全 文 ：ＲＰＨＰＬＣ测定白屈菜中白屈菜红碱的含量
孙楠，于黎明
（大连市药品检验所，辽宁 大连 １１６０２１）
［摘要］ 目的：建立白屈菜药材的质量标准。方法：采用甲醇提取，高效液相色谱法测定，以乙腈１％三乙胺溶液（２５∶
７５）（三乙胺溶液用磷酸调节ＰＨ至３０）为流动相；检测波长２６８ｎｍ。结果：白屈菜红碱进样量在００５１６～０５１６０μｇ线性关
系良好，ｒ＝１０００，平均加样回收率（ｎ＝６）１０３０％，ＲＳＤ１２％。供试品溶液在８ｈ内稳定，用不同色谱柱分析耐用性好。结
论：所建立的分析方法简单、专属性强，结果可靠、准确。
［关键词］ 白屈菜药材；白屈菜红碱；含量测定；高效液相色谱
［收稿日期］ ２００９０５０５
［通信作者］ 于黎明，主任药师，主要从事中药质量标准研究，
Ｔｅｌ：（０４１１）８４２５５２９８，Ｅｍａｉｌ：ｙｕｌｉｍｉｎｇ＿００７＠１６３．ｃｏｍ
［作者简介］ 孙楠，药师，主要从事中药质量标准及有害物质研究，
Ｔｅｌ：（０４１１）８４２５５１３０，Ｅｍａｉｌ：ｓｎｓｙｐ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
白屈菜又名地黄连、牛金花、土黄连、八步紧、断
肠草等，为罂粟科植物白屈菜 ＣｈｅｌｉｄｏｎｉｕｍｍａｊｕｓＬ．
的干燥全草。白屈菜多为地方用药，曾收录于《中
国药典》［１］１９７７年版一部，仅收载性状项，目前地方
标准也多延用１９７７年版《中国药典》的内容，已达
不到有效评价其质量的目的，本实验对白屈菜药材
中白屈菜红碱的含量测定方法进行了研究，虽已有
文献报道［２］，但已有方法处理过程复杂，不宜作为
标准应用。本实验对处理方法进行了改进，建立了
简便易操作的检测方法。
１ 仪器与试药
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪（Ａｇｉｌｅｎｔ公司），微
量分析天平（ＳａｒｔｏｒｉｕｓＢＰ２１１Ｄ，ＳａｒｔｏｒｉｕｓＬＥ２４４Ｓ）。乙
腈（色谱纯，德国 Ｍｅｒｃｋ公司）、磷酸（色谱纯，天津
市科密欧化学试剂开发中心），水为超纯水，其他试
剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）。白
屈菜红碱对照品（批号１１１７１８２００５０１）中国药品生
物制品检定所提供，自行采集白屈菜药材 Ｃ．ｍａｊｕｓ
５批，安徽亳州购买１批，以上６批经大连市药品检
验所陈代贤主任药师鉴定，为Ｃ．ｍａｊｕｓ。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＡｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×
２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相乙腈１％三乙胺溶液（２５∶
７５）（三乙胺溶液用磷酸调节 ｐＨ至３０）；流速１０
ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长２６８ｎｍ；柱温３０℃，对照品及
供试品色谱图见图１。
１．白屈菜红碱。
图１ 白屈菜红碱对照品（Ａ）和供试品（Ｂ）ＨＰＬＣ图
２．２ 对照品溶液的制备 精密称取白屈菜红碱对
照品１０３２ｍｇ，置１００ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解并稀
释至刻度，制成对照品储备液。精密量取对照品储
备液５ｍＬ，分别置２５，１０ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解并
稀释至刻度，制成质量浓度分别为００２０６ｇ·Ｌ－１
和００５１６ｇ·Ｌ－１的对照品溶液，分别用于供试品
含量测定及线性关系考察。
２．３ 供试品溶液的制备 取本品细粉约０５ｇ，精密
称定，置 ２５ｍＬ量瓶中，加甲醇适量，超声处理 ３０
ｍｉｎ（功率２５０Ｗ，频率３３ｋＨｚ），放至室温，加甲醇
稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
２．４ 线性关系考察 选取００５１６ｇ·Ｌ－１对照品，
分别进样１，２，４，６，１０μＬ，注入液相色谱仪，测定峰
面积。以峰面积对进样量进行回归处理，得到回归
方程Ｙ＝６７６５８Ｘ－３２３４４，ｒ＝１０００。即白屈菜红
碱在００５１６～０５１６０μｇ线性关系良好。
２．５ 精密度试验 取００２０６ｇ·Ｌ－１对照品溶液，
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第３４卷第２２期
２００９年１１月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ ２２
Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２００９
按２１项下色谱条件连续进样６次，进样量１０μＬ，
测定白屈菜红碱的峰面积，ＲＳＤ（ｎ＝６）０３％，仪器
精密度良好。
２．６ 稳定性试验 取白屈菜药材（本溪 １号）适
量，按２３项下供试品溶液的制备方法试验，分别于
０，１，２，４，６，８ｈ，吸取供试品溶液１０μＬ，注入液相色
谱仪，测定白屈菜红碱色谱峰峰面积，结果表明样品
在８ｈ内基本稳定，ＲＳＤ（ｎ＝６）０３％。
２．７ 重复性试验 取白屈菜药材（本溪１号）６份，
按２３项下供试品溶液的制备方法，依照上述色谱
条件进行含量测定，白屈菜红碱的平均含量（ｎ＝６）
为００７５％，ＲＳＤ（ｎ＝６）１８％，结果表明本方法有
良好的重复性。
２．８ 回收率试验 称取同一已知含量样品６份，
每份 ０２５ｇ，分别精密加入白屈菜红碱储备液
（０１０３２ｇ·Ｌ－１）２ｍＬ，按２３项下供试品溶液的
制备方法，依照上述色谱条件测定，计算回收率，
结果见表１。
表１ 白屈菜红碱的加样回收率试验（ｎ＝６）
称样量
／ｇ
