全 文 :补阳还五汤溶度峰及介电需量的研究
邹欢1,2,贺福元1,2,3,罗杰英1,2,黄胜1,2,邱云1,2,陈峰1,2
(1.湖南中医药大学 药学院,湖南 长沙 410208;
2.湖南中医药大学 现代中药制剂制备技术与评价实验室,湖南 长沙 410208;
3.中南大学 临床药理研究所,湖南 长沙 410078)
[摘要] 目的:测定补阳还五汤全方的溶度峰及介电需量,为中药复方提取溶媒的选择提供理论与实验依据。方法:分
别以溶度参数1411~4786,介电常数1~80的11种溶媒体系,在接近药材临界饱和溶媒体积V0,于25℃下浸提补阳还五汤
粗粉,按《中国药典》2005年版附录浸膏得率测定项下测定表观溶解度。结果:各溶媒体系浸渍药材所需的临界饱和体积V0,
分别为0210,0310,0490,0360,0770,0930,0860,0920,1080,1000,1140mL·g-1;各溶媒体系最大表观溶解度分别
为1140,1013,734,1094,2107,2950,5014,4370,3556,4231,2106g·L-1,从而得出补阳还五汤粗粉以甲醇水(68∶
32)浸渍时,其表观溶解度最大,出现溶度峰。对应的介电需量约为475。结论:中药及复方表观溶解度的大小决定于所提溶
媒的介电常数;并有稳定的介电需量与之对应。
[关键词] 补阳还五汤;溶度峰;介电需量;表观溶解度
[收稿日期] 20090209
[基金项目] 国家自然科学基金项目(30572378,30472199)
[通信作者] 贺福元,Tel:13787213681,Email:pharmasharking@
tom.com
[作者简介] 邹欢,硕士研究生,Tel:13517495950
药物的溶解特征决定于药物与溶剂的相互作
用,传统上按“相似相溶”原理进行判断。Hilde
brandScatchard建立了药物溶解分数与溶度参数定
量表达式[1],能定量描述药物在不同溶度参数溶剂
中的溶解特性。由于溶度参数的测定和应用没有介
电常数易被人广泛接受,习惯上仍多采用介电常数
来表达溶剂的极性大小和对药物的溶解能力影响,
这样以横坐标为溶剂的介电常数,纵坐标为溶解度
所得曲线图叫溶度峰曲线图,极值峰叫溶度峰,峰所
对应的介电常数值叫介电需量[1]。中药复方为多
成分体系,其表观溶解特征是诸成分性质作用的综
合表现,因此本研究对中药复方整体成分的溶解特
性进行研究,但由于诸成分的饱和溶解度不同,在某
一溶剂用量情况下,只能达到部分饱和,但由于诸成
分的饱和溶解度不同,在某一溶剂用量情况下,只能
达到部分饱和,故决定于部分饱和程度的溶剂用量
是接近中药材吸收该溶剂的临界饱和量。本研究基
于这一思路,通过测定补阳还五汤在不同极性溶媒
体系中临界饱和量的表观溶解度,研究其在临界饱
和溶剂的溶度峰与介电需量 。
补阳还五汤出自清代名医王清任的《医林改
错》[2],由生黄芪、当归尾、川芎、赤芍、桃仁、红花、
地龙组成。主治元气亏虚、气不能帅血行而见脉络
瘀阻之滞的中风后遗症。此方是目前治疗中风等血
栓性疾病应用频率最高的方剂[3]。关于此方的主
要有效部位及其药理作用本室已有详细的研究,但
对于此方成分的溶解特性研究较少。故以补阳还五
汤全方为复方模型,研究其在不同介电常数的溶媒
体系临界溶媒用量的溶解特性规律,一则能测定其
溶度峰与介电需量,同时又能为选择合适的提取溶
媒,进一步揭示其药剂学配伍提供理论与实验基础。
1 实验原理
1.1 溶剂的介电常数与溶质溶解度的关系
根据 HildebrandScatchard计算正规溶液的摩
尔分数溶解度的方程[1]:
-1nX2=
ΔHf
RT(
T0-T
T0
)+
