全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 10 期 2012 年 10 月

·1961·
HPLC 法测定复方酸枣仁软胶囊中阿魏酸和五味子甲素
殷之武，李娟阁
浙江尖峰药业有限公司，浙江 金华 321000
摘 要：目的 研究采用 HPLC 法测定复方酸枣仁软胶囊中阿魏酸和五味子甲素的方法。方法 阿魏酸定量测定的色谱条
件：色谱柱为迪马公司 C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-1%醋酸水溶液（35∶65），检测波长为 320 nm，
体积流量为 1 mL/min，柱温为室温，进样量为 10 μL；理论塔板数按阿魏酸峰计不低于 3 000；五味子甲素定量的色谱条件：
色谱柱为迪马公司 C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-水（77∶33），检测波长为 254 nm，体积流量为 1 mL/min，
柱温为室温，进样量为 10 μL。结果 阿魏酸的线性范围 9.8～49.0 μg/mL（r＝0.999 6）；加样回收率试验 RSD 为 1.98%；五
味子甲素的线性范围 8.8～44.0 μg/mL（r＝0.999 9）；加样回收率试验 RSD 为 0.98%。结论 本方法准确、简便、可靠，可
作为复方酸枣仁软胶囊质量控制的方法。
关键词：复方酸枣仁软胶囊；阿魏酸；五味子甲素；HPLC；质量控制
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)10 - 1961 - 03
Determination of ferulic acid and deoxyschisandrin in Compound Ziziphi
Spinosae Semen Soft Capsule by HPLC
YIN Zhi-wu, LI Juan-ge
Zhejiang Jianfeng Pharmaceutical Co., Ltd., Jinhua 321000, China
Key words: Compound Ziziphi Spinosae Semen Soft Capsule; ferulic acid; deoxyschisandrin; HPLC; quality control

复方酸枣仁软胶囊是根据我国“金匮要略”中
的酸枣仁汤，“摄生秘剂”中的天王补心丹，《中国
药典》2005 年版一部“安神补心丸”等进行化裁组
合优选而成的中药新复方制剂。方中酸枣仁养肝、
宁心、安神、敛汗，为方中之君药[1-2]；黄芪补心气、
气旺则阴血自生；当归养心血、润燥，两药合用益
心气、养心血，共为复方中臣药；佐以柏子仁养心
安神、交通心肾；五味子益气敛阴、助气生阴，作
为复方中使药。五味药配合应用，具有解表除烦、
养心安神、镇静助眠、补肾滋阴、宁心定志等功效。
用于治疗心脾两虚、心肾不交、营血亏虚、精神不
安、失眠健忘、虚烦不眠、夜寝梦多等症。本方中
当归气香善走，是“血中气药”，当归主要有效成分
是阿魏酸；五味子补肾宁心，主要有效成分是五味
子甲素。为了保证本制剂的安全、有效、质量可控，
本实验采用 HPLC 法对当归中阿魏酸和五味子中五
味子甲素（去氧五味子素，deoxyschisandrin）进行
定量测定的方法学研究。
1 仪器与材料
美国 Waters 公司高效液相色谱仪、Waters 515
泵、2487 双波长紫外检测器；阿魏酸（中国药品生
物制品检定所，批号 20098298，质量分数 99.55%），
五味子甲素（中国药品生物制品检定所，批号
20091088，质量分数 99.64%），复方酸枣仁软胶囊
（批号 20090820、20090822、20090824，0.55 g/粒，
浙江尖峰药业有限公司中试室研制），甲醇为色谱
纯，水为双重蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
2.1.1 测定阿魏酸的色谱条件[3-4] 色谱柱为迪马公
司 C18 柱（200 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲
醇-1%醋酸水溶液（35∶65），检测波长 320 nm，体
积流量 1 mL/mim，柱温为室温，进样量 10 μL，理
论塔板数按阿魏酸峰计不得低于 3 000。

收稿日期：2012-02-02
作者简介：殷之武（1968—），工程师，主要从事新药研究开发。Tel: (0579)82303591 E-mail: jysssw@yahoo.com.cn
网络出版时间：2012-09-07 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/12.1108.R.20120907.1017.001.html
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 10 期 2012 年 10 月

