全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2011，26(4)∶380 ～ 381
基金项目:国家教育部(206155)和青海科技厅(2006 － N － 141)项目资助
作者简介:卢永昌(1965—) ，男，陕西蓝田，教授，从事中藏药质量标准的研究工作。Email:qhlych@ 126． com
HPLC测定麻花艽地上和地下部分的 4 种有效成分
卢永昌1，贾丽红1，宋永朋2，王 欢1，林鹏程1
(1．青海民族大学化学与生命科学学院，青海 西宁 810007;2．青海省轻工业研究所有限责任公司，青海 西宁 810001)
摘要:目的 采用 HPLC法测定麻花艽地上和地下部位中马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量。方法 采用
Eclipse XOB － C18色谱柱(150 mm × 4． 6 mm，5μm) ;流动相为甲醇 －水(21∶79) ;流速 1 mL·min
－1;检测波长 254 nm;柱温
25 ℃。结果 马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的线性范围分别为 0． 08 ～ 6． 31 μg(r = 0． 9997)、0． 069 ～ 4． 12 μg
(r = 0． 9999)、0． 06 ～ 6． 23 μg(r = 0． 9998)、1． 32 ～ 7． 76(r = 0． 9999) ;平均回收率分别为 99． 7%(RSD = 2． 5%)、101． 2%
(RSD = 1． 9%)、102． 4%(RSD = 1． 6%)、100． 5%(RSD = 2． 2%)。结论 所建方法测定快速、结果准确;麻花艽地上部位可作
为主要的药源。
关键词:反相高效液相色谱;马钱苷酸;獐牙菜苦苷;龙胆苦苷;獐牙菜苷;麻花艽
中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2011)06 － 0380 － 02
Determination of four effective ingredients of Gentiana straminea ground and underground
parts by HPLC
LU Yong － chang1，JIA Li － hong1，SONG Yong － peng2，WANG Huan1，LIN Peng － cheng1
(1． School of Chemistry and Life Sciences，Qinghai University for Nationalities，Qinghai，Xining，810007 P． R． China;2． Qinghai Pro-
vincial Institute of Light Industry Limited Liability Company，Qinghai，Xining，810001 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To establish an HPLC method for the determination of loganic acid，swertiamaroside glycosides，gentiopicro-
side and swertiamar in ground and underground parts of Gentiana straminea． METHODS Eclipse XOB － C18(150 mm × 4． 6 mm，5
μm)column served as the solid phase，the mobile phase was methanol － water(21∶79)． The flow rate was 1 mL·min －1，the detection
wavelength was 254 nm，temperature was 25 ℃ ． RESULTS The linear range of loganic acid，swertiamaroside glycosides，gentiopicro-
side and swertiamarin were 0． 08 － 6． 31 μg(r = 0． 9997) ，0． 069 － 4． 12 μg(r = 0． 9999) ，0． 06 － 6． 23 μg(r = 0． 9998)and 1． 32 －
7. 76(r = 0． 9999) ，respectively． The average recovery were 99． 7% (RSD = 2． 5%) ，101． 2% (RSD = 1． 9%) ，102． 4% (RSD =
1. 6%)and 100． 5%(RSD = 2． 2%) ，respectively． CONCLUSION The method is rapid，accurate and reliable． Gentiana straminea
ground parts can be used as important sources of medicine．
Key words:RP － HPLC;Lganic acid;Swertiamaroside glycoside;Gentiopicroside;Swertiamarin;Gentiana straminea
CLC number:R917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2011)06 － 0380 － 02
麻花艽 Gentiana straminea为龙胆科龙胆属秦艽
组多年生草本植物，主要化学成分有马钱苷酸、獐牙
菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷等［1］。马钱苷酸、獐
牙菜苦苷有提高皮肤机能、促进毛发生长、抑制中枢
神经、镇痛和抗炎等作用;龙胆苦苷有促进胃液分
泌、抗原虫和抗炎作用［2］;獐牙菜苷适用于胃肠痉
挛、胃肠炎、肠蛔虫症、胆道蛔虫症、胆囊炎、胆石症
及其他胆道疾患引起的疼痛。现用 HPLC 法测定了
麻花艽地上及地下部位中上述 4 种成分的含量。
1 实验部分
1. 1 仪器与试药
1200 高效液相色谱系统(美国 Agilent)。马钱
苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷对照品(青
海普兰特藏药研究所) ;麻花艽于 2009 年 7 月采于
青海省不同地区，阴干后冷藏保存;水为娃哈哈纯净
水;其余试剂为分析纯。
1. 2 方法与结果
1. 2． 1 色谱条件 采用 Eclipse XOB － C18色谱柱
(150 mm × 4． 6 mm，5 μm) ;流动相为甲醇 － 水
(21∶79) ;流速 1 mL·min －1;检测波长 254 nm;柱温
25 ℃。该色谱条件下 4 种成分均被洗脱且达到基线
