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A chromatographic fingerprinting-based approach to evaluating the stability of production process of traditional Chinese medicine

一种基于指纹图谱分析技术的中药生产工艺稳定性评价方法



全 文 :一种基于指纹图谱分析技术的中药生产工艺
稳定性评价方法
胡楚楚 o李云飞 o程翼宇 3
k浙江大学 中药科学与工程学系 o浙江 杭州 vtssuzl
≈摘要  目的 }提出一种基于指纹图谱分析技术的中药提取工艺稳定性评价方法 ∀方法 }通过单因素实验 o获
取实验条件k如溶剂倍数 !溶剂浓度 !提取时间和提取次数等l变化时的红参提取液色谱指纹图谱 ∀比较并选取基
于欧式距离计算方法的相似性测度计算指纹图谱相似度值 o并且在所得实验数据的基础上 o应用三次样条函数对
相似度2工艺参数特性曲线进行拟合 ∀结果 }提取液指纹图谱相似度随工艺参数变化呈现一定规律 o表明以指纹图
谱相似度为指标可定量考察样品色谱指纹图谱与工艺参数之间的关系 ∀结论 }本方法较灵敏地表征了提取工艺参
数波动导致的药材提取物整体质量变化情况 o并可用于指导工艺参数的调整 o优于传统的以单一化学成分含量为
指标的工艺评价方法 ∀
≈关键词  色谱指纹图谱 ~工艺稳定性评价 ~中药 ~红参
≈中图分类号  • u{u1z ~• u{w1u ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltw2ttxt2sx
≈收稿日期  ussx2sw2tu
≈基 金 项 目   国 家 / 十 五 0 科 技 攻 关 计 划 重 大 项 目
kusst…„zst„stl ~国家重点基础研究发展规划项目kŠt|||sxwwsxl
≈通讯作者  3 程翼宇 oר¯ } ksxztl{z|xttv{ o ƒ¤¬} ksxztl
{z|xttv{ o∞2°¤¬¯}¦«¨ ±ª¼¼ ƒ ½­∏q¨§∏q¦±
建立科学的生产工艺稳定性评价方法 o阐明工
艺参数与产品化学组成间的内在关系 o对指导工艺
参数的调整 o进而保证中药产品质量稳定具有重要
意义 ∀以中药提取工艺为例 o现主要以药材浸出物
总量≈t  !单一化学成分含量≈u  !大类组分提取率≈v ow 
或/处方内指标成分在提取物中的量≈x 0等为指标评
价工艺状况的优劣 o但此类指标未能较全面地表征
出样品的组成特征 ∀
近年来 o化学指纹图谱因其能相对完整地反映
中药的化学成分而被应用于中药批次间质量稳定性
评价≈y  ∀本研究据此提出一种基于指纹图谱分析技
术的中药生产工艺稳定性评价方法 ∀以五加科药材
红参提取工艺为例 o用指纹图谱相似度为评价指标 o
通过建立基于样条函数的模型 o定量考察提取液色
谱指纹图谱和溶剂倍数 !溶剂浓度 !提取时间 !提取
次数等工艺参数的关系 ∀与基于人参皂苷 • ¥t含量
测定的方法比较 o本方法较好地表征红参提取过程
中工艺参数波动导致的提取物整体质量变化情况 o
可用于指导工艺参数的调整及优化 ∀
1 方法原理
通过计算不同工艺参数下获得的指纹图谱积分
峰面积与对照指纹图谱积分峰面积的相似度 o可建
立工艺参数与指纹图谱间的量化关系 ∀按照原理不
同 o有多种测度可用于计算色谱指纹图谱相似度 ∀
由于每种测度的适用范围有所不同 o本试验对夹角
余弦法 !相关系数法和欧氏距离法等 v种常见测度
对工艺参数波动的定量评价能力进行了比较研究 ∀
各相似性测度的计算公式参见文献≈z  ∀
由于实验的样本量有限 o本研究还采用 v次样
条函数建立了工艺参数与指纹图谱k以相似度表示l
的模型 o即可对不同工艺参数下获得的指纹图谱的
波动情况进行预测 ∀
2 试验部分
211 仪器和试剂
美国 • ¤·¨µ¶uy|x型高效液相色谱仪 ~u||y二极
管阵列检测器 ~‹‹ p w数显恒温水浴锅k国华电器
有限公司l ~≥≤’˜× ≥≤ysts电子天平kt ªlk梅特勒2
托利多常州衡器有限公司l ~∞×׏∞• „∞uws电子
天平k梅特勒2托利多上海有限公司l ~׊p ty≤ 台
式离心机kt1y ≅ tsw µ#°¬±ptlk上海安亭科学仪器
