全 文 :书不同添加剂对笋壳青贮品质和营养价值的影响
王力生1,齐永玲1,2,陈芳1,李大威1,2,程茂基1
(1.安徽农业大学动物科技学院,安徽 合肥230036;2.安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室,安徽 合肥230036)
摘要:本试验通过添加不同种类的青贮剂研究其对笋壳青贮品质和营养价值的影响。试验共5组,即对照组(CK),
原料直接青贮;A组:加玉米粉10%;试验B组:玉米粉和乳酸菌(10+0.001)%;C:添加3种酸(甲酸∶乙酸∶丙
酸=80∶11∶9),混合液0.3%;D组:甲酸和甲醛混合液3%(85%~90%甲酸和37%~40%甲醛混合比为1∶1),
塑料袋抽真空密封青贮45d。并于青贮第3,5,8,15,23,30和45天分别取样。结果表明,笋壳单独青贮时pH值
均达4.50以上,氨态氮占总氮比例高达22.83%,营养物质损失大,青贮效果不理想。添加玉米粉,玉米粉+乳酸
菌,有机酸,甲酸+甲醛后笋壳青贮的pH值、氨态氮占总氮比例均显著低于对照组(犘<0.05),4种添加剂处理均
能显著提高粗蛋白、干物质及乳酸含量(犘<0.05),可使笋壳青贮的发酵品质和营养价值得到改善。各处理中乳酸
含量均高于乙酸、丙酸和丁酸,各添加剂均可显著提高乳酸含量并降低乙酸、丙酸和丁酸含量(犘<0.05),青贮品质
和营养价值各处理组优劣顺序为B>A>D>C>CK;青贮前8d是影响青贮品质和营养价值的重要时期。
关键词:笋壳;添加剂;青贮;发酵品质;营养价值
中图分类号:S816.15 文献标识码:A 文章编号:10045759(2013)05032607
犇犗犐:10.11686/cyxb20130538
目前,在我国东南部地区竹笋(犇犲狀犱狉狅犮犪犾犪犿狌狊犾犪狋犻犳犾狅狉狌狊)产量越来越大,仅安徽和浙江两省其年产量约160
多万吨。经加工后,竹笋的下脚料约90万t。竹笋营养丰富,蛋白、膳食纤维含量高,成为人们日常生活中喜爱的
菜品和休闲品,也被誉为素食第一品。但近年来,竹笋加工业大规模发展,每年的出笋季节,废弃笋壳堆积如山,
成为各竹笋产区的一大污染源,对当地生态环境造成一定威胁。竹笋的生产季节主要集中在3月初到5月末,出
笋时,恰逢南方霉雨季节,鲜笋壳含水量很高,蛋白质丰富,极易腐烂。当前我国饲料资源匮乏,已成为制约畜牧
业发展的瓶颈,为加快畜牧业的发展,开发和扩大饲料资源是当务之急,为此,大量废弃的笋壳便得到了人们的重
视,保存和高效利用笋壳就成了研究者们很好的研究课题。Azzini等[1]曾分析竹笋加工下脚料的营养成分,王小
芹和刘建新[2]通过添加麸皮、稻秆,周建钟等[3]利用氨水、尿素、碳酸氢铵进行氨化青贮,为笋壳饲料的开发做了
一些尝试。目前,国内外在青贮方面的研究甚多,青贮方式、青贮剂的选用等综合配套技术越来越受到人们的关
注。然而,国内外开展高水分笋壳青贮的研究鲜见报道,笔者根据竹笋下脚料的生物学特性,采用调控水分、增加
糖分和添加青贮剂等综合处理技术,研究其对笋壳青贮品质和营养价值的影响以及变化规律,为生产优质青贮笋
壳提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验原料鲜笋壳(水分含量83.98%)由宁国市乡味源农产品开发有限公司提供。乳酸菌接种剂(LD):主要