分离，所得色谱图见图 1。
1. 2． 2 溶液的制备 分别精密称取适量 4 种对照
品，以甲醇溶解，配成浓度分别为 0． 40 mg·mL －1马
钱苷酸、0． 84 mg·mL －1獐牙菜苦苷、0． 52 mg·mL －1
龙胆苦苷、0． 32 mg·mL －1獐牙菜苷的对照品贮备
液。分别精密称取 2． 0 g 供试品的根和茎叶，加入
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2011.04.023
15 mL甲醇，超声提取 30 min，过滤，滤渣重复上述
操作 2 次，合并滤液，定容至 50 mL。用 0． 45 μm滤
膜过滤，作为供试品溶液。
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A B C
0 20 40 0 20 40 0 20 40
t/min
图 1 对照品(A)、样品地上部分甲醇提取物(B)和样品地下部分甲
醇提取物(C)溶液的色谱图
Fig 1 Chromatograms of control solution (A)，methanol extracts
solution of sample ground (B) and solution of sample
underground parts (C)
1. 2． 3 线性关系的考察 精密量取 4 种对照品贮
备液，以甲醇配制 0． 08、0． 16、0． 24、0． 32、0． 40 mg·
mL －1马钱苷酸，0． 168、0． 336、0． 504、0. 672、0. 840
mg·mL －1獐牙菜苦苷，0． 104、0． 205、0. 312、0． 416、
0． 52 mg·mL －1龙胆苦苷，0． 064、0. 128、0． 192、
0. 256、0． 320 mg·mL －1獐牙菜苷的混合对照品系列
溶液，每次进样 10 μL，测定峰面积，4 种对照品的回
归方程见表 1。
1. 2 ． 4 精密度试验 依次取适量按“1. 2． 2”项方
表 1 4 种活性成分的线性方程及线性范围
Table 1 The linear equations and linear range of four effective
ingredients
活性成分 线性回归方程 线性范围 /μg r
马钱苷酸 Y = 1325． 9X － 98． 6 0． 080 － 6． 31 0． 9997
獐牙菜苦苷 Y = 1427． 7X － 159． 6 0． 069 － 4． 12 0． 9999
龙胆苦苷 Y = 3125． 8X － 9． 8 0． 060 － 6． 23 0． 9998
獐牙菜苷 Y = 297． 34X － 21． 5 1． 320 － 7． 76 0． 9999
法制备的 4 种对照品，组成混合对照品溶液，按
“1. 2. 1”项色谱条件，测定色谱峰的峰面积。计算
得 4 种对照品的 RSD 分别为 1． 08%、0． 96%、
1. 25%、0． 89%(n = 5) ，表明仪器精密度良好。
1. 2． 5 稳定性试验 量取适量的供试品溶液，按
“1. 2. 1”项色谱条件，分别在 0、2、4、6、8 h 时进样，
测定 4 种有效成分的峰面积。计算得 RSD 分别为
0． 98%、1． 25%、1. 19%、0． 87%(n = 5)。表明供试
品溶液在 8 h内稳定。
1. 2. 6 回收率试验 分别精密称取 1． 0 g 4 份已测
知含量的样品(青海玉树) ，按“1. 2. 2”项方法提取，
添加适量各种对照品溶液。按“1. 2. 1”项方法测得
马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和龙胆苦苷的平均
回收率分别为 99. 7%、101． 2%、102． 4%、100. 5%
(n = 5) ;RSD分别为 2. 5%、1． 9%、1． 6%、2． 2%。
1. 2. 7 样品的测定 取供试品溶液，按“1. 2. 1”项方
法进样，将测得的峰面积代入回归方程，结果见表 2。
表 2 麻花艽地上和地下部分中 4 种有效成分的含量(%，n =5)
Table 2 Contents of four effective ingredients from Gentiana straminea ground and underground parts(%，n =5)
采集地点 部位 马钱苷酸 獐牙菜苦苷 龙胆苦苷 獐牙菜苷
青海玉树 地上 1． 18 ± 0． 94 0． 55 ± 0． 10 4． 54 ± 1． 77 2． 39 ± 0． 29
根部 1． 49 ± 0． 97 0． 41 ± 0． 09 5． 65 ± 1． 47 1． 01 ± 0． 17
青海北山林场 地上 1． 76 ± 0． 76 0． 78 ± 0． 34 6． 59 ± 2． 70 1． 51 ± 0． 32
根部 2． 13 ± 0． 83 0． 59 ± 0． 29 7． 25 ± 2． 32 1． 08 ± 0． 39
青海泽库 地上 0． 98 ± 0． 46 0． 48 ± 0． 05 5． 21 ± 3． 07 1． 27 ± 0． 18
根部 1． 26 ± 0． 71 0． 40 ± 0． 09 6． 34 ± 2． 35 1． 14 ± 0． 25
青海祁连 地上 1． 38 ± 0． 76 0． 83 ± 0． 42 7． 13 ± 4． 78 0． 86 ± 0． 15
根部 1． 72 ± 1． 05 0． 71 ± 0． 09 8． 37 ± 1． 93 0． 71 ± 0． 16
青海玛沁 地上 0． 86 ± 0． 70 0． 62 ± 0． 16 6． 25 ± 2． 81 2． 63 ± 0． 50
根部 0． 93 ± 0． 40 0． 47 ± 0． 18 6． 98 ± 2． 79 1． 97 ± 0． 63
2 讨论
《中国药典》［3］采用乙腈 －水作为流动相，文中
使用甲醇 －水时仍能确保 4 种有效成分达到基线分
离。4 种活性成分在麻花艽的不同部位含量不一，
根部中马钱苷酸和龙胆苦苷的含量较高，地上部分
中獐牙菜苦苷和獐牙菜苷的含量比根部略高。各样
品中地上部分龙胆苦苷的含量最低的是 4． 54%、马
钱苷酸的最低含量为 0． 86%，总量已超过药典规定
的 2． 5%以上。由此可知麻花艽地上部位作为藏医
用药的新药源完全具有可行性。
参考文献:
［1］ 纪兰菊，孙洪发，丁经业．青藏高原四种龙胆植物化学成分初
步研究［J］．高原生物学集刊，1992，11:113 － 115．
［2］ 孙文基，绳金房．天然活性成分简明手册［M］． 北京:中国医
药科技出版社，1998:539，256，367．
［3］ 中华人民共和国国家药典委员会． 中国药典［S］． 北京:中国
医药科技出版社，2010:253 － 254．
收稿日期:2010 － 11 － 30
183第 6 期 卢永昌，等。HPLC测定麻花艽地上和地下部分的 4 种有效成分