全 文 :林业科学研究 2008, 21 (4) : 548~554
Forest Research
文章编号 : 100121498 (2008) 0420548207
处理松材线虫病病死松树伐桩木腐菌的筛选
陈 瑶 1, 2 , 汪来发 13 , 朴春根 13 , 朱天辉 2 , 申相澈 3 , 郑荣镇 3
(1. 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所 ,北京 100091;
2. 四川农业大学林学园艺学院 ,四川 雅安 625014; 3. 韩国山林科学院 ,首尔 1302712)
摘要 :测试了木腐菌对松材线虫繁殖的影响以及对马尾松木块和松材线虫病病死树伐桩的分解能力 ,结果表明 ,供
试菌株除裂褶菌菌株外 ,其他菌株都能抑制松材线虫的繁殖 ,其中松材线虫在松生拟层孔菌菌株 W 10、W 11,硫磺菌
菌株 5452、6600,粗皮侧耳菌株 6221,虎掌菌菌株 6320,茯苓菌株 6284,灵芝菌株 6501菌落上完全不能存活。对马
尾松木块的分解试验结果表明 ,松生拟层孔菌菌株 W 10、W 11、硫磺菌菌株 6600、杂色云芝菌株 6923、茯苓菌株 6284
对马尾松木块具有较强的分解能力。田间接种硫磺菌菌株 6600、杂色云芝菌株 6923、松生拟层孔菌菌株 W 11、茯苓
菌株 6284和粗皮侧耳菌株 6221处理松材线虫病病死树伐桩 70 d后 ,硫磺菌菌株 6600和杂色云芝菌株 6923表现
出对松材线虫病病死树伐桩较强的分解能力 ,这 2个菌株可作为今后利用木腐菌处理松材线虫病病死树伐桩的潜
力菌株。
关键词 :木腐菌 ;松材线虫病 ;伐桩 ;分解
中图分类号 : S718. 7 文献标识码 : A
收稿日期 : 2007211214
基金项目 : 国家科技部社会公益研究专项 (2005D IB3J139)、国家“十一五”科技支撑项目 (2006BAD08A19104)、国家科技基础条件平台
建设项目 (2005DKA21207)及中韩林业科研合作课题联合资助
作者简介 : 陈瑶 (1983—) ,女 ,贵州遵义人 ,硕士研究生 ,从事松材线虫病的研究. E2mail: dean1023@hotmail. com
通讯作者 :汪来发 ,男 ,安微望江人 ,博士 ,研究员 ,从事森林病理学和植物线虫学研究. E2mail: neam @ forestry. ac. cn;朴春根 ,男 ,吉林延
吉人 ,博士 ,副研究员 ,从事森林微生物资源工作. E2mail: cfcc@ forestry. ac. cn
Screen ing of W ood2rotting Fung i to Trea t Stum ps of D ead P ine
Trees Caused by PW N( B u rsaphe lenchus xyloph ilus)
CHEN Yao1, 2 , WANG Lai2fa13 , PIAO Chun2gen1 , ZHU Tian2hui2 , SHIN Sang2chul3 , CHUNG Yeong2jin 3
(1. Research Institute of Forest Ecology, Environment and Protection, CAF, Key Laboratory of Forest Protection , State Forestry Adm inistration,
Beijing 100091, China; 2. College of Forestry and Horticulture Landscape A rchitecture, Sichuan Agricultural University,
Yapian 625014, Sichuan, China; 3. Korea Forest Research Institute, Seoul 1302712, Public of Korea)
Abstract: In this study, the wood2rotting fungi were chosen to evaluate their relation with B ursaphelenchus xy loph ilus
( PWN ) , the ability to decompose the wood specimens of Pinus m asson iana and the stump s of dead p ine trees
caused by PWN. the results showed that all the wood2rotting fungi tested had certain nematicidal effects on PWN
excep t Sch izophy llum comm une. Among the wood2rotting fungi, PWN could not survive on the strains ofW 10, W 11
( Fom itopsis pin icola ) , 5452, 6600 ( L aetiporus su lphureus ) , 6221 ( P leurotus ostrea tus ) , 6320 ( Trem ellodon
gela tinosum ) , 6284 ( Poria cocos) , 6501 (Ganoderm a lucidum ) absolutely. The results of the experiment indicated
that the strains of W 10, W 11 ( Fom itopsis pin icola ) , 6600 (L aetiporus su lphu reus) , 6923 ( Coriolus versicolor) and
6284 ( Poria cocos) had higher ability to decompose P inus m asson iana specimens. After inoculating the strains of
6600, 6923, W 11, 6284, 6221 to treat stump s for 70 d. The strains of 6600 and 6923 showed higher ability to
decompose the stump s. The strains could be used to treat stump s of dead wood caused by PWN in the future.