样品中量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
０２５４１ ０１９０６ ０４０１１ １０１９９
０２５１５ ０１８８６ ０３９７０ １００９４
０２５９８ ０１９４９
０２０６４
０４１０１ １０４２８
１０３００ １２
０２５８１ ０１９３６ ０４０７４ １０３５９
０２５７４ ０１９３１ ０４０６３ １０３３１
０２５８８ ０１９４１ ０４０８５ １０３８７
２．９ 样品的测定 按２３项下供试品溶液的制备
方法，分别对３个产地６批样品进行含量测定，结果
见表２。
表２ ６批白屈菜中白屈菜红碱质量分数
产地 批号 质量分数／％
本溪 ２００８０７０８ ００６９
本溪 ２００８０７０９ ００３０
本溪 ２００８０７１０ ００５６
朝阳 ２００８０７ ００５８
朝阳 ２００８０８ ００５７
亳州 － ００１６
３ 讨论
３．１ 提取方法考察 考察了同一供试品，分别以甲
醇、５０％甲醇和９０％乙醇提取，超声处理３０ｍｉｎ和
４０ｍｉｎ的条件下白屈菜红碱的含量，最终确定以甲
醇为溶剂，超声处理３０ｍｉｎ作为提取方法。
３．２ 流动相的选择 本实验曾采用乙腈０１％
（２５∶７５）作为流动相［３］，但色谱峰拖尾严重，改变流
动相比例仍未得到改善，所以改用乙腈１％三乙胺
溶液（２５∶７５）（三乙胺溶液用磷酸调节ｐＨ３０）为流
动相，拖尾现象得以改善，分离条件好。
３．３ 耐用性考察 分别采用３种不同品牌色谱柱
ＡｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；资生堂
ＣＡＰＣＥＬＬＰＡＫＣ１８ＭＧⅡ（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５
μｍ）；ＤＩＫＭＡＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５
μｍ），对同一供试品中白屈菜红碱的含量进行了考
察，３种色谱柱测定结果ＲＳＤ０８％。
［参考文献］
［１］ 中国药典．一部［Ｓ］．１９７７：１７６．
［２］ 左金梁，白璐，宋欣鑫，等．ＲＰＨＰＬＣ法同时测定白屈菜药材中
血根碱、小檗碱和白屈菜红碱的含量［Ｊ］．药物分析杂志，
２００８，２８（６）：９０３．
［３］ 安彩贤，杨广德，叶建涛，等．ＲＰＨＰＬＣ法同时测定小博落回中
血根碱和白屈菜红碱的含量［Ｊ］．中成药，２００１，２３（１１）：８２４．
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃｈｅｌｅｒｙｔｈｒｉｎｅｉｎＣｈｅｌｉｄｏｎｉｕｍｍａｊｕｓｂｙＲＰＨＰＬＣ
ＳＵＮＮａｎ，ＹＵＬｉｍｉｎｇ
（ＤａｌｉａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｄａｌｉａｎ１１６０２１，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｖｅｌｏｐａｎＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｃｈｅｌｅｒｙｔｈｒｉｎｅｉｎＣｈｅｌｉｄｏｎｉｕｍｍａｊｕｓ．
Ｍｅｔｈｏｄ：ＣｈｅｌｅｒｙｔｈｒｉｎｅｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｆｉｎｅｐｏｗｄｅｒｏｆｔｈｅｃｒａｄｅｗｉｔｈｄｒｕｇｍｅｔｈａｎｏｌａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＨＰＬＣ．Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅ
ｐｈａｓｅｗａｓａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ１％ ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（２５∶７５）（ａｄｊｕｓｔｅｄｐＨｔｏ３ｕｓｉｎｇｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄ）ａｎｄｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓｓｅｔａｔ２６８
ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｏｆｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｃｕｒｖｅｗａｓ００５１６０５１６０μｇ（ｒ＝１０００）．Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙ（ｎ＝６）ｗａｓ１０３０％
ｗｉｔｈＲＳＤｏｆ１２％．Ｃｈｅｌｅｒｙｔｈｒｉｎｅｉｎｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｏｌｕｔｉｏｎｗａｓｓｔａｂｌｅｉｎ８ｈａｎｄｔｈｅｒｕｇｇｅｄｎｅｓｓｗａｓｐｅｒｆｅｃｔａｍｏｎｇ３ｄｉｆｅｒｅｎｔｃｈｒｏｍａｔｏ
ｇｒａｐｈｉｃｃｏｌｕｍｎｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓａｃｃｕｒａｔｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｃｈｅｌｉｄｏｎｉｕｍｍａｊｕｓ；ｃｈｅｌｅｒｙｔｈｒｉｎｅ；ａｓｓａｙ；ＲＰＨＰＬＣ ［责任编辑 王亚君］
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第３４卷第２２期
２００９年１１月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ ２２
Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２００９