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Effects of combined injection of Angelica sinensis polysaccharide and cytarabine on bone marrow mononuclear cells of transplanted human leukemia mice

当归多糖与阿糖胞苷联合注射对人白血病模型小鼠骨髓单核细胞的影响



全 文 :·3418· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 23 期 2014 年 12 月

• 药理与临床 •
当归多糖与阿糖胞苷联合注射对人白血病模型小鼠骨髓单核细胞的影响
徐春燕,贾道勇,景鹏伟,张岩岩,张梦思,刘 俊,李 静,朱家红,姜 蓉,王 璐,王亚平*
重庆医科大学 干细胞与组织工程研究室 组织胚胎学教研室,重庆 400016
摘 要:目的 探讨当归多糖(ASP)与阿糖胞苷(Ara-C)联合注射对移植性人白血病模型小鼠骨髓单个核细胞(BMMCs)
的影响,并探讨其调控白血病细胞衰老的可能机制。方法 每只小鼠尾静脉移植 2×107个 K562 细胞,建立移植性人白血病
NOD/SCID 小鼠模型,模型建立后随机分为模型组、ASP 组、Ara-C 组和 ASP+Ara-C 组,移植 K562 细胞第 31 天开始分别
ip ASP(200 mg/kg)、Ara-C(2.5 mg/kg)和 ASP(200 mg/kg)+Ara-C(2.5 mg/kg)治疗,共 14 d,模型组注射等量生理
盐水。药物注射完成第 2 天眼球取血检测外周血白细胞总数与分类计数,取股骨测定每只股骨 BMMCs 细胞数;CCK8 测定
BMMCs 增殖能力,流式细胞术分析 BMMCs 增殖周期,混合集落(CFU-Mix)培养检测 BMMCs 形成集落能力;衰老 β半
乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察衰老细胞百分率;Western blotting 检测衰老相关蛋白 P16、Rb、CDK4 及 CyclinD1 表达。
结果 与模型组比较,无论是 ASP、Ara-C 单独注射或 ASP+Ara-C 联合用药均能有效降低白血病模型小鼠外周血白细胞总
数,降低中性粒细胞百分率,提高淋巴细胞百分率;降低股骨 BMMCs 细胞数,明显抑制 BMMCs 增殖,降低 CFU-Mix 产
率,提高 G1期细胞比例,减少 S 期细胞比例;显著提高 SA-β-Gal 染色阳性细胞百分率;上调 P16、Rb 表达,下调 CDK4、
CyclinD1 表达,且联合用药组效果更为明显。结论 ASP 与 Ara-C 可能通过调节衰老相关蛋白 P16、Rb、CDK4 及 CyclinD1
表达,进而促进移植小鼠白血病细胞衰老,为临床治疗白血病提供了新思路。
关键词:当归多糖;阿糖胞苷;人白血病;K562 细胞;骨髓单个核细胞;细胞衰老
中图分类号:R286.91 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2014)23 - 3418 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.23.012
Effects of combined injection of Angelica sinensis polysaccharide and cytarabine
on bone marrow mononuclear cells of transplanted human leukemia mice
XU Chun-yan, JIA Dao-yong, JING Peng-wei, ZHANG Yan-yan, ZHANG Meng-si, LIU Jun, LI Jing, ZHU Jia-hong,
JIANG Rong, WANG Lu, WANG Ya-ping
Laboratory of Stem Cell and Tissue Engineering, Department of Histology and Embryology, Chongqing Medical University,
Chongqing 400016, China
Abstract: Objective To explore the effects and the possible mechanism of combined injection of Angelica sinensis polysaccharide (ASP)
and cytarabine (Ara-C) on the bone marrow mononuclear cells (BMMCs) of the transplanted human leukemia mouse model. Methods
K562 cells (2×107)were transplanted into the tail vein of mice to establish the transplanted human leukemia NOD/SCID mouse model.
Then the leukemia mice were randomly divided into model, ASP, Ara-C, and ASP + Ara-C groups. After the 30 d transplantation, the mice
were ip injected with ASP (200 mg/kg/d), Ara-C (2.5 mg/kg/d), and ASP (200 mg/kg/d) + Ara-C (2.5 mg/kg/d), respectively for 14 d, and
the mice in the model group were injected with saline (equal volume and time). The next day after the treatment, the eyeball blood was
collected to detect the amount and classification of white blood cells (WBC). The femurs were taken to count BMMCs of each femur. The
proliferation of BMMCs was detected by CCK-8; The distribution of cell cycles was analyzed by flow cytometry (FCM); The capability of
colony forming was examined by CFU-Mix cultivation; The ratio of the SA-β-Gal staining positive BMMCs was counted; The aging
related proteins of P16, Rb, CDK4, and CyclinD1 were detected by Western blotting. Results Compared with the model group, ASP or
Ara-C injected alone and their combined injection can obviously reduce the amount of the peripheral blood WBC, the percentage of