第 4期 陈 瑶等 :处理松材线虫病病死松树伐桩木腐菌的筛选
Key words: wood2rotting fungi; p ine wilt disease (B ursaphelenchus xy loph ilus) ; stump s; decompose
松材线虫病是由松材线虫 B ursaphelenchus xy lo2
ph ilus ( Steiner&Buhrer) N ickle ( p ine wilt nematode,
PWN )引起的一种毁灭性松树病害。松材线虫病病
死树伐桩中含有松材线虫和松褐天牛幼虫是松材线
虫病重要侵染源之一 [ 1 ]。目前对病死树伐桩的处理
一般有以下几个方法 : 1 )化学药物灌注伐桩 ; 2 )塑
料袋包扎伐桩 ; 3 )剥皮挖虫 ; 4 )挖树桩烧毁 [ 2 ]。其
中前两者处理效果不明显 ,而且长期使用化学药剂
能对环境造成负面影响 ;后两者虽然取得一定效果 ,
但工序复杂 ,花费大 ,不能在疫区普遍推行。于是 ,
伐桩就成为松材线虫病除治工作中的难点 ,采取有
效措施处理伐桩将有利于提高该病的防治效果。
木腐菌是有机体的末端分解者 ,可以利用从单糖
到纤维素及木质素等有机大分子的多种有机化合物 ,
具有在树木上定殖的优势 [ 3 - 5 ] ,若使用具有药用或食
用价值的木腐菌接种处理病死树伐桩 ,不仅能够分解
伐桩而且还能够将伐桩作为药、食用真菌的栽培材
料 ,从而变废为宝 ,给松材线虫病疫区带来良好的社
会和经济效益。有研究表明真菌对松材线虫的繁殖
具有较强的抑杀作用 [ 6 - 10 ]。但有关利用木腐菌处理
松材线虫病病死树伐桩的研究至今未见系统报道。
本试验的主要目的在于通过室内试验筛选出不
利于松材线虫繁殖而且对马尾松 ( P inus m asson iana
Lamb. )木块具有较强分解能力的木腐菌进一步进
行田间试验 ,测定各个菌株对松材线虫病病死树伐
桩的分解情况 ,最终筛选出对伐桩具有较好处理效
果的菌株 ,以期为松材线虫病病死树伐桩的处理提
供一条新途径。现将本次试验有关结果报告如下。
1 材料与方法
1. 1 室内试验
1. 1. 1 菌株来源 试验所用木腐菌菌株见表 1。
表 1 试验菌株
真菌 学名 菌株 真菌 学名 菌株
松生拟层孔菌 Fom itopsis pinicola W10 粗皮侧耳 Pleurotus ostrea tus 6221
W11 6222
茯苓 Poria cocos 6284 6223
虎掌菌 Trem ellodon gela tinosum 6320 黑木耳 A uricu laria auricu lar 5907
灵芝 Ganoderm a lucidum 6501 5908
硫磺菌 Laetiporus su lphureus 5452 5909
6090 绣球菌 Sparassis crispa 6828
6600 密粘褶菌 Gloeophyllum trabeum 5. 98
洁丽香菇 Lentinus lepideus W18 杂色云芝 Coriolus versicolor 6924
桦褶孔菌 Lenzites betu lina W19 6923
裂褶菌 Schizophyllum comm une 6812 绵腐卧孔菌 Poria placenta 5608
6294
表 1中 23株供试菌株除密粘褶菌菌株 5. 98由
中国普通微生物菌种保藏管理中心 ( CGMCC)提供
以外 ,其余菌株由中国林业微生物菌种保藏管理中
心 (CFCC)提供。斜面菌种在 4 ℃冰箱中保藏。
1. 1. 2 松材线虫来源 本次试验所用松材线虫由
中国林业微生物菌种保藏管理中心 ( CFCC)提供。
在长满盘多毛孢 ( Pesta lotias sp. )的玉米粒培养基上
接种松材线虫 ,于 25 ℃条件下培养 10 d后获得大
量松材线虫 ,放置于 4 ℃冰箱中保存备用。
1. 1. 3 平板培养基上不同木腐菌菌落培养 在超
净工作台上 ,将表 1中的 23株在 PDA培养基上生
长良好的木腐菌菌种 ,切取直径为 5 mm的同质等
