全 文 ：天然产物研究与开发 Nat Prod Ｒes Dev 2015，27:1815-1820
文章编号:1001-6880(2015)10-1815-06
收稿日期:2015-07-09 接受日期:2015-08-26
基金项目:国家自然科学基金(81202458) ;全军医药科研“十二
五”面上项目(CLZ12JA04) ;中国博士后科学基金
(2012M521926) ;甘肃省自然科学基金(1308ＲJYA06)
* 通讯作者 Tel:86-931-8994671;E-mail:huipingmacyk@ 163． com
矮垂头菊乙醇提取物的体外自由基清除活性及
其对高原缺氧小鼠的保护作用研究
景临林，马慧萍* ，樊鹏程，何 蕾，贾正平
兰州军区兰州总医院药剂科 全军高原环境损伤防治重点实验室，兰州 730050
摘 要:本文对矮垂头菊乙醇提取物(Ethanol extract of Cremanthodium humile，EECH)中总黄酮与总多酚含量，体
外自由基清除活性以及对高原缺氧小鼠的保护作用进行研究。结果显示:EECH中总黄酮与总多酚的含量分别
为 378． 35 ± 7． 04 mg芦丁 /g 提取物和 114． 58 ± 0． 99 mg没食子酸 /g提取物。其对 DPPH、羟自由基、NO自由基
均表现出一定的清除活性，IC50值分别为 80． 90 ± 0． 47、263． 54 ± 6． 82 和 285． 26 ± 4． 45 μg /mL，但均弱于 Vc，
然而其对超氧阴离子的清除作用优于 Vc。此外，EECH能够显著延长缺氧常压密闭缺氧小鼠的存活时间，减少
低压低氧小鼠心脑组织中 MDA含量，提高抗氧化酶 SOD、CAT和 GSH-Px的活力。以上结果表明:EECH是一种
活性优异的天然抗氧化剂，对高原缺氧诱导的小鼠心脑组织损伤具有明显的保护作用。
关键词:矮垂头菊;自由基清除;低压低氧;抗氧化酶
中图分类号:TS255． 1 文献标识码:A DOI:10． 16333 / j． 1001-6880． 2015． 10． 023
In vitro Free Ｒadical Scavenging Activity of Ethanol Extract of Cremanthodium
humile and Its Protective Effect on Mice under Hypobaric Hypoxia Condition
JING Lin-lin，MA Hui-ping* ，FAN Peng-cheng，HE Lei，JIA Zheng-ping
Department of Pharmacy，Lanzhou General Hospital，Lanzhou Command of PLA;Key Lab of PLA
for Prevention and Treatment of Injuries Induced by High Altitude，Lanzhou 730050，China
Abstract:The objective of this study was to investigate the content of total phenolics and total flavonoid and free radical
scavenging activity of Cremanthodium humile (EECH)as well as its protective effect against hypobaric hypoxia (HH)
induced injury on mice． According to the results，the contents of total flavonoid and total phenolics in EECH were 378． 35
± 7． 04 mg Ｒu /g extract and 114． 58 ± 0． 99 mg GAE /g extract，respectively． EECH showed excellent scavenging
