全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 3 期 2012 年 3 月 ·507·
HPLC 法测定风痛炎颗粒中黄芩苷
贾淑杰 1，王 露 2，王文彤 1
1. 天津市医药科学研究所，天津 300020
2. 天津海河医院，天津 300350
摘 要：目的 建立 HPLC 法测定风痛炎颗粒中黄芩苷的方法。方法 采用 RP-HPLC 法测定黄芩苷的量；色谱柱为 C18柱
（250 mm×4.6 mm，10 μm），流动相为甲醇-水-冰醋酸（50∶50∶1），体积流量 1.0 mL/min，检测波长 274 nm，柱温 40 ℃。
结果 黄芩苷在 100.60～2 012.00 μg/mL 线性关系良好，平均回收率为 100.25%，RSD 为 0.360%。结论 本方法简单、准
确，可用于风痛炎颗粒的质量控制。
关键词：RP-HPLC；黄芩苷；定量测定；风痛炎颗粒；质量控制
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)03 - 0507 - 02
Determination of baicalin in Fengtongyan Granule by HPLC
JIA Shu-jie1, WANG Lu2, WANG Wen-tong1
1. Tianjin Institute of Medical Pharmaceutical Science, Tianjin 300020, China
2. Tianjin Haihe Hospital, Tianjin 300350, China
Key words: RP-HPLC; baicalin; quantitative determination; Fengtongyan Granule; quality control

风痛炎颗粒由黄芩、独活、桂枝、木香等多种
中药组成，具有祛风散寒、利湿通络、解毒消肿等
作用[1]，用于治疗风湿性关节痛和风湿性关节炎等。
为了进行质量控制，根据本处方配伍并结合文献报
道[2-3]，本实验摸索出 RP-HPLC 法的实验条件，对
方法学进行了考察，同时对制剂中的黄芩苷进行定
量测定，本方法操作简便、结果准确、灵敏度高、
专属性强，为控制风痛炎颗粒质量和临床用药的有
效性提供实验依据。
1 仪器与材料
LC—10ATVP、LC—2010AHT 高效液相色谱仪
（日本岛津），AE—240 型电子天平（上海梅特勒公
司），KQ—250B 型超声处理器（昆山市超声仪器有
限公司）。黄芩苷（批号 110715-200815，质量分数
95.2%，中国药品生物制品检定所）；甲醇（色谱纯，
天津市康科德科技有限公司）、冰醋酸（分析纯，天
津市化学试剂一厂）；水为去离子水。风痛炎颗粒（批
号 20090313、20090419、20090506，天津中西医结
合津华风湿类疾病医院医院提供）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
依利特 C18 色谱柱（250 mm×4.6 mm，10 μm），
甲醇-水-冰醋酸（50∶50∶1）为流动相，检测波长
274 nm，柱温 40 ℃，体积流量 1.0 mL/min，进样
量 10 µL，理论塔板数不低于 5 000；在上述条件下
风痛炎颗粒中黄芩苷与其他组分达到基线分离，与
相邻杂质蜂分离度大于 2.5。在本色谱条件下，对照
品、供试品、阴性样品色谱图见图 1。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 取减压干燥至恒定质量
的黄芩苷对照品适量，精密称定，加 50%乙醇制成
含黄芩苷 100.60 μg/mL 的溶液，即得。
2.2.2 供试品溶液的制备 取风痛炎颗粒，研细，
取约 1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 50%
乙醇溶液 50 mL，密塞，称定质量，超声处理 30 min，
放冷，再称定质量，用 50%乙醇补足减失的质量，
摇匀，滤过，取续滤液，过 0.45 µm 滤膜，即得。
2.2.3 阴性样品溶液的制备 按处方称取除黄芩外

收稿日期：2011-07-05
作者简介：贾淑杰（1964—），女，天津市人，副主任技师，长期从事药物成分研究及制剂质量标准制定。
Tel: 15522032883 E-mail: 64641001@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 3 期 2012 年 3 月 ·508·



*黄芩苷
*baicalin
图 1 黄芩苷对照品 (A)、风痛炎颗粒样品 (B) 和阴性样品 (C) 的 HPLC 图
Fig. 1 HPLC chromatograms of baicalin reference substance (A), Fengtongyan Granule (B), and negative sample (C)

