全 文 ：表 3 样品溶出度测定结果
批号 溶出度 /% 平均值 /%
20070601 83. 4 88. 1 89. 6 90. 7 95. 0 85. 3 88. 7
20070602 89. 4 89. 3 97. 8 93. 4 92. 2 89. 9 92. 0
20070603 95. 7 92. 3 91. 2 92. 4 93. 1 84. 8 91. 6
根据中试 3 批样品溶出度测定结果，结合中药的实际
情况，暂定本品总黄酮的溶出度限度为 70%。
5 讨论
5. 1 中药溶出度的研究尚处于摸索阶段，主要由于中药成
分复杂，有效成分不明确，有效成分和无效成分之间互相
干扰，使药物的溶出不规律。溶出介质的选择必须以接近
消化道内体液环境为原则，消化道内体液环境通常采用以
下几种溶出介质来涵盖［9］: (1)pH 值 1 ～ 3 的盐酸溶液;
(2)不同浓度的醋酸盐或磷酸盐缓冲溶液; (3)水。而中
药制剂 (有效成分为碱性的除外) ，很难在接近消化道内
体液的环境中得到合理的溶出量，这时可以考虑加入一定
量的表面活性剂来改善溶出，主要依据是人体内胃肠道表
面存在一定浓度的天然表面活性剂。
5. 2 口服固体制剂的核心就是生物利用度，评价生物利用
度最直接的手段是直接抽取人体血样，测定血药浓度，实
际生活研究中很难实现，而溶出度试验已成为证明药物体
内释放特性的一种简单、廉价而不失严谨的实验室检测方
法。中药成分复杂，与西药纯度较高的单体成分不同，溶
出机制复杂，其他成分对主要有效成分的溶出有较大的影
响。而溶出度是反映药品质量的关键指标，随着我国医药
事业的发展，溶出度的研究必定会越来越深入，甚至有专
家［10］提出“多条溶出曲线就是一个固体制剂的指纹图谱”!
由此观之，中药未来的溶出度研究 “任重而道远”!另外
本文成文时还参考了相关文献 ［11-14］。
参考文献:
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究［D］． 武汉:湖北中医学院，2007．
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中五味子醇甲的含量［J］． 民营科技，2011，(3) :98-100．
苗药观音草总皂苷的大孔树脂纯化工艺研究
刘 亮1， 杜 江2， 陈东林1， 丁丽娜1， 冯 华3
(1. 遵义医药高等专科学校，贵州 遵义 563002;2. 贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002;3. 遵义市药品检
验所，贵州 遵义 563000 )
收稿日期:2011-07-18
基金项目:贵州省教育厅自然科学研究项目 ［黔教科 (2007)074 号］
作者简介:刘 亮 (1981—) ，男，硕士生，从事中药、民族药化学成分及质量研究。Tel:18212120284，E-mail jikman1@ 163． com
摘要:目的 优选观音草总皂苷的大孔树脂纯化工艺。方法 采用 UV法考察 5 种大孔树脂对观音草总皂苷的吸附及
解析能力，选出最优树脂，确定最佳纯化工艺条件。结果 HPD100 型大孔树脂对观音草总皂苷吸附及解析能力较强，
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上样吸附时间 2h，上样及洗脱体积流量为 1. 5 BV /h，洗脱溶剂为 70%乙醇，洗脱体积 3 BV。结论 该工艺洗脱率稳
定，平均达到 80. 21% (n = 3) ，平均总皂苷得率 2. 11%。
关键词:观音草;总皂苷;大孔树脂
中图分类号:R284. 2 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2012)10-2034-04
观音草 Reineckia carnea (Andr．)Kunth 为百合科植物
吉祥草的带根全草，又名结实兰，竹叶草，佛顶珠，小青
胆，是一味著名的苗药。苗医药理论认为其药性为性冷，
质征为气微味甜，入热经，走肺、肝二架，表、中、里三
关。治疗肺热咳嗽、跌打损伤、疮毒等。查阅文献发现观
音草在工艺优选方面的研究极少，难以进行深入开发。因
此，建立观音草中总皂苷的提取纯化工艺具有十分重要的
现实意义。本实验探讨了不同型号大孔树脂对分离纯化观
音草总皂苷的影响，在此基础上优选出总皂苷的最佳纯化
工艺。
1 仪器与试药
UV75-18 可见分光光度计 (天津市拓普仪器有限公
司) ;DHG 90AOA型电热恒温鼓风干燥箱 (宁波江南仪器
