全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 15期 2016年 8月
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黄柏非生物碱化学成分研究
李艳萍 1, 2, 3,李丹丹 1, 2, 3,丁丽琴 2, 3,邱 峰 1, 3*
1. 天津中医药大学中药学院,天津 300193
2. 天津中医药大学中医药研究院,天津 300193
3. 天津市现代中药重点实验室,天津 300193
摘 要:目的 对黄柏 Phellodendri Cortex(黄皮树 Phellodendron chinense的干燥树皮)的非生物碱部分进行化学成分研究。
方法 采用 732型阳离子交换树脂柱色谱、D101大孔吸附树脂柱色谱、正相硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱
色谱等方法进行分离纯化,并根据化合物的理化性质、波谱及光谱数据鉴定化合物的结构。结果 从黄柏 70%乙醇提取物
的非生物碱部分分离得到 14个化合物,分别鉴定为 (−)-3-O-阿魏酰奎宁酸甲酯(1)、(−)-4-O-阿魏酰奎宁酸甲酯(2)、(−)-
绿原酸甲酯(3)、(−)-5-O-阿魏酰奎宁酸甲酯(4)、毛柳苷(5)、阿魏酸甲酯(6)、咖啡酸甲酯(7)、4-羟基苯乙醇(8)、
3,4,5-三甲基苯酚-O-β-D-葡萄糖苷(9)、2-methoxy-4-(2-propenyl) phenyl-β-D-glucopyranoside(10)、tachinoside(11)、丁香
酸甲酯(12)、(6S)-去氢催吐萝芙木醇(13)、(6R,7aR)-地芰普内酯(14)。结论 化合物 9~14 均为首次从该属植物中分离
得到。
关键词:黄柏;非生物碱;3,4,5-三甲基苯酚-O-β-D-葡萄糖苷;丁香酸甲酯;(6S)-去氢催吐萝芙木醇;(6R,7aR)-地芰普内酯
中图分类号:R284.1 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2016)15 - 2621 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.15.007
Non-alkoloids components from Phellodendri Cortex
LI Yan-ping1, 2, 3, LI Dan-dan1, 2, 3, DING Li-qin2, 3, QIU Feng1, 3
1. School of Chinese Materia Medica, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China
2. Institute of Traditional Chinese Medicine, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China
3. Tianjin State Key Laboratory of Modern Chinese Medicine, Tianjin 300193, China
Abstract: Objective To study the non-alkaloids from the 70% ethanolic extracts of Phellodendri Cortex. Methods A variety of 732
cation exchange resin chromatography, D101 macroporous adsorbent resin chromatography, silica gel chromatography, ODS column
chromatography, Sephadex LH-20 chromatography, and preparative HPLC methods were used for the separation and purification of
chemical composition. Their structures were established on the basis of physicochemical properties and spectral analysis. Results
Fourteen compounds were identified as (−)-3-O-feruloylquinic acid methyl ester (1), (−)-4-O-feruloylquinic acid methyl ester (2),
(−)-chlorogenic acid methyl ester (3), (−)-5-O-feruloylquinic acid methyl ester (4), salidroside (5), methyl ferulate (6), caffeic acid
methyl ester (7), p-hydroxylbenzyl ethanol (8), 3,4,5-trimetoxyphenol-O-β-D-glucopy ranoside (9), 2-methoxy-4- (2-propenyl) phenyl
β-D-glucopyranoside (10), tachinoside (11), methyl syringate (12), (6S)-dehydrovomifoliol (13), and (6R,7aR)- epiloliolide (14).
Conclusion Compounds 9—14 are isolated from the plants in this genus for the first time.
