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THE BLOCKING EFFECT OF PHYLLANTHUS EMBLICA L.ON THE FORMATION OF STRONG CARCINOGEN N-NITROSO COMPOUND IN HUMAN BODY

余甘子对强致癌物N-亚硝基化合物在人体内合成的阻断作用



全 文 :第 2 卷 第 1 期
1 9 8 9 年 2 月
林 业 科 学研 究
FO R E S T R E S E A R C H
幸0 1. 2 , 仗0 . 1
Fe b
。 , 1 9 8 9
余甘子对强致癌物N 一亚硝基化合物
在人体内合成的阻断作用
侯开卫 刘凤书 杨巨武
(中国林业科学研究院资源 昆虫研究所 )
宋圃菊 梁学军 程 列
(北京医科大学 )
摘要 本文采用 o h shi m a 的方法 , 以尿 中 N一亚稍 基脯氛酸 (N PR O ) 量 为指
标 , 研 完 了余甘子果汁队断人体内 N 一亚峭基化合物 (N N C )的合成 。 12 名志愿者摄
入 L一脯氛酸 5 0 0 m g 和稍 酸钠 3 0 0 m g 后 , 尿中 N PR O 的量平均为 7 5 . 1 0 n m o l, 而
当摄入上述两种药物的同时 , 分别给予同浓度的抗坏血 酸和余甘子 果 汁 后 , 尿 中
N PR O 的含量则分别降为 4 1 . 0 8 n m o l和2 0 . 7 9 n m o l , 且后 者比本底值 (2 5 . 5 5 n m o l)
还低。 表明在本实验条件下 , 摄入含杭坏血酸 75 m g 的余甘子果汁 13 m l, 即能完
全阻断 5 0 0 m g L 一脯氛酸和 30 0 m g 峭酸钠在人体 内所引起的 N PR O 的合成 。 同时
也证明 , 余甘子果汁能有效地队断人体内N N C的合成 。
关键词 余甘子多 N , 亚稍基化合物 多 N 一亚消基脯氛酸 ; L一脯氛酸 , 峭 酸钠 ,
抗坏血酸
国内外的研究表明 , 致癌性亚硝胺不 仅 可 在 动物胃内合成 , 也可在人体内合成。 而且
体内合成是人类接触致癌性 N 一亚硝基化合物 (N N C )的主要来源 [ ’] 。 可见 , 选择天然食品来
阻断体内合成 , 对于防止内源性 N N C潜在的致癌危险 , 具有重要的理论和实际意义 。
我们曾先后报道了余甘子汁在体外模拟胃液条件下和在动物体 内对 N N C 合成 的阻断作
用的研究结果 [ 2 一 “] 。 在此基础上 , 本文采用 0 五sh im a 的方法 I‘J, 以尿中 N P R O 的含量为指
标 , 定量研究余甘子对人体内N N C合成的阻断结果。 我们期望并深信 , 这些研究结果能对我
国余甘子资源的开发利用价值 , 对增加一种效果极佳的防癌天然食品产生积极的影响。
一 、 材料和方法
(一) 材 料
余甘子汁采 自云南省景东县自然分布的山甘野生种的果实 , 洗净 、 凉干 、 去核 、 压榨而
得 , 抗坏血酸含量为 5 91 . 7 m g / dl 。 使用时不再稀释或浓缩。 硝酸钠为北京红星化 工 厂 出
品, 分析纯 。 其他试剂和仪器同动物试验[”」。
本文于1 9 8 8年 8 月收到
林 业 科 学 研 究 艺卷
(二 ) 方 法
1
. 受试者摄 入前体物及尿收集 受试者为 12 名男性青年 , 身体健康 。实验前两天及实验
期问均食用相同菜肴 , 主食大米和馒头 , 不限量 。 收集尿的当天早餐食用面食糕点。 食用两
天实验餐后 , 测定 24 h 尿中N PR O 含量 , 作为本底水平 (第 1 期 ) 。 然后以自身为对照 , 按如
下分期经口摄入受试物 : 第 2 期摄入硝酸钠和 L一脯氨酸 ; 第 3 期摄入硝酸钠 、 L一脯 氨酸加
抗坏血酸 ; 第 4 期摄入硝酸钠 、 L 一脯氨酸加余甘子汁。 每期实验间隔 72 h 。 硝酸钠和 L 一脯
氨酸剂量分别为 3 0 和 5 0 m g , 配成20 m l水溶液 , 抗坏血酸剂量为 75 m g , 配成 10 m l水溶
液 ; 余甘子汁剂量为 13 m !。 受试者于上午 7 时 口服硝酸钠 , 30 m in 后 口 服 L 一脯氨酸或加余