成分为植物乳杆菌和乳酸片球菌,活菌总数≥1×109cfu,由山东宝来利来生物工程股份有限公司提供;丙酸、甲
酸、乙酸、甲醛均为分析纯(AR),玉米粉合肥市售。
1.2 试验设计
本试验共有6种添加剂即玉米粉、甲酸、乙酸、丙酸、甲醛、乳酸菌接种剂。以不同的组合方式共设置5个处
326-332
2013年10月
草 业 学 报
ACTAPRATACULTURAESINICA
第22卷 第5期
Vol.22,No.5
收稿日期:20130320;改回日期:20130422
基金项目:安徽省农业成果转化项目(12040302077)和安徽省肉牛产业技术体系专项经费资助。
作者简介:王力生(1957),男,安徽巢湖人,副教授,硕士。Email:wanglisheng@ahau.edu.cn
通讯作者。Email:cmj681212@sohu.com
理组,即对照组(CK)、3%甲乙丙酸(80∶11∶9)、0.3%甲酸甲醛(1∶1)、玉米粉10%、玉米粉和专用乳酸菌接种
剂(10+0.001)%,详情见表1。每个处理21个重复。将原料与青贮添加剂均匀混合,快速装入聚乙烯袋,用真
空封口机将其抽成真空、封口,室温下保存,分别于青贮第3,5,8,15,23,30和45天取样(每次3个重复)分析。
1.3 分析指标和测定方法
感官评定:青贮结束后,根据青贮饲料质量评定程序从色泽、气味、质地、霉变等方面进行感官评定[4]。
pH值:用pH计(PHS3C,上海雷磁)测量。取青贮样品20g,加180mL去离子水,用组织捣碎机捣碎,先
后用4层纱布和定性滤纸过滤,得到浸出液,取出一部分浸出液用pH测试仪测定pH值[5]。
乳酸:使用高效液相色谱仪分析(Agilent1260,安捷伦科技有限公司)测定。色谱柱为 XDBC18,流速1
mL/min,检测波长210nm,柱温31℃。
乙酸、丙酸、丁酸:使用高效气相色谱仪(岛津 GC2010,日本岛津科技有限公司),氢火焰离子化检测器
(FID),WondaCapWax毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm),柱温150℃,气化室、检测器温度180℃,分流比
50.0,出扫流量1.5mL/min。
表1 鲜笋壳青贮试验设计
犜犪犫犾犲1 犈狓狆犲狉犻犿犲狀狋犱犲狊犻犵狀狅犳犳狉犲狊犺犫犪犿犫狅狅狊犺狅狅狋狊犺犲犾狊犻犾犪犵犲
处理 Treatments 添加量 Rateofadditives
CK 0
A 10%玉米粉。10%cornflour.
B 10%玉米粉+0.001%乳酸菌制剂。10%cornflour+0.001%lactobaciluspreparation.
C 0.3%(甲酸+乙酸+丙酸)。0.3%(formicacid+aceticacid+propanoicacid).
D 3%(甲醛+甲酸)。3%(formaldehyde+formicacid).
注:甲酸∶乙酸∶丙酸=80∶11∶9。甲醛∶甲酸=1∶1(甲醛浓度为37%~40%,甲酸浓度为85%~90%)。
Note:Formicacid∶aceticacid∶propanoicacid=80∶11∶9.formaldehyde∶formicacid=1∶1(theconcentrationofformaldehyde:37%~40%,
theconcentrationofformicacid:85%~90%).
