全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 13 期 2015 年 7 月

• 1985 •
桂林产银杏叶最佳采收期的研究
杨金华 1，陈文财 2，孟 杰 2*
1. 河南中医学院第一附属医院，河南 郑州 450003
2. 桂林三金药业股份有限公司，广西 桂林 541000
摘 要：目的 通过对桂林地区的银杏叶 Ginkgo Folium 一年内的总黄酮苷与总内酯量检测，分析总黄酮和总内酯的比例变
化规律，找到最佳“酮酯比”，为确定桂林地区银杏叶药材的最佳采收期提供科学的实验依据。方法 使用回流提取法提取
样品中总黄酮苷和总内酯，使用 HPLC 法对其进行定量分析，色谱柱为 Ultimate XB-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；总
黄酮测定采用甲醇-0.4%磷酸溶液（48∶52）为流动相；测波长 360 nm；体积流量 1.0 mL/min。总内酯测定以甲醇-四氢呋喃-
水（25∶10∶65）为流动相；蒸发光散射检测器检测；体积流量 0.6 mL/min。结果 桂林地区产银杏叶药材，在 1 年内不同
采收期银杏叶总黄酮苷和总内酯量差异较大，但 8 月份 2 种有效部位量均较高，二者量比例最小。结论 8 月份为桂林地区
银杏叶的最佳采收季节，为指导桂林产银杏叶的采收提供实验依据。
关键词：银杏叶；总黄酮苷；总内酯；HPLC；最佳采收期
中图分类号：R286.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)13 - 1985 - 04
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.13.022
Best harvesting time of Ginkgo Folium from Guilin
YANG Jin-hua1, CHEN Wen-cai2, MENG Jie2
1. The First Affiliated Hospital of Henan University of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou 450003, China
2. Guilin Sanjin Pharmaceutical Co., Ltd, Guilin 541000, China
Abstract: Objective There are abundant Chinese medicinal herb resources in Guangxi province. Especially, there are lots of Ginkgo
Folium in the north. To detect the contents of the total flavonoid glycoside and lactone in Ginkgo Folium and to find out their best
concentration ratio during the year. Methods The reflux method was used for the distillation of the total flavonoid glycoside and
lactone in Ginkgo Folium and HPLC was used for quantitative analysis. The contents of the total flavonoid glycoside and lactone in
Ginkgo Folium were determined on a Ultimate XB-C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) analytical column with different mobile phases and
detectors. Results The concentration ratio of the total flavonoid glycoside and lactone in Ginkgo Folium in August was the smallest
and their contents were high. Conclusion There is significant difference between total flavonoid glycoside and lactone content in
Ginkgo Folium from different picking periods during the year, and the concentration ratio of the two compositions in August is the
smallest with high contents, which can be used to provide the basis for guiding the farmer to collect Ginkgo Folium in August.
Key words: Ginkgo Folium; total flavonoid glycoside; total lactone; HPLC; harvesting time

采收期是指中药材的采收时间，中药材的采收期
对有效成分量、制剂质量、临床疗效等方面均有直接
影响[1]。银杏叶 Ginkgo Folium 为银杏树的干燥绿叶，
有较高的药用价值，其药用成分主要有槲皮素、山柰
素和异鼠李素等黄酮类化合物[2-3]，以及银杏内酯 A、
B、C 和白果内酯等萜内酯类化合物，这些化合物具
有抗氧化、清除自由基、提高机体免疫力、延缓衰老
等药理作用[4-7]。有研究表明，银杏叶的有效成分量受
气候地域[8]、采收期[9-11]等因素的影响，其中选择恰当
的采收期可以较为容易地避免其影响，为更合理规范
地开发利用银杏叶资源，有必要研究不同采收期银杏
叶中总黄酮苷与总内酯的变化情况以确定1年内银杏
叶的最佳采收期。广西桂北地区有丰富的银杏树资
源，本实验研究广西桂北地区不同采收期银杏叶中总
黄酮苷与总内酯的变化情况，结合二者量高低和二者
比值大小确定该区产银杏叶的最佳采收期。

收稿日期：2015-01-13
作者简介：杨金华（1966—），男，本科，副主任药师，研究方向为中药制剂与鉴定。Tel: (0371)66221486 E-mail: yangjinhua1010@163.com
*通信作者 孟 杰，男，高级工程师，主要从事中药新药和新工艺研究。Tel: (0773)5849548 E-mail: doctormj@sina.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 13 期 2015 年 7 月