V2φ1
2
RT(δ1-δ2)
2 (1)
其中X2为溶质的溶解摩尔分数溶解度,ΔHf为
固体的摩尔溶化热,T0为固体的熔点,T为实验温
度,R=8314J·(mol·K)-1,δ1,δ2分别为溶剂和
溶质的溶度参数,φ1为溶剂的体积分数。在稀溶液
中,体积分数φ1接近于1。
在一定条件下,ΔHf,T0,T,V2均为常数,故式
(1)可简化为:
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1nX2=b0-b1(δ1-δ2)
2
展开后可得
1nX2=b0+b1δ
2
2-2b1δ1δ2+b1δ1
2 (2)
其中b0=
ΔHf
RT(
T0-T
T0
)
b1=
V21
2
RT
从式 (2)可知,物质的溶解度和溶质、溶剂的溶
度参数有关,实验中溶质的溶度参数是固定不变的,
因此可将其看为常数,故溶剂的溶度参数与物质的
溶解度成二次曲线关系(即抛物线),具有最大的溶
解度。
Paruta,AN等研究[4]指出介电常数与溶度参
数之间存在式(3)的经验关系:
δ=022ε+75 (3)
从式(3)可得物质的介电常数与溶度参数之间
存在简单的线性关系,将其代入式(2),可得:
-lgX2=b0+00484b1ε
2
2-00968b1ε1ε2+00484b1ε
2
1
(4)
其中ε1为溶剂的介电常数,ε2为溶质的介电
常数。而溶质的介电常数是固定不变的,可得物质
的溶解度与溶剂的介电常数成二次曲线关系,曲线
表现为一开口向下的抛物线,从而得到溶解度峰,即
最大溶解度,如图1。
图1 溶解度与介电常数曲线关系
1.1.1 极性溶质在非极性或弱极性的溶剂中时,溶
解度随溶剂介电常数的增大而增大,因为此时溶质
的介电常数ε2>溶剂的介电常数 ε1,故式(4)中
00484b1ε
2
1可忽略不计,式(4)可变为:
-lgX2=b0+00484b1ε
2
2-00968b1ε1ε2 (5)
从而得出在这种情况下物质的溶解度与溶剂的
介电常数ε1成线性关系,此时溶剂的极性较小,介
电常数较小,溶质的溶解度小,反之亦然,因此在图
形上表现为只有抛物线的前半段,物质的溶解度随
介电常数的增大而增大,成正相关。
1.1.2 非极性溶质在极性溶剂中时,溶解度随溶剂
介电常数的增大而减小,此时溶剂的介电常数 ε1>
溶质的介电常数ε2,故式(4)中00484b1ε
2
1可忽略
不计,式(4)可变为:
-lgX2=b0+00484b1ε
2
1-00968b1ε1ε2 (6)
此时溶剂的极性较大,介电常数较大,而溶质的
溶解度较小,反之亦然,因此在图形上表现为只有抛
物线的后半段,物质的溶解度随介电常数的增大而
减小,成负相关。
1.1.3 溶质与溶剂的极性接近时,溶解度与溶剂介
电常数成以介电常数为对称轴开口向下的与横坐标
渐近的曲线 ,此时溶质的溶解度既随溶剂极性增加
而减小,又随非极性溶剂增加而减小,当溶质与溶剂
的介电常数相等时,溶质的溶解度出现极大值,得到
溶度峰。如式(4)所示。当只有1种成分时,理论
上只出现1个溶度峰,但由于溶质与溶剂有多种缔
合形式,会在总体基峰上出现溶度小峰;当有几类不
同极性的成分时,将会出现变化明显的多个溶度峰。
中药复方为多成分体系,理论上会出现多个溶度峰,
每个溶度峰相对应于中药复方中的一组有效成分群
的介电需量。
在某一固定的介电常数,溶解度峰值会因复合
溶剂组成不同而不同。这些溶解度峰值,可与溶质
的介电常数有关,也可能与溶质分子与复合溶剂分
子有最理想缔合有关。但最重要的是:在组成不同
的复合溶剂中,溶质的介电需量几乎不受溶剂(单
一或混合)的影响,即虽然同一溶质的溶解度峰值
