全 文 ：植物生理学通讯 第43卷 第1期，2007年2月128
收稿 2006-11-25 修定 　2007-01-15
* E-mail：xylong168@163.com；Tel：0855-2118896
昆明山海棠的组织培养与快速繁殖
龙祥友*，贺定翔，郭德美，郑建立
贵州信邦中药发展有限公司，贵州凯里 560013
Tissue Culture and Rapid Propagation of Tripterygium hypoglaucum (Leul.)
Hutchins
LONG Xiang-You*, HE Ding-Xiang, GUO De-Mei, ZHENG Jian-Li
Guizhou XINBANG Tradition Chinese Medicine Development Company Limited, Kaili, Guizhou 560013, China
1 植物名称 昆明山海棠[Tripterygium hypoglaucum
(Leul.) Hutchin]。
2 材料类别 幼嫩叶片。
3 培养条件 基本培养基为 WPM 和 MS。(1)愈伤
组织诱导培养基：WPM+KT 0.5 mg·L-1 (单位下
同)+IAA 0.2；(2)分化培养基：MS+6-BA 0.5+NAA
0.1；(3)壮苗培养基：MS+6-BA 0.2+NAA 0.5；
(4)生根培养基：1/2MS+IBA 0.5。以上培养基均
附加30 g·L-1 蔗糖、6 g·L-1 琼脂，pH 5.8。培养
室温度为(25±2) ℃，光照时间12 h·d-1，光强为
30~40 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 剪取幼嫩的叶片，于自来水
下冲洗 20 min，洗洁精溶液浸泡 15 min，再用
自来水漂洗干净。将上述材料置于超净工作台上，
先用 75% 酒精浸泡 30 s，0.1% 升汞浸泡 8~13
min，无菌水冲洗5次以上，无菌滤纸吸干叶片表
面的水，剪去叶片边缘，然后用解剖刀切成1 cm×1
cm 左右的小块，接种于培养基(1)中，培养15 d
后叶片切口处开始膨大，35 d 后诱导出1.5 cm×
1.5 cm 左右的黄绿色颗粒状愈伤组织团。
4.2 愈伤组织分化 将愈伤组织团转接于培养基(2)
中进行培养，20 d后陆续分化出5~13棵丛生芽。
反复分切丛生芽，在培养基(2)中进行增殖培养，
可以获得大量的丛生芽(图 1)。
4.3 壮苗 将增殖后的丛生芽转入到培养基(3)，丛
生芽逐渐长大，20 d 时转入生根培养。
4.4 生根 将经过壮苗培养的无根苗切下，转接于
培养基(4)中培养, 25 d后长出2~4条长1.5~4.5 cm
的白色根，生根率达 9 5 % 以上。
4.5 炼苗和移栽 当大部分苗的根长达2 cm以上
时，打开瓶盖，炼苗 2~4 d，然后用镊子将苗轻
轻夹出，用清水洗去基部残留的培养基，栽于腐
殖土:珍珠岩:园土(2:1:1)的苗床中，浇透水，适当
遮阴，成活率可达 9 7 % 以上。
5 意义与进展 昆明山海棠属卫矛科卫矛属植物，
具有清热解毒、消肿散积、杀虫止血及显著的抗
炎作用和对体液免疫及细胞免疫等作用，主治风
湿性关节炎、红斑狼疮、麻风病、白血病等，
应用前景广泛。我们对昆明山海棠叶片采用组织
培养快繁技术已产出试管苗50多万株，为实现昆
明山海棠的人工规模化栽培提供一条可能有效的途
径。昆明山海棠的组织培养与快速繁殖尚未见报
道。
图1 昆明山海棠的愈伤组织分化