厂l ~‹∞‘Š„’ ×i⁄过滤器k‹∞‘ŠŠ„’ ×i⁄l ∀乙腈
k色谱纯 o µ¨¦®公司l ~Ž‹u °’w k优级纯l ~超纯水
k¬¯¯¬2± 纯水处理系统l ∀
#txtt#
第 vt卷第 tw期
ussy年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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红参药材由青春宝公司提供 o并经浙江大学中
药科学与工程学系吴永江教授鉴定 ∀人参皂苷 • ¥t
对照品购于中国药品生物制品鉴定所 ∀
212 试验设计
一般来说 o溶剂倍数 !溶剂中有机溶剂含量 !提
取时间和提取次数等通常是影响药材提取效果的主
要工艺参数 ∀本研究采用单因素试验设计 o考察色
谱指纹图谱能否定量描述上述 w种工艺参数的波
动 ∀各因素的水平数见表 t ∀考察溶剂倍数这一因
素时 o其余 v个因素暂定为溶剂 |s h乙醇2水 o回流
提取时间 u «o提取次数 t次 ∀挑选出合适的溶剂倍
数后 o再用确定了的溶剂倍数和暂定的回流提取时
间ku «l和提取次数kt次l考察溶剂中合适的乙醇含
量 ∀按此原则 o依次考察提取时间和提取次数 ∀各
单因素试验中其他因素的具体水平 o根据试验实际
结果进行选取 ∀
表 t 试验设计表
水平 溶剂倍数 乙醇含量r h 提取时间r« 提取次数
t t s s qx t
u u ux t u
v v ws u v
w w ys v w
x y zs w x
y { {s x y
z ts |s y
{ tu tss z
213 ‹°≤指纹图谱获取方法
21311 提取方法 准确称取红参饮片 uss ª置于烧
瓶中 o加回流冷凝装置并于 {s ε 恒温水浴中加热 o
溶剂为不同浓度的乙醇2水混合溶液 ∀提取液减压
浓缩并定容至 uxs °o离心后备 ‹°≤分析 o进样量
为 us ˏ∀k各具体工艺参数见表 tl ∀样品平行准
备 u份 ∀
21312 色谱条件 ¬¦«µ²¶³«¨µ≤t{柱kw1y °° ≅ uxs
°° ox Λ° o汉邦公司l o流动相流速 t1s °#°¬±pt o柱
温 ws ε o检测波长 usu ±° o二元线性梯度洗脱 o流动
相 „ {s h乙腈2水 o… s1sx °²¯#pt Ž‹u°’w水溶液 o
梯度洗脱程序为 s °¬±oux h „ ~x °¬±oux h „ ~vs °¬±o
wt h „ ~xs °¬±oyu h „ ~yx °¬±o{s h „ ~{s °¬±o{x h „ ∀
21313 标准曲线的制定 精密称取人参皂苷 • ¥t对
照品 u1x{ °ªo用甲醇溶解定容至 x °o制成浓度为
s1xty °ª#°pt的人参皂苷 • ¥t对照品储备液 ∀用
甲醇将储备液依次稀释成浓度约为 s1su os1sx os1t o
s1u os1v os1w os1x °ª#°pt的系列标准溶液 o进行液
相色谱分析 o进样量为 us ˏ∀每个浓度点进样 u
次 ∀
3 结果与讨论
311 红参指纹图谱获取方法验证
31111 精密度试验 取供试品溶液 t份 o连续进样
y次 o按 21312方法进行色谱分析 ∀选取图 t所示峰
的峰面积进行计算 o结果表明 o各色谱峰保留时间
• ≥⁄均小于 s1wx h o主要峰峰面积 • ≥⁄均小于
u1s h ∀
31112 重复性试验 称取同批红参药材 y份 o按
21311所述方法制备并检测 ∀结果表明 o各色谱峰
保留时间 • ≥⁄均小于 s1w| h o峰面积 • ≥⁄均小于
u1t h ∀
31113 稳定性试验 取同一份供试品溶液 o分别在
s ov oy o| otu ouw «进行色谱分析 ∀结果表明 o各色谱
峰保留时间的 • ≥⁄均小于 s1xs h o峰面积 • ≥⁄均小
于 u1y h ∀
312 工艺优化结果
考察溶剂倍数这一因素时 o溶剂由 t倍增加到
tu倍 o各谱峰峰面积逐渐增加 o但 v倍以后增加趋
势变缓 o因此选取 v倍量溶剂为优选结果 ~以 v倍溶
剂 ou «回流提取时间 o提取 t次为固定条件 o考察溶
剂含量 o观察得 ys h乙醇溶剂提取时 o各谱峰峰面
积达到最大值 ~以 v倍溶剂 oys h乙醇2水为溶剂 o提