氨态氮(NH3N)和粗蛋白(CP):使用凯氏定氮法,其中 NH3N含量是指浸出液中的 NH3N 占总氮百
分比。
干物质(DM):取鲜样,在65℃下中烘48h后在室温下冷却4h,测得的水分为初始水分。再将样品粉碎,取
粉碎样在105℃下烘干后测定干物质含量。
可溶性糖(WSC):利用苯酚硫酸法测定。
中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF):用纤维测定仪(FIWE6,意大利VELP公司),采用范氏纤维测
定法测定。
1.4 数据处理与分析
利用Excel软件进行基础数据处理,再用SAS9.1.3软件对试验结果进行 ANOVA分析和Duncan多重
比较。
2 结果与分析
2.1 青贮料的感官评定
主要从色泽、气味、质地3个方面进行感官评定。笋壳青贮45d后开袋,对照组有很强的丁酸味和氨味,青
贮料呈黏块,污泥状,无结构,墨绿色,发酵品质极差;A组有酒香味,青贮料呈湿润状态,颜色淡黄褐色,发酵效果
较好;B组有浓重的酒香味,青贮料结构湿润、紧密,颜色淡黄褐色,青贮品质佳;C组芳香味弱,青贮料结构保持
良好,颜色呈深褐色,青贮效果一般;D组芳香味弱,青贮料硬度大,颜色比原料稍深,青贮效果较好。
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2.2 不同添加剂对青贮笋壳pH和NH3N的影响
整个青贮发酵期间对照组pH均超过4.50,第5天pH快速上升至第8天达到高值(图1),第23天逐渐下
降,第45天pH下降为4.57,D组pH均处于最低点,第45天pH仅为3.43;A组青贮前5dpH几乎没变化,第
5天至第8天呈上升趋势,pH达到全期高值4.08,第8天后呈缓慢下降,第45天pH达3.81;B组青贮前8dpH
持续上升,并达最大值4.15,第8天至15天快速下降,15d后趋于平稳,第45天为3.79;C组前5dpH下降到
4.09,第8天开始上升,且逐渐加快,第45天pH升至4.52。A、B和D组pH 均低于对照组和C组,差异显著
(犘<0.05),且整个青贮期均处于4.2以下,符合优质青贮pH的标准。
青贮前5d,A、B组和对照组NH3N略高于C和D组(犘>0.05),青贮前8d各处理组产NH3N量均呈现
缓慢增多的趋势,8d后A、B和D组NH3N趋于平缓,但C组和对照组则加快上升,显著高于A、B和D组(犘<
0.05);D组在各个时间点NH3N含量均为最低,而对照组均处于最高水平,青贮第45天,各组NH3N含量分
别为对照组22.83%、A组9.17%、B组8.93%、C组16.72%和D组8.21%(图2)。
图1 不同添加剂对青贮笋壳狆犎值的影响
犉犻犵.1 犈犳犳犲犮狋狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犪犱犱犻狋犻狏犲狅狀狆犎狅犳
犫犪犿犫狅狅狊犺狅狅狋狊犺犲犾狊犻犾犪犵犲
图2 不同添加剂对青贮笋壳犖犎3犖的影响
犉犻犵.2 犈犳犳犲犮狋狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犪犱犱犻狋犻狏犲狅狀犖犎3犖狅犳
犫犪犿犫狅狅狊犺狅狅狋狊犺犲犾狊犻犾犪犵犲
2.3 不同添加剂对青贮笋壳DM和 WSC的影响
青贮开始前8d各参试组干物质含量(DM)下降较快,8d后下降幅度趋于缓慢,但对照组下降幅度仍然较
大。青贮第45天各组干物质含量分别为 A组20.82%、B组21.01%、C组13.72%、D组14.77%和对照组
11.97%,A和B组差异不显著(犘>0.05),其他各组间差异均显著(犘<0.05)(图3)。
可溶性糖(WSC)B组均处于最高点,C组最低。在整个青贮期各组可溶性糖含量均呈下降趋势,8d后可溶
性糖含量下降趋缓,可溶性糖含量高低顺序各个时间点均为B>A>D>CK>C;青贮第45天各组可溶性糖含量
分别为A组8.31%、B组8.05%、C组7.22%、D组7.66%和对照组6.86%。A和B组差异不显著(犘>0.05),
其他各组间差异均显著(犘<0.05)(图4)。
2.4 不同添加剂对青贮笋壳有机酸的影响
青贮45d,B组产乳酸量最高,其次为A、C组和对照组,D组最低。各组间差异均显著(犘<0.05)。对照组
乙、丙酸含量均最高,与其他各组间差异均显著(犘<0.05),C、D组与A、B组间差异显著(犘<0.05)。丁酸含量
A、B组均显著低于C、D组和对照组(犘<0.05)(表2)。
2.5 不同添加剂对青贮笋壳营养成分的影响
综合营养水平A和B两组最佳,DM、CP含量B组稍高于A组,而NDF含量较A组低,总体营养成分B组