Key words: Phellodendri Cortex; non-alkoloids; 3,4,5-trimetoxyphenol-O-β-D-glucopy ranoside; methyl syringate; (6S)-dehydrovomifoliol;
(6R,7aR)-epiloliolide
黄柏 Phellodendri Cortex为芸香科(Rutaceae)
植物黄皮树 Phellodendron chinense Schneid. 的干
燥树皮,习称“川黄柏”,是临床常用中药。黄柏味
苦,性寒,归肾、膀胱经,具有清热燥湿、泻火除
蒸、解毒疗疮的功效,用于治疗湿热泻痢、黄疸尿
赤、带下阴痒、热淋涩痛、脚气痿躄、骨蒸劳热、
盗汗、遗精、疮疡肿毒、湿疹湿疮[1]。黄柏的化学
成分报道最早见于日本学者村山义温等对日本产黄
收稿日期:2016-04-17
基金项目:国家自然科学基金重点项目(81430095)
作者简介:李艳萍(1989—),女,在读硕士,研究方向为天然药物活性成分。E-mail: anney575@163.com
*通信作者 邱 峰(1967—),男,博士生导师,教授,研究方向为中药及天然药物药效物质。E-mail: fengqiu20070118@163.com
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檗 Phellodendron amurense Rupr. 的研究,从中分离
得到小檗碱(berberine)及少量巴马汀(palmatine),
此后各国学者陆续报道了其他的化学成分[2]。至今,
对黄柏的化学成分和药理作用的研究大部分集中在
生物碱部分,对非生物碱部分的研究相对较少,因
此,为了深入研究黄柏药理活性的物质基础,本课
题对黄柏 70%乙醇提取物经阳离子交换树脂处理后
得到的非生物碱部分进行较深入的化学成分研究,
从中分离得到 14 个化合物,分别鉴定为 (−)-3-O-
阿魏酰奎宁酸甲酯 [(−)-3-O-feruloylquinic acid
methyl ester, 1]、 (−)-4-O-阿魏酰奎宁酸甲酯
[(−)-4-O-feruloylquinic acid methyl ester,2]、(−)-绿
原酸甲酯 [(−)-chlorogenic acid methyl ester,3]、
(−)-5-O-阿魏酰奎宁酸甲酯 [(−)-5-O-feruloylquinic
acid methyl ester,4]、毛柳苷(salidroside,5)、阿
魏酸甲酯(methyl ferulate,6)、咖啡酸甲酯(caffeic
acid methyl ester,7)、4-羟基苯乙醇(p-hydroxyl-
benzyl ethanol,8)、3,4,5-三甲氧基苯酚-O-β-D-葡萄
糖苷(3,4,5-trimetoxy phenol-O-β-D-glucopyranoside,
9)、2-methoxy-4-(2-propenyl) phenyl-β-D-glucopyra-
noside(10)、tachinoside(11)、丁香酸甲酯(methyl
syringate,12)、(6S)-去氢催吐萝芙木 [(6S)-dehydro
vomifoliol,13]、(6R,7aR)-地芰普内酯 [(6R,7aR)-
epiloliolide,14]。其中化合物 9~14 均为首次从该
属植物中分离得到。
1 仪器与材料
Waters-e2695高效液相色谱仪;Waters-2535制
备液相色谱仪;岛津 LC-6AD型制备液相色谱仪;
Bruker PLUS 400 MHz 核磁共振波谱仪;Waters
Xevo G2 Q-TOF MS质谱仪;AUTOPOL V旋光仪;
柱层层析硅胶 100~200、200~300目(青岛鼎康硅
胶有限公司);ODS-A-HG 12 nm S-50 μm(日本
YMC公司);Sephadex LH-20(Pharmacia,瑞典);
D101大孔吸附树脂(天津波鸿树脂科技有限公司);
732 型强酸性阳离子交换树脂(天津市申泰化学试
剂有限公司);所用试剂均为分析纯或者色谱纯(天
津康科德试剂公司)。
黄柏药材经天津中医药大学张丽娟教授鉴定为
黄皮树 Phellodendron chinense Schneid. 的干燥树
皮,现保存于天津中医药大学中药学院。
2 提取与分离
黄柏干燥树皮 9.0 kg,70%乙醇-水 10倍量回流
提取 3次,每次 2 h,合并提取液,48 ℃条件下减
压回收溶剂,浓缩后得到总浸膏,用水(5 L)分散,
4%稀硫酸调 pH 值为 4~5 后,经 732 型阳离子交
换树脂富集生物碱,得到非生物碱 435 g(经 TLC
检测,碘化铋钾反应呈阴性)。
非生物碱经 D101大孔吸附树脂以乙醇-水(0∶
100→95∶5)梯度初步洗脱,得到 5个粗流分(Fr.
1~5)。因各流分间存在部分交叉,故将 Fr. 2(100
g)再次经 D101 大孔吸附树脂以乙醇-水(10∶90→
95∶5)梯度洗脱,得到 3个流分(Fr. 2-1~2-3);
将 Fr. 3(50 g)再次经 D101大孔吸附树脂以乙醇-
水(10∶90→95∶5)梯度洗脱,得到 8个流分(Fr.