取 t次为固定条件 o考察提取时间 o观察得在 v «内
各类物质的提取量增加较快 o大于 v «后 o物质溶出
速度变缓 ~同样 o综合考虑提取效果和原料消耗量 o
提取次数以 v次为最佳 ∀
313 不同相似性测度的工艺参数波动评价能力考

图 t 红参药材 ‹°≤指纹图谱
按 213方法 o获取图 t所示红参药材 ‹°≤指纹
图谱 ∀选取各指纹图谱中积分面积较大的共有峰 o
计算各指纹图谱与对照指纹图谱间的相似度 o以考
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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察样品色谱指纹图谱和提取过程工艺参数k溶剂倍
数 !溶剂浓度 !提取时间和提取次数等l的相关性 ∀
由于不同相似性测度的评价能力和适用范围均有所
区别≈z  o为此 o有必要先考察各种测度对工艺参数波
动情况的评价能力 ∀
表 u列出了溶剂倍数变化时 ov种相似度的计
算结果 ∀显然 o相对于余弦函数和相关系数法 o欧氏
距离法更灵敏地反映了工艺参数的波动 ∀溶剂浓
度 !提取时间和提取次数等参数的计算结果也验证
了这一结论 ∀据此 o下文选择欧氏距离测度考察样
品色谱指纹图谱与各工艺参数的相关性 ∀
314 提取液指纹图谱与工艺参数的相关性考察
根据单因素试验结果 o将各因素下人参皂苷提
取率k见表 wl最高时所得指纹图谱作为每个因素的
对照用指纹图谱 o即 tu倍 ys h的乙醇提取 z «o提取
y次时所得样品指纹图谱作为对照用指纹图谱 ∀计
算不同工艺所得样品指纹图谱谱图与对照指纹图谱
的相似度 o以此为指标考察溶剂倍数 !溶剂浓度 !提
取时间和提取次数等工艺参数与色谱指纹图谱间的
相关性 ∀结果见表 v ∀
表 u 不同相似性测度的计算结果
相似度计算方法 溶剂倍数t u v w y { ts tu
余弦函数法 s q|yt s{ s q||| yu s q||{ |z s q||| vv s q||| ux s q||| y| s q||| |x t
相关系数法 s q|u| tz s q||| { s q||{ wx s q||| v| s q||| uv s q||| {v s q||| |u t
欧氏距离法 s qysu | s qz|x |v s q|tz xt s q|vu z| s q|ww zw s q|zt yx s q|{y t
表 v 不同工艺所得样品的指纹图谱相似度值
工艺参数 相似度值
乙醇倍数 t u v w y { ts tu
s qysu | s qz|x |v s q|tz xt s q|vu z| s q|ww zw s q|zt yx s q|{y t
乙醇含量r h s s qux s qw s qy s qz s q{ s q| t
s quzt vt s qvzt ux s qysx wt t s q|zw {{ s q{|{ yu s qyww yu s qvw{uz
提取时间r°¬± vs ys tus t{s uws vss vys wus
s q{|v y{ s q|su vv s q|u{ {t s q|xz yv s q|y| vu s q|{v y s q||v y t
提取次数 t u v w x y
s qxvx {v s q{vx xv s q|uz yx s q|yz {y s q|{{ w| t
利用三次样条函数建立指纹图谱k以相似度表
示l和工艺参数相关性的模型 ∀图 u分别给出了指纹
图谱随溶剂倍数 !溶剂浓度 !提取时间和提取次数等
工艺参数波动的变化情况 ∀以溶剂倍数为例k图 u2
„l o随着溶剂倍数的增加 o指纹图谱相似度先快速增
大 ~溶剂倍数达到一定量后 o相似度增大趋势变缓 ∀
显然 o本方法较好地刻画了工艺参数与指纹图谱的相
关性 o较灵敏地反应了提取工艺参数波动导致的药材
提取物整体质量变化情况 ∀由图 u2„还可知 o当溶剂
倍数大于 v倍时 o所得指纹图谱与对照指纹图谱的相
似度值均高于 s1|∀换而言之 o在实际提取或生产过
程中 ov倍溶剂与 tu倍溶剂的提取效果区别不大 ∀根
据其他工艺参数的计算结果也可得到类似的结论 }当
溶剂倍数在 v倍以上 o溶剂浓度在 xs h到 {s h o提取