量菌丝块 (带有琼脂培养基 ) ,分别接入到 PDA平板
培养基的中间部位。接种后的培养基置于 25 ℃温
箱中培养 10 d,使菌种长满或基本长满平板。
1. 1. 4 木腐菌对松材线虫的作用 将松材线虫接
入上述除绵腐卧孔菌菌株 5608以外的 22株木腐菌
菌落上 ,每皿接种 1 000条 ,每菌株接种 3皿 ,置于恒
温培养箱中 , 25 ℃培养 8 d,以贝尔曼漏斗法对线虫
进行分离并计数 [ 7, 11 ]。培养 8 d后 ,将上述试验数
据进行方差分析 ,结合方差分析的结果 ,将上述试验
中能够分离到松材线虫而且其数量与其他各个处理
分离的松材线虫数量差异显著的菌株选出继续做试
验 ,依照上述试验方法在长满该菌株的平板培养基
上接种线虫 1 000条 ,在相同培养温度下延长其培
养时间至 13 d,以贝尔曼漏斗法对线虫进行分离并
计数。
1. 1. 5 木腐菌分解能力测定 根据中华人民共和
945
林 业 科 学 研 究 第 21卷
国国家标准《木材天然耐久性试验方法 ;木材天然耐
久性实验室试验方法 》( 1993) (以下简称标准 ) ,采
用常规质量分析法 ,以木材受木腐菌分解试验前后
的质量减少百分率为评定木腐菌的木材分解能力的
依据 [ 12 - 13 ]。木腐菌对针叶树材的分解能力可分别
分为以下 4级 [ 14 ] ,见表 2。
表 2 木腐菌对针叶树材分解能力等级
等级 针叶树材
Ⅰ. 分解能力强 质量减少百分率 > 15%
Ⅱ. 分解能力较强 质量减少百分率 10~15%
Ⅲ. 分解能力中等 质量减少百分率 5~10%
Ⅳ. 分解能力弱 质量减少百分率 0~5%
具体试验方法参照参考文献 [ 12 ]和 [ 14 ]作适
当 修 改。将 马 尾 松 边 材 用 电 锯 削 成
2 cm ×2 cm ×1 cm的小块 ,试验样品 ,进行编号 ,
放入温度为 100 ±5 ℃的烘箱中烘至恒质量 ,每块用
电子天平称质量 (精确到 0. 01 g) ,然后用多层纱布
包好 , 在高压灭菌锅中灭菌 ( 0. 12 MPa 下灭菌
30 m in) ,这样可以使试样含水量达到 40% ~60%。
按照 1. 1. 3的方法分别培养 23株木腐菌 ,在无菌操
作台上将已灭菌木块放入已长满木腐菌菌丝的 PDA
平板培养基中 ,每一个平板培养基中按照三个不同
方位放入 3个木块 ,将培养皿放入 25 ℃恒温箱中培
养使木块受菌侵染 ,培养期间用白瓷盘加水放入恒
温箱中使温箱内保持一定的湿度。将绵腐卧孔菌
5608菌株设置为对照菌株。培养 46 d以后 ,取出附
带菌丝体的木块 ,用毛刷除去木块表面菌丝后 ,放入
100 ±5 ℃的烘箱中烘至恒质量 ,每块用电子天平称
质量 (精确到 0. 01 g)。计算受菌分解后木材样品质
量减少百分率 ,与对照作比较观察不同菌株对马尾
松木材的分解情况。
每块试样受菌侵染分解后的质量减少百分率 ,
以百分数计算表示。计算公式如下 :
试样质量减少百分率 = [ (W 1 - W 2 ) ÷W 1 ]
×100%
式中 ,W 1为木块样品试验前的绝干质量 ; W 2为
木块样品试验后的绝干质量。
另外 ,木材样品受菌侵染时间可以从 30 d到 80 d
不等 ,本试验马尾松木块样品受菌侵染时间为
46 d[ 14 ]。
1. 2 田间试验
1. 2. 1 试验地概况 马鞍山市林场位于安徽省东
南部 ,长江东岸 ,属于北亚热带南缘的季风气候。阳
光充足 ,雨量充沛 ,气候温和。年均温 15. 8 ℃,极端
最高温 41. 1 ℃,极端最低气温 - 13 ℃, 10 ℃以上常
年积温 3 062 ℃。年均降水量 1 003. 6 mm ,雨热同
季 ,相对湿度 78%。试验点设在林场的戴山上 ,海
拔一般 100 m左右。试验所选伐桩均为当年感染松
材线虫病后砍伐留下的马尾松新伐桩 ,与正常伐桩
无异样。
1. 2. 2 菌株的选择 根据室内试验条件筛选出松
生拟层孔菌菌株 W 10、硫磺菌菌株 6600、杂色云芝
菌株 6923、茯苓菌株 6284和粗皮侧耳菌株 6221进
行田间试验。
1. 2. 3 接种材料的准备
