全 文 ：© 1994-2009 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
园 　艺 　学 　报 　2005, 32 (4) : 713～715
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2004 - 09 - 21; 修回日期 : 2005 - 01 - 21
辣椒疫霉菌粗毒素对叶片组织超微结构的影响
李海燕 1 　肖淑琴 1, 2 　刘惕若 1
(1 黑龙江八一农垦大学植物科技学院 , 大庆 163319; 2 沈阳农业大学植物免疫室 , 沈阳 110161)
摘 　要 : 在辣椒疫霉菌作用下 , 辣椒 3叶期叶组织细胞超微结构发生了显著的变化 , 质膜内陷 , 叶绿
体膜、线粒体膜和核膜结构破坏 ; 细胞器基质的电子密度下降 ; 叶绿体基粒片层肿胀 , 排列紊乱 ; 线粒体
嵴消失 , 出现空泡化。
关键词 : 辣椒 ; 辣椒疫霉菌毒素 ; 超微结构
中图分类号 : S 64113; S 432　　文献标识码 : A　　文章编号 : 05132353X (2005) 0420713203
Studies on the Physiology of Capsicum Blight and Ultra2structure of Leaf Tissue
L i Haiyan1 , Xiao Shuqin1, 2 , and L iu Tiruo1
(1 College of P lan t Science and Technology of Heilongjiang A ugust F irst Land Reclam ation U niversity, D aqing 163319, China;
2Labora tory of plant Imm unity of Shenyang A gricu lture U niversity, shenyang 110161, Ch ina)
Abstract: The ultra2structure of leaf tissue was damaged by the effect of Phytoph thora capsici when the
cap sicum was in three leaves. It showed: sunken p lasmolemma, membrane of the chlorop lasts, m itochondria
and nucleus rup tured, the electron density of organella being decreasing, the chlorop last lamellae being disor2
dering and swelling, and the m itochondria ridges disappeared and vacuolated.
Key words: Cap sicum; Phy toph thora capsici; U ltra2structure
1　目的、材料与方法
辣椒疫病 ( Phytoph thora capsici Leonian) 是危害辣椒生产的毁灭性土传病害 , 此病以其流行速度
快、危害大的特点 , 引起了人们的注意并进行了多方面的研究。Hwang等〔1〕利用孢子悬浮液接种 , 研
究了辣椒疫霉菌对辣椒茎部组织结构的影响 , 谢丙炎等〔2〕采用叶片针刺注射法 , 用辣椒疫霉菌毒素
处理 3～4叶期辣椒叶片 , 鉴别了不同品种的田间抗性差异。作者以 ‘茄门 ’甜椒叶片为试材 , 探讨
辣椒疫霉菌的粗毒素对辣椒叶片组织超微结构的影响。
将 ‘茄门 ’甜椒种子表面消毒后播于装有灭菌砂土的育苗钵中 , 常规培育。取幼苗第 3位叶的
叶片 , 沿叶片中部与叶脉垂直方向切取 1 cm段 , 分别浸入装有 25%辣椒疫霉菌培养的粗滤液和蒸馏
水的针剂小瓶中 , 减压渗透 20 m in, 材料下沉到瓶底 , 25℃条件下黑暗处理 , 于处理 2、6、12、18、
24 h后取样固定。
样品固定采用常规的双重固定方法 , 先将样品用 215%的戊二醛固定 24 h, 再在 1%的四氧化锇
中固定 2 h, 用常规方法进行脱水处理。样品经脱水后 , 用 Epon 812树脂包埋 , 经醋酸双氧铀 —柠檬
酸铅双重染色后 , 于 JEM 2100CX11透射电子显微镜观察拍照。
2　结果分析与讨论
211　辣椒叶片超微结构的观察
电镜观察结果 , 健株在蒸馏水处理 24 h后 , 辣椒叶组织细胞超微结构正常 (图 1) , 细胞器排列
均匀 (图 1, A) ; 内质网丰富 , 线粒体依切片角度不同而呈椭圆形 , 球形 , 双层膜连续、完整 , 脊
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园 　　艺 　　学 　　报 32卷
数目较多 , 基质均匀 (图 1, B) ; 叶绿体基粒片层排列有序 , 基质分布均匀 (图 1, C) ; 核仁边界清
晰 , 形态正常 , 核质染色均匀 , 核膜连续完整 (图 1, D )。
图 1　不同时间正常辣椒叶片的超微结构
A. 处理 2 h细胞超微结构正常 (7 200 ×) ; B. 处理 6 h线粒体双层膜完整 , 脊清晰可见 (58 000 ×) ; C. 处理 24 h叶绿体、
线粒体超微结构正常 (29 000 ×) ; D. 处理 18 h细胞膜结构正常 , 内质网丰富 (10 000 ×)。
F ig. 1　Norma l ultra2structure of capsicum leaves in d ifferen t tim es
A. U ltra2structure is normal in the control leaves after treating 2 h (7 200 ×) ; B. Double membranes of m itochondria are integral and
mitochondria ridges are clear in the control leaves after 6 h (58 000 ×) ; C. U ltra2structures of chlorop last and m itochondria are normal in the
control after 24 h (29 000 ×) ; D. Structure of cell membrane is normal and endop lasts are rich in the control after 18 h (10 000 ×) .