大小不等,但相对应的介电常数基本相等[1]。根据
这一规律,可先获取中药复方成分的溶度峰图及介
电需量,然后根据介电需量组成不同复合溶剂测定
其溶解度峰值,最终可寻找到能获取最大的溶解效
果的中药复方提取溶剂及其配比。
1.2 复合溶剂的介电常数 复合溶剂的介电常数与
其组成溶剂的介电常数有关且介于组成溶剂的介电
常数之间。例如水性复合溶剂,无论何种配比其介
电常数均低于水的介电常数。复合溶剂的介电常数
是各组分介电常数(ε1,ε2)与其体积分数(φ1,φ2)
乘积之和为式(7)[1]
ε=ε1φ1+ε2φ2 (7)
所以只要已知纯溶剂的介电常数,任意配比复
合溶剂的介电常数均可计算,还可以用改变复合溶
剂中各组分的体积分数的方法来调节溶质的溶解
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度。但固体溶质的介电常数不易直接测定,一般是
通过实验从已知介电常数的一组复合溶剂或多种溶
剂推测。本实验将补阳还五汤全方药材粉碎后(固
体溶质)溶解在一组复合溶剂中,然后测定其在不
同极性溶煤体系中临界饱和量的表观溶解度,以溶
解度数据对相应介电常数作图,曲线上溶解度峰值
对应的复合溶剂的介电常数就是该补阳还五汤的介
电需量。
2 材料与方法
2.1 材料
FN1012型鼓风干燥箱,干燥器,OHAUS公司
电子天平,DKS22型电热恒温水浴锅,蒸馏水,其他
试剂均为分析纯。处方:黄芪120g,当归尾6g,川
芎3g,赤芍5g,桃仁3g,红花3g,地龙3g。黄芪
为豆科植物蒙古黄芪 AstragalusmembranaceusBge.
var.monghokicus(Bgo)Hsiao干燥根;当归为伞形
科植物当归Angelicasinensis(Oliv)Diels的干燥根;
川芎为伞形科植物川芎 LigusticumchuanxiongHort
的干燥根;赤芍为毛莨科植物芍药 Paeonialactlora
Pal的干燥根;桃仁为蔷薇科植物桃 Prunuspersica
(Linn)Batsch的干燥成熟种子;红花为菊科植物红
花CarthamustinctoriusL.的干燥花;地龙为环节动
物门钜蚓科动物参环毛蚓 Pheretimaaspergilum
(perier)的干燥主体。以上各药材均委托本院附属
第一医院药剂科定点采购,由本系中药鉴定教研室
鉴别。
2.2 溶剂的选择
从溶度参数1411~4786;介电常数1~80的
溶剂中选择单一或混合溶剂;从正己烷(ε=19)到
水(ε=785)分为 11组,介电常数间隔为 76。11
组溶剂是正己烷;正己烷正丁醇(50∶50);正丁醇;
乙醇;甲醇;甲醇水(83∶17);甲醇水(68∶32);甲
醇水(51∶49);甲醇水(34∶66);甲醇水(18∶82)和
水,各溶剂介电常数列于表1。
表1 曲线回归参数及各组表观溶解度
组别 溶媒体系组成 ε
S0
/g·L-1
系数
CS-KCS-KCuns Wuns+Wabs r P
1 正己烷 19 1140 -01135 1180 0970 0006
2 正己烷正丁醇(50∶50) 95 1013 007531 1579 0958 0010
3 正丁醇 171 734 -01375 1839 0909 0030
4 乙醇 247 1094 002126 1966 0997 0000
5 甲醇 326 2107 -7066 10830 0990 0010
6 甲醇水(83∶17) 399 2950 1549 13000 0936 0006
7 甲醇水(68∶32) 475 5014 -6245 24240 0995 0000
