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生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2010 年第 6 期
野生毛木耳 ISSR-PCR反应体系的建立与优化
杜萍1，2 崔宝凯1 戴玉成1
(1北京林业大学微生物研究所，北京 100083;2黑龙江农业经济职业学院，牡丹江 157041)
摘 要: 为获得条带清晰，重复性好，多态性高的野生毛木耳 ISSR扩增结果，通过单因子试验对 ISSR-PCR反应条件进
行了优化。确定了 ISSR分析的最佳 PCR条件:25 μL 反应体系中模板 DNA 25 ng、dNTPs 0. 24 mmol /L、Taq DNA 聚合酶 1 U、
Mg2 + 0. 9 mmol /L、引物 2 μmol /L、10 × PCR buffer 2. 5 μL、ddH2O 12. 6 μL。最佳退火温度因不同的引物而定，最佳循环次数
为 35 次。在此基础上初步筛选出 25 条扩增稳定、多态性丰富的 ISSR引物。这一优化体系的建立为进一步利用 ISSR标记技
术进行野生毛木耳种质鉴定及遗传多样性分析提供了一个适合的程序。
关键词: 野生毛木耳 ISSR-PCR 单因子试验 体系优化
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction
System for Auricularia polytricha
Du Ping 1，2 Cui Baokai 1 Dai Yucheng 1
(1 Institute of Microbiology，Beijing Forestry University，Beijing 100083;2 Heilongjiang Agricultural
Economy Professional College，Mudanjiang 157041)
Abstract: To obtain amplification result with clear，repeatable and rich polymorphism fragment，the effection ISSR-PCR by main
reaction system elements (template DNA，dNTPs，Taq DNA polymerase，Mg2 + and primer)was presented. The reaction system and
amplified procedure suitable for Auricularia polytrichawere established，the main elements include，25 μL amplification reaction mix-
ture containing 2. 5 μL × 10 × PCR buffer，25 ng template DNA，0. 24 mmol /L dNTPs，1 U TaqDNA polymerase，0. 7 mmol /L Mg2 +
and 2 mol /L primer，ddH2O 12. 6 μL. Optimal annealing temperature was decided by different primers. Optimal cycling times are thir-
ty-five. 25primers with stable amplification and rich polymorphism for ISSR were selected. The optimal system could provide a suitable
program for identification and genetic diversity analysis of Auricularia polytricha.
Key words: Auricularia polytricha ISSR-PCR Single factor tests Optimization
收稿日期:2009-12-28
基金项目:国家“863”计划课题 (2007AA021506) ，研究生科技创新专项计划项目(BLYJ200901)
作者简介:杜萍，女，博士研究生，研究方向:食药用真菌遗传多样性;E-mail:duping7374@ 163. com
通讯作者:戴玉成，E-mail:yuchengd@ yahoo. com
毛木耳(Auricularia polytricha(Mont.)Sacc.)属
