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垂盆草颗粒中异鼠李素的 HPLC测定方法研究
汪正宇(安徽省宿州市食品药品检验所 宿州 234000)
摘要:目的 建立垂盆草颗粒中异鼠李素的 HPLC的测定方法，为制定该制剂质量标准中定量测定方法及限度提供依据。方法 色谱柱:Sun-
fire– C18(4. 6mm ×150mm，5μm)流动相:以甲醇-0. 4%磷酸溶液(50∶ 50);流速:1. 0mL·min －1，检测波长:360nm，柱温:25℃，进样量:10μL。
结果 异鼠李素的线性范围为 12. 39 ～ 154. 94μg，平均加样回收率(n = 6)分别为 99. 26%、99. 33%和 99. 10%，ＲSD为 0. 77%。结论 该方法
简单、快速、结果准确，重现性好，为垂盆草颗粒中异鼠李素的测定提供可靠的方法。
关键词:垂盆草颗粒;异鼠李素;HPLC
中图分类号:Ｒ969. 4 文献标识码:B 文章编号:1006-3765(2015)-10-0509-0034-03
Studies on the Isohamnetin in Stringy Stonecrop Herb Granules by HPLC
WANG Zheng-yu(Suzhou Institute for Food ＆Drug Control，Suzhou 234000，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To establish a method for determing isohamnetin in Stringy Stonecrop Herb Granules
by HPLC. METHODS The HPLC method was carried out on Agilent C18 column(4. 6mm × 150mm，5μm)，The
mobile phase was methanol-0. 5% phosphate(50∶ 50) ;The flow rate was 1. 0mL·min －1，The detection wavelength
was at 360nm，The column temperature was set at 25℃，and 10μL injection volumn. ＲESULTS There was a good
linear relationship when isohamnetin were in the range of 12. 39 ～ 154. 94μg. The average recoveriy was 99. 10%
·43·
海峡药学 2015 年 第 27 卷 第 10 期
. ＲSD were 0. 77%. CONCLUSION The method is simple in operation，high in sensitivity and good in reproduc-
ibility，and can be used for the determination the isohamnetin in Stringy Stonecrop Herb Granules by HPLC.
KEY WOＲDS:Stringy Stonecrop Herb Granules;Isohamnetin;HPLC
垂盆草(Sedum sarmentosum Bunge)为景天科植物，全草
入药，清热解毒，治痈肿、带状疱疹、毒蛇咬伤、烫伤、烧伤，也
是治疗肝炎的有效药物。化学成分研究表明，从垂盆草中分
离并鉴定的化合物主要有黄酮及其苷、三萜、甾醇、生物碱、氰
苷、氨基酸、糖类等。垂盆草颗粒是由垂盆草的新鲜全草经提
取、制粒制备而成的中成药，具有清利湿热、降低谷氨酸氨基
转移酶的作用，用于清热解毒，活血利湿，急慢性肝炎湿热瘀
结证〔1，2〕。为全面控制药品质量，我们结合参考文献〔3 ～ 5〕，对
垂盆草颗粒中黄酮类化合物中的化学成分进行了研究，建立
异鼠李素含量测定方法，考察该药活性成分，以便控制药品质
量。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 DIONEX UltiMate 3000 系列(SＲD-3400A 分析
泵、WPS-3000 自动进样器、TCC-3000SD柱温箱、VDW-3000 检
测器);工作站:Chromeleon Dionex 版本 7. 1. 2. 1478;色谱
柱:SunFire ODS C18(150mm × 4. 6mm，5μm);KQ-300DE 型数
控超声波清洗器(江苏省昆山超声仪器有限公司);梅特勒
AB-135S型电子天平(D =0. 01mg)。
1. 2 试药 垂盆草颗粒(批号:120914、130115、130701，上海
海虹实业(集团)巢湖今辰药业有限公司);异鼠李素(批号:
110860-201109)，对照品来自中国药品生物制品检定院;甲醇
(色谱纯，美国 Tedia公司);水(自制纯化水)。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 流动相:以甲醇-0. 4%磷酸溶液(50∶ 40);流
速:1. 0mL·min －1，检测波长:360nm，柱温:25℃，进样量:
10μL。
2. 2 对照品溶液的制备 取异鼠李素对照品适量，精密称
定，加甲醇制成每 1mL含 5μg的溶液，即得。
2. 3 供试品溶液的制备 取垂盆草颗粒适量，精密称定，精
密加入甲醇-25%盐酸溶液(4∶ 1)混合溶液 25mL，称定重量，
加热回流 1h，放冷，再称定重量，用甲醇-25%盐酸溶液(4∶ 1)
混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2. 4 阴性供试品溶液的制备 取缺异鼠李素的阴性样品，按
2. 3 项下制得缺车前子阴性供试品溶液。
2. 5 阴性干扰试验 取对照品溶液、供试品溶液和阴性供试
品溶液各 10μL，依上述色谱条件测定，结果显示阴性无干扰
(见图 1)。
2. 6 线性关系的考察 精密量取 2. 2 项下的对照品溶液
2μL，5μL，10μL，15μL，20μL，25μL，注入高效液相色谱仪中，
记录色谱图，以对照品进样量为横坐标(X)、峰面积积分值为
纵坐标(Y)，求得回归方程:异鼠李素 Y = 3908. 2X － 16478，
Ｒ2 = 0. 9999。结果表明，异鼠李素的进样量在 12. 39 ～
154. 94μg范围内与峰面积分值呈良好的线性关系。