厂) ;Senco R系列旋转蒸发仪 (上海申生科技有限公司) ;
FY130 型药物粉碎机 (天津市泰斯特仪器有限公司) ;
DKS-26 型电热恒温水浴锅 (宁波江南仪器厂)。
薯蓣皂苷对照品购于上海华壹生物科技有限公司 (批
号:19057-60-4) ;观音草药材采集于贵州遵义，经遵义医
药高等专科学校张学愈副教授鉴定为百合科植物观音草 Re-
ineckia carnea (Andr．)Kunth;大孔树脂 HPD100，HPD200A，
HPD300，HPD700，D101 (沧州宝恩化工有限公司) ;其它
试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 观音草总皂苷定量分析方法的建立及样品溶液预处理
方法 精密称取薯蓣皂苷对照品 1. 2 mg，置于 10 mL 量瓶
中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
分别精密移取薯蓣皂苷对照品溶液 0. 0、0. 2、0. 4、0. 6、
0. 8、1. 0、1. 2 mL置于 10 mL 具塞试管内，挥干甲醇，再
分别加入 5% 的香草醛-冰醋酸溶液 0. 2 mL 和高氯酸
0. 8 mL，摇匀，密塞，60 ℃水浴显色 15 min，取出后立即
用冰水冷却 5 min，再加入 5 mL 冰醋酸稀释，摇匀，静置
10 min，于 460 nm处测定其吸光度。以吸光度 (A)为纵
坐标，质量浓度 (C)为横坐标进行线性回归。结果表明，
薯蓣皂苷在 4 ～ 24 μg /mL 与吸光度呈良好的线性关系。回
归方程为 A = 0. 019 121C + 0. 006 133，r = 0. 999 5［1］。
大孔树脂分离工艺中所得的观音草总皂苷洗脱流
份，回收乙醇至干，用蒸馏水溶解并定容至 100 mL，准
确吸取 10 mL 于分液漏斗中，用水饱合正丁醇分 4 次萃取
(15、10、10、10 mL) ，正丁醇萃取液用正丁醇饱和的水 20
mL洗涤，减压回收正丁醇至干，残渣用甲醇溶解并定容于
25 mL量瓶中，按上述紫外分光光度法进行总皂苷的含有量
测定。
2. 2 供试液的制备 称取观音草药材粗粉 50 g，用 8 倍量
70%乙醇加热回流提取 2 次，每次 1. 5 h，合并提取液回收
乙醇至干，加蒸馏水溶解并定容至 200 mL，用石油醚分 6
次萃取 (300、200、200、200、200、200 mL) ，弃去石油
醚液，水溶液过滤，定容至 500 mL。
2. 3 大孔吸附树脂的预处理 分别称取 5 种型号 (D101，
HPD100，HPD200A，HPD300，HPD700)的大孔吸附树脂用
95%乙醇浸泡 24 h，装柱，用 95%乙醇洗至 1 mL洗脱液与
3 mL蒸馏水混合澄清为止，再用蒸馏水洗至无醇，备用。
2. 4 不同型号大孔树脂的静态吸附及解析的研究 分别称
取经预处理的各型号的树脂 0. 5 g 置于锥形瓶中，加入供
试液 30 mL，每隔 10 min 振摇 30 s，持续 2 h，静置 24 h
后，抽滤，得吸附后的滤液。将吸附后的树脂置于锥形瓶
中，加入 70%乙醇 30 mL，其余操作同上，得解吸后的滤
液。按 2. 1 项下操作并进行总皂苷的含有量测定，计算树
脂对总皂苷的静态饱和吸附量，洗脱量及洗脱率［2］。结果
见表 1。
表 1 5 种树脂静态饱和吸附量及静态洗脱率
树脂型号
饱和吸附量 /
(mg·g － 1)
洗脱量 /
(mg·g － 1)
洗脱率 /
%
D101 79. 27 58. 64 73. 98
HPD100 85. 55 72. 76 85. 05
HPD200A 85. 55 69. 62 81. 38
HPD300 80. 84 69. 62 86. 12
HPD700 56. 52 51. 42 90. 98
由表 1 结果可知，各树脂饱和吸附量，洗脱量及洗脱
率相差较大，综合考虑 3 个因素，后续实验确定选择
HPD100 型大孔吸附树脂进行分离纯化观音草总皂苷的
工作。
图 1 HPD100 大孔吸附树脂上样吸附时间考察
2. 5 HPD100 大孔吸附树脂的上样吸附时间考察 分别准
确称取 0. 5 g预处理过的 HPD100 大孔吸附树脂置于 6 个
100 mL锥形瓶中，加入供试液 30 mL，摇匀，分别静止吸
附 0. 5、1、2、4、6、8 h，过滤，滤液按 2. 1 项下操作并
进行总皂苷的含有量测定，计算各吸附液中总皂苷的吸附
量达饱和吸附量的比率。结果见图 1。