effect on DPPH，hydroxyl，nitric oxide radical with the IC50 value of 80． 90 ± 0． 47，263． 54 ± 6． 82 and 285． 26 ± 4．
45 μg /mL，but still weaker than Vc． While EECH exhibited stronger scavenging activity on superoxide than Vc． Admin-
istration of EECH can prolong the survival time of mice under normobaric hypoxia，decrease the level of MDA in brain
and heart of mice under HH condition and increase the activity of SOD，CAT and GSH-Px． All of these results indicated
that EECH could be regarded as an excellent source of natural antioxidants and prevented damage from HH induced
brain and heart injury．
Key words:Cremanthodium humile;free radical scavenging;hypobaric hypoxia;antioxidant enzymes
矮垂头菊(Cremanthodium humile Maxim)是菊
科垂头菊属的多年生草本植物，生长于海拔 2400 ～
5600 m的高山草甸和碎石区，主要分布于西藏、青
海、甘肃和云南等地［1］。传统藏医理论认为矮垂头
菊具有清热解毒、祛风除湿的功效［1］。最新研究发
现矮垂头菊还具有一定的抗肿瘤活性［2］。课题组
前期对多种青藏高原植物筛选发现，矮垂头菊具有
一定的抗缺氧活性［3］。本实验拟对矮垂头菊乙醇
提取物的总黄酮和总多酚的含量、体外自由基清除
活性及其对缺氧小鼠保护作用进行研究，从抗氧化
的角度阐明其抗缺氧作用机制，为进一步将其开发
成为抗高原缺氧药物提供理论依据。
1 材料与仪器
1． 1 药物
矮垂头菊购自青海西宁三江宝商贸有限公司，
经兰州大学药学院生药学研究所杨永建教授鉴定为
菊科垂头菊属 Cremanthodium humile Maxim的花;干
燥的矮垂头菊 200 g，粉碎后加入 10 倍量 70%乙醇
浸泡过夜，超声提取 1 h，重复三次，合并提取液，过
滤，减压浓缩干燥得浸膏 30 g，为矮垂头菊乙醇提取
物(Ethanol extract of Cremanthodium humile，EECH)。
1． 2 动物
清洁级 BABL /C雄性小鼠，体重 18 ～ 22 g，由兰
州军区兰州总医院动物实验科提供，许可证号
SYXK(军)2014-0029。
1． 3 试剂
乙酰唑胺(100114)购自武汉远城科技发展有
限公司，1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)购自 Sig-
ma 公司;还原型辅酶 I(NADH)、吩嗪硫酸甲酯
(PMS)、抗坏血酸(VC)、硫代巴比妥酸(TBA)、硝普
钠、对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二胺购自阿拉丁试剂公
司;芦丁标准品(100080-200707)、没食子酸标准品
(110831-200804)购自中国食品药品检定研究院;其
余均为国产分析纯试剂。丙二醛(MDA)、超氧化物
歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化
物酶(GSH-Px)试剂盒购自南京建成生物工程研究
所。
1． 4 主要仪器
Spectramax i3 多功能酶标仪(Molecular Devices
公司) ;ＲE-3000A 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器
厂) ;SK3300L超声清洗器(上海精密仪器仪表有限
公司) ;AE204 型电子天平(美梅特勒-托利多仪器有
