全 文 ：麻黄汤及拆方对哮喘小鼠５脂质氧合酶激活蛋白、
白介素４基因的表达和白三烯 Ｃ４的影响
刘永刚１，罗佳波２
（１．武警广东总队医院 药剂科，广东 广州 ５１０５０７；
２．第一军医大学 中药制剂重点实验室，广东 广州 ５１０５１５）
［摘要］ 目的：通过对麻黄汤（ＨｅｒｂａＥｐｈｅｄｒａｅｄｅｃｏｃｔｉｏｎ，ＨＥＤ）各拆方配伍组对哮喘小鼠５脂质氧合酶激活蛋
白（ＦＬＡＰ）、白介素４（ＩＬ４）基因的表达和白三烯Ｃ４（ＬＴＣ４）的影响来探讨其配伍规律。方法：建立小鼠卵蛋白哮喘
模型，除正常对照组和模型组外其余各组分别灌胃给予麻黄汤及拆方（以麻黄生药剂量２５００ｍｇ·ｋｇ－１）和阳性药
地塞米松（２ｍｇ·ｋｇ－１），连续用药７ｄ后用实时荧光定量ＰＣＲ方法检测肺组织中５脂质氧合酶激活蛋白、白介素４
ｍＲＮＡ表达的变化，用ＥＬＩＳＡ方法检测支气管肺泡灌洗液中ＬＴＣ４含量。结果：哮喘小鼠肺组织中 ＦＬＡＰ，ＩＬ４基因
表达水平、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＬＴＣ４水平均较正常对照组显著升高。麻黄汤及拆方组可以不同程度抑制
小鼠肺组织中ＦＬＡＰ，ＩＬ４基因表达水平，ＢＡＬＦ中ＬＴＣ４水平。结论：麻黄汤具有明显抗过敏哮喘的作用，拆方分析
显示麻黄汤全方效果最佳，从分子水平验证了麻黄汤组方的科学性和合理性。
［关键词］ 麻黄汤；白三烯Ｃ４；５脂质氧合酶激活蛋白
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）０３０２４６０４
［收稿日期］ ２００６０１２０
［基金项目］ 国家自然科学基金重点项目（３００３０１５００）
［通讯作者］ 刘永刚，Ｔｅｌ：（０２０）６１６２７２８６
麻黄汤源于《伤寒论》，本方药味不多，配伍精
当，是历代中医学家倍为推崇的著名方剂。为了进
一步阐明麻黄汤及其君臣佐使的配伍规律，作者在
器官、细胞水平上探讨了其部分功效和作用机
制［１，２］，本研究考察了麻黄汤及拆方对白三烯的上
游调控基因５脂质氧合酶激活蛋白（ＦＬＡＰ）、白介素
４（ＩＬ４）和白三烯 Ｃ４（ＬＴＣ４）的影响，结合前面的实
验从分子水平探讨其配伍规律。
１ 材料
１．１ 动物 昆明种小鼠，清洁级，雄性，体重１８～
２５ｇ，由第一军医大学动物实验中心提供，动物合格
证号２００４０１００７。
１．２ 药品 麻黄为麻黄科植物草麻黄Ｅｐｈｅｄｒａｓｉｎｉ
ｃａＳｔａｐｆ的干燥草质茎，桂枝为樟科植物肉桂Ｃｉｎｎａ
ｍｏｍｕｍｃａｓｉａＰｒｅｓｌ的干燥嫩枝，杏仁为蔷薇科植物
山杏 ＰｒｕｎｕｓａｒｍｅｎｉａｃａＬ．ｖａｒ．ａｎｓｕＭａｘｉｍ．的干燥
成熟种子；甘草为豆科植物甘草 Ｇｌｙｃｙｒｈｉｚａｕｒａｌｅｎｓｉｓ
Ｆｉｓｃｈ的干燥根及根茎。饮片购自广东省药材公司
中药饮片厂，经第一军医大学中药鉴定学教研室鉴
定。麻黄汤及拆方配伍组合为１号全方：麻黄、桂
枝、甘草、杏仁；２号方：麻黄、桂枝、杏仁；３号方：麻
黄、桂枝、甘草；４号方：麻黄、桂枝；５号方：麻黄、杏
仁、甘草；６号方：麻黄、杏仁；７号方：麻黄、甘草；８
号方：麻黄。制备其水煎液：加水将饮片浸泡 ３０
ｍｉｎ，先煎麻黄２０ｍｉｎ，去沫，再和余药共煎３０ｍｉｎ，
纱布粗滤去渣，各配伍煎液中生药量同原方，煎法相
同，煎后均浓缩，使各配伍组合中各组成药生药含量
与全方中各相应生药含量相同（各方均含麻黄生药
０５ｇ·ｍＬ－１）。
１．３ 试剂 卵白蛋白（ｏｖａｌｂｕｍｉｎＯＶＡ，Ｓｉｇｍａ公
司）；地塞米松（常州制药有限公司）；总 ＲＮＡ提取
试剂盒（上海生物工程有限公司）；ＲＴＰＣＲ试剂盒
（Ｐｒｏｍｅｇａ公司）；ＳＹＢＲＧｒｅｅｎＩ（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｂｅｓ，
Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ，ＵＳＡ）；ＬＴＣ４ＥＬＡＳＡ试剂盒（Ａｍｅｒｓｈｍａ
Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司）；氢氧化铝粉、氯仿、异戊醇、无水乙