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如图 1 所示，当吸附时间达到 8 h 时，树脂静态吸附
量达到 73. 79 mg，达饱和吸附量的 86. 25%。吸附时间在
2 h之前，观音草总皂苷的吸附率提高较明显，而 2 h 之后
则无明显增加，故确定上样吸附时间定为 2 h，可在较短时
间内达到较高的吸附效率［3］。
2. 6 HPD100 大孔吸附树脂的动态吸附量的考察 准确称
取 4 g预处理过的 HPD100 大孔吸附树脂，共 3 份，湿法装
柱。准确吸取供试液 160 mL，上样预吸附 2 h 后，以
3 BV /h的体积流量进行吸附，吸附结束后，再用蒸馏水
8BV以 5BV /h的体积流量洗脱至近无色，合并过柱液及水
洗液并定容至 250 mL，按 2. 1 项下操作并进行总皂苷的含
有量测定，结果平均动态吸附容量为 55. 33 mg /g (n = 3) ，
RSD为 1. 22%。
2. 7 HPD100 大孔吸附树脂洗脱溶剂浓度的考察 准确称
取 4 g预处理过的 HPD100 大孔吸附树脂，湿法装柱。准确
吸取供试液 80 mL，上样预吸附 2 h，之后，以 3 BV /h 的
体积流量进行吸附，吸附结束后，再用蒸馏水 8 BV 以 5
BV /h的体积流量洗脱至近无色，再依次用 15%、30%、
50%、70%、90%乙醇各 4 BV 洗脱，洗脱体积流量为 3
BV /h，分别收集各浓度段洗脱液，按 2. 1 项下操作并进行
总皂苷的含有量测定，计算洗脱量及洗脱率。结果见表 2。
表 2 洗脱溶剂浓度考察
含乙醇量 /% 洗脱量 /mg 洗脱率 /%
15 11. 72 6. 97
30 39. 96 23. 77
50 94. 09 55. 98
70 22. 31 13. 27
90 0 0
由表 2 可以看出，观音草总皂苷主要集中在 50%乙醇
洗脱液中，而 70%乙醇洗脱液中总皂苷相对较少，从节约
成本考虑，可以选择 50%的乙醇进行洗脱，但实际操作过
程中 50%乙醇是否能有效地将总皂苷完全洗脱下来，还应
比较 50%及 70%乙醇的洗脱效率。
2. 8 HPD100 大孔吸附树脂洗脱溶剂用量的考察 准确称
取 4 g预处理过的 HPD100 大孔吸附树脂，共 2 份，湿法装
柱。准确吸取供试液 80 mL，上样预吸附 2 h 后，以 3
BV /h的体积流量进行吸附，吸附结束后，再用蒸馏水 8 BV
以 5 BV /h的体积流量洗脱至近无色，再分别选用 50%及
70%乙醇以 3 BV /h的体积流量洗脱 6 BV，每 1 BV 收集 1
份，按 2. 1 项下操作并进行总皂苷的含有量测定，计算洗
脱量及洗脱率。结果见表 3。
表 3 洗脱溶剂用量的考察
乙醇用
量 /BV
50%乙醇洗
脱量 /mg
70%乙醇洗
脱量 /mg
50%乙醇洗
脱率 /%
70%乙醇洗
脱率 /%
1 5. 83 8. 18 3. 96 5. 34
2 111. 34 135. 66 75. 63 88. 55
3 21. 13 9. 36 14. 35 6. 11
4 6. 22 0 4. 23 0
5 2. 69 0 1. 83 0
6 0 0 0 0
由表 3 可以看出，70%乙醇洗脱用量达到 3 BV时，即
可将总皂苷完全洗脱下来，而 50%乙醇需要 5 BV 才能将
总皂苷完全洗脱下来，故综合表 2 及表 3 确定洗脱含乙醇
量为 70%，洗脱用量为 3 BV。
2. 9 HPD100 大孔吸附树脂吸附及洗脱速度的考察 准确
称取 4 g预处理过的 HPD100 大孔吸附树脂，共 5 份，湿法
装柱。准确吸取供试液 80 mL，上样预吸附 2 h，吸附完成
后，用蒸馏水 8 BV 以 5 BV /h 的体积流量洗脱至近无色，
再用 70%乙醇 3 BV 洗脱，体积流量 (吸附及解吸附)分
别选用 1. 5、3、5、7、9 BV /h，收集 70%乙醇洗脱液，按
2. 1 项下操作并进行总皂苷的含有量测定，计算洗脱量及
洗脱率。结果见表 4。
表 4 吸附及洗脱体积流量的考察
体积流量 / (BV·h －1) 洗脱量 /mg 洗脱率 /%
1. 5 178. 76 79. 82
3 152. 08 67. 90
5 126. 20 56. 35
7 119. 14 53. 20
9 106. 58 47. 59
由表 4 可以看出，随着体积流量的增加，洗脱率有明
显的降低，从 79. 82%逐渐降低至 47. 59%，因此片面增加