3-1~3-8)。
Fr. 2-1(28 g)经 ODS柱色谱洗脱,Sephadex
LH-20 凝胶柱色谱洗脱以及制备 HPLC(甲醇-水
30∶70)得到化合物 1(12 mg)和 5(33.6 mg)。
Fr. 2-2(4 g)经 Sephadex LH-20凝胶柱洗脱以及制
备 HPLC(甲醇-水 35∶65)纯化得到化合物 2(20
mg)、3(154 mg)、4(135 mg)。
Fr. 3-1 经 ODS 柱色谱洗脱,Sephadex LH-20
凝胶柱色谱洗脱,得到化合物 7(13.4 mg)。Fr. 3-2
经 Sephadex LH-20柱色谱洗脱以及制备 HPLC(甲
醇-水 45∶55)纯化得到化合物 8(21.7 mg)和 9
(9.5 mg)。Fr. 3-4(145 mg)经 Sephadex LH-20柱
色谱洗脱以及制备 HPLC(甲醇-水 35∶65)纯化得
到化合物 10(38.4 mg)和 11(23.4 mg)。Fr. 3-5(130
mg)经 Sephadex LH-20柱色谱洗脱以及制备 HPLC
(甲醇-水 35∶65)得到化合物 12(41.4 mg)。Fr. 3-6
(180 mg)经硅胶柱色谱和 Sephadex LH-20柱色谱
反复纯化得到化合物 13(11.2 mg)和 14(14.9 mg)。
Fr. 3-7(2 g)经硅胶柱色谱,CH2Cl2-MeOH(100∶
0→0∶100)梯度洗脱和 Sephadex LH-20柱色谱洗
脱得到化合物 6(22.7 mg)。
3 结构鉴定
化 合 物 1: 白 色 粉 末 ( CH3OH); [α]
25
D
−28.16°(MeOH, c 0.12);HR-ESI-MS m/z: 381.121 4
[M-H]−(计算值 382.126 4),结合 1H-NMR 和
13C-NMR 数据确定分子式为 C18H22O9。1H-NMR
(400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.56 (1H, d, J = 15.6 Hz,
H-7), 7.29 (1H, d, J = 1.6 Hz, H-2), 7.10 (1H, dd, J =
8.0, 1.6 Hz, H-6), 6.78 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 6.45
(1H, d, J = 15.6 Hz, H-8), 5.17 (1H, m, H-3′), 4.00
(1H, m, H-4′), 3.82 (3H, s, 3-OCH3), 3.61 (1H, m,
H-5′), 3.59 (3H, s, -COOCH3), 2.05 (2H, m, H-6′),
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1.90 (2H, m, H-2′);13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)
δ: 174.2 (C=O), 166.1 (C-9), 149.1 (C-4), 148.0 (C-3),
144.5 (C-7), 125.7 (C-1), 123.0 (C-6), 115.5 (C-5, 8),
111.0 (C-2), 72.6 (C-1′), 70.3 (C-3′), 69.7 (C-4′), 67.8
(C-5′), 55.7 (3-OCH3), 51.5 (COOCH3), 38.1 (C-6′),
35.0 (C-2′)。以上数据与文献报道基本一致[3],故鉴
定化合物 1为 (−)-3-O-阿魏酰奎宁酸甲酯。
化合物 2:黄色油状物(CH3OH);[α]
25
D −49.4°
(MeOH, c 0.10);HR-ESI-MS m/z: 381.122 1 [M-H]−
(计算值 382.126 4),结合 1H-NMR和 13C-NMR数
据确定分子式为 C18H22O9。1H-NMR (400 MHz,
CD3OD) δ: 7.63 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-7), 7.13 (1H,
d, J = 1.9 Hz, H-2), 7.02 (1H, dd, J = 8.0, 1.9 Hz,
H-6), 6.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 6.38 (1H, d, J =
16.0 Hz, H-8), 4.75 (1H, dd, J = 3.0, 2.5 Hz, H-4′),
4.22 (1H, m, H-5′), 4.16 (1H, m, H-3′), 3.83 (3H, s,
3-OCH3), 3.68 (3H, s, -COOCH3), 2.16 (2H, m, H-2′),
1.93 (2H, m, H-6′);13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ:
175.8 (C=O), 169.0 (C-9), 150.8 (C-4), 149.5 (C-3),
147.1 (C-7), 128.0 (C-1), 124.2 (C-6), 116.6 (C-5),
115.9 (C-8), 111.9 (C-2), 78.7 (C-1′), 76.5 (C-4′), 69.1