时间大于 t «o提取次数大于 u次 o样品指纹图谱与对
照图谱的相似度均大于 s1|∀这表明 o通过设定对照
用指纹图谱和相似度阈值 o本方法可用于合理地指导
工艺参数的调整及优化 ∀
作为对比 o本研究定量考察了不同工艺条件获
取的提取液中人参皂苷 • ¥t的含量 ∀色谱条件与
21312所述相同 o测得人参皂苷 • ¥t回归方程和相关
系数分别为 }Α€ u1s ≅ tsy Χp w1{ ≅ tsw , ρ€ s1||| v o
k其中 Α为峰面积 , Χ为实际进样量 o单位 Λªl ~线性
范围为 s1x ∗ ts1s Λª∀含量测定结果见表 w ∀
由表 w可见 o人参皂苷 • ¥t含量随溶剂倍数 o提
取时间和次数的增加而增加 o而随溶剂浓度的增大
先增加后减小 o这一变化趋势与图 u所示的指纹图
谱相似度变化趋势一致 ∀这印证了本研究所提方法
具备了传统工艺评价方法的特点 o即能灵敏反映实
际生产条件的变动 ∀另外一方面 o在当前中药有效
化学成分尚未完全阐明的情况下 o仅仅根据单一化
学成分含量高低来进行工艺参数设定或调整会不够
全面 ∀当药材所含成分的化学性质差异较大 o各成
分含量与工艺参数的相随变化规律往往也不甚一
致 ∀如丹参药材水提过程中 o丹参素含量通常随提
取时间延长而增加 o但酚酸 …含量则逐渐下降≈{  o
此时 o本方法则能对样品的化学组成信息加以综合
考虑 ∀
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图 u 提取液指纹图谱与工艺参数的相关性
表 w 不同工艺红参提取样品中人参皂苷 • ¥t含量
工艺参数 人参皂苷 • ¥t含量r°ª#°pt
溶剂倍数 t u v w y { ts tu
s qt{| s qusw s quuw s quwx s quxw s quxs s quxs s quw|
溶剂浓度 s s qux s qw s qy s qz s q{ s q| t
s qt{z s qvs{ s qvzs s qvzy s qvyx s qvut s qtxz s qswv
提取时间r°¬± vs ys tus uws vss xws yys
s qu|u s qvss s qvwt s qvyv s qvy| s qvzy s qvzz
提取次数 t u v w x y
s qtzs s qvwt s qwsw s qwvt s qwvz s qwvx
4 小结
红参提取工艺中的应用结果表明 o本研究所提
出的基于化学指纹图谱分析技术的工艺稳定性评价
方法 o可定量反映工艺参数波动导致的药材提取物
整体质量变化情况 o指导工艺参数的调整及优化 o从
而确保中药产品质量的稳定 ∀
≈参考文献 
≈t  盛淑光 q鹿角炮制方法的改进 q中成药 oussv ouxk{l }yvu q
≈u  靳小舜 o张晓昀 o张海霞 o等 q苦瓜成分的提取工艺探索 q分
析化学 oussw ovukzl }|x{ q
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药苷的溶出量 q中国中药杂志 oussv ou{kyl }xty q
≈w  郭明全 o宋凤瑞 q超声提取 p 分光光度法测定刺五加叶中总
皂苷含量 q分析化学 oussu ovskul }uxs q
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≈y  李玉倦 o王 瑞 o毕开顺 o等 q中药材指纹图谱质量控制方法
研究 q中药新药与临床药理 ousst otukvl }t|v q
≈z  程翼宇 o陈闽军 o吴永江 q化学指纹图谱的相似性测度及其评
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≈{  毛声俊 o侯世祥 o唐昌炯 o等 q丹参素在加温加速条件下的含
量变化规律研究 q中国中药杂志 oussv ou{kvl }uus q
Α χηροµατογραπηιχ φινγερπριντινγ2βασεδ αππροαχη το εϖαλυατινγ τηε
σταβιλιτψ οφ προδυχτιον προχεσσ οφ τραδιτιοναλ Χηινεσε µεδιχινε