1. 2. 3. 1 菌株的液体扩大培养 在 300 mL三角瓶
中装入 100 mL液体培养基 (成分为 :玉米粉 3 g,蛋
白胨 1. 5 g,MgSO4 ·7 H2 O 0. 05 g, KH2 PO4 0. 1 g,水
100 mL ) , 透气封口膜封口 , 高温灭菌 ( 121 ℃,
30 m in)后冷却至室温 ,在无菌条件下将培养于斜面
培养基上的上述 5个菌株分别接种在液体培养基
中。置温度为 27 ℃,转速为 120 r·m in - 1的恒温摇
床中振荡培养 7 d。
1. 2. 3. 2 接种材料的制备 用直径 12 cm,长 22 cm
的聚丙烯原种袋装袋 ,每袋装 300 g滑石粉或 100 g
木屑、4 g葡萄糖、4 g玉米粉、1 g蛋白胨、0. 6 g KH2
PO4、0. 3 g MgSO4· 7 H2 O、4 g果胶和 4 g L2谷氨酸
钠 ,装袋后将材料混合均匀并封口。在高压灭菌锅
中重复灭菌 (0. 12 MPa) 2次 ,每次 40 m in。待接种
材料冷却后 ,在无菌条件下将 1. 2. 3. 1中准备好的
各个木腐菌菌液按照每袋 100 mL的接种量加入到
各袋中混合均匀 ,排出袋内空气并封口。在最初的
3个星期每天都要翻动接种材料 ,之后每个星期翻
动 2次 ,这样的接种材料可以在室温下至少保存 1 a
的时间而不破坏其菌种活性。在进行田间接种试验
以前 ,要对袋内菌种进行活性检测 ,在无菌操作台上
取少许袋内材料在 PDA培养基上看其是否生长良
好 ,菌丝生长良具有活性的菌种可进行田间试验。
在伐桩上接种木腐菌之前每个袋内都要加入 200 mL
浓度为 1%的葡萄糖溶液、100 mL植物油和少许鸡
蛋 ,混合均匀后进行接种。
1. 2. 4 伐桩的准备 选择直径 15 cm以上没虫蛀、
未脱皮腐烂的伐桩 150个并作标记。在接种木腐菌
前一个星期用 20%的石灰水涂抹伐桩表面 ,防止杂
菌生长 ,同时在伐桩周围 1 m范围内喷洒灭白蚁药
水 (商品名奋斗呐 )。其中 126~150号伐桩不接菌
作为对照。
055
第 4期 陈 瑶等 :处理松材线虫病病死松树伐桩木腐菌的筛选
1. 2. 5 接种木腐菌 接种应选择晴天午后或阴天
进行 ,根据各个木腐菌的栽培特点在伐桩上进行接
种 ,接种时将事先准备好的接种材料涂抹在伐桩表
面 ,然后盖上透气薄膜以利保湿 ,一袋接种材料接种
4~5个伐桩。每株木腐菌接种处理 25个伐桩。接
菌处理时间为 70 d。
1. 2. 6 木腐菌分解能力的测定 接菌处理 70 d
后 ,将供试伐桩样品带回实验室做进一步分析 ,采样
时取每个伐桩接菌部位木样 ,每一个伐桩样品均制
成规则的木块试样 (2 cm ×2 cm ×1 cm )各 3个 ,编
号后放入 100 ±5 ℃的烘箱中烘干至恒质量后称取
每个木块的质量 ,与对照伐桩木块试样作比较 ,分析
每个木腐菌菌株对伐桩的分解情况。
1. 3 数据分析
室内试验中木腐菌对松材线虫的作用结果运用
DPS v6. 55软件进行差异显著性检验 ,测定采用新
复极差法 ,字母相同为差异不显著 ,字母不同为差异
显著 ,水平为 0. 05。其他数据运用 SPSS 13. 0软件
进行方差分析、差异显著性检验及多重比较。
2 结果与分析
2. 1 室内实验
2. 1. 1 木腐菌对松材线虫的作用 将松材线虫接
入 22株木腐菌菌落上 ,培养 8 d后分离的松材线虫
数量列入表 3。
由表 3知 ,松生拟层孔菌菌株 W 10、W 11,洁丽
香菇菌株 W 18,桦褶孔菌菌株 W 19,黑木耳菌株
5907、5908、5909,硫磺菌菌株 5452、6090、6600,密粘
褶菌菌株 5. 98,粗皮侧耳菌株 6221、6222、6223,杂
色云芝菌株 6924,绣球菌菌株 6828,虎掌菌菌株
6320,茯苓菌株 6284和灵芝菌株 6501对松材线虫
的数量增加有抑制作用。其中从菌株 W 18、W 19、
5907、5908、5909、6090、5. 98、6222、6223、6924和菌
株 6828菌落上只分离到少量的松材线虫 ,从菌株