212　辣椒疫霉菌粗毒素对辣椒叶片超微结构的影响
辣椒被疫霉菌侵染后 , 植株体内产生一系列的组织细胞学改变。25%辣椒疫霉菌培养滤液处理茄
门甜椒叶组织 2 h, 质膜内陷 , 细胞壁染色加深 , 叶绿体基粒片层排列整齐 , 膜稍模糊 (图版 , 1、
2)。处理 6 h, 组织中出现最明显的变化是叶绿体严重肿胀 , 细胞壁出现沉积物 , 染色较深 (图版 ,
3) ; 线粒体结构正常 , 膜连续 , 基质均匀 , 脊清晰可见 (图版 , 4 )。处理 12 h, 细胞发生严重的质
壁分离 , 细胞壁中胶层分解 , 染色较深 (图版 , 5) ; 叶绿体膜部分消失 , 基粒片层排列紊乱 (图版 ,
6) ; 有的线粒体只剩单层膜 , 脊尚清晰可见 , 基质染色均匀 (图版 , 7)。处理 18 h, 叶绿体膜完全
消解 , 基粒片层排列散乱 , 出现空泡化 (图版 , 8) ; 线粒体膜被破坏 , 有的只剩少数片断 , 脊数减
少且模糊不清 (图版 , 9、10)。处理 24 h, 叶绿体解体 , 基粒片层只剩少数片断 , 排列散乱 (图版 ,
11) , 线粒体脊消失 , 出现空泡化和泡囊化 (图版 , 12)。辣椒叶组织超微结构的破坏 , 使辣椒的光
合、呼吸作用均不能正常进行 , 蛋白质和核酸代谢也受到影响。
参考文献 :
1　Hwang B K, Kim W K. U ltrastructure at the hostparasite interface of Phytophthora capsici in roots and stem s of Capsicum annuum. J. Phytopa2
thology, 1989, 127: 305～315
2　谢丙炎 , 朱国仁. 辣椒疫霉菌毒素. 菌物系统 , 1997, 16 (4) : 274～280
Xie B Y, Zhu G R. Phytophthora capsici phytotoxin. Mycosystem, 1997, 16 (4) : 274～280 ( in Chinese)
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　4期 李海燕等 : 辣椒疫霉菌粗毒素对叶片组织超微结构的影响 　
图版说明 : 1. 毒素处理 2 h, 质膜内陷 , 叶绿体基粒片层排列整齐 ( 14 000 ×) ; 2. 毒素处理 2 h, 叶绿体、线粒体超微结构正常
( 7 200 ×) ; 3. 毒素处理 6 h, 叶绿体膨胀 , 细胞壁染色加深 (7 200 ×) ; 4. 毒素处理 6 h, 线粒体结构基本正常 (36 000 ×) ; 5. 毒
素处理 12 h, 质壁分离 , 中胶层分解 , 染色加深 (36 000 ×) ; 6. 毒素处理 12 h, 叶绿体基粒片层排列非常紊乱 (14 000 ×) ; 7. 毒
素处理 12 h, 线粒体只剩单层膜 , 脊尚清晰可见 ( 36 000 ×) ; 8. 毒素处理 18 h, 叶绿体基粒片层排列非常紊乱 , 出现空泡化
(14 000 ×) ; 9. 毒素处理 18 h, 线粒体脊数减少 , 变得模糊 ( 36 000 ×) ; 10. 毒素处理 18 h, 线粒体基质外流 , 染色不均匀
(36 000 ×) ; 11. 毒素处理 24 h, 叶绿体结构完全破坏 , 散乱地堆积在细胞内 (7200 ×) ; 12. 毒素处理 24 h, 线粒体脊消失 , 基质
外流 , 空泡化 (36 000 ×)。
Explana tion of pla tes: 1. Sunken p lasmolemma and lamellae of chlorop last are in order after treating 2 h with toxin (14 000 ×) ; 2. The struc2
tures of m itochondria and chlorop lasts are normal after treating 2 h with toxin (7 200 ×) ; 3. Swollen chlorop last and the cellwalls are dyed deep ly
after treating 6 h with toxin (7 200 ×) ; 4. The structure of m itochondria is normal after treating 6 h with toxin (36 000 ×) ; 5. Plasmolysis after
treating 12 h with toxin (36 000 ×) ; 6. Lamellae of chlorop lasts disorder after treating 12 h with toxin (14 000 ×) ; 7. Double membrane of
m itochondria become single and the ridges are clear after treating 12 h with toxin (36 000 ×) ; 8. Lamellae of chlorop lasts disorder and vacuolated
after treating 18 h with toxin (14 000 ×) ; 9. The numbers of m itochondria ridges decrease and blur after treating 18 h with toxin (36 000 ×) ;
10. M itochondria overflow and the electronic dye is uneven after treating 18 h with toxin (36 000 ×) ; 11. The structure of chlorop lasts is com2
p letely damaged and scatter in cytop lasm after treating 24 h with toxin (7 200 ×) ; 12. M itochondria ridges disappear and vacuolated after treating
24h with toxin (36 000 ×) .
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