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2.1.2 测定五味子甲素的色谱条件 色谱柱为迪马
公司 C18 柱（200 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为
甲醇-水（77∶33），检测波长为 254 nm，体积流量
1 mL/mim，柱温为室温，进样量 10 μL。
2.2 对照品溶液的制备
2.2.1 阿魏酸对照品溶液的制备 取阿魏酸约 5
mg，精密称定，置 50 mL 量瓶中，加甲醇溶解，并
稀释至刻度，摇匀，制成含阿魏酸 98.0 μg/mL 的对
照品溶液。
2.2.2 五味子甲素对照品溶液的制备 取五味子甲
素约 5 mg，精密称定，置 50 mL 量瓶中，用甲醇溶
解并稀释至刻度，摇匀，制成含五味子甲素 88.0
μg/mL 的对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
2.3.1 阿魏酸供试品溶液的制备 取装量差异项下
的本品内容物，混匀，取约 1 g，精密称定，置 50 mL
量瓶中，加流动相适量，使充分溶解，用流动相稀
释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液待用，即得供试
品溶液。
2.3.2 五味子甲素供试品溶液的制备 取装量差异
项下的本品内容物，混匀，取约 0.55 g，精密称定，
置 50 mL 量瓶中，加流动相适量，使充分溶解，用
流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液待用，
即得供试品溶液。
2.4 阴性对照溶液的制备
按处方比例分别制备不含当归和五味子的阴性
对照样品，照供试品溶液的制备方法，分别制得阴
性对照溶液。
2.5 系统适应性试验
2.5.1 阿魏酸定量测定方法的系统适应性试验[5]
精密量取阿魏酸对照品溶液、供试品溶液、阴性对
照溶液各 10 μL，分别注入液相色谱仪中，从色谱
图可见，对照品溶液与供试品溶液色谱图在相应位
置上有保留时间相同的色谱峰，而阴性对照溶液（缺
当归）在相应位置上无吸收峰（图 1），复方酸枣仁
软胶囊中的其他成分对阿魏酸的测定无干扰，以阿
魏酸峰计算理论塔板数不少于 3 000。
2.5.2 五味子甲素定量测定方法的系统适应性试验[6]
精密量取五味子甲素对照品溶液、供试品溶液、阴
性对照溶液各 10 μL，分别注入液相色谱仪中，从
色谱图可见，对照品溶液与供试品溶液色谱图在相
应位置上有保留时间相同的色谱峰，而缺五味子阴
性对照溶液相应位置上无吸收峰（图 2），复方酸枣
仁软胶囊中的其他成分对五味子甲素的测定无干扰，




*阿魏酸
*ferulic acid

图 1 阿魏酸对照品 (A)、供试品 (B) 和阴性对照 (C) 的 HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of ferulic acid reference substance (A), sample (B), and negative control (C)