8 甲醇水(51∶49) 551 4370 -1202 20650 0999 0001
9 甲醇水(34∶66) 627 3556 -0367 19400 0984 0002
10 甲醇水(18∶82) 703 4231 -2254 22280 0994 0001
11 水 785 2106 4011 9716 0980 0003
2.3 溶解度的测定
将补阳还五汤全方药材粉碎,过40目筛,每种
溶剂所浸渍的药粉均称取(5±001)g,置50mL量
瓶中,加入不同量的溶剂后,于25℃浸渍48h,将浸
出液过滤后,置水浴上挥干溶剂,按2005年版《中国
药典》附录浸膏得率测定项下方法测定溶解物,计
算表观溶解度[5],见表1。
2.4 临界饱和溶媒体积V0的测定
取药粉W1,加大于 V0溶剂于25℃浸渍一定时
间至溶出平衡后,进行抽滤直至无滤液滴下,称取抽
滤后药材重 W2,按《中国药典》附录浸膏得率测定
项下进行表观溶解度,求得药材成分的转移率 a和
提取液的浓度CT,依式(8)计算出不同溶剂用量所
对应的临界饱和体积V0。
V0=
W2+W1a-W1
W1(ρ+CT)
(8)
式中W1为原药材重,W2为浸渍抽滤后药材重,
a为药材成分的转移率(g·g-1),CT为提取液的浓
度(g·mL-1),ρ为溶剂的比重。
2.5 最大表观溶解度S0的测定
由于在临界饱和体积 V0时,没有多余的提取液
进行成分含量测定,故只能先建立起近 V0的溶剂体
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积V与近饱和浓度S的关系,用V外推至V0处求得
药材最大饱和浓度 S0。中药提取时,当溶剂的用量
足够大,所有成分能溶出完全,这时成分的转移率最
大,而提取液的浓度最小;反之当溶剂的用量 V越
接近于V0,成分转移率越低,提取液的浓度越高,部
分成分达到饱和。当为V0时,可视为中药材的饱和
表观溶解度最大,提取液成分饱和程度最高。设总
成分浓度为S,由三方面因素决定,一是来源于饱和
成分,其饱和浓度为CS,该部分浓度不变,但提取量
随提取体积 V减少而减少,二是来源于不饱和成
分,其总量 Wuns不变,但浓度 Cuns随提取体积减少而
增加。三是来源于药材的吸附成分,其总量为Wabs,
吸附常数为 K,吸附量为 KV(Cs+Cuns),提取量为
Wabs-KV(Cs+Cuns),故有式(9)。
VS=VCs+VCuns+Wuns+Wabs-KV(Cs+Cuns)
亦S=Cs-KCs-KCuns+
Wuns+Wabs
V (9)
式中Cs,K,Wuns,Wabs为常数,当 V接近 V0时,
Cuns变化不大,也可以看成常数,故按式(9)用不同
的Si对1/Vi作图可得一直线,再用V0代入求得S0。
3 结果及数据处理
3.1 各组溶剂的V0
取补阳还五汤粗粉5g,按2.4项下测定并计算
V0,结果见表2。
3.2 近临界点饱和浓度S0的测定及曲线拟合分析
各溶剂组取5份补阳还五汤粗粉,每份5g,按
2.3操作测定不同 Vi所对应的 Si,按2.5项下以 Si
对1/Vi进行线性回归,得各溶剂组拟合曲线方程、
相关系数,并进行统计学显著性检验,相关结果见表
2。其中截距 b即为式(9)中的项 Cs-KCs-KCuns,
斜率为项Wuns+Wabs。
3.3 S0的计算
将各组 V0代入各组曲线方程,即得 V0时的溶
解度 S0,列于表2,将各组 S0与各组介电常数 ε作
图,即得溶解度峰曲线图,见图 2。从补阳还五汤
溶解度峰曲线图可以得出:当用第 7组溶酶体
系———甲醇水(68∶32)进行浸渍时,表观溶解度