限公司) ;UV2800SPC紫外可见分光光度计(上海舜
宇恒平科学仪器有限公司) ，FLYDWC50-IIC 低压低
氧动物实验舱(贵州风雷航空军械有限公司)。
2 实验方法
2． 1 DPPH清除实验
向 125 μL 不同质量浓度的样品溶液中分别加
入 125 μL 0． 1 mmol /L DPPH 70%乙醇溶液，室温下
暗处反应 30 min，以 70%乙醇溶剂做空白对照，测
量其在波长 517 nm 处的吸光度 Ai。将 125 μL 70%
乙醇溶液分别与 125 μL DPPH 70%乙醇溶液和 125
μL样品溶液混合后，测定其在波长 517 nm 处的吸
光度，分别计为 A0 和 Aj。按式(1)计算其清除率，
并计算其 IC50。
清除率(%)=(1-Ai-Aj /A0)× 100 (1)
2． 2 羟自由基清除实验
向 500 μL 不同质量浓度样品溶液中依次加入
50 μL 28 mmol /L 脱氧核糖(溶于 pH = 7． 0 的 0． 2
mmol PBS)、50 μL EDTA(1 mmol /L)、50 μL 的
FeCl2(1 mmol /L)和 50 μL H2O2(1 mmol /L) ，最后
加入 50 μL抗坏血酸(1 mmol /L)启动反应，37 ℃水
浴孵育 1 h后依次加入 250 μL 三氯乙酸(10%)和
250 μL TBA(0． 5%，溶于 25 mmol /L 的 NaOH 溶
液) ，沸水中孵育 0． 5 h，测定 532 nm 处吸光度 Ai，
用 500 μL蒸馏水代替样品溶液，测得吸光度 A0，用
PBS代替脱氧核糖测得吸光度 Aj。按式(1)计算其
清除率，并计算其 IC50。
2． 3 超氧阴离子清除实验
向 100 μL 不同质量浓度的样品溶液中依次加
入 50 μL NADH(500 μmol /L，溶解于 0． 2 mol /L pH
=7． 4 的 PBS 中)、50 μL NBT(200 μmol /L)和 50
μL PMS(20 μmol /L)。混合均匀后室温下反应 8
min，测定其在 560 nm 处的吸光度 Ai。用 100 μL
70%乙醇替代样品，混合后测定其 560 nm处的吸光
度 A0;用 50 μL 水取代 PMS，混合后测定其在波长
560 nm处的吸光度 Aj。按式(1)计算其清除率，并
计算其 IC50。
2． 4 一氧化氮清除实验
将 100 μL不同浓度的样品溶液与 100 μL的硝
普钠(10 mmol /L，溶解在磷酸缓冲液中 0． 05 mol /L，
pH 7． 4)混合均匀后，室温下孵育 2． 5 h，向混合溶
液中加入 900 μL 蒸馏水和 0． 5 mL 对氨基苯磺酸
(33%，溶解在 20% 的乙酸溶液中) ，室温放置 5
min，最后加入 0． 5 mL盐酸萘乙二胺(0． 1%，w /v) ，
室温放置 30 min 后，测定 540 nm 处的吸光度 Ai。
用磷酸缓冲液代替硝普钠时测得吸光度 Aj，用 70%
乙醇代替样品溶液时测得吸光度 A0。按式(1)计算
其清除率，并计算其 IC50。
2． 5 总黄酮含量测定
将 50 μL NaNO2 溶液(5%)加入到 500 μL 的
不同质量浓度的芦丁标准品溶液(0 ～ 140 μg /mL)
中，混合均匀。室温下静置 6 min 后加入 50 μL Al
(NO3)3 溶液(10%) ，混匀后再静置 6 min，最后加
入 250 μL NaOH溶液(4%) ，再次混合均匀后静置
15 min，测定其在 518 nm 处吸光值，每个样品重复
三次，取平均值。根据实验结果建立标准曲线。根
据芦丁标准曲线，按照相同方法求得样品中总黄酮
含量。
6181 天然产物研究与开发 Vol. 27
2． 6 总多酚含量测定
将 1 mL Folin-Ciocalteu 试剂分别与 100 μL 的
不同质量浓度的没食子酸标准品溶液(0 ～ 140 μg /
mL)充分混合后，加入 1 mL Na2CO3 溶液(7%) ，室
温放置 5 h，测定其在 760 nm处吸光值，每个样品重
复三次，取平均值。根据实验结果建立标准曲线。
根据没食子酸标准曲线，按照相同方法求得样品中