• 1986 •
1 仪器与材料
Waters2695高效液相色谱仪（美国Waters公司），
Waters2998 光电二极管阵列检测器（美国 Waters 公
司），Waters2420 蒸发光检测器（美国 Waters 公司），
Ultimate XB-C18液相色谱柱 [中国月旭材料科技（上
海）有限公司]。槲皮素、山柰素、异鼠李素、白果
内酯、银杏内酯 A、B、C 对照品均购于中国食品药
品检定研究院。银杏叶 Ginkgo Folium 分别于 2013
年 5—10 月采自广西桂林，经桂林三金药业股份有
限公司科研所卢志标研究员鉴定。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
2.1.1 总黄酮色谱条件 Ultimate XB-C18 液相色谱
柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以十八烷基硅烷键
合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（48∶52）
为流动相；检测波长 360 nm；体积流量 1.0 mL/min；
进样量 10 μL。
2.1.2 总内酯色谱条件 色谱柱 Ultimate XB-C18
液相色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以十八烷
基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-四氢呋喃-水
（25∶10∶65）为流动相；蒸发光散射检测器检测；
体积流量 0.6 mL/min；进样量 20 μL。
2.2 对照品溶液的制备
2.2.1 总黄酮对照品溶液制备 取槲皮素、山柰素、
异鼠李素对照品适量，精密称定，加甲醇分别配制
成含槲皮素 100 μg/mL、山柰素 100 μg/mL、异鼠李
素 80 μg/mL 的混合对照品溶液，即得。
2.2.2 总内酯对照品溶液制备 取银杏内酯 A、B、
C 和白果内酯对照品适量，精密称定，加 50%甲醇
分别配制成含银杏内酯 A 200 μg/mL、银杏内酯 B
100 μg/mL、银杏内酯 C 100 μg/mL、白果内酯 200
μg/mL 的混合对照品溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
2.3.1 银杏叶粉末的制备 将采摘得到的银杏叶即
刻清洗干净后于 60 ℃烘干，然后用高速多功能粉
碎机粉碎，过 60 目筛。
2.3.2 总黄酮苷供试品溶液制备 取“2.3.1”项制
得粉末 0.5 g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯
甲烷回流提取 2.5 h，弃去三氯甲烷液，药渣挥干，
加甲醇回流提取 4 h，提取液蒸干，残渣加甲醇-25%
盐酸溶液（4∶1）混合液 25 mL，加热回流 30 min，
放冷，转移至 50 mL 量瓶中，并加甲醇至刻度，摇
匀，制得。
2.3.3 总内酯供试品溶液制备 取“2.3.1”项制得
粉末 0.5 g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚
（30～60 ℃）在 70 ℃水浴上回流提取 1.5 h，弃去
石油醚液，药渣挥干并置于烘箱中 60 ℃下烘干，
加甲醇回流提取 6 h，提取液蒸干，加甲醇溶解残渣，
转移至 10 mL 量瓶中超声处理（功率 300 W，频率
50 kHz）30 min，取出放冷，加甲醇至刻度，摇匀，
静置，精密量取上清液 5 mL，加入酸性氧化铝柱
（200～300 目，3 g，内径 1 cm，甲醇湿法装柱），
用甲醇 25 mL 洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至干，
残渣容甲醇 5 mL 分次转移至 10 mL 量瓶中，加水
约 4.5 mL，超声处理（功率 300 W，频率 50 kHz）
30 min，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2.4 标准曲线的绘制及线性关系考察
分别精密吸取“2.2”项制得对照品溶液 2、4、
6、8、10 μL，依次注入液相色谱仪，在“2.1”项下
色谱条件下测定峰面积，以峰面积（Y）为纵坐标，
以对照品进样量（X）为横坐标绘制标准曲线，分别
得各对照品回归方程及线性范围，见表 1。
2.5 精密度试验
取上述对照品溶液，以“2.1”项色谱条件进行
分析，重复进样 6 次，槲皮素、山柰素、异鼠李素、
银杏内酯 A、银杏内酯 B、银杏内酯 C、白果内酯
峰面积 RSD 分别为 1.33%、2.01%、1.86%、2.26%、
1.64%、2.52%、1.47%。
表 1 回归方程及线性范围 (n = 5)
Table 1 Regression equation and linear range (n = 5)
对照品 回归方程 r 线性范围/μg
槲皮素 Y＝2.02×105 X－1.03×104 0.999 8 0.20～1.00
山柰素 Y＝1.91×105 X－4.6×103 0.999 9 0.20～1.00
异鼠李素 Y＝2.53×105 X－5.01×103 0.999 7 0.16～0.80
银杏内酯 A Y＝3.11×105 X＋1.22×103 0.999 8 0.40～2.00
银杏内酯 B Y＝2.65×105 X＋4.33×103 0.999 9 0.20～1.00
银杏内酯 C Y＝3.44×105 X－2.42×103 0.999 6 0.20～1.00
白果内酯 Y＝5.38×105 X－3.88×103 0.999 6 0.40～2.00
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 13 期 2015 年 7 月

