全 文 ：柏子仁生品及霜品中总皂苷的含量测定
徐新刚１，闫雪生１，张　晶２
（１．山东省中医药研究院，山东 济南 ２５００１４；
２．山东中医药大学 中药学院，山东 济南 ２５００１４）
［摘要］　目的：测定柏子仁生品及霜品中总皂苷含量。方法：通过比较不同的显色体系，采用正交设计优选出显色条件，
建立了测定柏子仁总皂苷含量的分光光度法。结果：确定了香草醛冰醋酸硫酸显色体系，优选出显色的条件为８０％（φ）硫
酸，８５℃水浴加热１０ｍｉｎ。经测定柏子仁生品中总皂苷０１４２％；霜品中总皂苷０３１９％。结论：该方法稳定、简便、快速，适用
于柏子仁总皂苷的含量测定。柏子仁炮制制霜前后总皂苷几乎没有损失。
［关键词］　柏子仁；总皂苷；分光光度法；含量测定
［收稿日期］　２００８０９２２
［基金项目］　国家“十一五”科技支撑计划项目（２００６ＢＡＩ０９Ｂ０６０５）
［通信作者］　徐新刚，副研究员，主要从事中药制剂及中药炮制研
究工作。Ｔｅｌ：（０５３１）８２９４９８１３，Ｅｍａｉｌ：ｔｃｍｘｘｇ＠１２６．ｃｏｍ
　　柏子仁为柏科绿乔木植物侧柏 Ｐｌａｔｙｃｌａｄｕｓｏｒｉ
ｅｎｔａｌｉｓ（Ｌ．）Ｆｒａｎｃｏ的种仁，性平味甘，入心、肝、肾、
大肠经，具有宁心安神，敛汗生津，润肠通便之功
效［１］。柏子仁中主要有脂肪油及挥发油、皂苷等成
分，其中脂肪油含量达到 ４０％；还含谷甾醇，柏木
醇，红松

酯，二羟基半日花三烯酸等化合物［２４］。
柏子仁中皂苷类成分有改善睡眠的作用［５］。
目前，测定柏子仁总皂苷的测定方法未见报道，
本研究参考相关总皂苷测定的文献［６９］，采用分光
光度法，以齐墩果酸为对照品，建立了准确、稳定、简
便、快速，适用于柏子仁总皂苷的含量测定方法。
１　仪器与试药
ＵＶ２６５ＦＷ分光光度计（日本岛津）；柏子仁药
材由山东省中医药研究院生药室林慧彬研究员鉴定
为侧柏的种仁；齐墩果酸（中国药品生物制品检定
所提供，批号 ０７０９８０３）；试剂均为分析纯。
２　方法与结果
２．１　显色体系与测量波长的选择
２．１．１　对照品溶液制备　精密称取在１０５℃干燥至
恒重的齐墩果酸对照品２３８ｍｇ，置２５ｍＬ量瓶中，用
甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
２．１．２　供试品溶液制备　取柏子仁粉末１０ｇ，精
密称定，装入滤纸筒置索氏提取器中，加石油醚２００
ｍＬ，加热回流２５ｈ，弃去提取液，取出，药渣连同滤
纸筒挥干溶剂后，移入具塞锥形瓶中，加入７０％乙
醇溶液４０ｍＬ，超声提取３０ｍｉｎ，倾出提取液，再重
复提取２次，合并提取液，旋转蒸干；残渣加水 ２０
ｍＬ，转至分液漏斗中，加正丁醇１０ｍＬ进行提取，提
取３次，合并提取液，旋转蒸干；残渣以甲醇溶解，转
至１０ｍＬ量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，作为供
试品溶液。
２．１．３　测量体系与测量波长的选择　有文献报道
的以齐墩果酸为对照品进行分光光度法测定总皂苷
的显色体系主要有两种，即香草醛冰醋酸高氯
酸［７］，香草醛乙醇硫酸［８］。测定总皂苷常用的还
有香草醛冰醋酸硫酸体系［９］。经初步考察各体系
稳定性，以香草醛冰醋酸硫酸体系较适合测定。
香草醛冰醋酸硫酸体系：精密吸取齐墩果酸对照
品溶液１ｍＬ于具塞试管中，水浴挥干溶剂，加入新
配制质量浓度为５％的香兰素冰醋酸溶液２０ｍＬ
和７０％的硫酸溶液５ｍＬ，摇匀后于６５℃恒温水浴
加热２０ｍｉｎ，立即取出置冰水浴中冷却１５ｍｉｎ，取
出，放置至室温，以随行试剂为空白，比色测定吸光
度值，测定波长以５３８ｎｍ为宜。
２．２　正交试验优化测定条件
为确定测定柏子仁总皂苷的最佳测定条件，在
较短时间内用较少试验次数获得理想的测定效果，
采用正交设计法对影响显色反应的硫酸浓度、加热
时间、温度３个因素进行优化试验。因素和水平见
表１。按Ｌ９（３
４）条件安排试验。正交试验结果见表
２，方差分析见表３。
