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苗药观音草渗漉提取工艺的研究



全 文 :Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
第17卷 第7期
Vol.17 No. 7
2011年 7月
July.2011
苗药观音草渗漉提取工艺的研究
刘 亮1,陈东林1,杜 江2,罗海明1,姚 丽1
(1.遵义医药高等专科学校,贵州 遵义 563002;2.贵阳中医学院,贵州 贵阳 550002)
[摘要] 目的:优化观音草总皂苷的渗漉提取条件。方法:采用正交试验法,以提取液中总皂苷的含量为考察指标。结果:
试验设计3因素中渗漉速度有明显影响,最佳的提取工艺为:10倍量50%乙醇,0.6 mL/min的渗漉速度。结论:本法提取总皂苷
得率高,经济、可行。
[关键词] 观音草;渗漉;提取工艺
[中图分类号] R284.2 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X(2011)07-0073-02
Miao medicine Reineckia carnea(Andr.)Kunth permeability capsules extraction process
research
Liu Liang1, Chen Donglin1,2, Du Jiang Luo Haiming1, Yao Li1
(1.Zun Yi pharmaceutical college school, Gui Zhou Zun Yi 563002;
2.Gui Yang, Gui Zhou institute of traditional Chinese medicine Gui Yang 550002)
[Abstract] Objective: To optimize Reineckia carnea(Andr.)Kunth total saponins extraction conditions of permeability cap-
sules. Methods: using orthogonal test method, to extract the content of total saponins investigation of index. Results: the test
design, 3 factors of permeability capsules have obvious influence on the speed, the best extraction technology for: 10 times
the amount 50% ethanol, 0.6 mL/min capsules of permeability velocity. Conclusion: this law total saponins extraction yield,
high economic and feasible.
[Key words] Reineckia carnea(Andr.)Kunth; Capsules permeability; Extraction technology
观音草Reineckia carnea(Andr.)Kunth为百合科植物吉祥
草的带根全草,是一味著名的苗药,苗医药理论认为其药性
为性冷,质征为气微味甜,入热经,走肺、肝二架,表、中、里三
关。文献查阅可知观音草中有效成分为皂苷类成分,本文以
渗漉提取法对观音草中总皂苷进行提取,以正丁醇萃取法对
其进行纯化,以薯蓣皂苷为对照品对其进行含量测定,旨在
为渗漉提取法提取观音草中总皂苷在工业生产中的应用积
累参数,为观音草的进一步开发、利用提供试验数据。
1 仪器与试药
UV75-18可见分光光度计(天津市拓普仪器有限公司);
Senco R系列旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司);FY130型
药物粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司);DKS-26型电热恒
温水浴锅(宁波江南仪器厂)。
薯蓣皂苷对照品购于上海华壹生物科技有限公司(批
号:19057-60-4);观音草药材采集于贵州遵义,经遵义医药
高等专科学校张学愈副教授鉴定为百合科植物观音草Rei-
neckia carnea(Andr.)Kunth;其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 正交试验设计 本试验以观音草中总皂苷的含量为指
标,选择渗漉速度、乙醇浓度、乙醇用量3因素为考察因素[1-3],
采用L9(34)正交设计表进行试验。(见表1)
表1 正交试验因素水平表
渗漉速度(mL/min) 乙醇浓度(%) 乙醇用量(倍)
A B C
1 0.3 50 10
2 0.6 70 12
3 0.9 90 14
2.2 供试品溶液的制备 称取观音草药材粗粉25 g,共9份,
分别用相应浓度的乙醇浸润药材2 h后装柱,浸泡12 h,按正
交表L9(34)设计安排试验,收集渗漉液浓缩至干,加入蒸馏水
溶解,并转移至500 mL的容量瓶中加蒸馏水稀释至刻度,摇
匀,准确吸取10 mL于分液漏斗中,用石油醚分6次萃取(15、
10、10、10、10、10 mL),弃去石油醚液,水液再用水饱合正丁
醇分4次萃取(15、10、10、10 mL),正丁醇萃取液用正丁醇饱
和的水20 mL洗涤,减压回收正丁醇至干,残渣用甲醇溶解并
定容于25 mL容量瓶中,作为供试品溶液[4]。
2.3 对照品溶液的制备 精密称取薯蓣皂苷对照品1.2 mg,
置于10 mL容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,作为
对照品溶液。
2.4 线性关系考察 分别精密移取薯蓣皂苷对照品溶液* 基金项目:贵州省教育厅自然科学研究项目 [黔教科
(2007)074号]
水平\因素
!!!!!!
!!!!!!