(C-5′), 65.9 (C-3′), 56.6 (3-OCH3), 53.1 (COOCH3), 42.3
(C-6′), 38.6 (C-2′)。以上数据与文献报道基本一致[4],
故鉴定化合物 2为 (−)-4-O-阿魏酰奎宁酸甲酯。
化合物 3:绿色油状物( CH3OH; [α]
25
D
−108.1°(MeOH, c 0.08);HR-ESI-MS m/z: 367.105 7
[M-H]−(计算值 368.110 7),结合 1H-NMR 和
13C-NMR 数据确定分子式为 C17H20O9。1H-NMR
(400 MHz, CD3OD) δ: 7.52 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-7),
7.03 (1H, d, J =1.9 Hz, H-2), 6.94 (1H, dd, J = 8.0, 1.9
Hz, H-6), 6.78 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 6.21 (1H, d,
J = 16.0 Hz, H-8), 5.27 (1H, m, H-5′), 4.13 (1H, m,
H-3′), 3.73 (1H, m, H-4′), 3.69 (3H, s, -COOCH3),
2.18 (2H, m, H-6′), 1.99~2.19 (2H, m, H-2′);
13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 175.6 (C=O), 168.4
(C-9), 149.8 (C-4), 147.3 (C-7), 147.0 (C-3), 127.8
(C-1), 123.1 (C-6), 116.7 (C-5), 115.2 (C-2, 8), 76.0
(C-1′), 72.7 (C-4′), 72.2 (C-5′), 70.5 (C-3′), 53.1
(COOCH3), 38.2 (C-2′), 37.9 (C-6′)。以上数据与文献报
道基本一致[5],故鉴定化合物 3为 (−)-绿原酸甲酯。
化合物 4:黄色油状物(CH3OH); [α]
25
D
−30.6°(MeOH, c 0.10);HR-ESI-MS m/z: 381.121 8
[M-H]−(计算值 382.126 4),结合 1H-NMR 和
13C-NMR 数据确定分子式为 C18H22O9。1H-NMR
(400 MHz, CD3OD) δ: 7.51 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-7),
7.10 (1H, d, J = 1.6 Hz, H-2), 7.00 (1H, dd, J = 8.0,
1.6 Hz, H-6), 6.74 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 6.24 (1H,
d, J = 16.0 Hz, H-8), 5.21 (1H, m, H-5′), 4.01 (1H, m,
H-3′), 3.82 (3H, s, 3-OCH3), 3.66 (1H, m, H-4′), 3.62
(3H, s, -COOCH3), 2.13 (2H, m, H-2′), 2.02 (2H, m,
H-6′);13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 175.6 (C=O),
168.4 (C-9), 151.0 (C-4), 149.6 (C-3), 147.2 (C-7),
127.8 (C-1), 124.3 (C-6), 116.7 (C-5), 115.6 (C-8),
111.8 (C-2), 76.0 (C-1′), 72.8 (C-4′), 72.3 (C-3′), 70.5
(C-5′), 56.6 (3-OCH3), 53.1 (COOCH3), 38.2 (C-2′,
6′)。以上数据与文献报道基本一致[6],故鉴定化合
物 4为 (−)-5-O-阿魏酰奎宁酸甲酯。
化合物 5:黄色油状物(MeOH);HR-ESI-MS
m/z: 345.118 8 [M+COOH]−(计算值 300.120 9),
结合 1H-NMR 和 13C-NMR 数据确定分子式为
C14H20O7。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.17
(1H, s, -OH), 7.03 (2H, d, J = 8.6 Hz, H-10, 14), 6.65
(2H, d, J = 8.6 Hz, H-11, 13), 4.96 (1H, d, J = 5.1 Hz,
-OH), 4.92 (1H, d, J = 5.1 Hz, -OH), 4.88 (1H, d, J =
5.1 Hz, -OH), 4.48 (1H, t, J = 5.8 Hz, -OH), 4.15 (1H,
d, J = 7.9 Hz, H-1), 3.86 (1H, dt, J = 9.0, 7.0 Hz,
H-7a), 3.65 (1H, ddd, J =11.7, 6.1, 1.8 Hz, H-6a), 3.55
(1H, dt, J = 9.1, 6.7 Hz, H-7b), 3.42 (1H, dt, J = 11.7,
5.9 Hz, H-6b), 3.10 (1H, m, H-3), 3.06 (1H, m, H-5),