‹˜ ≤«∏2¦«∏oŒ ≠∏±2©¨¬o≤‹∞‘Š ≠¬2¼∏
( ∆επαρτµεντ οφ Χηινεσε Μεδιχινε Σχιενχε ανδ Ενγινεερινγ , Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssuz , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε :ײ¶·∏§¼ ¤ ±¨ º ° ·¨«²§©²µ·«¨ √¨¤¯∏¤·¬²± ²©·«¨ ¶·¤¥¬¯¬·¼ ²©³µ²§∏¦·¬²± ³µ²¦¨¶¶²©×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨  §¨¬¦¬±¨ ¶
k×≤ l ¥¤¶¨§²± ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦©¬±ª¨µ³µ¬±·¬±ª1 Μετηοδ : פ®¬±ª·«¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ³µ²¦¨¶¶²© • §¨Š¬±¶¨±ª©²µ ¬¨¤°³¯¨o·«¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²©
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∏¯¼ oussy
表 v 附子药材生品与炮制品中新乌头碱 !乌头碱
和次乌头碱的含量 °ª#ªp t
样品 新乌头碱 乌头碱 次乌头碱
生附片 s qxuv s qs|u s qyvx
盐附子 s qssy s qssw s qsts
白附片k四川中张l s qstt s qssv s qsvz
白附片k四川统l p s qssw s qsvy
黑顺片k四川特级l p s qssw s qstz
黑顺片k四川一级l p s qssu s qstx
黑顺片k四川二级l p s qssv s qstt
黑顺片k四川统l p s qssy s qsux
刨附片 s qsxu s qssv s qszs
炮附子 p s qssv s qssv
熟附片 s qss{ s qssu s qstw
注 }/ p 0表示未检出
上述含量测定结果可知生品附子中乌头碱类生物碱
的含量以次乌头碱最高 o新乌头碱次之 o而乌头碱最
低 o其余各炮制品中 v种生物碱含量均很低或检测
不到 ~充分说明了炮制减毒的目的 ∀
313 比较附子各个炮制品的 ‹°≤ 图 o在 wy °¬±左
右均有 t个色谱峰较稳定 o虽然经过浸 !漂 !加热等
不同的炮制方法处理后其仍然稳定 o此物质是否为
附子炮制后的某种活性成分 o尚待进一步研究 ∀除
wy °¬±色谱峰较明显 o在 { °¬±左右还有 t个色谱
峰 o此峰在不同的炮制品中含量略有不同 o但比起生
品含量有所增加 o同时其保留时间比单酯型生物碱
苯甲酰乌头碱的色谱峰kty °¬±l又有提前 o说明此
化合物的极性大于苯甲酰乌头碱 o推断此物质可能
为新乌头碱的水解产物苯甲酰新乌头碱 o尚需进一
步验证 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 1 一部 qussx }tvu q
≈u  洪 波 o赵宏峰 o司云珊 o等 q中药附子的指纹图谱研究 q吉
林农业大学学报 oussv ouxkxl }xvy q
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乌和附片中乌头类生物碱的方法研究 q药物分析杂志 ot||x o
txkyl }tv q
≈w  丁兆梦 q中药药效与临床 q北京 }中国医药科技出版社 ot||| }
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∆ετερµινατιον οφ τηρεε κινδ οφ διεστερ διτερπενοιδ αλκαλοιδσ (∆∆Ασ)
ιν Αχονιτυµ χαρµιχηαελι ανδ ιτσ προχεσσεδ προδυχτσ βψ ΗΠΛΧ
Œ˜ ƒ¤±ªt o ≠˜ ÷¬¤±ª2«²±ªt oŒ ƒ ¬¨t oפ± ≠∏2¼∏¤±u o ±Œ„’ ≠¤±2­¬¤±ªt
