全 文 ：［收稿日期］ 20100721(005)
［基金项目］ 河南省高校工程技术研究中心资助项目(教科外
［2010］6 号)
［第一作者］ 李喜凤，河南中医学院教授，硕士生导师，研究方
向:中药新药及质量标准的研究，Tel:0371-
65575823，E-mail:lxf_52@ yeah. net
HPLC测定不同产地禹州漏芦中 α-三联噻吩含量
李喜凤，余云辉，胡春月，胡利欣，邱天宝，高伟利
(河南中医学院，郑州 450008)
［摘要］ 目的:采用 RP-HPLC法测定不同产地禹州漏芦中 α-三联噻吩含量。方法:色谱柱为 Hypersil ODS2C18(4. 6 mm ×
250 mm，5 μm)，流动相甲醇-0. 1%醋酸溶液(85∶ 15)，流速 1. 0 mL·min －1，柱温 25 ℃，检测波长 352 nm。结果:α-三联噻吩在
0. 491 6 ～ 6. 145 0 μg峰面积与进样量呈良好线性关系(r = 0. 999 9)，平均加样回收率为 98. 83%。结论:该法简便、快速、准确、
专属性强、重现性好，不同产地禹州漏芦中 α-三联噻吩含量均符合《中国药典》(2010 年版)不得少于 0. 2%的规定。
［关键词］ 反相高效液相色谱;禹州漏芦;α-三联噻吩;含量测定
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)06-0060-03
Determination of α-Terthienyl in Radix Echinopsis from
Different Places by RP-HPLC
LI Xi-feng，YU Yun-hui，HU Chun-yue，HU Li-xin，QIU Tian-bao，GAO Wei-li
(Henan College of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou 450008，China)
［Abstract］ Objective:Determination of α-terthienyl in Radix Echinopsis from different places by using RP-
HPLC. Method:The separation was carried out at 25 ℃ on a Hypersil ODS2 C18 column (4. 6 mm × 250 mm，
5μm)with MeOH 0. 1% acetate solution (85∶ 15)as mobile phase. The detective wavelength was at 352 nm with
the flow rate of 1. 0 mL·min －1 . Result:The α-terthienyl was linear within the concentration range of 0. 4916 －
6. 1450 μg (r = 0. 999 9). The average recovery was 98. 83% . Conclusion:This method is simple and practical
with strong specificity and good reproducibility. The content of α-terthienyl is up to the regulation of no less than
0. 2% in Chinese Pharmacopoeia (Edition 2010)from different places.
［Key words］ HPLC;Radix Echinopsis;α-terthienyl;determination
禹州漏芦 Radix Echinopsis 为菊科植物蓝刺头
E. latifolius Tausch 或华东蓝刺头 E. grijisii Hance
的干燥根，别名华州漏芦、毛头、龙葱、驴欺口、单州
漏芦、火绒草、火球花、鹿骊、禹漏芦，具有清热解毒、
排脓止血、消痈下乳的功效，临床用于治疗诸疮痈
肿，乳痈肿痛，乳汁不通，瘰疬疮毒等症［1］。《神农
本草经》记载其“味苦咸、寒，主皮肤热，恶疮疽痔，
湿痹，下乳汁，久服轻身益气，耳目聪明，不老延
年”［2］。《中国药典》1995 年版首次将禹州漏芦与漏
芦分开，另列为独立品种。禹州漏芦与漏芦为同科
不同属植物，其化学成分明显不同，禹州漏芦主要含
α-三联噻吩，卡多帕亭，5-(3，4 二羟基丁炔-l)-联噻
吩，薄荷酮，δ-愈创烯，十六烷酸，熊果酸等 40 多种
成分，药效学表明禹州漏芦主要活性成分 α-三联噻
吩具有杀虫、抗 HIV、抗真菌、抗病毒及肿瘤等作
用［3-7］，α-三联噻吩的含量高低将直接影响药材的质
量。本实验对各地所产禹州漏芦 α-三联噻吩含量进
行分析比较，为更好控制禹州漏芦质量提供依据。
1 仪器与试药
DIONEX 高效液相色谱仪包括 DIONEX P-680
泵、ASI-100 自 动 进 样 器、PDA-100 检 测 器、
·06·
第 17 卷第 6 期
2011 年 3 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 6
Mar.，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.06.071
CHROMELON 工 作 站 (美 国 DIONEX 公 司);
YUPING FA2004b型电子天平(上海越平科学仪器
有限公司);KQ-100E型超声波清洗器(昆山市超声
仪器有限公司)。甲醇为色谱纯(天津四友)，水为
娃哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。
禹州漏芦药材购自不同地区，经河南中医学院
生药学科董诚明教授鉴定为菊科植物蓝刺头 E.