体积流量并不能提高总皂苷的洗脱效率，应选择 1. 5 BV /h
较为适宜。
2. 10 工艺验证实验 准确称取 4 g预处理过的 HPD100 大
孔吸附树脂，共 3 份，按以上工艺优化实验结果进行实验
并按 2. 1 项下操作进行总皂苷的含有量测定，计算洗脱量、
洗脱率、总皂苷得率。结果见表 5。
表 5 工艺验证实验
编号 加入量 /mg 洗脱量 /mg 洗脱率 /% 平均洗脱率 /% 得率 /% 平均得率 /% RSD /%
1 210. 16 170. 13 80. 95 2. 13
2 210. 16 166. 99 79. 46 80. 21 2. 09 2. 11 0. 93
3 210. 16 168. 56 80. 21 2. 11
注:总皂苷得率 =总皂苷质量 /药材质量 × 100%
由表 5 可知，70%乙醇流分中总皂苷的洗脱率稳定，
平均达到 80. 21% (n = 3) ，平均总皂苷得率 2. 11%。因此
该工艺较为稳定，洗脱率较高，可以用于工业化生产。
3 讨论
大孔树脂在装柱前应当按预处理方法处理好，否则会
影响分离效果;同时还应注意湿法装柱时应尽量将气泡除
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去，以免柱子出现断层;加入供试液时，应缓缓加入，防
止树脂冲起，影响分离效果。由于皂苷具有很强的发泡性，
故在浓缩过程中应时刻注意，避免浓缩液冲出，影响实验
结果的准确性。
目前采用大孔吸附树脂技术分离、纯化药材皂苷类有
效部位的研究较多［4-12］。本实验在参考文献的基础上，通
过一系列工艺参数的优化研究，首次建立起大孔吸附树脂
分离纯化观音草中总皂苷的工艺路线，其具体工艺参数为:
选用 HPD100 型号大孔吸附树脂装柱，上样吸附时间为2 h，
采用 70%乙醇 3 BV 进行洗脱，体积流量为 1. 5 BV /h。通
过验证实验证实，该工艺路线稳定可行，可为观音草的生
产应用提供可靠的理论依据。
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活血消瘿片水提液的澄清工艺研究
胡俊杰1， 肖 伊2， 吕秋霞1， 郑国华1*
(1. 湖北中医药大学，湖北 武汉 430065;2. 孝感市南区食品药品监督管理局，湖北 孝感 432300)
收稿日期:2011-07-25
作者简介:胡俊杰 (1984—) ，男，硕士，从事中药新制剂、新剂型的研究。Tel:13407126284，E-mail:Hero0712@ 163． com
* 通信作者:郑国华 (1964—) ，男，研究员，博士，从事中药新制剂、新剂型的研究。Tel: (027)62101102，E-mail:zgh1227@
sina． com
摘要:目的 优选活血消瘿片水提液最佳澄清工艺。方法 通过对浸膏得率和苦杏仁苷含有量的测定，比较了乙醇沉
淀法和壳聚糖澄清技术 2 种澄清工艺的差异。结果 2 种澄清工艺对 2 个指标均有不同程度的影响。壳聚糖澄清技术
能使浸膏得率降至 17%左右，有效成分保留率在 90%以上，且溶液澄清;乙醇沉淀法能使浸膏得率降至约 13%，有
效成分保留率在 80%。结论 壳聚糖澄清技术可作为活血消瘿片水提液的澄清工艺。
关键词:活血消瘿片;澄清工艺;苦杏仁苷;壳聚糖
中图分类号:R944. 4 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2012)10-2037-04
活血消瘿片是湖北省中医院根据国家名老中医陈如泉
教授的经验方研制而成的医院制剂，由桃仁、莪术、柴胡、
王不留行、猫爪草等八味中药组成，具有活血通络、消瘿
化结之功效，临床上主要用于结节性甲状腺肿［1］。为将其
开发成现代中成药，有效控制该制剂的质量，保证其临床
疗效，减少服用量，本试验以浸膏得率和苦杏仁苷含有量
为评价指标，对活血消瘿片水提液澄清工艺进行了研究。
1 仪器与试药
Agilent1100 型高效液相色谱仪 (四元泵、紫外检测器
及配套色谱工作站) ;ZK072 型电热真空干燥箱 (上海市
仪器试验总厂) ;Mettler-Toledo AG285 型分析天平 (Mett-
ler-ToledoGmbH，Laboratory＆ Weighing Technologies，Switzer-
7302
2012 年 10 月
第 34 卷 第 10 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
October 2012
Vol． 34 No． 10