于担子菌门(Basidiomycota) ，伞菌纲(Agaricomyce-
tes)木耳目(Auriculariales) ，木耳科(Auriculariace-
ae) ，木耳属(Auricularia) ，生长在多种阔叶树倒木
和腐朽木上，分解利用木质素、纤维素、半纤维素等，
是森林生态系统中生物多样性的重要组成部分。毛
木耳营养丰富，是一种天然的食药两用菌，子实体含
有丰富的蛋白质、粗纤维、碳水化合物及 8 种人体必
需氨基酸。药用成分主要是多糖以及多种对机体有
益的微量元素，具有活血、止痛、降血压、降血糖、防
冠心病、防治贫血、抑制血小板聚集、抑制肿瘤、抗血
栓形成、抗衰老、抗溃疡、抗放射等作用［1，2］。
ISSR是 1994 年 Zietkiewicz 等提出的一种新型
分子标记技术，为显性标记，引物序列较长，退火温
度较高，稳定性、重复性较好，且多态性高，是一种用
于分析物种、种群、不同品系甚至是个体间遗传差异
的理想方法［3，4］。现已广泛应用于食药用真菌菌株
鉴定、种质资源及遗传多样性方面的研究［5 － 9］。
本研究采用单因子试验对影响野生毛木耳 IS-
SR-PCR反应体系的 6 个主要因素(Taq 酶用量、模
2010 年第 6 期 杜萍等:野生毛木耳 ISSR-PCR反应体系的建立与优化
板含量、引物浓度、Mg2 +浓度、dNTPs 浓度)进行优
化，对 40 条 ISSR引物进行筛选，经多次重复比较试
验，建立野生毛木耳 ISSR-PCR 最佳反应体系。同
时，对扩增反应的退火温度及循环次数进行优化，获
得野生毛木耳 ISSR-PCR 反应的适宜扩增程序，为
进一步研究野生毛木耳的遗传多样性及品种选育等
工作提供科学依据。
1 材料与方法
1. 1 供试菌株
本研究所用菌株由采自于河北省涞水县和江苏
省金湖县的野生毛木耳分离得到，各菌株在麦芽浸
粉斜面培养基上，于 25℃恒温培养箱中培养 1 周，
置于 4℃冰箱保存备用。
1. 2 主要试剂及仪器
1. 2. 1 试剂 Taq酶、dNTPs、MgC12、10 × buffer 等
PCR扩增所用试剂购自 Promega 生物技术有限公
司;DL 2000 Marker购自唐旗生物技术有限公司;IS-
SR引物是根据加拿大哥伦比亚大学(UBC)公布的
序列设计［10］，由英骏生物技术有限公司(Invitrogen)
合成(表 1)。
表 1 ISSRPCR基础扩增反应体系
组成成分 用量(μL)
10 × Buffer 2. 5
dNTPs(4 mmol /L) 1. 5
MgCl2(25 mmol /L) 1. 5
ISSR 引物(10 μmol /L) 4
Taq酶(5 U /μL) 0. 25
模板 DNA(75 ng /μL) 2
ddH2O 13. 25
1. 2. 2 仪器 MagNA Lyser 全自动组织匀浆机，
Eppendorf centrifuge 5415R低温离心机，凝胶成像仪
(Bio-Rad) ，Mastercycler PCR 仪(Eppendorf) ，BIO
RAD Smart SpecTmPlus紫外可见分光光度计，电泳仪
(Bio-Rad)及各种规格电泳槽(DYY-6C)。
1. 3 基因组 DNA的提取
采用 ZR Fungal /Bacterial DNA KitTM试剂盒提取
野生毛木耳基因组 DNA，用 Bio-RadSmart SpecTm
Plus紫外可见分光光度计定量测定波长 260 nm 和
280 nm 处的吸光度值。根据 OD260计算 DNA 的浓
度，用无菌 ddH2 O 稀释至所需浓度后，4℃ 保存
备用。
1. 4 ISSR扩增反应条件优化
1. 4. 1 ISSR-PCR基础扩增反应体系 基础扩增反
应体系见表 1。扩增结束后，将扩增产物 10 μL与 2
μL溴酚蓝指示剂混合均匀，点样于 1. 5%琼脂糖凝
胶上(含 0. 5 μg /mL EB) ，DNA 分子量标记为 DL
2 000，分子量为 100 － 2 000 bp，稳压 65 V，电泳 80
min。电泳结束后在凝胶成像仪下照相，并记录
结果。
1. 4. 2 PCR扩增反应程序及循环次数 参考文献
中的 4 个 PCR 反应程序［9，11 － 13］，并稍有改动，用引
物 847 与 d6、d17，2 号 DNA 分别进行扩增，筛选出
适合野生毛木耳 ISSR-PCR 扩增的反应程序。在最
佳反应程序的基础上，对循环次数设置了 30、35、
40、45 四个梯度，检测其对野生毛木耳 ISSR-PCR扩
增的影响。
1. 4. 3 ISSR-PCR 反应体系的优化试验设计 以纯
化的野生毛木耳基因组 DNA 为模板进行 ISSR 扩增