总酚含量。
2． 7 常压密闭缺氧实验
将 50 只清洁剂级雄性 BABL /C 小鼠随机分成
5 组，缺氧模型组、乙酰唑胺组(300 mg /kg)、EECH
低、中、高剂量组(125、250、500 mg /kg ) ，每组 10
只，连续灌胃给药 5 d，最后一次给药 60 min 后，将
小鼠分别放入 250 mL 广口瓶内(瓶内含 5 g 钠石
灰) ，密封瓶口，立即开始计时，待小鼠停止呼吸时
记录小鼠存活时间。利用存活时间和延长率评价药
物的抗缺氧作用，确定 EECH 最佳给药剂量。延长
率 =(药物组存活时间-缺氧模型组存活时间)/缺氧
模型组存活时间。
2． 8 低压低氧实验
将 24 只 SPF 级雄性 BABL /C 小鼠随机分成 4
组，正常组、缺氧模型组、乙酰唑胺组(300 mg /kg)、
EECH高剂量组 500 mg /kg，每组 6 只。给药方式同
2． 7。最后一次给药后，除正常组外，将其他 3 组置
于低压低氧动物实验舱中，以 100 m /min 的速度减
压至模拟 8000 m海拔高度，并维持低压低氧 9 h，随
后快速升压至正常气压。立即将小鼠脱臼处死，取
大脑和心脏组织，用 4 ℃生理盐水制成 10%的组织
匀浆用于相关生化指标的测定。
2． 9 指标检测
MDA含量、SOD、CAT和 GSH-Px活性测定按照
相应的试剂盒说明书进行。
2． 10 统计学处理
实验数据均用 珋x ± s表示，并采用 SPSS 19． 0 统
计软件对数据中各组之间进行 one-way ANOVA统
100
80
60
40
20
0
EECH
Vc
DP
PH
清
除
率
DP
PH
%in
hi
bi
tio
n(
%
)
0 50 100
浓度
Concentration(μg/mL)
图 1 EECH对 DPPH自由基的清除率
Fig. 1 DPPH radical scavenging effect of EECH
计学分析，P ＜ 0． 05 时表示统计学上有显著性差异。
3 实验结果
3． 1 EECH对 DPPH清除作用
结果如图 1 所示，EECH 对 DPPH 自由基的清
除作用存在较好的剂量依赖性。在浓度为 120 mg /
mL时，其对 DPPH的清除率达到了 79． 92%，EECH
和 Vc的 IC50分别为 80． 90 ± 0． 47 和 30． 39 ± 0． 43
μg /mL。以上结果表明，EECH 对 DPPH 自由基具
有较好清除能力，但是其活性明显弱于 Vc。
100
80
60
40
20
0
EECH
Vc
·
OH
清
除
率
·
OH
%in
hi
bi
tio
n(
%
)
0 100% 200% 300% 400% 500
浓度
Concentration(μg/mL)
图 2 EECH对·OH的清除率
Fig. 2 Hydroxyl scavenging effect of EECH
3． 2 EECH对羟自由基清除作用
从图 2 结果可以看出:随着 EECH浓度的升高，
其对·OH的清除能力逐渐增强，具有明显的剂量
依赖性，经计算其 IC50为 263． 54 ± 6． 82 μg /mL，显
著高于 Vc(50． 78 ± 2． 45 μg /mL)。随着浓度的增
加，Vc对·OH的清除能力增加缓慢，而 EECH增长
迅速，但仍弱于 Vc。
EECH
Vc
O-
2
清
除
率
O-
2%i
nh
ib
iti
on
(%
)
0
浓度
Concentration(μg/mL)
80
70
60
50
40
30
20
10
0
200% 400% 600% 800
图 3 EECH对 O–·2 的清除率
Fig. 3 Superoxide radical scavenging effect of EECH
3． 3 EECH对超氧阴离子清除作用
结果如图 3 所示，当浓度低于 200 μg /mL 时，
随着浓度的升高，EECH 和 Vc 对 O–·2 的清除能力
增加迅速，当浓度大于 200 μg /mL 时，二者的清除
能力增长速度明显放缓，特别是 Vc。总的来说，
EECH对 O–·2 的清除能力要高于 Vc。其 IC50值为
