全 文 ：第 24 卷　第 3 期　　　　　　　　　　　　　植　　　物　　　研　　　究 2004 年　7 月
Vol.24　No.3　　　　　　　　　　　　BULLETIN OF BOTANICAL RESEARCH July 　2004
基金项目:黑龙江省教育厅科学技术研究项目(9551010);哈尔滨师范大学校基金资助
第一作者简介:关 (1969—),女 ,硕士 ,讲师 ,现从事植物生物学研究工作。
收稿日期:2003-12-27
粗糙龙胆地下器官龙胆苦苷和可溶性糖含量的动态研究
关　 1 　王　臣1 　王　晔2
(1.哈尔滨师范大学生物系 , 哈尔滨　150080)
(2.西安东盛集团 , 西安　710075)
摘　要　对两个栽培地点北安和呼兰产粗糙龙胆的主要有效成分龙胆苦苷的含量和可溶性糖含
量进行了研究 。结果表明:龙胆苦苷含量随发育节律而波动 ,6 月份虽然有一个积累高峰 ,但含水
率高 ,不宜定为采收期 ,适宜采收期均应是花期和休眠期。可溶性糖含量相应在 6月份出现先低
后高的趋势 ,在生长后期则积累较多。
关键词　粗糙龙胆;高效液相色谱法;龙胆苦苷;可溶性糖
The study on dynamic of the contents of gentiopicroside and soluble
sugars in under ground organs of Gentiana scabra
GUAN Yang 1 　WANG Chen1 　WANG Ye2
(1.Biolog y Department of Harbin Normal University ,Harbin　150080)
(2.Xi an Topsun G roup Co.LTD , Xi an　710075)
Abstract　In this paper the contents of gentiopicroside and soluble sugars in under g round o rgans of
cultivated Gentiana scabra in Bei an and Hulan has been studied.The results indicated that the con-
tent of gentiopicroside changed w ith the rhy thm of development .The content of gentiopicroside is
higher in early June , but the w ater contents w as also higher.So i t is unsuitable to harvest in this sea-
son.To harvest in flowering and dormancy period is the best .The content of soluble sugars decreased
in early June and gradually increased subsequently.It accumulated more in later development period.
Key words　Gentiana scabra ;HPLC;gentiopicroside;soluble sugar
粗糙龙胆(Gent iana Scabra Bunge)是药典收
载龙胆药材的原植物之一 ,是黑龙江省著名地道药
材“关龙胆”的重要药源 ,以干燥根及根茎入药 ,味
苦 ,性寒 , 入肝胃经 ,有泻肝火 , 除下焦湿热的功
效[ 1] 。目前 ,由于野生龙胆资源日趋枯竭 ,市售产
品以栽培产品为主[ 1 ～ 5] 。粗糙龙胆是当前主栽品
种之一 ,主要在黑龙江省中东部 、吉林和辽宁的东
部山区 、低山区及平原与山区的过渡地带栽培 。关
于粗糙龙胆有效成分龙胆苦苷的含量前人已做过
一些研究工作 ,由于产地 、研究方法 、栽培方法 、加
工方法 、取材时间等方面的不同 ,因而相关结论亦