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2.6 稳定性试验
分别取供各试品(5 月样品)溶液每隔 2 h 进样 1
次，以“2.1”项色谱条件进行分析，共测定 6 次，
结果槲皮素、山柰素、异鼠李素、银杏内酯 A、银
杏内酯 B、银杏内酯 C、白果内酯峰面积 RSD 分别
为 2.68%、2.13%、1.62%、2.36%、1.78%、1.86%、
1.97%。
2.7 重复性试验
精密称取 5 月份样品粉末 6 份，各 0.25 g，分
别按“2.3.2”和“2.3.3”项下方法制备溶液，以“2.1”
项色谱条件进行分析，计算总黄酮苷和银杏总内酯
平均质量分数分别为 0.641、0.565，RSD 值分别为
1.86%、1.74%。
2.8 加样回收率试验
精密称取“2.3.1”项下粉末 5 份，各 0.25 g，
分别加入各对照品的对应量，分别按“2.3.2”和
“2.3.3”项下方法制备溶液，以“2.1”项色谱条件
进行分析，计算槲皮素、山柰素、异鼠李素、银杏
内酯 A、银杏内酯 B、银杏内酯 C、白果内酯回收
率分别为 98.68%（RSD＝1.98%）、99.46%（RSD＝
1.26%）、97.86%（RSD＝1.18%）、100.38%（RSD＝
1.35%）、97.69%（RSD＝1.71%）、101.02%（RSD＝
1.04%）、96.94%（RSD＝1.52%）。
2.9 样品的测定
精密吸取“2.2”项下制备的对照品溶液和“2.3”
项下制备的供试样品溶液，以“2.1”项色谱条件进
行分析，用外标法计算总黄酮苷量 [总黄酮苷量＝
（槲皮素量＋山柰素量＋异鼠李素量）×2.51] 和总
内酯量（4 种内酯量之和）。总黄酮苷和总内酯色谱
图见图 1，样品测定结果见表 2。
由表 2 可知，银杏叶中总黄酮苷量从 5 月到
7 月逐渐增大，从 7 月到 10 月又逐渐减小，质量
分数最高出现在 7 月；总内酯从 5 月到 8 月逐渐
增大，从 8 月到 10 月又逐渐减小，质量分数最高
出现在 8 月。银杏叶中两者质量分数都有呈现出
小逐渐增大再减小的过程，但是两者的变化不完
全一样，总黄酮量最高出现在 7 月，而总内酯量
最高出现在 8 月，因此在以银杏叶中有效成分为
标准确定银杏叶的采收期时不能单以某一个成分
的质量分数来定，本实验提出以二者比值最小为
其中一个指标，二者比值最小值出现在 8 月。结
合二者质量分数最大值，确定桂林产银杏叶的最
佳采收期为 8 月。


1-槲皮素 2-山柰素 3-异鼠李素 4-银杏内酯 C 5-白果内酯
6-银杏内酯 A 7-银杏内酯 B
1-quercetin 2-kaempferde 3-isorhamnetin 4-ginkglide C 5-bilobalide
6-ginkgolide A 7-ginkgolide B
图 1 样品中总黄酮苷 (A) 和总内酯 (B) 的 HPLC 图
Fig. 1 HPLC of total flavonoid glycoside (A) and
lactone (B)
表 2 样品测定
Table 2 Sample test
月份 总黄酮苷/% 总内酯/% 总黄酮苷/总内酯
5 0.643 0.564 1.140
6 0.682 0.617 1.105
7 0.769* 0.652 1.179
8 0.759 0.728 1.041
9 0.716 0.645 1.110
10 0.638 0.563 1.113

3 讨论
中药材的采收加工对其药用成分的质量分数
有较大的影响，以中药材的药效成分量为指标，
评价中药材的采收加工方法是否恰当是最为直接
有效的方法。银杏叶中最具代表性的药效成分是
黄酮类化合物和萜内酯类化合物，考察银杏叶的
采收加工方法是否合适，应该同时考虑银杏叶中
这 2 类成分的质量分数。为此本实验测定不同采
收期的银杏叶中总黄酮苷和总内酯的量，以二者
比例小且二者的量这 2 个指标来确定最佳采收
期。由实验结果得出，广西桂北地区的银杏叶中
总黄酮苷质量分数最高出现在 7 月，总内酯质量
分数最高出现在 8 月，二者质量分数比最小出现

0 10 20 30 40
1
2
3
A
4
5
6
7
0 2 4 6 8 10 12
t / min
B
t / min
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在 8 月。由此可以看出，桂林地区 8 月采收的银
杏叶中总黄酮苷和总内酯的质量分数都比较高，
且二者的质量分数比最小。依此实验依据，确定
桂林地区银杏叶药材的最佳采收期为 8 月份。
参考文献
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