图 1 对照品(A)、样品(B)和阴性样品(C)HPLC色谱图
2. 7 稳定性试验 取供试品溶液，分别在 0，2，4，6，8，10h进
样，取 10μL注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定。结
果异鼠李素峰面积的 ＲSD 为 1. 9%(n = 5)，表明供试品 10h
内稳定。
2. 8 精密度试验 取混合对照品溶液 10μL，连续进样 6 次，
按上述色谱条件测定峰面积。结果，异鼠李素峰面积的 ＲSD
为 0. 6%(n = 6)，表明仪器精密度良好。
2. 9 加样回收率试验 取已知含量的垂盆草颗粒(批号
130115)取 6 份，各加入一定量的异鼠李素对照品，依法测定
并计算回收率(见表 1)。
表 1 异鼠李素回收率测定结果 (n = 6)
编号 取样量(g)
样品中
含量
(mg)
加入量
(mg)
测出
总量
(mg)
回收率
(%)
平均
回收率
(%)
ＲSD
(%)
1 1. 0723 0. 2632 0. 2832 0. 5460 99. 87 99. 10 0. 77
2 1. 0832 0. 2454 0. 3102 0. 5515 98. 31
3 1. 0723 0. 2580 0. 3952 0. 6508 99. 05
4 1. 0721 0. 2602 0. 4225 0. 6777 98. 08
5 1. 2364 0. 2613 0. 4075 0. 6683 99. 81
6 1. 0812 0. 3406 0. 3125 0. 6512 99. 45
2. 10 样品测定 取 3 批垂盆草颗粒，按 2. 3 项下制备供试
品溶液，依法测定，记录色谱图，按外标法计算 3 批样品含量
(见表 2)。
·53·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 27 No. 10 2015
表 2 样品的测定结果 (n = 3)
批号 异鼠李素含量 /(mg·g － 1)
120914 0. 2945
130115 0. 2815
130701 0. 2612
3 讨论
本实验所采用的液相色谱条件和样品配制方法都参考
《中国药典》一部中垂盆草药材〔6〕项下方法。在选择样品提
取方法时，作者先后采用超声、萃取和回流法分别进行试验，
通过对比试验结果，可以得出回流方法重复性高，提取相对完
全，所以本文采取回流法提取样品。
垂盆草中含有垂盆草苷、黄酮类、甾醇类和三萜类、有机
酸、氨基酸等化合物，其中具有保肝降酶作用的活性成分主要
为黄酮类和垂盆草苷类。而槲皮素、山奈素和异鼠李素是黄
酮类主要化学成分，通过查阅文献可知，槲皮素具有抗癌、抗
炎、抗菌、抗氧化、保护心血管系统和保护皮肤等作用，山奈素
对酪氨酸酶 TYＲ活性有抑制作用。所以研究上述 3 种成分
检测方法，对于控制垂盆草颗粒质量，发挥积极治疗作用有着
重要作用〔7，8〕。
本研究建立了垂盆草颗粒中异鼠李素含量测定方法，经
方法学考察，均符合中药质量标准要求，该方法简便、准确、可
控，重复性高，可作为控制垂盆草质量的指标。
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UPLC-QTOF-MS法快速测定化妆品中添加的 7 种性激素
张晓璐* ，丁 建，汪嘉丽(江苏省常州市药品检验所 常州 213000)
摘要:目的 建立快速、准确检测化妆品中非法添加的 7 种性激素的方法。方法 采用 UPLC-QTOF-MS 法，使用 Agilent ZOＲBAX Extend-C18
(2. 1 × 50mm，1. 8μm)柱，以乙腈(A)水(B)为流动相，流速 0. 3mL·min －1，柱温:30℃;选择 ESI离子源，正负离子扫描等模式测定 7 种性激素。
通过比较各样品峰与对照品峰的分子离子峰、二级碎片离子峰、色谱保留时间等信息确定添加的成分，并根据外标法以质谱峰面积计算添加成
分的含量。结果 在上述色谱及质谱条件下，雌三醇、雌二醇、雌酮、己烯雌酚、睾丸酮、甲睾酮、黄体酮 7 种性激素能被准确检出，最低检出限
(LOD)均在 3 ～ 80ng·mg －1之间，标准加样回收率均在 80. 3% ～103. 5%之间。结论 本方法快速准确方便、灵敏度较高，可作为化妆品中非
法添加性激素的测定方法。
关键词:UPLC-QTOF-MS;性激素;化妆品;非法添加;快速测定
中图分类号:Ｒ927. 2 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2015)-10-05144-0036-04
作者简介:张晓璐。研究方向:药物分析。联系电话:18915045605，E-mail:33908727@ qq. com
Determination of 7 Sexhormones Add to Cosmetics by UPLC-QTOF-MS
ZHANG Xiao-lu，DING Jian，WANG Jia-li(Changzhou Institute for Drug Control，Chanzhou 213000，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To establish a rapid，accurate method for determination of 7 sexhormone，which were
illegally added to cosmetics. METHODS The UPLC-QTOF-MS method was adopted. The analytes were separated
on a Agilent ZOＲBAX Extend-C18(2. 1 × 50mm，1. 8μm)with acetonitrile(A)and water(B)and the flow rate of
0. 3mL·min －1，and the column temperature was 30℃. A positive and negative ions(ESI)source was used to sepa-
rate and quantitatively determinate 7 sexhormones. The obtained molecular ions，fragment ions and retention time were
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海峡药学 2015 年 第 27 卷 第 10 期