反应。为了确定最佳的 ISSR 扩增条件，根据原初的
PCR反应条件进行的引物初筛，选择能看到清晰条带
的引物 847，对影响 ISSR-PCR反应的 5 个主要因素:
模板 DNA、引物、Taq 酶、Mg2 +、dNTPs 浓度逐个作
8 －9个水平的梯度优化，各反应参数变量见表 2。
表 2 ISSR-PCR 反应体系优化设计
反应物 反应物浓度
Taq酶 (U) 0. 25 0. 5 0. 75 1 1. 25 1. 5 1. 75 2 ─
DNA 稀释倍数 10 20 30 40 50 60 70 80 ─
引物(μmol /L) 0. 4 0. 8 1. 2 1. 6 2 2. 4 2. 8 3. 2 ─
dNTPs(mmol /L) 0. 06 0. 12 0. 18 0. 24 0. 3 0. 36 0. 42 0. 48 0. 54
Mg2 +(mmol /L) 0. 3 0. 5 0. 7 0. 9 1. 1 1. 3 1. 5 1. 7 1. 9
在整个反应过程中，除对上述比较因素进行梯度
设置而变动外，其余参数和反应条件不变，而且每个优
化好了的因素将用到下一个优化因素的反应体系中，
并相应地调整 ddH2O量以保持反应体系为 25 μL
［14］。
对于优化结果的评判以电泳结果为标准，背景低、谱带
清晰、数目适中、稳定可重复的参数为最佳。
1. 4. 4 引物退火温度优化试验 根据退火温度计
算公式 Tm =4(G + C)+ 2(A + T)设计了退火温度
131
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2010 年第 6 期
梯度试验。DNA模板选用 d17 菌株的 DNA，引物用
842、847、856，退火温度设 44、46、48、50、52、54、56、
58℃共 8 个梯度。
1. 5 引物筛选
试验所用引物以与 SRS 是(AT)n、(TA)n、
(GA)n、(CT)n等序列互补的加锚二核苷酸重复序
列为主，寡聚三核苷酸、四核苷酸引物较少。40 条
ISSR引物碱基序列及退火温度如表 3 所示。利用
优化得出的反应体系对引物进行筛选。
表 3 ISSR引物碱基序列及退火温度
引物
序列
(5′ － 3′)
退火温度
(℃)
引物
序列
(5′ － 3′)
退火温度
(℃)
P0 (TATG)4 45 809 A(GA)7GG 51
P1 TGC(AC)6 45 810 G(AG)7AT 51
P2 GTG(AC)6 45 811 G(AG)7AC 51
P3
GTGACGA
(CT)6
51 815 C(TC)7 TG 51
P4 GCG(CGA)5 51 818 C(AC)7AG 51
P5 C(GT)7 45 823 T(CT)7 CC 51
P6 A(GT)7 45 826 A(CA)7 CC 51
P7 CCA(GTG)4 51 827 A(CA)7 CG 51
P8 GGA(GTG)4 51 834 (AG)8YT 51
P9 (AG)8G 51 835 A(GA)7GYC 51
P10 (GA)8 C 51 836 A(GA)7GYA 51
P12 (AG)8GC 51 840 (GA)8YT 51
P13 (TC)8 CG 51 841 G(AG)7AYC 51
P14 (AC)8 CG 51 842 (GA)8YG 51
P16 (TG)8GA 51 847 (CA)8RC 51
P17 (AC)8 51 856 A(CA)7 CYA 51
P18 (AC)8 C 51 857 A(CA)7 CYG 51
P19 (AC)8 CT 51 864 A(TGA)5 TG 45
807 (AG)8 T 51 884
HBHA
(GA)6G
51
808 (AG)8 C 51 885 BHB(GA)7 51
B = T /G /C，H = A /T /C，Y = T /C，R = A /G
2 结果与分析
2. 1 反应程序及循环次数对 ISSR-PCR 扩增的
影响
从图 1 可以看出程序 1 扩增产物最多，条带清
晰，带型丰富，扩增效果最好，适宜野生毛木耳菌株的
ISSR-PCR扩增。从图 2可以看出循环次数决定着扩
增产量，过多过少均导致扩增产物减少，35 个循环为
野生毛木耳 ISSR-PCR扩增的最佳循环次数。
1. maker;2，3.程序 1 扩增产物;4，5.程序 2 扩增产物;6，
7.程序 3 扩增产物;8，9.程序 4 扩增产物
图 1 不同反应程序对野生毛木耳
ISSR-PCR扩增的影响
1. maker;2，3. 循环次数为 30;4，5 循环次数为 35;6，7.