*五味子甲素
*deoxyschisandrin

图 2 五味子甲素对照品 (A)、供试品 (B) 和阴性对照 (C) 的 HPLC 色谱图
Fig. 2 HPLC chromatograms of deoxyschisandrin reference substance (A), sample (B), and negative control (C)
0 3 6 9 12 15 0 3 6 9 12 15 0 3 6 9 12 15
t / min
*
*
A B C
*
*
A B C
0 10 20 30 40 50 60 0 10 20 30 40 50 60 0 10 20 30 40 50 60
t / min
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以五味子甲素峰计算，理论塔板数不低于 3 000。
2.6 线性关系考察
2.6.1 阿魏酸 分别精密量取阿魏酸对照品溶液
1、2、3、4、5 mL，置 10 mL 量瓶中，用流动相稀
释至刻度，摇匀得 9.8、19.6、29.4、39.2、49.0 μg/mL
系列对照品溶液。分别精密吸取 10 μL，连续进样 2
次，测定峰面积，计算平均值，以峰面积为纵坐标
（Y）、质量浓度为横坐标（X），进行线性回归，得
回归方程 Y＝12 227.4 X＋12.486 9，r＝0.999 6，表
明阿魏酸在 9.8～49.0 μg/mL 线性关系良好。
2.6.2 五味子甲素 分别精密量取五味子甲素对照
品溶液 1、2、3、4、5 mL，置 10 mL 量瓶中，用
甲醇配制成 8.8、17.6、24.4、35.2、44.0 μg/mL 的
系列对照品溶液，分别注入液相色谱仪中，各进样
2 次，每次 10 μL，测定峰面积，计算平均值。以峰
面积为纵坐标（Y），质量浓度为横坐标（X），进行
线性回归，得回归方程 Y＝8 551.4 X＋2.941 8，r＝
0.999 9，表明五味子甲素在 8.8～44.0 μg/mL 线性关
系良好。
2.7 精密度试验
2.7.1 阿魏酸 精密量取19.6 μg/mL阿魏酸对照品
溶液，按色谱条件连续进样 5 次，每次 10 μL，测
定峰面积，计算得其 RSD 为 0.99%。
2.7.2 五味子甲素 精密量取17.6 μg/mL五味子甲
素对照品溶液，按色谱条件连续进样 5 次，每次 10
μL，计算得其 RSD 为 0.49%。
2.8 稳定性试验
取批号为 20090820 的样品，制备供试品溶液，
分别在 0、1、2、4、8、12 h 进样 10 μL，测定阿魏
酸、五味子甲素的色谱峰面积，计算阿魏酸峰面积
的 RSD 为 2.1%，五味子甲素的 RSD 为 0.49%，表
明供试品溶液在 12 h 内稳定。
2.9 重复性试验
取批号为20090820样品，制备5份供试品溶液，
分别测定阿魏酸、五味子甲素的峰面积，计算阿魏
酸和五味子甲素质量分数，阿魏酸的 RSD 为 1.2%，
五味子甲素的 RSD 为 1.5%。
2.10 加样回收率试验
2.10.1 阿魏酸 称取批号为 20090820 样品 6 份，
精密称定，每份 0.5 g，分别置 10 mL 量瓶中，分别
精密加入 19.6 μg/mL 阿魏酸对照品溶液 0.10、0.10、
0.15、0.15、0.20、0.20 mL，用流动相稀释至刻度，
按“2.3.1”项下方法制备供试品溶液，各精密吸取
10 μL，注入液相色谱仪中，按测定方法色谱条件测
定，计算回收率，结果阿魏酸的平均回收率为
100.48%，RSD 为 1.98%。
2.10.2 五味子甲素 称取批号为 20090802 样品 6
份，精密称定，每份 0.25 g，分别置 10 mL 量瓶中，
分别精密加入 17.6 μg/mL 五味子甲素对照品溶液
1.0、1.0、3.0、3.0、5.0、5.0 mL，用甲醇稀释至刻
度，按“2.3.2”项下方法制备供试品液，各精密吸
取 10 μL 和对照品溶液（22.0 μg/mL）10 μL，注入
液相色谱仪，按色谱条件测定，计算回收率，五味
子甲素的平均回收率为 100.52%，RSD 为 0.98%。
2.11 样品测定
2.11.1 阿魏酸的测定 取批号 20090820、20090822、
20090824 的 3 批样品制备供试品溶液，依法测定，
用外标法计算阿魏酸的质量分数分别为0.026、0.025、
0.025 mg/g（n＝2）。
2.11.2 五味子甲素的测定 取批号 20090820、
20090822、20090824 的 3 批样品按测五味子甲素方
法制备供试品溶液，依法测定，以外标一点法计算
五味子甲素的质量分数分别为 1.35、1.34、1.42 mg/g
（n＝2）。
3 讨论
为控制复方酸枣仁软胶囊的质量，使其达到安
全、有效、质量可控；对本品中当归的有效成分阿
魏酸、五味子的有效成分五味子甲素的量进行了方
法学考察，对样品中的成分进行了定量测定，各项
测试结果良好，方法准确、简便、可靠，可作为控
制产品质量的方法。
参考文献
[1] 李 陆, 刘桂友, 刘婧姝, 等. 基于均匀设计法对酸枣
仁镇静催眠有效组分的配伍研究 [J]. 中草药, 2011,
42(7): 1374-1377.
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