醇（分析纯，广州化学试剂厂）；引物由广州博亚生
物工程公司合成，ＦＬＡＰ：５′ＧＧＣＣＣＴＴＧＴＣＡＣＣＣＴ
ＣＡＴＣＡＧＣＧ３′，５′ＣＣＣＧＧＣＧＡＡＧＧＡＣＡＴＧＡＧ
ＧＡＡＣＡＧＡ３′；ＩＬ４：５′ＡＴＧＧＧＴＣＴＣＡＡＣＣＣＣ
ＣＡＧＣＴＡＧＴ３′，５′ＧＣＴＣＴＴＴＡＧＧＣＴＴＴＣＣＡＧ
ＧＡＡＧＴＣ３′；βａｃｔｉｎ：５′ＧＴＧＧＧＣＣＧＣＴＣＴＡＧＧ
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ＣＡＣＣＡ３′，５′ＣＧＧＴＴＧＧＣＣＴＴＡＧＧＧＴＴＣＡＧＧ
ＧＧＧ３′。
１．４ 仪器 ＪＳＣＡ多功能超声雾化器（辽宁省鞍山
市电子医疗仪器厂）；ＥＸＬ８００酶标仪（美国 ｂｉｏｒａｄ
公司）；荧光定量 ＰＣＲ仪：ＲｏｔｏｒＧｅｎｅ３０００（Ｃｏｒｂｅｔ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｓｙｄｎｅｙ，Ａｕｓｔｒａｌｉａ）。
２ 方法
２．１ 分组与造模 将６６只小鼠随机分１１组，即正
常对照组、模型组、麻黄汤及其拆方 ８个组（２５００
ｍｇ·ｋｇ－１，以麻黄生药剂量计）、阳性药地塞米松
（２ｍｇ·ｋｇ－１）对照组。哮喘模型的制备参照文献
［３］方法：哮喘组在０，７，１４ｄ腹腔注射含卵蛋白１０
μｇ及４ｍｇＡｌ（ＯＨ）３的０５ｍＬＰＢＳ。从第１５天开
始，正常对照组除外，每天用５％ＯＶＡ密闭钟罩下雾
化３０ｍｉｎ，在激发前１ｈ灌胃给药，每天１次直到第
２２天。
２．２ 标本处理 所有小鼠均于最后１次激发后１
ｈ，眼眶动脉放血处死动物。放血毕用 ＰＢＳ行支气
管肺泡灌洗，灌液总量按８０ｍＬ·ｋｇ－１计算，分４次
灌洗，合并 ４次支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ），采用
ＥＬＩＳＡ方法检测 ＢＡＬＦ中 ＬＴＣ４的含量，严格按说明
书操作，根据标准曲线求得所测样品浓度。取右肺
１００ｍｇ立即放入液氮保存，以备抽提总ＲＮＡ。
２．３ 总ＲＮＡ的提取 提取方法参照试剂盒的说明
书进行操作。
２．４ 荧光定量 ＰＣＲ反应和分析［４７］ 每种组织所
提取的ｍＲＮＡ均以 ＦＬＡＰ，ＩＬ４和 βａｃｔｉｎ基因引物
分别扩增。反应体系为５０μＬ∶１０×ＰＣＲ缓冲液５
μＬ，２５ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＭｇＣｌ２５μＬ，５μｍｏｌ·Ｌ
－１５′和３′引
物各 １μＬ，ＳＹＢＲＧｒｅｅｎＩ０４μＬ，ｄＮＴＰｍｉｘｔｕｒｅ２
μＬ，模板１μＬ，Ｔａｑ酶１μＬ，去离子水３３μＬ。配制
混合物加至荧光定量ＰＣＲ反应管中，充分混匀后于
ＲｏｔｏｒＧｅｎｅ３０００进行反应。反应条件如下：９５℃２
ｍｉｎ，９４℃变性３０ｓ，５８℃退火３０ｓ，７２℃延伸２０ｓ，
４５次循环，７２℃延伸３ｍｉｎ。设定程序自动记录每
个循环的延伸期的荧光值，以表示在该循环结束时
的ＰＣＲ产物的量。荧光种类选择ＳＹＢＲＧｒｅｅｎＩ，程
序将按照设定的激发和发射光谱选择滤镜组，分别
为４９７，５２０ｎｍ。
为了便于对所检测样本进行比较，在实时荧光
定量ＰＣＲ反应的指数期，首先需设定一定荧光信号
的域值，一般这个域值（ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ）是以 ＰＣＲ反应的
前１０～１５个循环的荧光信号作为荧光本底信号
（ｂａｓｅｌｉｎｅ），仪器荧光域值的缺省设置是３～１０个循
环的荧光信号的标准偏差的１０倍。如果检测到荧
光信号超过域值则被认为是真正的信号，它可用于
定义样本的域值循环数（Ｃｔ）。研究表明，每个模板
的Ｃｔ值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关
系，起始拷贝数越多，Ｃｔ值越小。实时荧光定量反
应完成后，得到含所有标本的记录点曲线，荧光定量
ＰＣＲ软件自动计算出 Ｃｔ值，利用荧光值曲线和 Ｃｔ