甘子汁或加抗坏血酸 , Z h 后进餐 。 摄入硝酸钠前排空膀胧 , 收集此后 24 h 的 尿 于 预 先 加
10 m l A s 液的聚乙烯塑料瓶中 , 以肌醉含量 ( 1 . 。一 1 . 5 9 / 2 4 h 尿 )监测尿量是否收全。 受试
者在实验期间禁食芹菜 、 菠菜 、 鱼制品以及其他含硝酸盐高的食物 , 不吸烟 , 不喝茶、 咖啡
和啤酒 , 不服药 , 以控制其他因素的干扰 。 自由饮水。
2
. 尿中 N PR O 的 汉,I定 测量 2 4 h 总尿量 , 混匀后取 5 0 m l尿样 , 用醋酸乙醋 5 0 、 3 0 ,
30 m l三次萃取 , 其余按动物实验 [a] 进行。
3. 尿中肌醉 刚 定用苦味 酸法 [0] 。
二 、 结果与讨论
12 名志愿受试者吃两天实验餐后 , 2 4 h 尿中的N PR O 本底水平以及摄入前体物硝酸钠和
L一脯氨酸或前体物 加余廿子汁或抗坏血酸后 , 尿中N PR O 排除量的变化见表 1 。 受试者摄入
3 0 0 m g 硝酸钠和 5 0 0 m g L 一脯氨酸后 , 尿中 N PR O 平均含量(7 5 . lo n m o l)明显高于本底水
平 (2 5 . 5 5 n m o l) , 说明体内出现N PR O 合成 。 但个体差异较大 (3 9 . 6 3一 1 4 4 . 7 2 n m o l) , 是否
裹 1 摄入不同受试物24 h 尿N PR O 含t (n m o l)
,
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1 期 侯开卫等 : 余甘子对强致癌物N一亚硝基化合物在人体内合成的阻断作用 5 7
可以认为这与各人 口腔里形成的亚硝酸盐的量不同有关。 这在许多资料中反映出, 人体摄入
硝酸盐后在 胃肠道上部吸收入血循环后 , 其中一部分由唾液腺分泌到 口腔中的硝酸盐被细菌
还原成亚硝酸盐。 此种转变 比例虽然较稳定 , 但其绝对量个体间差异很大[ ”〕。 随唾液进入胃
内的亚硝酸盐可能与此时摄入的工一脯氨酸在酸性条件下合成N PR O 。 st ic h 等研究了不同膳
食时尿 N PR O 含量的变化 , 发现食亚硝酸盐加工的肉制品 , 尿 N PR O 含量较高 (2 . 5一7 8 . 5
昭) ; 食不加硝酸盐的肉和鱼制品 , 尿 N PR O 含量则较低 (0 一 。. 8 0 9) ; 而 素 食 者 也 较 低
(0 一3 . 5 0 9 , 平均 0 . 8 卜g) 〔7 ] 。 可见 , 摄入膳食中可能 已形成的不同的N P R O , 也是影响24 h
尿 N PR O 含量的另一 因素。 但本实验受试者不吃鱼肉等类制品 , 因而从膳食中摄入 已形成的
N PR O 的可能性极小。
从实验结果可看出 , 在摄入前体物的同时 , 摄入 已知阻断剂抗坏血酸 75 m g , 尿中N PR O
含量平均为 41 . 08 n m ol , 比只摄入前体物者降低较多 , 差异极为显著 (P < 0 . 0 1 )。 但此值仍
高于本底水平较多 , 表明在本实验条件下 , 该剂量的抗坏血酸只有部分阻断作用。 而在摄入
前体物的同时摄入相当于 75 m g 抗坏血酸的 13 m l余甘子汁 , 尿中N PR O 含量却明显低于相
同剂量的抗坏血酸 , 差异极显著 (P < 0 . 0 1) , 并降到本底水平 。 表明 此剂量的余甘子汁在本
实验条件下能完全阻断 3 0 m g 硝酸盐与 5 0 m g L一脯氨酸在人体内引起的N PR O合成。 这
与动物实验的结果一致。 可否认为余甘子汁除抗坏血酸外 , 还有其他阻断体内亚硝化的成分
(如单宁、 酚类物质等)。
其他学者和我们的研究说明 , N PR O 模型是一个简便 、 灵敏 、 可靠的方法 , 且无致癌和
致突变作用 , 故可用于反映人体内源性亚硝化能力的指标〔“l。 利用这一方法来研究天然食品
对N N C体内合成的影响 , 筛选出有效的阻断剂作为对抗 N N C 危害的保健食品 , 具有较大的
实用意义 。 本实验表明 , 作为一种天然食品 , 余甘子汁具有明显减少和消除人类接触内源性
N 一亚硝基化合物的作用 。
参 考 文 献