收稿日期:2014-01-10
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81173398)
作者简介:徐春燕(1987—),女,硕士研究生。Tel: 13983969279 E-mail: 214541274@qq.com
*通信作者 王亚平,教授,博士生导师。Tel: (023)68485968 E-mail: ypwangcq@aliyun.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 23 期 2014 年 12 月 ·3419·

neutrophiles, and the number of femur BMMCs; effectively inhibit the proliferation of BMMCs, CFU-Mix forming, and the ratio of S
stages; markedly raise the percentage of lymphocytes, ratio of G1 stages, and the percentage of SA-β-Gal positive cells; down-regulate the
expression of the aging related proteins of CDK4 and CyclinD1; and up-regulate the expression of P16 and Rb protein. The effects of
ASP + Ara-C group were much better than those in the other groups. Conclusion The aging mechanism of BMMCs for the transplanted
human leukemia mice induced by ASP and Ara-C may be ascribed to the regulation of the expression of the aging related proteins of P16,
Rb, CDK4, and CyclinD1. Our research provides a new idea to treat leukemia in clinic.
Key words: Angelica sinensis polysaccharides; cytarabine; human leukemia; K562 cells; bone marrow mononuclear cells; cell aging

当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides,
ASP)是“补血”要药当归的重要药效成分,ASP
对机体的免疫系统和造血系统有明显的促进作用,
抗肿瘤和抗辐射损伤也显示良好的功效[1-5]。传统中
医理论认为,某些中药及其有效成分有“双向调控”
作用,即对正常组织细胞和异常组织细胞的作用存
在差异。本课题组最近研究发现,ASP 对延缓造血
干细胞衰老有明确的调控作用[6-7]。白血病是造血干
细胞水平的恶性血液系统肿瘤,ASP 是否有诱导白
血病细胞衰老的作用,这是值得探讨的科学问题。
本实验以移植性人白血病NOD/SCID小鼠模型为研
究对象,探讨 ASP 与阿糖胞苷(cytarabine,Ara-C)
联合体内注射对移植性人白血病细胞衰老的作用及
其相关机制,旨在为探讨天然药物有效成分调控肿
瘤细胞衰老提供实验依据,为白血病等肿瘤的治疗
提供新的思路和方法。
1 材料与方法
1.1 实验动物
雄性 NOD/SCID 小鼠,8~10 周龄,体质量 18~
22 g,购自北京华阜康生物科技股份有限公司,合
格证号 SCXK(京)2009-0007。
1.2 人白血病 K562 细胞株
重庆医科大学临床检验医学院惠赠,在含 10%
胎牛血清的 RPMI 1640 培养体系、37 ℃、5% CO2
的恒温培养箱中培养,每 2~3 天换液传代。
1.3 主要药品、试剂与配制
ASP 购自陕西慈缘生物技术有限公司(批号为
CY130421,甘肃岷县当归提取,质量分数≥95%,
生理盐水配制成 20 mg/mL,滤过除菌);Ara-C 购自
国药一心制药有限公司(批号 110902-1015,相对分
子质量为 279.68,规格 0.1 g,生理盐水配制成 2.5
mg/mL,滤过除菌);环磷酰胺(山西普德药业股份
有限公司,批号 04120105)。衰老 β-半乳糖苷酶
(SA-β-Gal)染色试剂盒购自碧云天生物技术研究所;
甲基纤维素半固体培养基(MethoCult GF M3434)
购自 Stem Cell Technologies 公司;P16 兔多克隆抗体
购自安博生物技术有限公司,β-actin 鼠多克隆抗体、
Rb、CDK4 与 CyclinD1 兔多克隆抗体购自武汉三鹰