值就可以比较基因的表达水平。相同组织中 ＦＬＡＰ
ｍＲＮＡ和ＩＬ４ｍＲＮＡ与参照基因 βａｃｔｉｎｍＲＮＡ的
初始模板量的比值为２（βａｃｔｉｎＣｔＦＬＡＰＣｔ）和２（βａｃｔｉｎＣｔＩＬ４Ｃｔ），
代表肺组织中ＦＬＡＰ和ＩＬ４基因表达水平。
２．５ 统计学处理 实验数据均采用 珋ｘ±ｓ表示，并
采用 ＳＰＳＳ１００软件对数据中各组之间进行 ｏｎｅ
ｗａｙＡＮＯＶＡ统计学分析。
３ 结果
３．１ ＲＮＡ纯度分析 所提取总 ＲＮＡ经分光光度
计检测，比值均在１８０～２１０。
３．２ 麻黄汤及拆方对哮喘小鼠肺组织中 ＦＬＡＰ，ＩＬ
４基因表达的影响 如表１结果所示，模型组小鼠
肺组织中 ＦＬＡＰ，ＩＬ４基因表达明显增加，麻黄汤及
拆方和地塞米松组可以不同程度的抑制 ＦＬＡＰ，ＩＬ４
基因表达。组间比较全方与麻桂杏、麻桂甘组对
ＦＬＡＰ，ＩＬ４基因表达没有显著性差异，麻桂与麻桂
杏、麻桂甘组对ＦＬＡＰ基因表达没有明显差异；麻桂
组与麻杏甘组、麻杏、麻甘、麻黄组对 ＩＬ４基因表达
没有明显差异。
表１ 麻黄汤及拆方对哮喘小鼠肺组织中ＦＬＡＰ，
ＩＬ４基因表达的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 ＦＬＡＰ／βａｃｔｉｎ ＩＬ４／βａｃｔｉｎ
正常 １０３±０１３２） ００７９±００１４２）
模型 ５８２±０８７ ０６９９±００６５
地塞米松 １３６±０２８２） ０２６８±００７１２）
全方 １９８±０３８２） ０３１３±００３９２）
麻桂杏 ２５３±０５４２） ０３３８±００４７２）
麻桂甘 ２４３±０６６２） ０３５２±００８４２）
麻桂 ２９８±０４７２） ０４７８±００７５２）
麻杏甘 ２６５±０５８２） ０４５５±００５６２）
麻杏 ３７２±０７３２） ０５４７±００４２２）
麻甘 ４６７±０６９２） ０５５２±００９１１）
麻黄 ４４６±０８６２） ０５６１±００９３１）
注：与模型组比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１（表２同）
３．３ 麻黄汤及拆方对哮喘小鼠 ＢＡＬＦ中 ＬＴＣ４的影
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响 如表２结果所示，在模型组中 ＢＡＬＦ中 ＬＴＣ４明
显增加，给予麻黄汤及拆方、地塞米松后可以不同程
度的抑制 ＬＴＣ４的增加，但麻杏甘、麻杏、麻甘、麻黄
组与模型组比较没有明显意义。组间比较，全方与
麻桂杏、麻桂甘组没有显著差异。
表２ 麻黄汤及拆方对哮喘小鼠ＢＡＬＦ中ＬＴＣ４
的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别 ＬＴＣ４／ｎｇ·ｍＬ－１
正常 ９４８±１９６２）
模型 ３６３９±９５７
地塞米松 １９０７±６６４２）
全方 ２１７３±６１２２）
麻桂杏 ２６９３±７８７２）
麻桂甘 ２５６８±８２３２）
麻桂 ２８０８±６９４２）
麻杏甘 ２９４６±９３６
麻杏 ３１６４±９８７
麻甘 ３１４１±７１８
麻黄 ３３７９±８８５
４ 讨论
白三烯Ｃ４是由储存于细胞膜磷脂中的花生四
烯酸（ＡＡ）经５脂氧合酶（５ＬＯ）途径并在５脂质氧
合酶激活蛋白参与下生成的一种代谢产物，是哮喘
发病过程中重要的炎症介质之一。细胞膜磷脂被磷
脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）裂解为 ＡＡ，ＡＡ结合到 ＦＬＡＰ，再递
呈给已转移到核膜上的５ＬＯ，被５ＬＯ氧化为５羟
过氧化二十碳四烯酸（５ＨＰＥＴＥ），然后在５ＬＯ的作
用下进一步氧化为不稳定的环化物白三烯 Ａ４
（ＬＴＡ４），ＬＴＡ４再转化为 ＬＴＣ４等白三烯类物质而发
挥生物学效应。Ｃｈｕ［８］等研究 ＯＶＡ致敏小鼠，发现
ＦＬＡＰ在肺泡巨噬细胞中的表达增加，５ＬＯ阻滞剂
能显著降低肺部炎症细胞及内皮细胞 ＦＬＡＰｍＲＮＡ
的表达。可见ＦＬＡＰ基因表达的上调与哮喘的发病
密切相关。ＬＴＣ４促进炎症细胞在气道的聚集，引起
气道平滑肌收缩、黏液分泌增加及血管通透性增加。