〔1〕徐勇 , 19 86 , 人体内N 一亚 硝基化 合物的合成及其 影响因素 , 国外医 学卫生学分册 , (5 ) : 2 8 2 。
〔2〕刘凤书等 , 19 8 , 热带作物 学报 , 9 (2 ) 。
〔3〕侯开卫等 , 1 9 8 8 , 热带作物学报 , 9 (3 ) 。
〔4〕 o h s h im a , B . e t a l. , Q u a n t ita t iv e e st im a t io n o f e n d o g e n o u s n itr o s a t io n in h u m a n by
m o n lto r in g N
一 n it r o s o P r o lin e e x e r e t e d in t he u r in e , C a n e e r R e s
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〔6〕B a r th o lo m e w , B . H Ill M J . , T he p h a r m a e o lo g y o f d ie t a r y n it r a t e a n d t h e o r ig in o f u r in a r y
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C a n e e r
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弓8 林 业 科 学 研 冗 2 卷
T H E B LOCKI NG E FFE CT OF 尸万y L L A N T万仃5 百M B L IC A L .
O N T HE FOR MAT !O N OF ST R ONG CA R CINO G E N
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E a e h o n e o f t h e tw e lv e te s te d m e n a bs o r be d 5 0 0 m g L 一Pr o lin e a n d
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一 n it ro s o

Pr o lin e
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.
1 0 n m o l
.
H o w e v e r
,
w h e n a bs o rb in g L

P ro lin e a n d
s o d iu m n it ra te
, t h e y a比o r be d a郎 in a s e o rb ie a e id a n d P人夕lla n thu s 。阴 blic a L .
ju ie e o f th e sa m e c o n e e n tr a tio n w ith a sc o r b ie a e id se Pa r a te ly
.
T h e e o n te n t
o f N PR O in th e ir u r in e w a s d o w n to 4 1
.
O8 n m o l a n d 2 0
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T h e e o n t e n t o f N PR O o f th e la tte r 15 lo w e r t h a n b a e k g ro u n d n u m be r (2 5

5 5
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It in d ie a te d th a t if a m a n a bs o r be d 1 3 m l P h刀lla , : thu : e二西lie a L . ju ie e
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