生物技术有限公司;辣根过氧化物酶(HRP)标记
的山羊抗小鼠抗体、山羊抗兔抗体购自北京中杉金
桥生物技术有限公司。
1.4 人白血病小鼠模型的建立与鉴定
按本课题组方法建立移植性人白血病小鼠模
型[8]。即 NOD/SCID 小鼠随机均分为对照组、模型
组,模型组小鼠 ip 环磷酰胺(2 mg/只,每天 1 次,
2 d)后每只小鼠尾静脉移植 2×107 个对数生长期的
K562 细胞,对照组小鼠注射等量生理盐水,移植细
胞第 7 周取对照组和模型组小鼠眼球血,全自动血
球计数仪检测外周血白细胞总数与白细胞分类计
数;PBS 冲出股骨骨髓,计数每只股骨骨髓单个核
细胞(BMMCs),Wright’s 染色骨髓细胞涂片,光
镜观察;分别收集 2 组小鼠的骨髓,Trizol 法提取
RNA,RT-PCR 检测 NOD/SCID 小鼠骨髓中人特有
基因 DQα 基因表达。
1.5 ASP 与 Ara-C 联合注射对人白血病模型小鼠
BMMCs 的影响
1.5.1 分组与药物注射 接种 K562 细胞第 31 天开
始,各组小鼠 ip给药,共 14 d,即ASP组(200 mg/kg,
药效最佳剂量)、Ara-C 组(2.5 mg/kg,临床用药剂
量)、ASP+Ara-C 联合组(ASP 200 mg/kg+Ara-C
2.5 mg/kg),模型组注射等量生理盐水,注射完成
第 2 天取材,检测外周血和股骨骨髓相关指标。
1.5.2 外周血与骨髓常规检测 药物注射完成第 2
天,取各组小鼠眼球血,全自动血球计数仪检测外
周血白细胞总数与白细胞分类计数,取股骨计数每
只股骨 BMMCs。
1.5.3 BMMCs 细胞增殖与分化能力检测 CCK8
法测定 BMMCs 细胞增殖能力:收集各组 BMMCs,
调整细胞密度为 1×108个/L,以每孔 200 μL 的培
养体系接种于 96 孔板,每组设 3 个复孔,同时设立
无细胞的空白对照孔调零。分别培养 0、1、2、3、
4 d,加入 20 μL CCK-8 继续培养 4 h,酶联免疫检
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测仪测定各孔于波长 450 nm 处吸光度(A450)值。
流式细胞术分析细胞周期:收集各组 BMMCs 细胞
1×105 个,PBS 洗涤 2 次,70%冷乙醇 4 ℃固定过
夜,测定前遗弃固定液,加入碘化丙啶和 RNA 酶
工作液,4 ℃染色处理 30 min,300 目滤网滤过后
上流式细胞仪,经计算机数据处理分析得出细胞周
期的各时相比例。混合集落(CFU-Mix)形成实验
检测 BMMCs 形成集落与分化能力:收集各组
BMMCs 1×104 个,PBS 洗涤 2 次,加入混合集落
培养基 0.5 mL 充分混匀,接种于 24 孔板,在 5%
CO2、37 ℃培养箱中孵育 7~10 d,根据各组
CFU-Mix 的数量评价各组细胞的多向分化能力。
1.5.4 SA-β-Gal 染色检测衰老细胞 收集各组
BMMCs,PBS 洗涤 2 遍,按试剂盒说明书操作。
甘油封片镜检,每组随机计数 400 个细胞中的阳性
细胞数,计算阳性细胞率。
1.5.5 P16、Rb、CDK4 及 CyclinD1 蛋白表达检测
收集各组 BMMCs,PBS 洗涤,蛋白裂解液裂解提
取蛋白,BCA 法测定细胞总蛋白浓度,聚丙烯酰胺
凝胶电泳分离。一抗(参照说明书稀释抗体)4 ℃
过夜,二抗 37 ℃ 1 h,增强化学发光。Quantity-One
软件分析,目的蛋白表达量用目的条带与 β-actin 条
带的灰度值比值表示。
1.6 统计学分析
采用 SPSS 16.0 统计软件进行单因素方差分析,
组间两两比较采用LSD检验,计量资料以 ±x s 表示。
2 结果
2.1 人白血病小鼠模型的鉴定
移植 K562 细胞第 7 周,模型组与对照组比较,
外周血白细胞数量显著增加,中性粒细胞百分比升
高,淋巴细胞百分比明显下降(表 1)。股骨 BMMCs
明显增多(图 1),骨髓中大小不等的白血病细胞明显
增多(图 2)。RT-PCR 检测显示,对照组骨髓中未发
现有人特有 DQα基因,而模型组为阳性表达(图 3)。
表 1 模型组与对照组小鼠外周血白细胞计数及分类比较
( ± = 5x s , n )
Table 1 Amount and classification of peripheral blood WBC
of mice in control and model groups ( ± = 5x s , n )
组别 白细胞 / (×109·L−1) 中性粒细胞 / % 淋巴细胞 / %
对照 1.34±0.03 61.35±1.13 31.33±2.24
模型 13.60±2.33* 84.13±1.90* 7.20±0.20*
与对照组比较:*P<0.05,下同
*P < 0.05 vs control group, same as below