3.03 (1H, m, H-4), 2.94 (1H, m, H-2), 2.73 (2H, m,
H-8); 13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 155.6
(C-12), 129.7 (C-10, 14), 128.6 (C-9), 115.0 (C-11,
13), 102.8 (C-1), 76.9 (C-5), 76.8 (C-3), 73.4 (C-2),
70.1 (C-4), 69.9 (C-7), 61.1 (C-6), 34.8 (C-8)。以上数据
与文献报道基本一致[7],故鉴定化合物 5为毛柳苷。
化合物 6:白色粉末(MeOH);HR-ESI-MS m/z:
207.065 7 [M-H]−(计算值 208.073 6),结合
1H-NMR和 13C-NMR数据确定分子式为 C11H12O4。
1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.61 (1H, d, J = 15.9
Hz, H-1′), 7.18 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2), 7.06 (1H, dd,
J = 8.1, 2.0 Hz, H-6), 6.80 (1H, d, J = 8.1 Hz, H-5),
6.35 (1H, d, J = 15.9 Hz, H-2′), 3.89 (3H, s, 3-OCH3),
3.76 (3H, s, 3′-OCH3);13C-NMR (100 MHz, CD3OD)
δ: 169.9 (C-3′), 150.8 (C-4), 149.5 (C-3), 147.0 (C-1′),
127.8 (C-1), 124.2 (C-6), 116.6 (C-5), 115.3 (C-2′),
111.8 (C-2), 56.6 (3-OCH3), 52.1 (3′-OCH3)。以上数
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据与文献报道基本一致[8],故鉴定化合物 6 为阿魏
酸甲酯。
化合物 7:黄色粉末(MeOH);HR-ESI-MS m/z:
193.053 3 [M-H]−(计算值 194.057 9),结合
1H-NMR和 13C-NMR数据确定分子式为 C10H10O4。
1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.53 (1H, d, J = 15.9
Hz, H-7), 7.02 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2), 6.93 (1H, dd,
J = 8.1, 2.0 Hz, H-6), 6.77 (1H, d, J = 8.1 Hz, H-5),
6.24 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-8), 3.75 (3H, s, 3-OCH3);
13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 169.9 (C-9), 149.7
(C-4), 147.1 (C-3), 146.9 (C-7), 127.9 (C-1), 123.0
(C-6), 116.6 (C-5), 115.3 (C-8), 115.0 (C-2), 52.1
(3-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[9],故鉴
定化合物 7为咖啡酸甲酯。
化合物 8:黄色固体(MeOH);HR-ESI-MS m/z:
137.023 5 [M-H]−(计算值 138.068 1),结合
1H-NMR和 13C-NMR数据确定分子式为 C8H10O2。
1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.03 (2H, d, J = 8.2
Hz, H-2, 6), 6.70 (2H, d, J = 8.2 Hz, H-3, 5), 3.68 (2H,
t, J = 7.2 Hz, H-8), 2.71 (2H, t, J = 7.2 Hz, H-7);
13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 156.9 (C-4), 131.2
(C-1), 131.1 (C-2, 6), 116.3 (C-3, 5), 64.7 (C-8), 39.6
(C-7)。以上数据与文献报道基本一致[10],故鉴定化
合物 8为 4-羟基苯乙醇。
化合物 9:白色粉末(MeOH);HR-ESI-MS m/z:
391.124 7 [M+COOH]−(计算值 346.126 4),结合
1H-NMR和 13C-NMR数据确定分子式为 C15H22O9。
1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 6.38 (2H, s, H-2, 6),
4.77 (1H, d, J = 5.0 Hz, H-1′), 4.09 (2H, q, J = 5.3 Hz,
H-6′), 3.73 (6H, s, 3, 5-OCH3), 3.58 (3H, s, 4-OCH3),