好于A组(犘>0.05);其次是C、D组,对照组最差;营养成分各处理组明显优于对照组(犘<0.05)(表3)。
823 ACTAPRATACULTURAESINICA(2013) Vol.22,No.5
图3 不同添加剂对青贮笋壳犇犕的影响
犉犻犵.3 犈犳犳犲犮狋狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犪犱犱犻狋犻狏犲狅狀犱狉狔犿犪狋狋犲狉(犇犕)
犮狅狀狋犲狀狋狅犳犫犪犿犫狅狅狊犺狅狅狋狊犺犲犾狊犻犾犪犵犲
图4 不同添加剂对青贮笋壳 犠犛犆的影响
犉犻犵.4 犈犳犳犲犮狋狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犪犱犱犻狋犻狏犲狅狀狑犪狋犲狉狊狅犾狌犫犾犲犮犪狉犫狅犺狔犱狉犪狋犲
(犠犛犆)犮狅狀狋犲狀狋狅犳犫犪犿犫狅狅狊犺狅狅狋狊犺犲犾狊犻犾犪犵犲
表2 不同添加剂对青贮笋壳有机酸的影响
犜犪犫犾犲2 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犪犱犱犻狋犻狏犲狊狅狀狅狉犵犪狀犻犮犪犮犻犱狊狅犳犫犪犿犫狅狅狊犺狅狅狋狊犺犲犾狊犻犾犪犵犲 %DM
测定项目Items CK A B C D
乳酸Lacticacid 3.37±0.16d 11.08±0.04b 14.33±0.02a 5.35±0.29c 0.86±0.09e
乙酸Aceticacid 0.23±0.01a 0.11±0.02cd 0.12±0.01bc 0.13±0.01b 0.09±0.01d
丙酸Propionicacid 0.24±0.02a 0.14±0.02cd 0.13±0.02d 0.17±0.01b 0.16±0.01bc
丁酸Butyricacid 0.27±0.01a 0.10±0.01c 0.09±0.01c 0.12±0.01b 0.12±0.00b
注:表中同行字母不同为差异显著(犘<0.05)。下同。
Note:Themeansinthesamerowwithdifferentletterindicatesignificantdifferenceat0.05level.Thesamebelow.
表3 不同添加剂对青贮笋壳营养成分的影响
犜犪犫犾犲3 犈犳犳犲犮狋狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犪犱犱犻狋犻狏犲狊狅狀狀狌狋狉犻狋犻狅狀犪犾犮狅犿狆狅狀犲狀狋狊狅犳犫犪犿犫狅狅狊犺狅狅狋狊犺犲犾狊犻犾犪犵犲
测定项目Items CK A B C D
干物质Drymatter(DM,%) 11.97d 20.82a 21.01a 13.72c 14.77b
粗蛋白Crudeprotein(CP,%DM) 13.20d 15.85a 16.03a 14.08c 14.93b
中性洗涤纤维Neutraldetergentfiber(NDF,%DM) 80.23a 58.02d 57.03d 76.02c 77.84b
酸性洗涤纤维Aciddetergentfiber(ADF,%DM) 50.06a 30.05d 31.99c 41.37b 40.32b
3 讨论
3.1 不同添加剂对青贮笋壳进行感官评价
从色泽、气味、质地对青贮笋壳进行感官评价,A组和B组效果较好,有光泽,质地松散,酒香味大,特别是B
组很强烈,对照组为笋壳直接青贮效果最差。A组和B组均添加玉米粉,玉米粉属于营养性添加剂,此类物质的
添加不仅可以降低青贮料的水分,而且还可以提供充足的可溶性碳水化合物,有助于乳酸菌发酵;B组补充玉米
粉同时添加乳酸菌,提高了乳酸含量,从而使酒香味更浓;有机酸属于发酵抑制剂类型,添加有机酸能直接降低青
贮原料的pH,快速抑制有害菌,降低氨态氮和丁酸含量,有助于乳酸含量的增加,改善发酵品质[6],乙酸和丙酸
防腐剂少量与甲酸混合,可以使青贮效果更佳[711],然而,本次试验C组青贮效果较差,酒香味不明显,色泽呈深
褐色与上述报道不符,可能与有机酸添加不足有关,尚待进一步验证;D组虽然酒香味较弱,但保存较好,是因为
甲醛作为防腐剂,能抑制青贮过程中各种微生物的发酵。
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3.2 不同添加剂对青贮笋壳pH和NH3N的影响
在青贮饲料中,pH、NH3N含量是评定品质优劣的重要指标[12,13],一般认为pH值、NH3N含量越低,青贮
料品质就好。对照组pH较高,整个发酵期间pH值均处于4.5以上,而且青贮前23dpH值处于上升趋势,后