图 1 对照组与模型组小鼠 BMMCs 计数
Fig. 1 Number of BMMCs of mice in control and model groups


对照 模型
图 2 对照组与模型组小鼠骨髓象 (Wright’s 染色)
Fig. 2 Bone marrow of leukemia mice in control
and model groups (Wright’s staining)

图 3 人白血病模型小鼠骨髓细胞 DQα的表达
Fig. 3 Expression of DQα in bone marrow of leukemia mice
2.2 ASP 与 Ara-C 对人白血病模型小鼠外周血与
骨髓常规指标的影响
与模型组比较,ASP、Ara-C 单独注射或 ASP+
Ara-C 联合用药均能有效降低人白血病模型小鼠
外周血白细胞总数,降低中性粒细胞百分率,提高
淋巴细胞百分率;降低股骨 BMMCs 细胞数(P<
0.05);ASP+Ara-C 联合用药组与单独用药组相
比,中性粒细胞百分率、淋巴细胞百分率和股骨
BMMCs 细胞数的改变更加明显(P<0.05),见表
2 和图 4。


1.6
1.4
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
B
M
M
C
s /

10
7

)
对照 模型
*
marker 对照 模型
221 bp
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表2 ASP与Ara-C对人白血病模型小鼠外周血白细胞计数
与分类的影响 ( ± = 5x s , n )
Table 2 Effect of ASP and Ara-C on amount and
classification of peripheral blood WBC
of leukemia mice ( ± = 5x s , n )
组别
剂量 /
(mg·kg−1)
白细胞 /
(×109·L−1)
中性粒细
胞 / %
淋巴细胞 / %
模型 — 13.60±2.33 84.13±1.90 7.20±0.20
ASP 200 6.39±0.15#△ 80.73±0.87#△ 13.64±0.65#△
Ara-C 2.5 3.19±0.08# 76.94±1.82#△ 13.43±1.05#△
ASP+Ara-C 200+2.5 1.90±0.30# 69.07±1.47# 19.30±0.70#
与模型组比较:#P<0.05;与 ASP+Ara-C 组比较:△P<0.05,下同
#P < 0.05 vs model group; △P < 0.05 vs ASP + Ara-C group, same as below