3.42 (1H, m, H-2′), 3.26 (1H, m, H-5′), 3.20 (1H, m,
H-4′), 3.10 (1H, m, H-3′); 13C-NMR (100 MHz,
CD3OD) δ: 154.0 (C-1), 153.1 (C-3, 5), 132.4 (C-4),
101.0 (C-1′), 94.3 (C-2, 6), 77.3 (C-5′), 76.8 (C-3′),
73.2 (C-2′), 70.1 (C-4′), 60.9 (C-6′), 60.1 (4-OCH3),
55.7 (3, 5-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[11],
故鉴定化合物 9为 3,4,5-三甲氧基苯酚-O-β-D-葡萄
糖苷。
化合物 10:黄色油状物(MeOH);HR-ESI-MS
m/z: 371.133 9 [M+COOH]−(计算值 326.136 6),
结合 1H-NMR 和 13C-NMR 数据确定分子式为
C16H22O7。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.08 (1H,
d, J = 8.3 Hz, H-6), 6.83 (1H, s, H-3), 6.72 (1H, d, J =
8.3 Hz, H-5), 5.94 (1H, m, H-8), 5.05 (1H, d, J = 16.4
Hz, H-9′), 5.02 (1H, d, J = 16.4 Hz, H-9′), 4.84 (1H, d,
J = 7.6 Hz, H-1′), 3.86 (2H, q, J = 12.4, 2.0 Hz, H-6′),
3.85 (3H, s, H-10), 3.42 (1H, m, H-2′), 3.26 (1H, m,
H-5′), 3.20 (1H, m, H-4′), 3.10 (1H, m, H-3′);
13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 150.9 (C-2), 146.5
(C-1), 139.1 (C-8), 136.6 (C-4), 122.2 (C-5), 118.4
(C-6), 116.0 (2-OCH3), 114.3 (C-3), 103.2 (C-1′), 78.3
(C-3′), 78.0 (C-5′), 75.1 (C-2′), 71.5 (C-4′), 62.6
(C-6′), 56.8 (C-10), 40.9 (C-7)。以上数据与文献报道
基本一致[12],故鉴定化合物 10 为 2-methoxy-4-(2-
propenyl) phenyl-β-D-glucopyranoside。
化合物 11:无色油状物(MeOH);HR-ESI-MS
m/z: 347.097 5 [M+COOH]−(计算值 302.100 2),
结合 1H-NMR 和 13C-NMR 数据确定分子式为
C13H18O8。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 6.80 (1H,
d, J = 2.2 Hz, H-3), 6.69 (1H, d, J = 8.6 Hz, H-5), 6.58
(1H, dd, J = 8.6, 2.2 Hz, H-6), 4.74 (1H, d, J = 7.2 Hz,
H-1′), 3.90 (1H, d, J = 12.0 Hz, H-6′a), 3.85 (3H, s,
2-OCH3), 3.69 (1H, d, J = 5.1 Hz, H-6′b), 3.66 (1H,
m, H-3′), 3.43 (1H, m, H-5′), 3.38 (1H, m, H-2′), 3.35
(1H, m, H-4′);13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 153.0
(C-4), 149.4 (C-2), 143.1 (C-1), 116.1 (C-6), 110.2
(C-5), 104.0 (C-3), 103.9 (C-1′), 78.3 (C-3′), 78.2
(C-5′), 75.1 (C-2′), 71.7 (C-4′), 62.8 (C-6′), 56.5
(2-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[13],故鉴
定化合物 11为 tachinoside。
化合物 12:黄色粉末(MeOH);HR-ESI-MS m/z:
211.061 1 [M-H]−(计算值 212.068 5),结合
1H-NMR和 13C-NMR数据确定分子式为 C10H12O5。
1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.31 (2H, s), 4.84
(6H, s), 3.87 (3H, s);13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ:
168.8 (C-7), 149.1 (C-3, 5), 142.0 (C-4), 121.5 (C-1),
108.3 (C-2, 6), 56.9 (3, 5-OCH3), 52.6 (7-OCH3)。以
上数据与文献报道基本一致[14],故鉴定化合物 12