其引起气道平滑肌收缩的能力比组织胺约强１０００
倍。
本实验研究了麻黄汤及拆方对过敏性哮喘小鼠
肺组织 ＦＬＡＰ，ＩＬ４基因表达水平及 ＢＡＬＦ中 ＬＴＣ４
水平的影响，结果显示哮喘小鼠肺组织 ＦＬＡＰ，ＩＬ４
基因表达水平及 ＢＡＬＦ中 ＬＴＣ４水平较正常对照组
显著升高，提示ＦＬＡＰ基因表达的上调 ＬＴＣ４水平的
增高在哮喘发病中起一定的作用。麻黄汤及拆方可
以不同程度的抑制哮喘小鼠肺组织ＦＬＡＰ，ＩＬ４基因
表达水平及 ＢＡＬＦ中 ＬＴＣ４水平的升高。麻黄组，麻
杏甘组、麻杏组、麻甘组对 ＢＡＬＦ中 ＬＴＣ４水平的影
响与模型组比较没有明显意义。与作者在器官、细
胞水平的实验结果基本一致，从基因水平上再次验
证了麻黄、桂枝的君臣地位的作用，也佐证了杏仁、
甘草对麻黄、桂枝在抗过敏性哮喘方面的作用。
［参考文献］
［１］ 刘永刚，罗佳波，吴 忠．麻黄汤及拆方对过敏性炎症的抑制
作用［Ｊ］．中草药，２００５，３６（４）：５６３．
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ｆｌａｍｍａｔｉｏｎａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｂｙｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅｂｌｏｃｋａｄｅ［Ｊ］．ＪＩｍｍｕ
ｎｏｌ，２０００，１６５（１１）：４６４０．
ＥｆｅｃｔｓｏｆａｍｏｎｇｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｏｆＨｅｒｂａＥｐｈｅｄｒａｅｄｅｃｏｃｔｉｏｎ
ｏｎｇｅｎｉｃｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ５ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅａｃｔｉｖａｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＩＬ４
ａｎｄｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅＣ４ｉｎａｓｔｈｍａｔｉｃｍｉｃｅ
ＬＩＵＹｏｎｇｇａｎｇ１，ＬＵＯＪｉａｂｏ２
（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ，ＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＣｏｒｐｓＨｏｓｐｉｔａｌ，
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第３２卷第３期
２００７年２月
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ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ ３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００７
ＣｈｉｎｅｓｅＰｅｏｐｌｅ＇ｓＡｒｍｅｄＰｏｌｉｃｅＦｏｒｃｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０５０７，Ｃｈｉｎａ；
２．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｏｆＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＦｉｒｓｔＭｉｌｉｔａｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０５１５，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｒｅｇｕｌａｒｉｔｙｏｆｒｅｃｉｐｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｂｙｏｂｓｅｒｖｉｎｇｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔｓｏｎｔｈｅｇｅｎｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ
５ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅａｃｔｉｖａｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＩＬ４ａｎｄｔｈｅｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅＣ４ｉｎａｓｔｈｍａｔｉｃｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅｍｉｃｅｗｅｒｅｃｈａｌｅｎｇｅｄｗｉｔｈＯＶＡａｎｄ
ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄｉｇｗｉｔｈｔｈｅＨｅｒｂａＥｐｈｅｄｒａｅｄｅｃｏｃｔｉｏｎ（ＨＥＤ），ｓｅｐａｒａｔｅｄｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ（２５００ｍｇ·ｋｇ－１，ｃａｌｃｕｌａｔｅｄｂｙＨｅｒｂａＥｐｈｅｄ
ｒａｅ）ａｎｄｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ（２ｍｇ·ｋｇ－１）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｏｎｃｅｄａｉｌｙｆｏｒｓｅｖｅｎｄａｙｓ．ＴｈｅｒｅａｌｔｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲｍｅｔｈｏｄｗａｓ
ｅｍｐｌｏｙｅｄｔｏｍｅａｓｕｒｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆＦＬＡＰｍＲＮＡａｎｄＩＬ４ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｉｎｌｕｎｇａｎｄｔｈｅＥＬＩＳＡｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅ
ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＬＴＣ４ｉｎｔｈｅｗａｓｈｉｎｇｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆｐｕｌｍｏｎａｒｙａｌｖｅｏｌｕｓａｎｄｂｒｏｎｃｈｉ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｉｎｔｈｅｌｕｎｇｏｆａｓｔｈｍａｍｉｃｅ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆ
ＦＬＡＰａｎｄＩＬ４ａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＬＴＣ４ｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙａｕｇｍｅｎｔｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．ＴｈｅＨＥＤａｎｄｔｈｅｓｅｐａｒａｔｅｄ
ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｃｏｕｌｄｓｕｐｐｒｅｓｓｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＦＬＡＰａｎｄＩＬ４ａｎｄＬＴＣ４ｒｅｌｅａｓｅｔｏａｇｒｅａｔｅｘｔｅｎｔｉｎｍｉｃｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅＨＥＤｈａｄ
ｔｈｅｒｅｍａｒｋａｂｌｅｅｆｅｃｔｓｏｆａｎｔｉａｎａｐｈｙｌａｘｉｓａｓｔｈｍａａｎｄｔｈｅｏｒｉｇｉｎａｌｆｏｒｍｕｌａＨＥＤｗｏｒｋｅｄｂｅｓｔ．Ｔｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｃｏｎｆｉｒｍｅｄｔｈｅｒａｔｉｏｎａｌｉｔｙａｎｄ
ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃｌｅｖｅｌｏｆＨＥＤ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ＨｅｒｂａＥｐｈｅｄｒａｅｄｅｃｏｃｔｉｏｎ；ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅＣ４；５ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅａｃｔｉｖａｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ
［责任编辑 古云侠］
黄连解毒汤有效成分对缺氧／复氧时
脑微血管内皮细胞的保护作用
袁拯忠１，朱陵群２，庞 鹤２，单泽松１，王硕仁２，高永红２，牛福玲２
（１．温州医学院 附属第一医院，浙江 温州 ３２５０００；
２．北京中医药大学 东直门医院 中医内科学教育部重点实验室，北京 １００７００）
［摘要］ 目的：研究栀子苷、黄芩苷和小檗碱对大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用。方法：建立离体大鼠脑微
血管内皮细胞缺氧／复氧损伤模型，用１０２４，０５１２，０２５６，０１２８，００６４，００３２，００１６，０００８μｍｏｌ·ｍＬ－１栀子苷，
０２２４，０１１２，００５６，００２８，００１４，０００７，０００３μｍｏｌ·ｍＬ－１黄芩苷和 ０１９２，００９６，００４８，００２４，００１２，０００６，
０００３μｍｏｌ·ｍＬ－１小檗碱分别作用于正常组和模型组细胞。细胞活性用 ＭＴＴ比色法检测。结果：０１２８，００６４，
００３２μｍｏｌ·ｍＬ－１栀子苷，００２８，００１４，０００７μｍｏｌ·ｍＬ－１黄芩苷和００２４，００１２，０００６μｍｏｌ·ｍＬ－１小檗碱能够
比较理想的保护缺氧４ｈ复氧１２ｈ损伤的大鼠脑微血管内皮细胞。结论：适当浓度的栀子苷、黄芩苷和小檗碱等
黄连解毒汤主要成分可以保护脑微血管内皮细胞。
［关键词］ 黄连解毒汤；脑微血管内皮细胞；缺氧／复氧；栀子苷；黄芩苷；小檗碱
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）０３０２４９０４
［收稿日期］ ２００６０１２０
［基金项目］ 国家人事部留学回国人员科技活动基金（２００２
年）；教育部科学技术研究重点项目（０３０３０）
［通讯作者］ 王硕仁，Ｔｅｌ：（０１０）８４０１３１９６，Ｅｍａｉｌ：ｄｏｃｔｏｒｗａ
ｎｇ＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ
黄连解毒汤是清热解毒的代表方剂。临床研究
表明对急性脑梗死的患者，用加味黄连解毒汤能显
著提高疗效［１］。近年国内外对黄连解毒汤及其有
效成分用于脑血管病的基础研究与临床报道较
多［２］，提示本方治疗缺血性脑血管病有良好前景。
血脑屏障的破坏是缺血性脑血管疾病研究的重点，
而微血管内皮细胞是血脑屏障的主要结构基础。作
者用培养的大鼠脑微血管内皮细胞，以氧糖剥夺再
复氧复糖复制体外缺血再灌注损伤模型，用梯度浓
度的栀子苷、黄芩苷和小檗碱等黄连解毒汤中的有
效成分对细胞损伤模型进行干预，确定３种单体的
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第３２卷第３期
２００７年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ ３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００７