(t . ∆επαρτµεντ οφ Χηινεσε Πηαρµαχψ, Βειϕινγ Υνιϖερσιτψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsstsu , Χηινα ;
u . Βειϕινγ Πυρυν Βιολογιχ Τεχηνολογψ Χο . Λτδ . , Βειϕινγ tsstsu , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«¤± ‹°≤ ° ·¨«²§©²µ·«¨ §¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©·«µ¨¨®¬±§²©§¬¨¶·¨µ§¬·¨µ³¨ ±²¬§¤¯®¤¯²¬§¶k⁄⁄„¶l¬± Α2
χονιτυµ χαρµιχηαελι ¤±§¬·¶³µ²¦¨¶¶¨§³µ²§∏¦·¶±¤°¨¯¼ ° ¶¨¤¦²±¬·¬±¨ o¤¦²±¬·¬±¨ ¤±§«¼³¤¦²±¬·¬±¨ q Μετηοδ : „ ²µ¥¤¬ ∞¦¯¬³¶¨ ÷⁄… ≤t{¦²¯∏°±
º¤¶∏¶¨§o¤±§¤°°²±¬∏° ¤¦¨·¤·¨ ¶²¯∏·¬²±2¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ ¤¶·«¨ °²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ oº¬·«¤©¯²º µ¤·¨ ²©t1s °#°¬±pt ¤±§¤ §¨·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·«²©
uvs ±° q Ρεσυλτ :  ¶¨¤¦²±¬·¬±¨ o¤¦²±¬·¬±¨ ¤±§«¼³¤¦²±¬·¬±¨ oº µ¨¨ ¶¨³¤µ¤·¨§o¤±§·«¨ ¦¤¯¬¥µ¤·¬²±¦∏µ√ ¶¨²©·«¨ ° º µ¨¨ ¬± ª²²§ ¬¯±¨ ¤µ¬·¼ ²√ µ¨·«¨
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σιον : ׫¬¶° ·¨«²§¬¶¶¬°³¯¨¤±§¤¦¦∏µ¤·¨qŒ·¦¤± ¥¨ ∏¶¨§¬±·«¨ ¬§¨±·¬©¬¦¤·¬²± ¤±§ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²© Α. χαρµιχηαελι q
[ Κεψ ωορδσ] Αχονιτυµ χαρµιχηαελι ~·«µ¨¨®¬±§²©§¬¨¶·¨µ§¬·¨µ³¨ ±²¬§¤¯®¤¯²¬§¶k⁄⁄„¶l ~¤¶¶¤¼~ ‹°≤ ~ªµ¤§¬¨±·¨ ∏¯·¬²±
≈责任编辑 鲍 雷 
k上接第 ttxw页l
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·¬° ¶¨oº µ¨¨ ¤¦´∏¬µ¨§1  ¤¨±º«¬¯¨ o·«¨ ¶¬°¬¯¤µ¬·¼ ²©©¬±ª¨µ³µ¬±·¬±ª¥¤¶¨§²± ∞∏¦¯¬§¨¤± §¬¶·¤±¦¨ º¤¶¦¤¯¦∏¯¤·¨§¤±§ ¤¨¦«©¬±ª¨µ³µ¬±·º¤¶©¬·º¬·«
¦∏¥¬¦¶³¯¬±¨ 1 Ρεσυλτ : ≥¬°¬¯¤µ¬·¬¨¶²©©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²©·«¨ ¬¨·µ¤¦·¶µ¨¶³²±§¨§·²·«¨ ©¯∏¦·∏¤·¬²± ²©³µ²¦¨¶¶¬±ª©¤¦·²µ¶o¤±§¬·¶«²º §¨·«¤··¤®¬±ª¶¬°2
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≈责任编辑 鲍 雷 
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第 vt卷第 tw期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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