W 10、W 11、5452、6600、6221、6320、6284和菌株 6501
菌落上完全没有分离到松材线虫 ,这 8个菌株完全
抑制了松材线虫的数量增加。培养 8 d后从菌株
6294、6812和菌株 6923菌落上分离到松材线虫而且
其数量与其他各处理分离的松材线虫数量存在明显
差异 ( P≤0. 05) ,选择这 3个菌株继续试验 ,延长培
养时间至 13 d,从这 3个菌株的菌落上分离的松材
线虫数量列入表 4。
表 3 松材线虫在木腐菌菌落上培养 8 d的数量
真菌 菌株 线虫数量 /条
松生拟层孔菌 Fom itopsis pinicola W10 0 ±0 a
W11 0 ±0 a
茯苓 Poria cocos 6284 0 ±0a
虎掌菌 Trem ellodon gela tinosum 6320 0 ±0 a
灵芝 Ganoderm a lucidum 6501 0 ±0 a
硫磺菌 Laetiporus su lphureus 5452 0 ±0 a
6090 15. 7 ±7. 3 a
6600 0 ±0 a
粗皮侧耳 Pleurotus ostrea tus 6221 0 ±0 a
6222 4 ±1 a
6223 4. 3 ±2. 3 a
洁丽香菇 Lentinus lepideus W18 10. 7 ±6. 1 a
桦褶孔菌 Lenzites betu lina W19 13. 7 ±7. 3 a
黑木耳 Auricu laria auricu lar 5907 4. 7 ±1. 5 a
5908 5. 3 ±2. 9 a
5909 8. 3 ±1. 2 a
绣球菌 Sparassis crispa 6828 2. 3 ±0. 9 a
密粘褶菌 Gloeophyllum trabeum 5. 98 17. 3 ±5. 7 a
杂色云芝 Coriolus versicolor 6924 30. 7 ±6. 6 a
6923 99 ±30. 1c
裂褶菌 Schizophyllum comm une 6812 60 ±20. 8 b
6294 141. 3 ±22 d
注 :表中的数字后字母均为新复极差测验结果 ,不同小写英文字
母表示差异显著 ( P≤0. 05)
表 4的试验结果表明 ,将松材线虫接入菌株
6294和 6812上并延长其培养时间至 13 d,松材线虫
开始出现繁殖的迹象 ,此时分离出的松材线虫数量
比培养 8 d后分离的松材线虫数量多 ,而且从中分
离到大量的松材线虫幼虫 ,从菌株 6294上分离到的
松材线虫量接近 500条 ,其中松材线虫幼虫为 339
条 ,所占比例为 68. 7% ;从菌株 6812上分离的平均
线虫量为 275. 7条 ,其中松材线虫幼虫为 142. 2条 ,
所占比例为 51. 6% ;从菌株 6923菌落上培养松材线
虫 13 d后 ,分离出的松材线虫数量比培养 8 d后分离
的松材线虫数量少 ,平均仅为 9. 7条 ,没有分离到松
材线虫幼虫 ,说明菌株 6923对松材线虫的繁殖也有
抑制作用。在培养 13 d的情况下 ,这 3株菌株对松
材线虫数量的影响存在显著差异 ( P≤0. 05)。
表 4 松材线虫在木腐菌菌落上培养 13 d的数量
真菌 菌株 线虫数量 /条 幼虫数量 /条 幼虫所占比例 /%
裂褶菌 Schizophyllum comm une 6294 493. 3 ±49. 4 a 339 ±53 a 68. 7
6812 275. 7 ±40. 3 b 142. 2 ±19. 4 b 51. 6
杂色云芝 Coriolus versicolor 6923 9. 7 ±2. 7 c 0 ±0 c 0
注 :表中的数字后字母均为新复极差测验结果 ,不同小写英文字母表示差异显著 ( P≤0. 05)。
155
林 业 科 学 研 究 第 21卷
2. 1. 2 木腐菌对马尾松木块的分解作用 23株木
腐菌处理马尾松木材样品 46 d后木材样品质量损
失百分率的结果、引起木材腐朽的类型以及主要寄
主树种见表 5。
表 5 23株木腐菌对马尾松分解能力
真菌 菌株 野外腐朽类型和主要寄主树种 木材样品质量损失百分率 /%