为丁香酸甲酯。
化合物 13:黄色油状物(MeOH);[α]25D +95.4°
(MeOH, c 0.08);HR-ESI-MS m/z: 223.139 8 [M+H]+
(计算值 222.125 6),结合 1H-NMR和 13C-NMR数
据确定分子式为 C13H18O3。1H-NMR (400 MHz,
CD3OD) δ: 7.01 (1H, d, J = 15.6 Hz, H-7), 6.44 (1H,
d, J = 15.6 Hz, H-8), 5.93 (1H, s, H-4), 2.62 (1H, d,
J = 16.8 Hz, H-2a), 2.31 (1H, d, J = 16.8 Hz, H-2b),
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 15期 2016年 8月
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2.31 (3H, s, H-10), 1.90 (3H, s, H-13), 1.06 (3H, s,
H-11), 1.02 (3H, s, H-12);13C-NMR (100 MHz,
CD3OD) δ: 200.8 (C-9), 200.5 (C-3), 164.8 (C-5),
148.5 (C-7), 131.9 (C-8), 128.2 (C-4), 80.1 (C-6), 50.7
(C-2), 42.8 (C-1), 27.8 (C-10), 24.9 (C-12), 23.7 (C-11),
19.3 (C-13)。以上数据与文献报道基本一致[15-16],故
鉴定化合物 13 为去氢催吐萝芙木醇。结构中 6 位
为手性碳,CD谱中(图 1),在 264 nm处显示正的
Cotton效应 (Δε +38.4),结合文献报道[17],化合物
(+)-去氢催吐萝芙木醇在 261 nm 处有正的 Cotton
效应 (Δε +34.5),确定其构型为 S,故最终确定化
合物 13为 (6S)-去氢催吐萝芙木醇。其结构见图 2。
图 1 化合物 13的 CD图谱
Fig. 1 CD spectrum of compound 13
图 2 化合物 13的结构式
Fig. 2 Structure of compound 13
化合物 14:白色粉末(MeOH); [α] 25D
−88.9°(MeOH, c 0.09);HR-ESI-MS m/z: 197.1179
[M+H]+(计算值 196.109 9),结合 1H-NMR 和
13C-NMR 数据确定分子式为 C11H16O3。1H-NMR
(400 MHz, CD3OD) δ: 5.75 (1H, s, H-3), 4.22 (1H, q,
J = 3.4 Hz, H-6), 2.42 (1H, dt, J = 13.7, 2.4 Hz, H-7a),
2.00 (1H, dt, J = 14.3, 2.5 Hz, H-5b), 1.76 (3H, s,
H-11), 1.75 (1H, dd, J = 13.7, 4.2 Hz, H-7b), 1.53
(1H, dd, J = 14.3, 3.8 Hz, H-5a), 1.46 (3H, s, H-9),
1.27 (3H, s, H-10);13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ:
185.9 (C-2), 174.6 (C-8), 113.5 (C-3), 89.1 (C-7a),
67.4 (C-6), 48.1 (C-5), 46.6 (C-7), 37.3 (C-4), 31.2
(C-10), 27.6 (C-11), 27.1 (C-9)。以上数据与文献报道
基本一致[18],故鉴定化合物 14 为地芰普内酯。结
构中 6 位和 7a 位为手性碳,CD 谱中(图 3),在
229 nm处显示负的 Cotton效应 (Δε −32.9),结合文
献报道[19],化合物 (6R,7aR)-地芰普内酯在 223 nm
处有负的 Cotton效应,确定其构型为 6R,7aR。故最
终确定化合物 14为 (6R,7aR)-地芰普内酯。其结构
见图 4。
图 3 化合物 14的 CD图谱
Fig. 3 CD spectrum of compound 14
图 4 化合物 14的结构式
Fig. 4 Structure of compound 14
4 讨论
采用各种柱色谱方法对黄柏乙醇提取物中的非
生物碱部分进行分离纯化,并根据化合物的理化性
质、波谱及光谱数据进行结构鉴定,共鉴定得到 14
个化合物,其中,3,4,5-三甲氧基苯酚-O-β-D-葡萄
糖苷(9)、2-methoxy-4-(2-propenyl) phenyl-β-D-
glucopyranoside(10)、tachinoside(11)、丁香酸甲
酯(12)、(6S)-去氢催吐萝芙木醇(13)、(6R,7aR)-
地芰普内酯(14)为首次从该属植物中分离得到,
丰富了黄柏化学组分信息库,并为黄柏的药效研究
提供更多的物质基础。
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180 200 300 400
λ/nm
50
40
20
0
−20
−40
−50
C
D
值
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