期略有下降,说明前期有害微生物活动强烈,后期可能因缺氧,有害微生物活动受到抑制;在青贮初期,各添加物
处理组pH值均处于4.2以下,但到第5天,C组pH值开始缓慢上升,23d后快速升高,说明乳酸发酵不明显。
青贮过程中C组和对照组NH3N量一直显著增高,且随着发酵时间的延长有快速上升的趋势。其他试验组pH
值、NH3N量均较低,虽然各处理组pH、NH3N在青贮前8d有不同程度的提高,但8d后逐渐降低,说明青贮
环境处于稳定状态,可以达到长期保存青贮料的目的,这与田瑞霞等[14]研究结果一致。
3.3 不同添加剂对青贮笋壳DM和 WSC的影响
笋壳青贮期间DM均有不同程度的降低,试验A和B组DM下降幅度最小,明显好于其他组,对照组下降明
显,且有加快的趋势。干物质回收率也是青贮质量的一个重要指标,青贮料DM 变化较大,则在发酵过程中营养
物质降解就越大,保存越不佳[15]。保证乳酸菌的正常活动,需要保证充足的可溶性碳水化合物。乳酸菌数量和
可溶性碳水化合物含量这两个其中之一不足就会限制乳酸的发酵[16]。笋壳青贮过程中 WSC均有下降的趋势,
表明青贮过程微生物发酵需要消耗一定量的可溶性碳水化合物,因试验A和B组添加玉米粉致使 WSC含量一
直处于高水平。吕建敏等[17]在稻草(犗狉狔狕犪狊犪狋犻狏犪)青贮中添加麸皮补充 WSC的不足,从而改善了稻草青贮料的
品质。
3.4 不同添加剂对青贮笋壳有机酸的影响
有机酸含量是评价青贮质量好坏的一个重要指标,各种有机酸的含量大小可以直接反映青贮过程中哪种微
生物占主导地位[18]。本次试验表明,青贮笋壳添加玉米粉和乳酸菌,其有机酸含量明显优于其他各组,其中乳酸
含量A和B组较C组、D组及对照组显著增加(犘<0.05),而乙酸、丁酸含量则大多数低于C组、D组及对照组
(犘<0.05),Flya等[19]在苜蓿(犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪)青贮中添加玉米粉和乳酸菌也得到类似结论;侯晓静等[20]在青
贮稻草时,在添加米糠的各个处理中,青贮料的乙酸、丁酸含量下降,乳酸含量显著上升,改善青贮稻草的发酵品
质;玉柱等[21]在萎蔫和玉米粉混合处理紫花苜蓿袋装青贮中发现,处理组中添加玉米粉均使pH值、氨态氮,乙
酸、丁酸含量显著降低,乳酸含量增加。有机酸的添加,能快速降低青贮原料的pH值,快速抑制有害菌的作用,
降低氨态氮含量和丁酸含量,增加乳酸含量[22,23]。
3.5 不同添加剂对青贮笋壳营养成分的影响
A、B组营养组成明显优于C、D组及对照组,如干物质、粗蛋白、可溶性糖含量明显提高(犘<0.05),NDF和
ADF含量明显降低(犘<0.05)。添加玉米粉不仅改善笋壳的发酵品质,而且降低青贮原料的水分进而降低青贮
料营养物质的损失;而B组营养价值好于A组,可能是玉米粉和乳酸菌协同作用有利于乳酸菌优势的发挥,大量
的乳酸菌可以抑制有害微生物的活动,避免青贮过程中营养成分的破坏,而玉米粉添加本身也可能会改善青贮原
料部分营养;C和D组营养成分均好于对照组(犘<0.05),是因为甲酸可以降低蛋白质的分解,抑制细胞呼吸,增
加饲料中可溶性碳水化合物含量。刘玲等[22]在添加甲酸青贮红豆草(犗狀狅犫狉狔犮犺犻狊狏犻犮犻犪犲犳狅犾犻犪)时,发现甲酸能显
著降低ADF和NDF,提高CP含量。冀旋等[24]研究甲酸添加剂对鹅观草(犚狅犲犵狀犲狉犻犪犽犪犿狅犼犻)青贮品质影响的
试验中,证明添加甲酸使青贮料的CP、WSC含量显著提高,ADF显著下降,可以明显改善鹅观草的发酵品质。
干物质、粗蛋白、可溶性糖等D组均优于C组,说明甲酸和甲醛配合使用可能具有一定的协同效果,与杨富裕
等[25]报道相符。
4 结论
试验中添加玉米粉+乳酸菌不仅使青贮笋壳中蛋白、可溶性碳水化合物等营养成分和干物质总量流失最低,
而且青贮效果最佳;添加玉米粉组青贮品质良好,效果仅次于添加玉米粉+乳酸菌制剂组;添加甲醛+甲酸显著
降低青贮pH,氨态氮,保护了营养成分,发酵效果较好;添加有机酸对青贮品质改善有限;笋壳直接青贮发酵品
质较差,不宜采用。
033 ACTAPRATACULTURAESINICA(2013) Vol.22,No.5
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133第22卷第5期 草业学报2013年
犈犳犳犲犮狋狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犪犱犱犻狋犻狏犲狊狅狀狋犺犲狇狌犪犾犻狋狔犪狀犱狀狌狋狉犻狋犻狅狀犪犾狏犪犾狌犲狅犳犫犪犿犫狅狅狊犺狅狅狋狊犺犲犾狊犻犾犪犵犲