松生拟层孔菌 Fom itopsis pin icola W10 褐腐 ,针叶树 10. 3 ±2. 0
W11 褐腐 ,针叶树 25. 5 ±1. 0
洁丽香菇 Lentinus lepideus W18 褐腐 ,针叶树 7. 1 ±0. 9
桦褶孔菌 Lenzites betu lina W19 白腐 ,阔叶树 8. 3 ±0. 4
黑木耳 A uricu laria auricu lar 5907 白腐 ,阔叶树 5. 2 ±0. 1
5908 白腐 ,阔叶树 4. 2 ±0. 3
5909 白腐 ,阔叶树 6. 1 ±0. 3
硫磺菌 Laetiporus su lphureus 5452 褐腐 ,针叶树 2. 3 ±0. 3
6090 褐腐 ,针叶树 7. 0 ±0. 5
6600 褐腐 ,针叶树 10. 6 ±1. 8
裂褶菌 Schizophyllum comm une 6294 白腐 ,阔叶树 3. 7 ±0. 1
6812 白腐 ,阔叶树 4. 3 ±0. 5
粗皮侧耳 Pleurotus ostrea tus 6221 白腐 ,阔叶树 5. 8 ±0. 3
6222 白腐 ,阔叶树 3. 2 ±0. 1
6223 白腐 ,阔叶树 3. 5 ±0. 2
杂色云芝 Coriolus versicolor 6923 白腐 ,阔叶树 11. 4 ±0. 7
6924 白腐 ,阔叶树 8. 0 ±0. 3
密粘褶菌 Gloeophyllum trabeum 5. 98 褐腐 ,针叶树 8. 8 ±0. 5
灵芝 Ganoderm a lucidum 6501 白腐 ,阔叶树 3. 7 ±0. 2
绣球菌 Sparassis crispa 6828 褐腐 ,针叶树 5. 6 ±0. 2
虎掌菌 Trem ellodon gela tinosum 6320 褐腐 ,针叶树 9. 3 ±0. 6
茯苓 Poria cocos 6284 褐腐 ,针叶树 10. 5 ±0. 8
绵腐卧孔菌 poria placenta 5608 褐腐 ,针叶树 7. 6 ±0. 7
由表 5知 ,被测定的 23株木腐菌对马尾松木材
的分解能力明显不同 ,结合表 2中木腐菌对针叶树
材的分解能力的等级标准 , 23个菌株在本试验测定
的 46 d内对马尾松木材分解能力最强的是主要寄
主树种为针叶树的褐腐菌松生拟层孔菌菌株 W 11,
它对马尾松木块的分解率高达 25. 5% ;对马尾松木
材分解能力最弱的是主要寄主树种为针叶树的褐腐
菌硫磺菌菌株 5452,它对马尾松木块的分解仅为
2. 3% ;对照菌株 5608在本次试验中对马尾松木材
的分解能力为中等 ,它对马尾松木块的分解率为
7. 6%。对马尾松木材分解能力较强的有 5株 ,它们
分别是 :松生拟层孔菌菌株 W 10、W 11、硫磺菌菌株
6600、杂色云芝菌株 6923、茯苓菌株 6284,它们对马
尾松木块的分解率分别是 : 10. 3%、25. 5%、10. 6%、
11. 4%、10. 5% ,除杂色云芝菌株 6923为白腐菌以
外其他 4株均为褐腐菌 ;对马尾松木材分解能力中
等的有 11株 ,其中白腐菌 5株 ,褐腐菌 6株 ,它们分
别是 :桦褶孔菌菌株 W 19、黑木耳菌株 5907、5909、
粗皮侧耳菌株 6221、杂色云芝菌株 6924、洁丽香菇
菌株 W 18、硫磺菌菌株 6090、密粘褶菌菌株 5. 98、绣
球菌菌株 6828、虎掌菌菌株 6320、绵腐卧孔菌菌株
5608,它们对马尾松木块的分解率分别是 : 8. 3%、
5. 2%、6. 1%、5. 8%、8. 0%、7. 1%、7. 0%、8. 8%、
5. 6%、9. 3%、7. 6% ;其他 7株木腐菌对马尾松木材
的分解能力均为弱 ,这 7株菌中除硫磺菌菌株 5452
为褐腐菌以外其他 6株均为白腐菌。
23种木腐菌对马尾松木块质量的影响显著
性检验 (见表 6 )知 ,室内试验中对马尾松木材分
解能力较强的 5 个菌株除松生拟层孔菌菌株
W 10以外的其他 4个菌株所引起的马尾松木块
质量损失率较对照菌株 5608差异显著。结合室