291． 43 ± 2． 45 μg /mL，显著低于 Vc 的 IC50 值
(462． 81 ± 3． 24 μg /mL)。
7181Vol. 27 景临林等:矮垂头菊乙醇提取物的体外自由基清除活性及其对高原缺氧小鼠的保护作用研究
3． 4 EECH的对 NO的清除能力
EECH
Vc
NO
清
除
率
NO
%in
hi
bi
tio
n(
%
)
0 200% 400% 600% 800
浓度
Concentration(μg/mL)
100
80
60
40
20
0
图 4 EECH对 NO的清除率
Fig. 4 Nitric oxide radical scavenging effect
结果如图 4 所示，EECH 和 Vc 对 NO 清除作用
与对 O–·2 的清除作用类似，随着浓度的升高，清除
能力逐渐增加，但是增长的幅度越来越小。EECH
的 IC50(285． 26 ± 4． 45 μg /mL)明显高于 Vc(176．
33 ± 5． 76 μg /mL) ，表明其对 NO 的清除能力弱于
Vc。
3． 5 EECH中总黄酮与总多酚含量
经检测，EECH中总黄酮的含量高达 378． 35 ±
7． 04 mg 芦丁 / g 提取物，多酚含量为 114． 58 ±
0. 99 mg没食子酸 / g提取物。
3． 6 EECH对常压密闭缺氧小鼠存活时间的影响
从表 1 结果可以看出:缺氧模型组小鼠在 250
mL广口瓶内的存活时间为 32． 15 ± 1． 08 min，阳性
药乙酰唑胺组可以显著延长存活时间至 42． 24 ±
1. 63 min(P ＜ 0． 01) ，延长率为 31． 38%。EECH 三
组存在明显则剂量依赖性，低剂量组的存活时间略
长于模型组，但是低于乙酰唑胺组，中剂量组的存活
时间为 44． 12 ± 3． 25 min，效果与乙酰唑胺相当，而
表 1 EECH对常压密闭缺氧小鼠存活时间的影响(n = 10，
珋x ± s)
Table 1 Effects of EECH on the survival time of mice under
normobaric hypoxia condition (n = 10，珋x ± s)
组别
Groups
剂量
Dose
(mg /kg)
存活时间
Survive
time (min)
延长率
Prolong
rate (%)
缺氧模型组
Model － 32． 15 ± 1． 08 －
乙酰唑胺组
Acetazolamide 300 42． 24 ± 1． 63
＊＊ 31． 38
EECH组 EECH 125 39． 24 ± 1． 56* # 22． 05
250 43． 12 ± 3． 25＊＊ 34． 12
500 47． 37 ± 2． 56＊＊# 47． 34
注:与模型组相比，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;与乙酰唑胺组相比，#P ＜
0． 05，##P ＜ 0． 01。
Note:Compared with model group，* P ＜ 0． 05，＊＊ P ＜ 0． 01;Compared
with Acetazolamide group，#P ＜ 0． 05，##P ＜ 0． 01．
高剂量组的存活时间达到 47． 37 ± 2． 56 min，延长率
为 47． 34%，显著高于缺氧模型组(P ＜ 0． 01)和乙酰
唑胺组(P ＜ 0． 05)。因此，在后续实验中采用高剂
量进行相关指标测定。
3． 7 EECH对低压低氧小鼠心脑组织中 MDA 含量
的影响
结果如图 5 所示，对所有组别而言，脑组织中
MDA含量显著低于心肌组织。与正常组比较，缺氧
模型组小鼠心、脑组织 MDA 含量显著升高(P ＜
0. 01) ，经乙酰唑胺和 EECH 预处理后，缺氧小鼠
心、脑组织中 MDA 含量显著降低(P ＜ 0． 01 或 P ＜
0． 05)。
乙酰唑胺组
Acetazolamide
8
7
6
5
4
3
2
1
0
M
DA
含
量
M
DA
%c
on
te
nt
(n
m
ol
/m
g%
pr
ot
ei
n)
大脑组织 Brian 心脏组织 Heart
正常组
Normal
模型组