达到最大,第7组溶煤体系的介电常数为475,即
补阳还五汤的介电需量为475。则补阳还五汤药
材在其他混合或单一溶剂也有该介电常数时具有
最大溶解度。这样,就可以根据补阳还五汤药材
的介电需量大小而配制对其最适宜的混合溶剂来
进行定位定量提取。
表2 各组溶剂V0及测定参数
组
别
a
/g·g-1
b
/g·mL-1
W1
/g
W2
/g
ρ
V0
/mL·g-1
1 00492 00246 4321840057 0660 0210
2 00466 00233 8433470034 0739 0310
3 00504 00294 9538570084 0810 0490
4 00915 00320 6050050060 0790 0360
5 00794 00397 7810750084 0792 0770
6 03080 01540 7878050025 0796 0930
7 03680 01840 7574850030 0842 0860
8 03480 01220 7810050080 0876 0920
9 03450 00967 8596450013 0885 1080
10 03610 00903 8292150030 0935 1000
11 03640 00909 9425350031 1000 1140
图2 补阳还五汤全方溶度峰曲线
4 讨论
研究依据中药整体成分的表观溶解度与所用溶
媒的介电常数之间的定量关系,从整体上研究中药
复方成分群的溶出规律,通过实验得出不同溶媒浸
提中药时,存在稳定的介电需量,即药物的最大溶解
度与介电常数有关但与所用溶剂的种类无关。根据
这一规律,笔者能够选择中药复方或成分群介电需
量所对应的溶剂来进行中药及有效成分群的提取,
结合影响工艺条件的主要因素进行试验设计,从而
得到最适宜的中药复方及成分群的提取条件。
物质溶解度与溶剂介电常数的 3种关系(见
11项下),对纯物质来说,一般最常见的是前2种
情况,由于实验上的困难,第3种峰型曲线的情况并
不总是能测定得到的。对于极性物质,与盐类一样,
溶解度随溶剂介电常数的增大而增大,极大值观测
不到是由于很少有如此高的介电常数的溶剂。而在
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非极性物质溶解时则出现相反情况,溶解度随溶剂
介电常数的增大而降低,只有溶剂介电常数很小时
才有可能出现极大点,而很少有如此小的介电常数
的溶剂。对于中药来说,其化学成分复杂,有极性成
分也有非极性成分,在一定的溶剂介电常数的区间
内会出现最大的溶解度,从而得到其溶度峰与介电
需量。
从补阳还五汤的溶度峰曲线可以看出,补阳还
五汤药材具有4个溶度峰,溶媒体系的介电常数分
别为1.90,32.6,47.5,70.3;相对应的溶解度分别
为1140,2107,5014,4231g·L-1。当溶媒体系
的介电常数为47.5时,其溶解度最大。其中溶媒体
系的介电常数为32.6对应的溶度峰不是很明显,为
1个很小的肩峰,推测原因可能是补阳还五汤中此
极性段的成分含量很低,表观溶解度较小,而在介电
常数为47.5的极性段的成分含量很高,溶度峰很
高,将其掩盖所导致。从实验结果可以得出补阳还
五汤全方的介电需量为47.5,还可以初步推测得出
补阳还五汤的几大有效成分群的介电需量,进而可
以根据各有效成分群的介电需量来选择适当的溶剂
对其进行定位提取。补阳还五汤主要含有总苷、总
苷元、总生物碱、总多糖这4类有效成分群,其极性
从小到大分别为总苷元、总生物碱、总苷、总多糖。
故可以初步推测补阳还五汤中总苷元、总生物碱、总
苷、总多糖这4类有效成分群的介电需量分别为1.