图 4 ASP 与 Ara-C 对人白血病模型小鼠 BMMCs 细胞数
量的影响 ( ± = 5x s , n )
Fig. 4 Effect of ASP and Ara-C on number of BMMCs
of leukemia mice ( ± = 5x s , n )
2.3 ASP 与 Ara-C 对人白血病模型小鼠 BMMCs
增殖与分化能力的影响
人白血病模型小鼠注射 ASP、Ara-C 或 ASP+
Ara-C 后,BMMCs 增殖能力下降(图 5);细胞增
殖周期阻滞(表 3);1×104 个 BMMCs 形成
CFU-Mix 的能力下降,模型组(30.00±1.73)个,
ASP 组(23.33±1.53)个,Ara-C 组(17.00±1.00)
个,ASP+Ara-C 组(11.50±2.12)个(图 6),ASP+
Ara-C 组作用更加明显。
2.4 ASP 与 Ara-C 对人白血病模型小鼠 BMMCs
SA-β-Gal 染色阳性率的影响
染色显示阳性细胞胞质呈蓝绿色,阴性细胞则
未着色。人白血病模型小鼠 BMMCs SA-β-Gal 阳性
率分别为模型组(7.33±1.53)%、ASP 组(20.33±
2.52)%、Ara-C 组(36.33±1.15)%、ASP+Ara-C
组(51.00±1.00)%(图 7)。


图 5 ASP 与 Ara-C 对人白血病模型小鼠 BMMCs 增殖能
力的影响 ( ± = 3x s , n )
Fig. 5 Effect of ASP and Ara-C on proliferation of BMMCs
of leukemia mice ( ± = 3x s , n )
表 3 ASP 与 Ara-C 对人白血病模型小鼠 BMMCs 细胞周
期的影响 ( ± = 3x s , n )
Table 3 Effect of ASP and Ara-C on cell cycle of BMMCs
of leukemia mice ( ± = 3x s , n )
组别
剂量 /
(mg·kg−1)
G0/G1 期 / % G2/M 期 / % S 期 / %
模型 — 66.71±0.79 9.00±7.09 24.29±7.39
ASP 200 74.72±2.68#△ 2.40±1.80 22.88±2.98△
Ara-C 2.5 79.30±2.31#△ 3.93±2.38 16.77±0.46
ASP+Ara-C 200+2.5 88.63±1.94# 1.33±0.22# 10.04±2.00#


图 6 ASP 与 Ara-C 对人白血病模型小鼠 BMMCs
CFU-Mix 形成能力的影响
Fig. 6 Effect of ASP and Ara-C on forming capacities
of CFU-Mix in BMMCs of leukemia mice
Ara-C
ASP 模型
ASP+Ara-C


0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
A 4
50

0 1 2 3 4
培养时间 / d
模型
ASP
Ara-C
ASP+Ara-C
#△
#△
#
#△
#△
#
#△
#△
#△
#△ # #
1.6
1.4
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
B
M
M
C
s /

10
7

)
模型 ASP Ara-C ASP+Ara-C
#△
#△
#△
·3422· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 23 期 2014 年 12 月



图 7 ASP 与 Ara-C 对人白血病小鼠 BMMCs SA-β-Gal 染
色阳性细胞率的影响
Fig. 7 Effect of ASP and Ara-C on ratio of SA-β-Gal staining
positive cells in BMMCs of leukemia mice
2.5 ASP与Ara-C对白血病模型小鼠BMMCs P16、
Rb、CDK4 及 CyclinD1 蛋白表达影响
与模型组比较,用药组能显著上调 P16 蛋白
与 Rb 蛋白的表达,下调 CDK4 与 CyclinD1 蛋白
的表达,ASP+Ara-C 联合用药组作用更加明显
(图 8)。
3 讨论
NOD/SCID 小鼠-白血病模型是研究白血病细
胞增殖、分化及其调控机制,探索新的白血病治疗
手段的重要方法[9]。本研究通过植入人白血病细胞
K562 建立白血病小鼠模型。结果显示,模型组小鼠
骨髓中 DQα 基因为阳性表达,而对照组为阴性。与
对照组相比较,模型组小鼠外周血白细胞数量显著
上升,中性粒细胞百分比明显升高,骨髓原粒细胞
大量增加,提示 NOD/SCID 小鼠接种 K562 细胞能
成功建立人白血病小鼠模型。