latifolius 的干燥根。α-三联噻吩对照品 (批号
311073)由美国 Sigma公司提供。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Hypersil ODS2 C18色谱柱 (4. 6
mm ×250 mm，5 μm)(大连依利特公司);流动相甲
醇-0. 1%醋酸溶液(85∶ 15);流速 1. 0 mL·min －1;检
测波长 352 nm;柱温 25 ℃;进样量 10 μL。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取 α-三联噻吩对
照品适量，加甲醇制成每 1 mL 中含 α-三联噻吩
0. 245 8 mg的溶液，摇匀，过 0. 45 μm的滤膜，即得。
见图 1。
图 1 α-三联噻吩对照品色谱图
2. 3 供试品溶液的制备 取禹州漏芦粗粉(过四号
筛)约 0. 25 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入
甲醇 10 mL，密塞，称定质量，超声 30min(功率 300
W，频率 40 kHz)，放冷，再称定质量，用甲醇补足减
失的质量，摇匀，取续滤液，过 0. 45 μm 的滤膜，即
得。见图 2。
图 2 禹州漏芦供试品 HPLC
1. α-三联噻吩
2. 4 线性关系考察 精密吸取 α-三联噻吩照品溶
液 2，5，10，15，20，25 μL 进样，以进样量为横坐标，
以 α-三联噻吩的峰面积为纵坐标，进行线性回归，得
回归方程 Y = 99. 093X － 67. 958，r = 0. 999 9，α-三联
噻吩在 0. 491 6 ～ 6. 145 0 μg具有良好的线性关系。
2. 5 精密度试验 取同一样品溶液，连续进样 5
次，每次 10 μL，测得 α-三联噻吩峰面积的 RSD
1. 34%，表明该方法精密度良好。
2. 6 重复性试验 精密称定同一批次样品 0. 25 g，
共 5 份，按 2. 3 项下的方法制备供试品溶液，进样 10
μL，测得 α-三联噻吩峰面积的 RSD 1. 63%，表明该
方法重复性良好。
2. 7 稳定性试验 精密吸取同一批供试品溶液，分
别于 0，2，4，6，8，12 h 进样 10 μL，得 α-三联噻吩峰
面积的 RSD 0. 68%，表明样品溶液在 12 h内稳定。
表 1 禹州漏芦中 α-三联噻吩的加样回收率测定
称样量
/ g
样品含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
0. 124 5 0. 718 4 0. 770 0 1. 484 7 99. 52 98. 83 1. 53
0. 125 3 0. 721 3 0. 577 1 1. 291 8 98. 86
0. 126 3 0. 730 0 0. 730 1 1. 448 1 98. 36
0. 124 5 0. 718 2 0. 718 2 1. 422 6 98. 08
0. 129 3 0. 722 5 0. 867 0 1. 575 6 98. 40
0. 126 1 0. 726 1 0. 871 5 1. 595 7 99. 78
2. 8 加样回收率试验 精密称取已知含量的禹州
漏芦药材 6 份，按高、中、低 3 种浓度分别加入 α-三
联噻吩对照品溶液，按 2. 3 项下供试品处理的方法
制备样品溶液，进样 10 μL，测得含量，计算加样回
收率，结果见表 1。
2. 9 样品的含量测定 取待测 9 批样品，按 2. 3 项
供试品处理方法进行处理，平行 3 份，按上述色谱条
件测定，用外标法进行计算样品含量。结果见表 2。
3 讨论
3. 1 检测波长的选择 采用 PDA 检测器在 190 ～
600 nm扫描，α-三联噻吩在 352 nm 处有最大吸收，
因此本实验采用 352 nm作为检测波长。
3. 2 提取溶剂的选择 曾用乙醇、丙酮、乙酸乙酯、
石油醚、氯仿溶剂对样品的提取进行考察，发现石油
醚在超声过程中易升温暴沸;氯仿、乙醇、丙酮、乙酸
乙酯提取物中 α-三联噻吩含量低。甲醇提取物中 α-
三联噻吩含量较高。故用纯甲醇作为的提取溶剂。
·16·
李喜凤，等:HPLC测定不同产地禹州漏芦中 α-三联噻吩含量
表 2 禹州漏芦中 α-三联噻吩的含量测定 (n = 3)
No. 样品来源
样品量
/ g
α-三联噻吩
/mg·g － 1)
1 济源 0. 250 1 5. 768 2
2 焦作 0. 249 8 5. 078 9
3 洛阳 0. 249 1 3. 417 6
4 南阳 0. 249 9 3. 489 2
5 湖北 0. 250 1 5. 245 7
6 南阳(饮片) 0. 250 0 3. 181 9
7 山西 0. 249 6 6. 377 8
8 山东 0. 250 4 3. 907 0
9 陕西 0. 250 2 4. 242 6
3. 3 流动相的选择 实验中曾对甲醇-0. 1%醋酸
溶液(80∶ 20)，甲醇-0. 1%醋酸溶液(85 ∶ 15)，甲醇-
0. 1%醋酸溶液(90∶ 10)等色谱系统进行考察，结果
以甲醇-0. 1%醋酸溶液(85 ∶ 15)分离效果好，峰形
理想。
6 号样品中 α-三联噻吩含量最低，该样品为饮
片，实验中发现具有较多的非药用部位纤维状硬毛
和根茎，笔者观察药材市场上禹州漏芦药材饮片大
都含有上述非药用部位，因此，禹州漏芦饮片的生产
还有待进一步规范。
［参考文献］
［1］ 中国药典.一部［S］. 2005:244.
［2］ 曹元宇. 本草经［M］. 上海:上海科技出版社，
1987:l10.
［3］ Marles R J，Hudson J B，Graham E A，et al.
Structureactivity studies of Photoactivated antiviral and
cytotoxic tricyclic thiophenes ［J］. Photochem Photobio，
1992，56(4):479.
［4］ Hudson J B，Harris L，Teeple A，et al. The anti-HIV
activity of the phytochemical α-terthienyl ［J］. Antiviral
Res，1993，20(1):33.
［5］ Hudson J B，Harris L，Marles R J，et al. The anti-HIV
activities of photoactive terthiophenes ［J］. Photochem
Photobiol，1993，58(2):246.
［6］ Hudson J B，Graham E A，Towers G H. Antiviral assays
on phytochemicals:the influence of reaction parameters
［J］. Planta Med，1994，60(4):329.
［7］ Nivsarkar M，Kumar G P，Laloraya M，et al. Superoxide
dismutase in the analgills of the mosquito larvae of Aedes
aegypti:its inhibition by α-terthienyl ［J］. Arch Insect
Biochem Physiol，1991，16(4):249.
［责任编辑 蔡仲德］
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第 17 卷第 6 期
2011 年 3 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 6
Mar.，2011