WANGLisheng1,QIYongling1,2,CHENFang1,LIDawei1,2,CHENGMaoji1
(1.ColegeofAnimalSciencesandTechnology,AnhuiAgriculturalUniversity,Hefei230036,China;
2.AnhuiProvincialLaboratoryforLocalLivestockandPoultryGeneticResource
ConservationandBioBreeding,Hefei230036,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:Thetestresearchesthequalityandnutritionalvalueinfluenceofbambooshootshelsilagethrough
addingdifferentkindsofsilageagent.Thetestisatotaloffivegroups.Controlgroup(CK),rawmaterialsdi
rectlyensiling.GroupA:addingcornflourto10%;GroupB:addingcornflourandlacticacidbacteriato
(10.000+0.001)%;GroupC:adding0.3% mixedacid(formicacid,aceticacid,propionicacid=80∶11∶9);
GroupD:adding3% mixedformicacidandformaldehyde[formicacid(85%-90%):formaldehyde(37%-
40%)=1∶1].Thereareplasticbagsforvacuumsealingafter45days.Andtheyweresampledrespectivelyat
silage3,5,8,15,23,30and45days.Theexperimentalresultsshowedthat:whenbambooshootshelsingle
ensiled,thepHvaluewasmorethan4.50,NH3Ntototalnitrogenratiowasashighas22.83%andnutrient
waslossoflarge.Silageeffectwasnotideal.Thetestgroupsrespectivelyaddingcornflour,cornflour+lactic
acidbacteria,organicacid,formicacidandformaldehydewerethatthebambooshootshelsilagepHvalueand
NH3Ntototalnitrogenratioweresignificantlylowerthanthatofcontrolgroup(犘<0.05).Fourkindsofad
ditivescansignificantlyimprovethecontentofthecrudeprotein,drymatterandlacticacid(犘<0.05),and
canmakethefermentationqualityandthenutritionalvalueofbambooshootshelsilageimproved.Lacticacid
contentwashigherthantheaceticacid,propionicacidandbutyricacidinaltreatments.Altheadditivescould
significantlyincreasethecontentoflacticacidanddecreaseaceticacid,propionicacidandbutyricacidcontent
(犘<0.05).TheorderofeachtreatmentgroupexcelencewasB>A>D>C>CKonsilagequalityandnutri
tionalvalue.Thatisanimportantperiodofsilagequalityandnutritionalvaluebeforeensiling8days.
犓犲狔狑狅狉犱狊:bambooshootshel;additive;silage;fermentationquality;nutritionalvalue
233 ACTAPRATACULTURAESINICA(2013) Vol.22,No.5