图 8 ASP 与 Ara-C 对人白血病模型小鼠 BMMCs P16、RB、CDK4 及 CyclinD1 蛋白表达的影响
Fig. 8 Effect of ASP and Ara-C on expression of P16, RB, CDK4, and CyclinD1 protein in BMMCs of leukemia mice
白血病在中医属于“虚劳”、“血虚”等范畴,
以气血两虚多见,临床以血虚证和血瘀证为主。而
当归是中医临床的“补血、活血”要药,有“补血
生气”之功效,ASP 是其主要药物活性成分之一。
本课题组以移植性人白血病NOD/SCID小鼠模型为
研究对象,研究 ASP 与 Ara-C 体内联合注射对人白
血病细胞衰老的作用及其相关机制,旨在为探讨天
然药物有效成分调控肿瘤细胞衰老提供实验依据,
为白血病等肿瘤的治疗提供新的思路和方法。
本实验结果证明,无论是 ASP、Ara-C 单独注
射或 ASP+Ara-C 联合用药均能有效降低外周血白
细胞总数,降低中性粒细胞百分率,提高淋巴细胞
百分率;降低股骨骨髓单个核细胞数,明显抑制骨
髓细胞增殖;降低 CFU-Mix 产率,ASP 与 Ara-C
联合用药作用更明显。研究证明[6-7,10],ASP 对人和
小鼠的造血细胞增殖分化有促进作用,并能有效延
缓造血干细胞衰老,这一结果说明 ASP 确有双向调
控作用。若 ASP 与抗癌药联合应用既能协同抑制肿
瘤细胞,又能减轻抗肿瘤药物对骨髓造血细胞损伤,
达到理想的治疗效果。
ASP与抗癌药联合应用既能协同抑制白血病细
胞,又能减轻抗肿瘤药物对骨髓造血细胞损伤的可
能机制是什么?本实验从细胞衰老角度来进行探
讨,细胞衰老是细胞生理功能逐渐衰退的过程,随
着细胞衰老进程推移,细胞将不可逆走向死亡。细
胞衰老是一种复杂的、多因素参与的调控过程,如
果人为诱导肿瘤细胞发生应激性衰老,这是肿瘤治
疗的新思路。
Ara-C
ASP 模型
ASP+Ara-C

1.6×104
3.4×104
3.6×104
1.1×105
4.3×104
P16
CDK4
CyclinD1
Rb
β-actin
模型 ASP Ara-C ASP+Ara-C
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
−0.2 P16 CDK4 CyclinD1 Rb
模型
ASP
Ara-C
ASP+Ara-C
#△#△#
#△
#△
#
#△
# # #