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表１　因素水平
水平
温度／℃
Ａ
ｔ／ｍｉｎ
Ｂ
硫酸浓度／％
Ｃ
１ ６５ １０ ６０
２ ７５ １５ ７０
３ ８５ ２０ ８０
表２　柏子仁总皂苷正交试验Ｌ９（３
４）
Ｎｏ Ａ Ｎｏ Ａ
１ ０５４４９ ６ ０４９１６
２ ０８５４７ ７ １０６３８
３ ０８３３０ ８ ０５７３６
４ ０８８９２ ９ １０６０５
５ ０９９９５
表３　方差分析及结果
方差
来源
离均差
平方和
ｆ 均方 Ｆ 显著性
Ａ ００３７６９ ２ ００１８８４ ２３１４ 　
Ｂ ０００２１６２ ２ ０００１０８１ ０１３２８ 　
Ｃ ０３４３２ ２ ０１７１６ ２１０７８３Ｐ＜００５
Ｄ ００１６２８ ２ ０００８１４２ 　 　
　　注：Ｆ００５（２，２）＝１９０，Ｆ００１（２，２）＝９９０。
从表３可以看出，有显著影响因素主要是硫酸
　　
浓度，且 Ｃ＞Ａ＞Ｂ，测定柏子仁总｀皂苷显色反应的
条件确定为 Ａ３Ｂ１Ｃ３。即反应温度８５℃，反应时间
１０ｍｉｎ，５０ｍＬ８０％Ｈ２ＳＯ４。
针对上述测定体系进行了稳定性试验。精密吸
取１ｍＬ对照品，显色，测吸光度，每隔２０ｍｉｎ测１
次，测定７次，ＲＳＤ１０１％。结果表明，齐墩果酸显
色后的吸光度值在１２０ｍｉｎ内基本稳定。
２．３　标准曲线的建立
精密称取齐墩果酸对照品２８２ｍｇ，以甲醇溶
解，定容至２５ｍＬ量瓶中，分别稀释浓度为０１１２８，
００８４６，００５６４，００２８２，００１１２８ｇ·Ｌ－１的溶液，
精密吸取１ｍＬ进行显色，测吸光度。以质量浓度
（ｇ·Ｌ－１）对吸光度进行线性回归，得回归方程 Ａ＝
００４２１４＋７９９７５Ｃ，ｒ＝０９９９２。结果表明，在
００１１２８～０１１２８ｇ·Ｌ－１与吸光度存在良好的线
性对应关系。
２．４　加样回收率试验
取同批次柏子仁粉末６份，每份０５０ｇ，精密
称定，精密加入齐墩果酸对照品溶液１ｍＬ（称取齐
墩果酸７１８ｍｇ，定容于１０ｍＬ量瓶中），照“供试品
溶液制备”项下的方法依法制备，精密吸取各供试
品溶液１ｍＬ，各置６支１０ｍＬ具塞试管中，按优选
出的显色体系进行显色，测定，见表４。
表４　柏子仁皂苷回收率
取样量／ｇ 总皂苷量／ｍｇ Ａ 测得量／ｍｇ 回收率／％ 平均值／％ ＲＳＤ／％
０５０４８ ０７１７３ ０２６８３ １４１４ ９７０３
０５０５６ ０７１８４ ０２６６８ １４０５ ９５６８
０５０３２ ０７１５０ ０２６５５ １３９６ ９４８５ ９６３３ １７
０５０２８ ０７１４５ ０２６４６ １３９１ ９４２９
０５０３６ ０７１５６ ０２６８９ １４１８ ９７７７
０５０４５ ０７１６９ ０２６９７ １４２３ ９８３３
　　注：加入量均为０７１８ｍｇ。
２．５　柏子仁生品及霜品中总皂苷的测定
分别测定３批柏子仁生品及霜品中总皂苷的含
量，见表５。
表５　柏子仁生品及霜品中总皂苷的含量（ｎ＝３）
组别 质量分数／ｍｇ·ｇ－１ ＲＳＤ／％
生品１ １４２１ ０４０
生品２ １３０７ ０７５
生品３ １５２５ ０６２
霜品１ ３１９０ ０４２
霜品２ ３０５２ ０５１
霜品３ ３２３４ ０６４
３　结果与讨论
本研究对柏子仁总皂苷和对照品齐墩果酸在３
种显色体系中最大吸光值时波长对应状况及稳定性
进行比较，选择了香草醛冰醋酸硫酸作为显色体
系，测量波长为５３８ｎｍ。通过正交试验对测定条件
进行优选，最后选用的测定条件是１０ｍＬ质量浓度
为５％的香草醛冰醋酸溶液和５０ｍＬ８０％硫酸溶
液为显色剂，８５℃恒温反应１０ｍｉｎ。对柏子仁生品
及霜品中总皂苷含量进行了测定，结果表明其于炮制
前后几乎没有变化。所建立的分光光度法方法稳定、
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简便、快速，适用于柏子仁总皂苷的含量测定。
［参考文献］
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