内试验中木腐菌对松材线虫的作用结果得知上
述分解能力较强而且与对照菌株差异显著的 4个
菌株都不利于松材线虫的繁殖 (见表 3 , 4 ) ,选出
这 4个菌株进行田间接种伐桩试验。另外 ,粗皮
侧耳菌株 6221在本次试验所选的 3株粗皮侧耳
菌株中对马尾松木块的分解能力最强 ,而且该菌
株也不利于松材线虫的繁殖 ,所以该菌株也选出
进行田间试验。
255
第 4期 陈 瑶等 :处理松材线虫病病死松树伐桩木腐菌的筛选
表 6 不同木腐菌对木块质量的影响显著性检验
( D unnett氏检验 )
( I) 处理 (J )处理 平均差 ( I与 J ) S ig. 值
W10 5608 2. 700 00 0. 074
W11 5608 17. 833 333 0. 000
W18 5608 - 0. 533 33 0. 991
W19 5608 0. 633 33 0. 825
5907 5608 - 2. 466 67 1. 000
5908 5608 - 3. 400 00 1. 000
5909 5608 - 1. 566 67 1. 000
5452 5608 - 5. 366 67 1. 000
6090 5608 - 0. 600 00 0. 993
6600 5608 2. 933 333 0. 045
6294 5608 - 3. 900 00 1. 000
6812 5608 - 3. 333 33 1. 000
6221 5608 - 1. 800 00 1. 000
6222 5608 - 4. 433 33 1. 000
6223 5608 - 4. 100 00 1. 000
6923 5608 3. 733 333 0. 007
6924 5608 0. 400 00 0. 889
5. 98 5608 1. 166 67 0. 614
6501 5608 - 3. 900 00 1. 000
6828 5608 - 2. 033 33 1. 000
6320 5608 1. 633 33 0. 397
6284 5608 2. 900 003 0. 049
注 : 3 表示差异显著 ( P≤0. 05)。
2. 2 田间试验
田间试验所选 5个木腐菌菌株分别是松生拟层
孔菌菌株 W 11、硫磺菌菌株 6600、杂色云芝菌株
6923、茯苓菌株 6284和粗皮侧耳菌株 6221。按照
1. 2. 3的方法准备接种材料 ,硫磺菌菌株 6600和茯
苓菌株 6284使用木屑 ,其他 3个菌株均使用滑石
粉。接菌处理 70 d后 125个接菌伐桩样品及 25个
对照伐桩样品的干质量见表 7,不同木腐菌对伐桩
样品质量的影响显著性检验结果见表 8。
表 7 伐桩样品质量
处理 伐桩样品质量 / g
6221 2. 13 ±0. 06
6923 2. 06 ±0. 06
W11 2. 23 ±0. 07
6600 1. 93 ±0. 06
6284 2. 10 ±0. 05
CK 2. 25 ±0. 05
表 8 不同木腐菌对伐桩样品质量的影响显著性检验
( D unnett氏检验 )
( I) 处理 ( J )处理 平均差 ( I与 J) S ig. 值
6221 CK - 0. 117 20 0. 234
6923 CK
- 0. 192 803 0. 038
W11 CK - 0. 014 00 0. 777
6600 CK - 0. 320 003 0. 000
6284 CK - 0. 147 60 0. 125
注 : 3 表示差异显著 ( P≤0. 05)
通过对伐桩样品质量的分析表明 ,经过 5株木
腐菌接种处理的伐桩样品质量均比对照伐桩样品质
量低。在伐桩上接种粗皮侧耳菌株 6221、杂色云芝
菌株 6923、松生拟层孔菌菌株 W 11、硫磺菌菌株
6600和茯苓菌株 6284 70 d后伐桩样品质量分别为
2. 13、2. 06、2. 23、1. 93、2. 10 g,而对照伐桩样品质量
为 2. 25 g (见表 7)。表 8中显著性检验的结果表
明 ,只有接种硫磺菌菌株 6600和杂色云芝菌株 6923
处理伐桩 70 d后伐桩样品的质量与对照伐桩样品