Model
EECH
图 5 EECH对低压低氧小鼠心脑组织中 MDA含量的影
响(n = 6，珋x ± s)
Fig. 5 Effects of EECH on the MDA content in brain and
heart of mice under hypobaric hypoxia condition (n
= 6，珋x ± s)
注:与正常组相比，#P ＜ 0． 05，##P ＜ 0． 01;与模型组相比，* P ＜
0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
Note:Compared with normal group，#P ＜ 0． 05，##P ＜ 0． 01;Compared
with model group，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
3． 8 EECH对低压低氧小鼠心脑组织中 SOD、CAT
和 GSH-Px活性的影响
结果如表 2 所示，与正常组比较，缺氧模型组小
鼠心、脑组织中 SOD、CAT和 GSH-Px 活性显著降低
(P ＜ 0． 01) ;与模型组比较，经乙酰唑胺和 EECH预
处理后，小鼠心、脑组织中 SOD、CAT 和 GSH-Px 活
力均显著升高。但是 EECH的效果显著优于乙酰唑
胺。
4 讨论
活性氧簇(ＲOS) ，包括羟自由基(·OH)、超氧
阴离子(O-·2 )、过氧化氢(H2O2)和单线态氧(
1O2)
等是机体正常代谢产物［4］。在正常生理状态下，机
体内存在内源性抗氧化体系(抗氧化酶和非酶抗氧
化剂)能够及时清除体内产生 ＲOS，保持自由基代
8181 天然产物研究与开发 Vol. 27
表 2 EECH对低压低氧小鼠心脑组织中 SOD、CAT和 GSH-Px活性的影响(n = 6，珋x ± s)
Table 2 Effects of EECH on the levels of SOD，CAT，GSH-Px and T-AOC in brain and heart of mice under hypobaric hypoxia condi-
tion (n = 6，珋x ± s)
组别
Group
剂量
Dose
(mg /kg)
SOD (U /mg protein) CAT (U /mg protein) GSH-Px (U /mg protein)
脑组织
Brain
心肌组织
Heart
脑组织
Brain
心肌组织
Heart
脑组织
Brain
心肌组织
Heart
正常组 Normal －
98． 12
± 6． 17
55． 62
± 4． 12
2． 45
± 0． 26
6． 78
± 0． 56
3． 65
± 0． 34
3． 22
± 0． 21
模型组 Model －
70． 23
± 3． 26##
38． 76
± 1． 24##
1． 66
± 0． 48##
3． 36
± 0． 78##
2． 57
± 0． 18##
1． 46
± 0． 12##
乙酰唑胺组 Acetazolamide 300
76． 76
± 4． 72*
44． 34
± 2． 66*
1． 86
± 0． 40*
4． 96
± 0． 66＊＊
3． 22
± 0． 22＊＊
2． 32
± 0． 23＊＊
EECH组 EECH 500
88． 42
± 5． 46＊＊
48． 05
± 2． 98＊＊
2． 11
± 0． 17＊＊
6． 33
± 0． 64＊＊
3． 40
± 0． 38＊＊
2． 93
± 0． 18＊＊
注:与正常组相比，#P ＜ 0． 05，##P ＜ 0． 01;与模型组相比，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01。
Note:Compared with normal group，#P ＜ 0． 05，##P ＜ 0． 01;Compared with model group，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01．
谢平衡。但当机体处于病理状态时，机体内氧化平