各味药材，按“2.3”方法制得阴性样品溶液。
2.3 线性关系考察
分别量取黄芩苷对照品溶液 1、5、10、15、20
μL，注入液相色谱仪，按“2.1”项色谱条件进样测
定，测定峰面积，以黄芩苷进样量（μg）为横坐标
（X），峰面积值为纵坐标（Y）进行线性回归，得回
归方程 Y＝3 387.7 X－83 401（R＝0.999 2），表明
黄芩苷在 100.60～2 012.00 μg/mL 线性关系良好。
2.4 方法学考察
2.4.1 精密度试验 取供试品溶液，按照“2.1”项
色谱条件连续进样 6 次，每次 10 μL，测定黄芩苷
峰面积，计算得其峰面积的 RSD 为 0.3%。
2.4.2 稳定性试验 取同一批号（20090313）样品，
按“2.3”项供试品溶液制备操作，分别在 0、2、4、
6、8、10、12 h 进样，测得峰面积值的 RSD 为 0.37%，
结果表明供试品溶液在 12 h 内稳定。
2.4.3 重现性试验 取同一批号（20090313）样品，
按照“2.3”项操作，共 6 份，按“2.1”项色谱条件
分析测定，结果黄芩苷质量分数的 RSD 为 1.39%。
2.4.4 加样回收率试验 取同一批号（20090313）
样品研细，共 6 份，按“2.3”项供试品溶液制备操
作，分别精密加入黄芩苷对照品的稀释溶液（10.06
μg/mL）25 mL，按“2.1”项色谱条件分析，计算
回收率，结果平均回收率为100.25%，RSD为0.36%。
2.5 样品测定
取 3 个批号（20090313、20090419、20090506）
的样品，按照“2.3”项供试品溶液制备操作，按“2.1”
项色谱条件测定，结果样品中黄芩苷的质量分数分
别为 4.131 9、4.282 4、4.285 4 mg/g（n＝4）。
3 讨论
3.1 提取方式的确定
同一批号（20090313）样品，超声处理与加热
回流处理，提取时间均为 30 min，测定样品中黄芩
苷的量，结果显示，两种方法提取测得结果基本一
致，故采用相对简便的超声提取方法。
3.2 提取溶剂的确定
同一批号（20090313）样品，分别采用 95%、
70%、50%乙醇为提取溶剂，进行黄芩苷的测定分
析，结果 70%、50%乙醇为提取溶剂黄芩苷测定量
较高，考虑节约溶剂，采用 50%乙醇为提取溶剂。
3.3 提取时间的确定
比较了 30、45、60 min 提取时间定量测定结果，
表明提取 30、45、60 min 测得样品中黄芩苷的量不
随时间延长而有所增加，故提取时间为 30 min。
3.4 提取溶剂量的确定
同一批号（20090313）样品，分别精密加入 50%
乙醇 25、50、100 mL 进行提取，测定样品中黄芩
苷的量。结果显示提取溶剂量为 50 mL 时样品中黄
芩苷的量较高，故确定提取溶剂量为 50 mL。
3.5 不同色谱柱的考察
采用了不同批号的 C18 色谱柱对样品定量测定
的影响，结果测得黄芩苷的量基本一致，说明该样
品分离时选择 C18 柱是可行的。
3.6 流动相的确定
采用了甲醇-水-磷酸与甲醇-水-冰醋酸两种流
动相分离，结果显示甲醇-水-冰醋酸分离效果更好。
3.7 仪器对定量测定的影响
分别采用 LC—2010AHT 及 LC—10ATVP 高效
液相色谱仪，结果测得黄芩苷的量基本一致。
参考文献
[1] 中国药典 [S]. 一部. 2010.
[2] 赵兰芬, 符清海, 冯进仪. 不同剂型清开灵中黄芩苷含
量测定方法的改进 [J]. 广东药学院学报, 2009, 25(5):
479-482.
[3] 王惠娟 , 王 力 , 刘艳新 . 牛黄解毒片中黄芩苷的
HPLC 法测定结果的不确定度评定研究 [J]. 中草药,
2011, 42(7): 1326-1329.

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