循环次数为 40;8，9.循环次数为 45
图 2 不同循环次数对野生毛木耳
ISSR-PCR扩增的影响
2. 2 TaqDNA聚合酶用量对 ISSR扩增的影响
在 ISSR-PCR反应体系中，Taq 酶直接影响扩
增反应的成功与否。适宜的 Taq 酶浓度既能保证
试验成功，又可以节省试验药品。高浓度的 Taq
酶不仅成本过高，且易产生非特异性扩增产物;过
低则导致产物的合成效率下降。本试验所设置的
6 个 Taq酶浓度梯度对扩增结果影响不大(图 3)。
从条带的清晰度、稳定程度及经济角度考虑，1 U
的 Taq酶浓度是野生毛木耳 ISSR-PCR 扩增的最
适酶浓度。
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2010 年第 6 期 杜萍等:野生毛木耳 ISSR-PCR反应体系的建立与优化
1. maker;2 － 9. Taq 酶浓度分别为 0 25，0 5，0 75，1，
1 25，1 5，1 75，2U
图 3 Taq酶浓度对野生毛木耳
ISSR-PCR扩增的影响
2. 3 模板 DNA含量对 ISSR扩增的影响
PCR反应中对模板 DNA 浓度要求的范围通常
较宽，但最佳的 DNA模板浓度范围取决于研究的物
种、类群以及 DNA 模板纯度［15］。为得到 PCR 扩增
的最佳模板浓度，对提取的野生毛木耳 DNA 模板
(浓度为 750 ng /μL) ，进行了不同稀释倍数扩增试
验。从图 4 中可以看出，模板 DNA 浓度在 9 － 75
ng /25 μL均能扩增出相同的带型，但 9 ng(稀释 80
倍)的条带在 1 200 bp左右有些模糊。从条带的清
晰度、稳定程度考虑 25 ng(稀释 30 倍)为野生毛木
耳 ISSR扩增的最适模板用量。
1. maker;2 － 9. 模板 DNA 稀释倍数分别为 10，20，30，
40，50，60，70，80
图 4 模板 DNA稀释倍数对野生毛木耳
ISSR-PCR扩增的影响
2. 4 引物浓度对 ISSR扩增的影响
引物浓度关系到扩增产物的质量，浓度太低不能
进行有效扩增，浓度太高会增加引物二聚体的形成，导
致条带不稳定及清晰度下降。在引物浓度等于或低于
0. 4 μmol /L时扩增条带最少;0. 8 μmol /L时扩增条带
偏少，且亮度较弱;1. 2 － 3. 2 μmol /L时扩增带型基本
相同。可见，引物浓度影响 ISSR的扩增，重复试验结
果(图 5)显示，2 μmol /L时扩增条带清晰、带型丰富，
结果稳定，为野生毛木耳 ISSR扩增的最佳引物浓度。
1. marker;2 － 9. 引物浓度分别为 0 4，0 8，1 2，1 6，2，
2 4，2 8，3 2μmol /L
图 5 引物浓度对野生毛木耳
ISSR-PCR扩增的影响
2. 5 Mg2 +浓度对 ISSR扩增的影响
Mg2 +浓度是 ISSR-PCR扩增的一个主要变化因
素，选择合适的 Mg2 + 浓度对 PCR 反应至关重要。
由图 6 可见，Mg2 +浓度为 0. 3 mmol /L 时未扩增出
条带，0. 5 mmol /L时仅扩增出两条弱带，0. 7 mmol /
L时扩增产物偏少，当Mg2 +浓度为 0. 9 －1. 1 mmol /L
时扩增条带最清晰且丰富;Mg2 +浓度为1. 3 mmol /L
时，由于酶活性过高，产生了一些不同分子量的非特
异性条带，随着浓度增加，条带逐渐模糊且严重缺
失。由此可见，Mg2 +浓度的较小变动就能引起 PCR
产物的较大改变。经多次重复比较试验，最终确定
0. 9 mmol /L 的 Mg2 + 浓度是进行野生毛木耳 ISSR
扩增的最适浓度。
2. 6 dNTPs浓度对 ISSR扩增的影响
dNTPs浓度过低会导致扩增带产率低，过高会产
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生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2010 年第 6 期
生错误掺入［16］。由图 7 可见，当 dNTPs 浓度在 0. 06
－0. 24 mmol /L 时，扩增带型基本相同，但 0. 06 －
0. 18 mmol /L时在 700 bp 和 1 200 bp 左右的两条带
明显弱于 0. 24 mmol /L;当浓度等于或高于 0. 3
mmol /L时，扩增产物逐渐减少且条带较弱，直至