衡出现紊乱，产生的 ＲOS 无法及时清除，造成 ＲOS
蓄积。过量的 ＲOS会攻击蛋白质、核酸等生物大分
子，造成细胞凋亡或坏死［5］。适当摄取一些抗氧化
剂对于氧化应激导致的疾病具有预防和治疗作用。
由于人工合成抗氧化剂其存在一定的肝毒性［6］，从
天然产物当中寻找高效、低毒的天然抗氧化剂越来
越受到人们的关注。
矮垂头菊常年生长在低压低氧的环境中，为了
抵抗氧化应激，其体内可能含有具有优异抗氧化活
性的物质。为了证明上述猜想，本研究首先考察了
EECH对 DPPH、·OH、O-·2 和 NO的清除作用。DP-
PH是一种稳定的含氮自由基，其乙醇溶液呈深紫
色，自由基清除剂会使其颜色变浅。该法具有操作
简便、灵敏度高的特点，已经广泛用于样品，特别是
植物提取物样品的抗氧化活性测定［7］。·OH 被认
为是 ＲOS中活性最强的自由基，它能够无选择性的
攻击几乎所有生物大分子，造成细胞损伤。研究表
明:心血管疾病、肿瘤、糖尿病以及阿尔兹海默病的
发生均与·OH有关［8］。O-·2 自身活性较弱，但是其
能够在体内转化成活性更强的 H2O2 和·OH
［9］。
NO是体内重要的功能分子，发挥着血压调节、神经
信号传递、控制血管舒张和松弛平滑肌等众多生理
功能。但是 NO还会与 O-·2 反应生成氧化性更强的
过氧亚硝酸根离子 (ONOO-) ，从而导致组织器官氧
化损伤［10］。从文中结果可以看出:矮垂头菊乙醇提
取物对 DPPH、·OH 和 NO 的清除能力弱于 Vc，但
其对 O-·2 的清除能力明显优于 Vc。总的来说，
EECH对四种自由基均表现出一定的清除活性，尽
管活性弱于 Vc，但仍是一种非常有前景的天然抗氧
化剂。
黄酮和多酚是植物体内含有的非常重要的次生
代谢产物，也是许多植物提取物抗氧化作用的物质
基础［11］。通过对 EECH 的总黄酮和总多酚的含量
进行测定，结果表明:其高浓度的总黄酮可能其发挥
抗氧化作用的物质基础。
尽管低压低氧对机体产生损伤的作用机制尚不
完全明确，但是自由基代谢紊乱是损伤产生的重要
原因之一。有研究指出:通过摄取抗氧化剂，例如维
生素 E和乙酰左旋肉碱等能够减轻低压低氧造成
的损伤［12，13］。为此，本研究首先利用小鼠常压密闭
缺氧实验考察了自由基清除剂 EECH 的抗缺氧能
力。结果表明:灌胃给药高、中、低剂量的 EECH 均
能不同程度地延长缺氧小鼠的存活时间，且呈剂量
依赖性，其中，EECH最高剂量组表现出显著优于乙
酰唑胺的抗缺氧效果。
大脑和心脏是机体中氧代谢最为活跃的器官，这
也造成它们对低压低氧非常敏感［14，15］。为了阐明
EECH对低压低氧小鼠心脑组织的保护作用，本研究对
心脑组织中自由基代谢相关生化指标进行了考察。
MDA是脂质过氧化的最终产物之一，其含量可
以反映脂质过氧化的程度［16］。低压低氧会导致小
鼠心脑组织中 MDA 含量显著升高，经 EECH 预处
理后，小鼠心脑组织中 MDA 含量降低明显，说明
EECH对低压低氧诱导的脂质过氧化有抑制作用。
SOD、CAT 和 GSH-Px 是机体内重要的抗氧化
酶，被认为是抵抗氧化应激损伤的第一道防线。
SOD可以通过歧化反应将·OH 转化为 H2O2。生
成的 H2O2 又可以进一步被 CAT 和 GSH-Px 清除，
三者协同维持机体内自由基代谢的稳态［17］。低压
9181Vol. 27 景临林等:矮垂头菊乙醇提取物的体外自由基清除活性及其对高原缺氧小鼠的保护作用研究
低氧会导致小鼠心脑组织中 SOD、CAT 和 GSH-Px
的活性显著降低，抗氧化系统被破坏，导致自由基代
谢紊乱和 ＲOS 大量蓄积。EECH 能够提高低压低
氧条件下小鼠心脑组织中抗氧化酶的活性，维持机
体内自由基代谢稳态，减少低压低氧诱导的氧化应
激损伤。
综上所述，矮垂头菊乙醇提取物表现出优异的
体外自由基清除活性，是一种高效的天然抗氧化剂，
其含有的高浓度总黄酮，可以作为获得黄酮类化合
物的天然来源。体内实验研究表明:矮垂头菊乙醇
提取物能够显著延长缺氧小鼠的存活时间，缓解低
压低氧对小鼠心脑组织的损伤，其机制可能与维持
机体抗氧化酶的活性、调节自由基代谢有关。
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