90,32.6,47.5,70.3。若要更具体地研究各类有效
成分群的溶解特性,还应测定各类有效成分群在溶
酶体系中的浸提含量,以此来确定其溶度峰及介电
需量。
补阳还五汤药材的最大表观溶解度只能通过测
定其在各溶剂的最大溶解浓度得到,而只有在溶剂
量能完全浸渍药粉且没有剩余的情况下,即用临界
饱和溶媒体积V0的溶剂浸渍药粉时,浸渍液浓度最
大,此时中药材的饱和表观溶解度最大,提取液成分
饱和程度最高。但是由于用小于该临界饱和溶媒体
积溶媒用量提取药材,溶媒完全被药材吸收,中药成
分不能提取;只能通过增加溶剂的体积,从而测定其
浸渍药粉的表观溶解度,进行曲线拟合,得到回归方
程,将V0代入方程后得到最大表观溶解度S0。依据
中药成分溶解的不完全性,成分溶解时存在饱和部
分与不饱和部分,综合考虑溶剂浸提中药材时存在
的吸附现象,本研究推导出总方成分的浓度 S与溶
剂体积的倒数1/V存在如式(9)所示的线性关系。
从表2可知,各组溶剂体系所拟合得到的回归曲线,
r均在0900以上,P均小于0.05,说明总方成分的
浓度S与溶剂体积的倒数1/V有良好的相关性;还
可以看到有部分溶剂组的截距项 CSKCSKCuns为负
值,即吸附浓度要大于饱和部分浓度,这种现象主要
是由于溶媒的种类不同所导致的,但用这些溶剂浸
提时,成分不饱和部分占主要,饱和部分很少。
本研究测定了补阳还五汤全方药材最大溶解度
时所需溶剂的介电常数即介电需量,为补阳还五汤
全方提取溶媒的选择提供依据。但是仅仅以表观溶
解度为指标进行研究,还不够全面,后续研究将采用
补阳还五汤的主要有效成分或有效成分群的含量为
指标进行溶度峰及介电需量的研究,并将其应用于
色谱技术,将各有效成分群的介电需量与洗脱剂的
介电常数相关联,将色谱理论与介电需量理论联系
起来,确定各有效成分群介电需量与保留参数之间
的定量关系,达到中药有效成分群的定位定量洗脱
提取。这样不仅能从宏观上反映还能更加具体地描
述此方的溶解特性,还将为中药复方有效成分群定
位定量提取提供了可靠的方法,对中药提取的现代
化研究具有很重大的意义。
[参考文献]
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[5] 中国药典.一部[S].2005:附录56.
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第34卷第13期
2009年7月
Vol.34,Issue 13
July,2009
Solubilitypeakanddielectricrequirementof
BuyangHuanwudocoction
ZOUHuan1,2,HEFuyuan1,2,3,LUOJieying1,2,HUANGSheng1,2,QIUYun1,2,CHENFeng1,2
(1.DepartmentofPharmaceutics,HunanUniversityofTraditionChineseMedicine,Changsha410208,China;
2.PharmaceuticalPreparationTechnologyandEvaluationLaboratoryofTraditionalChineseMedicine,HunanUniversityof
TraditionChineseMedicine,Changsha410208,China;
3.ClinicalPharmacologyResearchInstituteofCentralSouthUniversity,Changsha410078China)
[Abstract] Objective:TostudythesolubilitypeakanddielectricrequirementoftheBuyangHuanwudococtionmaterials,and
providetheoreticalandexperimentalfoundationforselectingextractionsolventforextractingtraditionalChinesedrugs(TCD).Meth
od:11typesofsolventswereemployedassingleorcomplexsolventsystems,whosesolubilityparameteranddielectricconstantwere
from1411to4786,dielectricrequirementfrom1to80respectively,tolixiviateBuyangHuanwudecoction(5gpersamples)in
nearlysaturatevolumeasV0formaterialsat25℃.Theapparentsolubilitiesofextractsweredeterminedandcalculatedoutaccording
tothesectionofdeterminationofextractintheappendixof‘ChinesePharmacopoeia’.Result:ThesaturatesolventV0formaterials
powderwere021,031,049,036,077,093,086,092,108,100,114mL·g-1,respectively.Theapparentsolubility
ofBuyangHuanwudococtionforeachsolventsystemwere1140,1013,7340,1094,2107,2950,5014,4370,3556,
4231,2106g·mL-1,respectively,amongwhichthemaxapparentsolubility,ilustratedassolubilitypeak,wascariedoutby
methanolwater(68∶32)with475corespondingtotheBuyangHuanwudococtiondielectricrequirement.Conclusion:Theapparent
solubilitiesof(TCD)andtheirformulaarecontroledbydielectricconstantofextractionsolvent,andareinaccordancewithstabledie
lectricrequirement.
[Keywords] BuyangHuanwudecoction;solubilitypeak;dielectricrequirement;apparentsolubility
[责任编辑 周 驰]
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第34卷第13期
2009年7月
Vol.34,Issue 13
July,2009