0. 54 mmol /L时仅扩增出一条较弱的带。本试验
确定野生毛木耳 ISSR 扩增体系的最佳 dNTPs 浓
度为0. 24 mmol /L。
2. 7 退火温度对 ISSR扩增的影响
在同一个 PCR 反应体系中，退火温度不同，产
生错配的程度也不同。一般较低的退火温度能保证
引物与模板结合的稳定性。而在允许的范围内选择
较高的退火温度则可减少引物与模板 DNA 之间的
非特异性结合。
1. marker;2 － 10. Mg2 + 浓度分别为 0 3，0 5，
0 7，0 9，1 1，1 3，1 5，1 7，1 9 mmol /L
图 6 Mg2 +浓度对野生毛木耳
ISSR-PCR扩增的影响
1. marker;2 － 10. dNTPs 浓度分别是 0 06，0 12，
0 18，0 24，0 3，0 36，0 42，0 48，0 54 mmol /L
图 7 dNTPs浓度对野生毛木耳
ISSR-PCR扩增的影响
首先根据原初的 PCR 反应条件进行的引物初
筛，选择能看到清晰条带的引物 842、847 和 856 进行
退火温度的测定，其结果见图 8。在退火温度为 44 －
48℃时 3条引物的扩增条带均较弱且弥散;50 － 56℃
时 3条引物的扩增带型基本相同，但 50 －52℃时扩增
出最清晰明亮的 ISSR条带，在此温度范围内，随着温
度的增加，条带亮度略有减弱，直至 58℃时只有引物
847扩增出少量条带，842、856均无扩增产物。
为了确定野生毛木耳 ISSR-PCR 的最佳退火温
度，选用引物 834、842 和 847 对退火温度再次优化，
梯度设定为 49℃、50℃、51℃、52℃、53℃、54℃。从
图 9 中可以看出，50 － 51℃时扩增条带最清晰明亮，
但 51℃时的扩增产物最丰富，49℃、52 － 54℃时的
扩增条带相对较弱，且有部分缺失。因此，确定野生
毛木耳 ISSR-PCR的最佳退火温度为 51℃。而根据
公式计算的引物 834、842、847 退火温度分别为
52℃、56℃、56℃。在理论退火温度下虽然也扩增出
带型，但是没有在 51℃下带型清晰、丰富。
2. 8 引物筛选
引物的筛选是进行 ISSR分析的一个关键环节，
因为不同的物种 SSR 相差很大。一般在进行引物
筛选时，利用 ISSR-PCR 扩增选择条带清晰，无弥
散，重复性好、特异性高的引物。试验选用的 40 条
引物中多数引物的理论退火温度为 50 － 56℃，个别
为 40 － 46℃，因此，将理论退火温度在 50 － 56℃的
均采用 51℃，在 40 － 46℃的均采用 45℃。本试验
采用以上确立的最佳体系，应用 40 条 ISSR 引物对
地理分布较远的两号野生毛木耳菌株的 DNA 进行
扩增，结果如图 10 所示，40 条 ISSR 引物中大多数
可用，效果较好的为 P1、P2、P3、P6、P7、P8、P9、P10、
P12、P17、P18、808、809、810、818、823、826、827、834、
836、840、841、842、847、856 共 25 条引物;807、811、
835、857、884 在 d17 上扩增条带较少，也为可用引
物;P0 无扩增条带，P4、P5、P13、P14、P16、P19、815、
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2010 年第 6 期 杜萍等:野生毛木耳 ISSR-PCR反应体系的建立与优化
1. marker;2 － 4.退火温度 44℃;5 － 7.退火温度 46℃;8 － 10.退火温度 48℃;11 － 13.退火温度 50℃;14 － 16.退火温度 52℃;17 －
19.退火温度 54℃;20 － 22.退火温度 56℃;23 － 25.退火温度 58℃
图 8 退火温度对野生毛木耳 ISSR-PCR扩增的影响
1 － 3.退火温度 49℃;4 － 6.退火温度 50℃;7 － 9.退火温度 51℃;10 － 12.退火温度 52℃;13 － 15.退火温度 53℃;16 － 18.退火温度
54℃;19. marker
图 9 优化后的退火温度对野生毛木耳 ISSR-PCR扩增的影响
864、885 扩增条带较少，或相对较弱，或只在 1 号
DNA上有扩增带，本试验均不采用。
3 讨论
由于 PCR扩增受到许多因素的影响，因此在研
究时都应先建立起合适的反应体系并对其进行优
化，以获得重复性和可靠性较高的 ISSR谱带。从试