多种多样[ 6 ～ 8] 。本文通过跟踪粗糙龙胆的发育进
程 ,研究两个不同栽培地区有效成分和可溶性糖含
量的变化 ,旨在探讨其动态积累规律 ,为龙胆的规
范化栽培和GAP基地的建设提供基础资料 。
1　材料与方法
1.1　试剂及仪器
Waters 1525 高效液相色谱泵 ,Waters2487 紫
外 —可见检测器 , Empow er工作站 , WatersCode
图 1　北安产粗糙龙胆龙胆苦苷含量和
可溶性糖含量年动态曲线
Fig.1　Curve of dynamic accumulations of the contents of
gentiopicroside andsoluble sugars o f Gentiana scabra
cultivated in Bei an
5CH 型柱温箱 , Anke TDL —5 型离心机 ,Sartoriua
BS —210S 电子天平 , UV —2202 紫外—可见分光
光度计。甲醇为色谱纯(美国迪马公司),乙醇为分
析纯 ,水为超纯水。龙胆苦苷对照品购自中国药品
生物制品检定所 。
1.2　材料
供试药材均系人工栽培。目前 ,在栽培生产上
通常的做法是粗糙龙胆定植 2 年采收入药 。本研
究亦遵从这一做法 ,采集定植 2年(实际应为 3年
生)的粗糙龙胆 。采样地点分别是哈尔滨市呼兰城
郊和黑龙江省北安市赵光镇 。取材时间自 5 月 5
日～ 10月 15日 ,间隔10 ～ 15 d取材一次;每个样
地每次选取代表性植株15 ～ 20 株 ,尽可能将根茎
及根全部挖出 ,快速洗净泥土 ,置室温下阴干 ,粉
碎 ,过40目筛 ,根粉备用。
1.3　方法
1.3.1　可溶性糖含量测定 采用蒽酮法比色法 。
具体可溶性糖提取及含量测定参照文献[ 9] 。
1.3.2　龙胆苦苷含量测定
色谱条件 　Nova—Pak C18 色谱柱(3.9 mm
×150 mm);流动相:甲醇:水(25∶75);流速:
1.0 mL/min;保留时间为4 min;进样量5μL ,紫外
检测波长270 nm ,理论塔板数按龙胆苦苷峰计算
不低于5 000 ,柱温40℃。
标准曲线的制备　精密称取龙胆苦苷对照品
10.0 mg置于25 mL容量瓶中 ,以甲醇溶解并定容
至刻度 ,摇匀制成浓度为0.40 mg/mL的对照品贮
存液。精密吸取上述贮存液0.1 , 0.2 , 0.3 , 0.4 ,
0.5 mL加入到10 mL容量瓶中 ,用甲醇定容至刻
度 ,摇匀并进样 。每一浓度平行进样 3次 ,进样量
为5 μL 。以峰面积为纵坐标 ,对照品浓度为横坐
图 2　呼兰产粗糙龙胆龙胆苦苷含量和
可溶性糖含量年动态曲线
Fig.2　Curve of dynamic accumulations of the contents
of gentiopicroside andsoluble sugars of Gentiana scabra
cultiv ated in Hulan
标绘制标准曲线。回归方程为:
Y =7.206 X -1.963 , r =0.999 67
表明龙胆苦苷在0.004 ～ 0.020 mg/mL 浓度
范围内具有良好的线性关系 。
样品溶液的制备 精密称取龙胆根粉50 mg置
50 mL容量瓶中 ,加入约45 mL 70%乙醇 ,超声提
取30 ～ 35 min ,冷却至室温 ,用 70%乙醇定容至刻
度 ,混匀 , 取约5 mL放入10 mL离心管中 , 转速
2 500 r/min 离心 10 min , 取上清 1 mL 加入到
10 mL容量瓶中 , 用流动相稀释并定容 , 混匀经
0.45μm微孔滤膜过滤 ,等待进样。
2　结果与分析
从图 1可以看出 5月 5日 ～ 9 月 30日龙胆苦
苷含量和可溶性糖含量年动态曲线的变化。北安
产粗糙龙胆的龙胆苦苷含量变化幅度为4.88%～
7.12%,年动态曲线似有两个积累高峰 ,苦苷含量
第一个波动出现在萌动展叶末期的 6月20日 ,含
量升高至7.12%,而可溶性糖含量则 5 月20日 ～ 6
