 食用葛药材采自香格里拉、昆明、大理，经中国科学
院昆明植物研究所分类鉴定室陶德定副研究员鉴定为食用
葛 Pueraria edulis Pamp. 。
1. 2 Agilent1100 型高效液相色谱仪，DAD 检测器，Agilent
Chemstation 工作站。
1. 3 大豆苷对照品:中国食品药品检测研究院提供，批
号:111738 － 201302。
试药:甲醇 (色谱纯)，水 (超纯水)，95%乙醇 (分
析纯)。
2 方法与结果
2. 1 液相色谱条件 结合文献报道［3 ～ 6］和实验研究，色谱
条件确定为:色谱柱 Agilent ZOＲBAX SB － C18;流动相:
甲醇 －水，线性梯度洗脱，条件见下表;流速:1ml /min;
柱温:30℃;检测波长:250nm;进样量:10μl。
表 1 梯度洗脱条件
时间 /min 甲醇 /% 水 /%
0 20 80
30 56 34
32 20 80
2. 2 标准品溶液制备 精密称取大豆苷对照品 20mg，加
70%甲醇溶解，定容到 25ml，即为标准品母液，取母液适
量，加 70%甲醇稀释到需要浓度即得。
2. 3 供试品溶液制备 精密称取食用葛药材约 0. 2g，加入
甲醇 (70%)20ml，称定重量，超声提取 30min (59KHz，
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中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy
药 物 研 究
The medicine study
325W)，放冷，用甲醇 (70%)补足失重，滤过，滤液用
0. 2μm滤膜滤过，即得。
2. 4 线性关系考察 精密量取大豆苷标准品母液适量，
70%甲醇稀释，分别配制成浓度为 3. 0、10. 0、20. 0、
50. 0、80. 0、100. 0、200. 0ug /ml的对照品溶液，照确定的
色谱条件进样测定，记录色谱图，由浓度及相应峰面积得
线性方程和相关系数。
表 2 线性关系考察 (n = 7)
浓度 ug /ml 3. 0 10. 0 20. 0 50. 0 80. 0 100. 0 200. 0
峰面积 79. 4 314. 5 662. 4 1684. 3 2738. 9 3497. 9 7060. 8
线性方程:Y = 35. 473X—55. 138，r2 = 0. 9999，大豆
苷在 3 ～ 200ug /ml浓度范围内线性关系良好。
2. 5 精密度考察 取同一大豆苷标准液 (20ug /ml)，按选
定色谱条件连续进样 6 次，峰面积 ＲSD 为 0. 55 % ＜ 3%，
表明仪器精密度良好。
2. 6 重复性 精密称取食用葛药材 (产地昆明)6 份，按
照 2. 3 项下供试品溶液制备方法制备，测定大豆苷量，测
得大豆苷平均含量为 1692. 9ug /g，ＲSD 为 2. 17%，表明本
方法重复性良好
2. 7 回收率试验 称 取 已 知 含 量 的 食 用 葛 药 材
(1692. 9ug /g)9 份，以 1∶0. 5，1∶1，1∶1. 5 分别精密加入大
豆苷对照品，按照供试品溶液制备方法制备，测定大豆苷
量，计算回收率，回收率为 98. 4% ～ 103. 2%，ＲSD 为
1. 49% ＜ 3%。结果见下表 3:
表 3 加样回收率试验结果 (n = 9)
取样量
(g)
样品中大
豆苷量
(ug)
标准品加
入量 (ug)
测得大
豆苷总
量 (ug)
回收率
(%)
平均回
收率
(%)
ＲSD
(%)
0. 2088 353. 5
0. 2097 355. 0
0. 2037 344. 8
0. 2055 347. 9
0. 2056 348. 0
0. 2073 350. 9
0. 2074 351. 1
0. 2056 348. 1
0. 2071 350. 6
50%
100%
150%
175 529. 3 100. 4
175 529. 7 99. 8
175 517. 1 98. 4
350 697. 6 99. 9
350 698. 9 100. 2
350 704. 7 101. 1
525 877. 5 100. 3
525 889. 8 103. 2
525 890. 5 102. 8
100. 68 1. 49
2. 8 耐用性试验
2. 8. 1 不同色谱柱考察 选用不同品牌的三根色谱柱:
Agilent ZOＲBAX SB － C18 (4. 6 × 250mm，5μm)，Waters
Symmetry C18 (4. 6 × 250mm，5μm) ，Shiseido C18 (4. 6 ×
250mm，5μm) ;对供试品溶液和标准品溶液用 2. 1 项下色
谱条件进样测定，记录色谱图，结果表明三根色谱柱保留
时间与峰形略有差异，但大豆苷的峰都能完全分离，分离
度达到 1. 5 以上，且所测得的大豆苷含量只是略有差异。
2. 8. 2 不同柱温考察 改变柱温，其他条件不变，用 2. 1
项下色谱条件进样测定供试品溶液 (产地昆明)，记录色谱
图，结果表明柱温在有变动时，测定结果不受大的影响，
20℃时出峰时间为 17. 321min，峰面积为 625. 16;30℃是出
峰时间为 14. 087min，峰面积为 627. 15;40℃时，出峰时间
为 14. 523min，峰面积为 634. 62。
2. 8. 3 不同仪器考察 选用不同品牌的三台高效液相色谱
仪:Agilent 1100，Waters 2695，Shimadzu LC 2010;用 2. 1
项下色谱条件进样测定，记录色谱图，结果表明在仪器的
品牌、型号有变动时，大豆苷的峰能够完全分离，且进样
浓度有小的波动时，测定结果不受大的影响，在仪器稳定
的情况下，仍可以准确进行定量测定。
2. 9 供试品溶液稳定性考察 取同一供试品溶液 (产地昆
明)，分别在 0h、2h、6h、12h照 2. 1 项下色谱条件进样测
定，记录色谱图，结果大豆苷含量 ＲSD 值为 1. 75%，表明
供试品溶液在 12h内稳定性良好。
2. 10 样品测定 取不同产地的样品，分别按“2. 3”项下方
法制备供试品溶液，分别进样 10μl，按“2. 1”项下色谱条件
测定，记录各成分的峰面积，以外标法计算样品中各成分的含
量，结果见表 4。三个产地食用葛药材中大豆苷含量分别为
1. 87% (香格里拉)，1. 12% (大理)，0. 84% (昆明)。
表 4 样品含量测定结果
采收地 药材量 (g)
大豆苷量
(ug)
大豆苷量平
均值 (ug /g)
大豆苷含量
(%)
香格里拉
0. 2027 3808. 2
3805. 0 1. 87
0. 2033 3801. 7
大理
0. 2052 2290. 7
2294. 8 1. 12
0. 2057 2298. 9
昆明
0. 2025 1690. 7
1678. 6 0. 84
0. 1954 1692. 8
3 讨论
实验结果表明，云南三个产地的食用葛中都含有一定
量的大豆苷，但含量有明显差异，产于大理和香格里拉的
含量都高于昆明，这从一个方面提示食用葛将来栽培的优
质产区可在滇西北遴选。
在笔者的研究中还发现，食用葛不含葛根素，与药典
规定的粉葛在成分上差异较大，是否能与粉葛混用值得考
证。如果食用葛作为地方习用药药用，则需新制定专门的
药材质量标准，本项研究的成果可为此提供可靠数据。此
外，我们还进行过食用葛水提物解酒作用和急性毒性方面
的研究，结果表明食用葛水提物有较明显的解酒作用，且
毒性较低，在将来的保健品开发中是值得注意的优质资源。
参考文献
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(收稿日期:2014. 07. 05)
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