全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 3期，2007年 6月 615
提取植物叶中水杨酸最佳条件的探讨
黄永鑫，王洋，阎秀峰 *
东北林业大学生命科学学院，哈尔滨 150040
收稿 2007-02-02 修定 　2007-04-19
资助 国家自然科学基金(3067 0325 和 30070 086)。
* 通讯作者(E-ma il：xfyan@ma i l.hl . cn；T el：04 51 -
8 2 1 9 0 0 5 2 )。
在测定植物中游离态水杨酸(salicylic acid，
SA)和结合态 SA的方法中，高效液相色谱被认为
是一种精密度高、重复性好的方法(李兆亮等
1997；徐幼平等 1997)。结合态 SA一般采用测
定其水解后 SA含量的方法测定，但由于 SA易升
华，植物组织中 SA提取的回收率总是很低。虽
然有法可以减少提取液浓缩过程中SA的升华和提
高回收率(Verberne等 2002)，但从总体上说，迄
今对其提取条件尚少系统研究。为此，本文以喜
树(Camptotheca acuminata Decne.)叶片为材料，在
Verberne等(2002)方法的基础上，对提取 SA过程
中的温度、超声时间、提取溶剂及其适宜浓度作
了探讨。结果如下。
1. 提取SA的溶剂一般采用挥发性高和有毒的
甲醇。我们分别以甲醇和乙醇(按原方法浓度)为
溶剂超声提取(500 W，40 kHz)的结果表明，乙
醇的效果优于甲醇(表 1)。
最佳。
4. 称取 4份喜树叶粉，每份 0.5 g，分别加
入 SA标准溶液(1 µg·mL-1) 60 µL，在确定的最佳
提取条件下，测得加标提取回收率为 94.5%。在
同样的方法条件下，测得拟南芥(Ar ab ido ps is
thaliana)和烟草(Nicotiana tabacum)的加标回收率
分别为 92.7%和 95.1%。
参考文献
李兆亮, 原永兵, 李冬梅(1997). 薄层层析和高效液相层析技术结
合测定植物叶片水杨酸含量. 植物生理学通讯, 33 (2): 130~
132
徐幼平, 马志超, 蔡新忠(1997). 反相高效液相色谱测定番茄组
织中的水杨酸. 植物生理学通讯, 33 (1): 49~52
Verberne MC, Brouwer N, Delbianco F, Linthorst HJM, Bol JF,
Verpoorte K (2002). Method for the extraction of the vola-
tile compound salicylic acid from tobacco leaf materia l.
Phytochem Anal, 13: 45~50
表 1 乙醇和甲醇溶剂提取效果的比较

溶剂 游离态 SA含量 / 结合态 SA含量 /
ng·g-1 (FW) ng·g-1 (FW)
甲醇 28.35±1.82a 151.00±4.48a
乙醇 36.02±3.70b 204.92±22.03b
　　不同小写字母表示在 0 .0 5 水平上差异显著。
图 1 不同浓度乙醇对 SA提取的影响
图 2 提取时间对 SA提取的影响
2. 进一步以 30%、40%、50%、60%、70%、
80%、90%乙醇和无水乙醇提取的结果表明，不
同浓度乙醇对游离态 SA含量影响不大，结合态
SA含量则有随乙醇浓度升高而增加的趋势，浓度
在 60%~80%之间时增加的幅度最大，90%后变
化不大(图 1)。随着乙醇浓度的增加，随后的真
空浓缩过程可以缩短，因此认为以用无水乙醇为
提取溶剂较适宜。
3. 以无水乙醇为提取溶剂，分别超声 1、3、
5、7、9、13、17、21和 30 min的结果表明，
提取时间主要影响结合态SA的提取，而对游离态
SA则无影响(图 2)，据此认为提取时间以 9 min为