#△
#








中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 23 期 2014 年 12 月 ·3423·

迄今 SA-β-Gal 染色是公认经典评价细胞衰老
的生物学指标。本实验研究证明,无论是ASP、Ara-C
单独注射或 ASP+Ara-C 联合用药均能显著提高白
血病骨髓细胞 SA-β-Gal 染色阳性百分率,相反 ASP
却能减轻辐射或氧化低密度脂蛋白对造血干细胞损
伤,使 SA-β-Gal 染色阳性百分率降低。这是“扶正
祛邪”的进一步证明,提示 ASP 与 Ara-C 作用机制
与诱导白血病细胞衰老有密切关系。
细胞周期 G1 期的关卡是细胞衰老的关键调控
点,而 P16 在该调控点发挥重要作用,它能特异地
与 CDK4 结合,抑制 CyclinD-CDK4 的活性,使 Rb
蛋白低磷酸化,从而使 Rb 正常地行使 G1 期阻滞功
能,导致细胞不可逆地停滞于 G1 期,以维持细胞衰
老的特征性改变[11-13]。本研究结果表明,注射 ASP、
Ara-C、ASP+Ara-C 后,人白血病模型小鼠骨髓单
个核细胞均出现 G1 期阻滞,G0/G1 期比例显著升高、
S 期比例显著降低;P16 与 Rb 蛋白表达水平显著增
加,CDK4、CyclinD1 蛋白表达水平显著降低,且
ASP 与 Ara-C 联合用药作用更明显。提示 ASP 与
Ara-C 可能通过上调 P16 与 Rb 蛋白的表达,从而诱
导白血病细胞不可逆地停滞于 G1 期,最终使细胞进
入衰老状态。
综上所述,ASP 与 Ara-C 联合注射可抑制人白
血病模型小鼠骨髓单核细胞增殖,促进细胞衰老,
其机制可能与调控细胞周期基因的表达有关。结合
既往研究工作认为,ASP 与抗癌药物联合应用可以
协调提高诱导白血病细胞衰老的作用,并能减轻骨
髓正常造血细胞损伤,这是肿瘤治疗的新思路。
参考文献
[1] Cao W, Li X Q, Wang X, et al. A novel polysaccharide,
isolated from Angelica sinensis (Oliv.) Diels induces the
apoptosis of cervical cancer HeLa cells through an
intrinsic apoptotic pathway [J]. Phytomedicine, 2010,
17(8/9): 598-605.
[2] Liu C, Li J, Meng F Y, et al. Polysaccharides from the
root of Angelica sinensis promotes hematopoieses and
thrombopoieses through the PI3K/AKT pathway [J].
BMC Complement Altern Med, 2010, doi: 10.1186/1472-
6882-10-79.
[3] 何晓莉, 关雪晶, 吴 宏, 等. 当归多糖对电离辐射致
小鼠骨髓单个核细胞凋亡及氧化损伤的影响 [J]. 重庆
医科大学学报, 2012, 37(4): 315-319.
[4] Zhao L, Wang Y, Shen H L, et al. Structural
characterization and radioprotection of bone marrow
hematopoiesis of two novel polysaccharides from the root
of Angelica sinensis (Oliv.) Diels [J]. Fitoterapia, 2012,
83(8): 1712-1720
[5] 韦 玮, 龚苏晓, 张铁军, 等. 当归多糖类成分及其药
理作用研究进展 [J]. 药物评价研究 , 2009, 32(2):
130-134.
[6] 李成鹏, 刘 俊, 贾道勇, 等. 当归多糖诱导人白血病
干细胞衰老与调控端粒系统机制的研究 [J]. 中草药,
2014, 45(16): 2364-2369.
[7] 张先平, 王乾兴, 陈 斌, 等. 当归多糖对小鼠衰老造
血干细胞细胞周期蛋白的调控 [J]. 基础医学与临床,
2013, 33(3): 320-324.
[8] 陈地龙, 李 静, 刘永刚, 等. 移植性人白血病小鼠模
型的建立 [J]. 重庆医科大学学报, 2006, 31(2): 204-207.
[9] 聂小蒙, 楼敬伟, 王建民. SCID 小鼠-人白血病模型在
白血病研究中的应用 [J]. 中国实验血液学杂志, 2003,
11(1): 99-104.
[10] 宋姝丹, 华自森, 王建伟, 等. 当归多糖诱导 K562 细
胞向红系样细胞分化及其信号转导通路研究 [J]. 解剖
学报, 2009, 40(6): 897-901.
[11] 王亚平, 王建伟, 吴 宏, 等. 干细胞衰老与疾病 [M].
北京: 科学出版社, 2009.
[12] Sandhu C, Peehl D M, Slingerland J. p16INK4a mediates
cyclin dependent kinase 4 and 6 inhibition in senescent
prostatic epithelial cells [J]. Cancer Res, 2000, 60(10):
2616-2622.
[13] Attema J L, Pronk C J, Norddahl G L, et al.
Hematopoietic stem cell aging is uncoupled from
p16INK4a-mediated senescence [J]. Oncogene, 2009,
28(22): 2238-2243.