验结果可以看出，Mg2 +、引物和 dNTPs浓度对 ISSR-
PCR扩增有显著的影响，浓度过低，不能满足扩增
的要求;浓度过高，则由于组分间的竞争影响了扩增
效果。Mg2 +浓度是决定扩增产物的一个非常重要
的影响因子，高浓度 Mg2 +会使产物带有明显的背
景，适当降低 Mg2 +浓度则可以有效地消除背景，提
高反应的特异性，本试验最佳的用量为 0. 9 mmol /
L;引物浓度也是影响扩增效果的一个非常重要的
因素，浓度过高容易形成引物二聚体，同时，易引起
碱基错配，产生非特异性条带;浓度过低，其与模板
DNA的结合位点少，扩增产量下降，本试验适宜的
引物浓度为 2 μmol /L。可见，野生毛木耳 ISSR-PCR
反应需要较高的引物浓度和较低的 Mg2 +浓度，而以
往的研究中 Mg2 +浓度一般为 1. 5 － 2. 5 mmol /L，引
物浓度一般为 0. 2 － 0. 75 μmol /L，但孙立夫等［17］在
法国蜜环菌 ISSR-PCR反应体系的优化试验中得出
1. 25 mol /L的引物浓度为最佳［5，8，14，16 － 18］。因此，对
于不同的物种，其试验参数均有差异，没有一种普遍
531
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2010 年第 6 期
图 10 部分筛选引物对野生毛木耳 ISSR － PCR扩增的影响
适宜的反应条件，试验前对反应体系的各个参数进
行优化显得尤为重要。
在遗传多样性研究中反应体系的稳定性和重复
性很重要。尽管 ISSR 标记使用了较长的引物和较
高的退火温度，但在对试验条件进行优化时，发现退
火温度仍是影响扩增的重要因素。不同引物之间退
火温度存在很大差异，退火温度过高或者过低均会
导致扩增结果出现背景弥散、非特异性产物增加，或
者条带缺失的现象。本试验将理论退火温度在50 －
56℃的均采用 51℃，在 40 － 46℃的均采用 45℃退火
温度获得了较好的扩增效果。ISSR-PCR 反应程序
中的循环次数决定着扩增产量，过高过低均会导致
扩增产物减少，本试验最佳循环次数为 35，与大多
数研究者的结果一致。试验确定了野生毛木耳 IS-
SR-PCR 扩增的适宜反应体系及程序，为下一步进
行野生毛木耳遗传多样性分析提供理论依据。
4 结论
本研究以野生毛木耳为材料，建立了重复性好，
分辨率高的 ISSR-PCR 反应体系。在保证扩增产量
和特异性的基础上，为节约药品，通过单因素多水平
试验，综合以上结果确定了适合野生毛木耳 ISSR-
PCR扩增的反应体系:总反应体积 25 μL，其中含 10
× PCR buffer 2. 5 μL，模板 DNA 为 25 ng、dNTPs 为
0. 24 mmol /L、Taq DNA 聚合酶为 1 U、Mg2 +为 0. 9
mmol /L，引物为 2 μmol /L，ddH2O 12. 6 μL。适宜的
扩增条件为 94℃预变性 1 min，94℃变性 30 S，51
(45)℃退火 1 min，72℃延伸 1. 5 min，35 个循环，最
后 72℃延伸 10 min，4℃保存。初步筛选出 25 条扩
增效果较好的 ISSR 引物用于野生毛木耳的遗传多
样性分析。
参 考 文 献
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2007.
·科学出版社新书·
进化
(英)巴顿 等著 宿兵 等译
978-7-03-027175-4 ￥ 168. 00 元(含光盘) 2010 年 4 月出版
内容简介:本书是一部全面、系统介绍进化生物学的教科书。本书的作者均是多年从
事进化生物学研究并对本领域有卓越贡献的欧美学者。本书涵盖了进化生物学的产生和
发展的历史，从西方早期的自然神学到达尔文的进化论。本书介绍了进化生物学的重要科
学问题和相应的研究领域，如生命的起源、物种形成与生命多样性产生的机制、体制发育的
进化、突变和遗传重组、DNA和蛋白质的变异、生命复杂性状的遗传基础、自然选择在分子
水平的作用机制、进化中的冲突与合作、进化中新性状的产生以及人类起源和进化的历史
等。本书的讲述深入浅出并提供了大量实际研究的例证和精美直观的图表。
本书适合于作为本科生和研究生的专业教材，同时也是从事生命科学研究的学者不可
多得的参考书。
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