方药研究
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2011.07.001
第17卷 第7期
Vol.17 No.7
2011年 7月
July.2011Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
A B C D
0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0和1.2 mL置于10 mL具塞试管内,挥干
甲醇,再分别加入5%的香草醛冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸
0.8 mL,摇匀,密塞,60℃水浴显色15 min,取出后立即用冰水
冷却5min,再加入5mL冰醋酸稀释,摇匀,静置10min,于460 nm
处测定其吸光度[5]。以吸光度(A)为纵坐标,质量浓度(C)为横坐
标进行线性回归。结果表明,薯蓣皂苷在4-24 μg/mL与吸光
度呈良好的线性关系。回归方程为A=0.019121C+0.006133,r=
0.9995。
2.5 供试品溶液的测定 分别精密吸取供试品溶液0.2 mL,
按“2.4”项下的操作方法显色,于460 nm处作含量测定,试验
设计及数据处理结果见表2,方差分析见表3。
表2 L9(34)正交试验结果
因素 观音草总皂
试验号 苷含量(%)
1 1 1 1 1 2.22
2 1 2 2 2 2.42
3 1 3 3 3 2.38
4 2 1 2 3 2.78
5 2 2 3 1 3.06
6 2 3 1 2 2.72
7 3 1 3 2 2.49
8 3 2 1 3 2.47
9 3 3 2 1 2.63
K1 2.340 2.497 2.470 2.637
K2 2.853 2.650 2.610 2.543
K3 2.530 2.577 2.643 2.543
R 0.513 0.153 0.173 0.094
表3 方差分析表
因素 偏差平方和 自由度 F比值 F临界值 显著性
A 0.404 2 23.765 19.000 P<0.05
B 0.035 2 2.059 19.000
C 0.051 2 3.000 19.000
D(误差) 0.017 2 1.000 19.000
2.6 结果与方差分析 由表2分析可知最佳的提取工艺为
A2B2C3。由表3方差分析可知,各因素对总皂苷得率的影响大
小顺序为A﹥C﹥B,结果显示渗漉速度对总皂苷的得率差异
有统计学意义,其余两因素差异均无统计学意义。因此,考虑
节约成本等实际情况,将最佳提取工艺调整为A2B1C1,即渗漉
速度为0.6 mL/min、用10倍量50%乙醇渗漉提取。
3 讨 论
渗漉提取法具有提取完全、不需要加热、不易破坏有效
成分、节约能耗等优点。从理论上考虑乙醇用量越大提取率
越高,试验结果也证明了此点,但方差分析没有显著性,故乙
醇用量10倍量即可。总皂苷的纯化先用石油醚萃取是为了除
去脂溶性的杂质,再应用皂苷在含水正丁醇中溶解度较大的
性质进行萃取,进而除去水溶性的杂质,得到纯化的总皂苷。
本研究结果表明只有渗漉速度对总皂苷的含量有显著
性影响,故试验的最佳工艺为药材用相应浓度的乙醇浸润药
材2 h后装柱,浸泡12 h,渗漉速度0.6 mL/min、用10倍量50%乙
醇渗漉提取,所得提取液用正丁醇萃取法纯化。本工艺优点
总皂苷提取率高、经济、可用于工业化生产。
参考文献
[1] 王丹,龚涛,孙冰,等.红参循环渗漉提取工艺的优化研究
[J].四川大学学报:医学版,2004,35(1):110-112
[2] 谭朝阳,尤昭玲,袁宏佳.三七渗漉提取工艺的研究[J].中
国中医药信息杂志,2010,17(4):51-52
[3] 闫光军,陈建,邵明杰.渗漉法提取三七总皂苷的工艺研究
[J].山东医药工业,2003,22(5):4-5
[4] 丁宁,杜江,贾宪生.黄褐毛忍冬总皂甙的含量测定[J].贵
阳中医学院学报,2001,23(2):39-40
[5] 王旭,舒国伟.蒺藜甾体皂苷的测定[J].食品研究与开发,
2006,27(7):171-173
(收稿日期:2011-03-25 编辑:李海洋)
国家中医药局印发《农村中医药工作指南》
明确农村中医药工作目标
国家中医药管理局近日印发《农村中医药工作指南》(试行),指导各级卫生、中医药行政管理部门和县级中医医
院、基层医疗卫生机构更好地开展农村中医药工作。
《指南》提出,要将中医药工作纳入县经济社会发展规划、卫生事业发展规划和县政府年度工作目标,制定本县
中医药事业发展规划和协调机制,中医药事业费要实行财政预算单列,并占全县卫生总事业费10%以上;县卫生局
要设立中医药工作管理机构或配备专职干部,建立县中医医院、县综合医院、乡镇卫生院、村卫生室中医药服务工作
考核机制。要充分发挥中医药在医改中的作用,制定提高补偿比例等鼓励政策,引导参合农村居民选择应用中医药
服务。
[来源:中国中医药报2011-07-13]
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