的质量差异显著。
3 结论与讨论
室内试验研究发现 ,试验所用的 13种木腐菌的
22个菌株除裂褶菌菌株 6294和菌株 6812以外 ,其
它 20个菌株均能够很好地抑制松材线虫的繁殖 (见
表 3、4)。其中松生拟层孔菌菌株 W 10、W 11,硫磺
菌菌株 5452、6600,粗皮侧耳菌株 6221,虎掌菌菌株
6320,茯苓菌株 6284,灵芝菌株 6501对松材线虫的
繁殖有很强的抑制作用 ,松材线虫在其菌落上完全
不能存活 ,可见本试验所用的木腐菌对松材线虫具
有比较强的抑杀作用。
由表 5知 ,室内试验中 ,对马尾松木材分解能力
较强的 5个菌株除杂色云芝菌株 6923为白腐菌以
外 ,其他 4个菌株都是褐腐菌 ,分解能力弱的 7个菌
株除硫磺菌菌株 5452为褐腐菌以外其他 6个菌株
全部是白腐菌 ,而且其他 11个分解能力中等的木腐
菌菌株也表现出褐腐菌比白腐菌更强的分解能力 ,
这说明本试验所选的褐腐菌对马尾松木材的分解能
力比白腐菌强。虽然主要寄主为阔叶树的木材腐朽
菌 ,同样引起了马尾松木材的分解 ,如杂色云芝、粗
皮侧耳 (见表 5) ,但是 ,大多数主要寄生在阔叶树上
的木腐菌对马尾松木材的分解能力比主要寄生在针
叶树的木腐菌弱 ,可见木腐菌对寄主的种类有一定
的选择性。室内试验的结果同时表明 ,木腐菌对马
尾松木材分解能力的大小还与菌种来源有关 ,同种
木腐菌不同来源的菌株对马尾松木材的分解能力有
明显的差异 ,如松生拟层孔菌菌株 W 10和菌株 W 11
对马尾松木材的分解能力明显不同 ,硫磺菌菌株
5452和菌株 6090、6600对马尾松木材的分解能力也
存在明显差异。
田间试验所选的 5个木腐菌菌株在实验室无菌
条件下 ,无其他微生物与同类的干扰与竞争 ,它们都
能很好地分解马尾松木块。在田间试验条件下接菌
355
林 业 科 学 研 究 第 21卷
处理伐桩 70 d后 ,通过对试验各个处理伐桩样品的
质量分析表明 ,接菌处理后的伐桩样品质量比对照
伐桩样品质量轻 (见表 7) ,说明接菌处理 70 d后 ,
5个木腐菌菌株都对病死树伐桩起到了一定的分解
作用。其中接种硫磺菌菌株 6600和杂色云芝菌株
6293处理后的伐桩样品质量与对照伐桩样品质量
之间差异显著 (见表 8) ,这 2个菌株在田间试验中
都表现出对松材线虫病病死树伐桩较强的分解能
力 ,说明硫磺菌菌株 6600与杂色云芝菌株 6293能
够很好地在伐桩上定殖并进行分解 ,而且另一个相
关试验的研究结果表明 ,接种硫磺菌菌株 6600处理
伐桩 70 d后从病死树伐桩内分离到的松材线虫数
量最少 (文章尚未发表 ) ,由此可见 ,在本次试验中
硫磺菌菌株 6600处理松材线虫病病死树伐桩的效
果最好。
在田间试验条件下 ,有了其他微生物与同类的
干扰与竞争 ,使得在室内试验中对马尾松木块分解
能力最强的松生拟层孔菌菌株 W 11对伐桩的分解
作用不明显 (见表 5、7) ,这说明菌株 W 11受田间试
验环境影响较大 ,不能很好地在伐桩上定殖进而分
解。相反 ,在室内试验中对马尾松木块分解能力中
等的粗皮侧耳菌株 6221却在田间试验条件下表现
出对伐桩较强的分解能力 (见表 5、7) ,这说明菌株
6221在伐桩上定殖的竞争力比较强 ,因此菌株 6221
能够很好地在松材线虫病死树伐桩上定殖并分解。
经过室内试验筛选菌株、田间试验测定木腐菌
分解松材线虫病死树伐桩的结果表明 ,利用木腐菌
接种处理松材线虫病病死树伐桩是一项环保、有效
的病死树伐桩处理技术。如果选用的木腐菌具有药
用或食用价值 ,该处理方法不仅能够有效地处理伐
桩而且还能够给松材线虫病疫区带来良好的社会和
经济效益 ,这一处理技术值得在松材线虫病疫区推
广应用。处理伐桩效果好坏的关键在于接种木腐菌
在伐桩上定殖能力的强弱。因此 ,筛选优良菌株、改
良接种材料的配方以获得木腐菌最佳的定殖效果 ,
从而更好地处理松材线虫病病死树伐桩 ,这将是今
后利用木腐菌处理松材线虫病病死树伐桩研究的主
要方面。
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