月 5日出现最低点 ,之后逐渐升高;从 6月20日 ～
8月20日为期近 2个月 ,苦苷含量在6%上下小幅
波动 ,呈逐渐降低趋势 ,从 8月20日 ～ 9月30日 ,
龙胆苦苷含量逐渐升高 ,在 9月30日产生第二峰;
在此期间可溶性糖含量波动不大 ,但龙胆苦苷含量
升高 ,可溶性糖含量则有降低的趋势。
呼兰产粗糙龙胆的苦苷含量变化幅度为
5.43%～ 7.05%(图 2),年动态曲线似有三个积累
高峰 ,第一个高峰与北安相差不大 ,是在萌动展叶
末期的 6 月 5 日 ,之后逐渐回落;7 月 5 日形成一
个小的峰谷后转而回升 ,从 7月5日 ～ 9月30日 ,
龙胆苦苷含量总体上呈升高的趋势;在 8月20日
3673 期　　　　　　　　　　　关 等:粗糙龙胆地下器官龙胆苦苷和可溶性糖含量的动态研究
苦苷含量出现第二峰值 ,8月30日再成峰谷 ,之后
呈升高趋势 ,在 9月30日出现第二峰。至于呼兰
产粗糙龙胆的可溶性糖含量最低点也出现在 6月
5日;以后从 6月20日～ 9月30日为期近 3个月期
间 ,含量逐渐升高。
3　讨论
3.1　本文研究表明:呼兰和北安两个产地的粗糙
龙胆的龙胆苦苷含量的变动幅度为5%～ 7.12%,
前人关于粗糙龙胆苦苷含量的报道亦多在4%～
7%的范围内[ 6 ,10 , 11] ,这说明粗糙龙胆引种驯化
后 ,不同产地的产品有效成分含量相对稳定 ,具备
作为栽培品种的基本条件 ,保证了栽培品与野生品
药材质量的一致性 ,奠定了栽培品安全入药的生药
学基础。
3.2　不论两地产品的苦苷含量如何波动 ,都在
4.88%之上 ,说明在整个生育期内任何时间进行采
收 ,产品的苦苷含量均超过药典规定的“不得少于
1.0%”的标准[ 1] 。结合前人的报道和本文研究结
果可知[ 8 ,10 , 11] , 药典中收载的龙胆的四种原植物
不论产地如何 ,商品药材的龙胆苦苷含量均超过
3%,高者可达8.39%,均明显高于药典规定。若不
同产地的不同龙胆苦苷含量的药材以等量入药 ,势
必造成疗效的差异 ,所以为保证疗效 ,建议应对药
典相应的部分进行修订 ,将龙胆苦苷含量的最低标
准提高至3%～ 4%。
3.3　质量(苦苷含量)和折干率是决定栽培龙胆最
佳采收期的两大因素 。呼兰和北安两个产地的粗
糙龙胆在 6月份萌动期均出现了龙胆苦苷含量的
积累高峰 ,但由于此期间的折干率较低 ,这样会影
响药材的产量 ,所以结合产量及效益等因素 ,适宜
的采收期应为花期和休眠期 ,即呼兰产地的粗糙龙
胆应在 8月中旬的花期和 9月中旬的休眠期采收 ,
而北安的应在 8月下旬和 9月末 10月初采收 。
3.4　两地所产粗糙龙胆的苦苷含量虽然相对稳
定 ,但在整个生长季也存在着较为明显的波动 ,基
本呈现出升高 、降低和逐渐又升高的趋势;而可溶
性糖含量则出现先低后高的趋势。这种波动的原
因可能与发育节律有关 。另外两地所产的粗糙龙
胆均在 6月有一龙胆苦苷的积累高峰 ,而可溶性糖
含量则出现一个低谷 ,可能是由于萌动展叶期地上
部分光合速率低 ,根中的可溶性糖等被大量被消耗
而提高了苦苷合成量 。
3.5将各时期产品的苦苷含量进行平均计算可知
北安比呼兰的高出3.59%,两地产品的最高值与最
低峰值出现相差10 d左右 ,在地理位置上北安的纬
度高出2°,这一结果与前人的相关报道一致 ,随着
纬度的升高龙胆苦苷含量呈升高的趋势[ 7 ,8] 。
3.6　就可溶性糖含量的动态变化而言 ,二者在萌
动展叶期均出现大幅度降低 ,但在花末期可溶性糖
含量均明显增加 ,可能与抗寒性相关[ 12] 。龙胆地
下器官中主要的贮存物质为糖类 ,含量高达20%～
50%,其药用价值何在 ,有待于进一步研究 。唐传
核等就龙胆低聚糖可作为功能性食品添加剂及其
生产方法和龙胆低聚糖的生理功能等方面进行过
综述[ 13] 。由于粗糙龙胆含糖量过高 ,致使在夏季
药材吸湿变软 ,对药材质量会有所影响 。
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