全 文 ：• °2‹°≤对金银花和连翘单煎 !单煎后
合并及混煎的分析
林丽美 o王智民 3 o王维皓 o李 春 o曹伶俐 o张小光
k中国中医科学院 中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要   目的 }利用 • °2‹ °≤对金银花和连翘单煎 !单煎后合并及混煎进行分析 o寻找异同 ∀方法 }采用 „¯¯2
·¨¦«2≤t{ kw1y °° ≅ uxs °°ox Λ°l色谱柱进行分离 o流动相采用乙腈 2水 k含 s1uh醋酸 l系统梯度洗脱 o流速 t1s °
# °¬±pt o检测波长有 u{s ±°o柱温为室温 o进样体积 ts ˏ∀结果 }绿原酸和连翘酯苷 „分别在下列范围内有良好
的线性 }s1|{s ∗ |1{ss Λªkρ€ s1||| |l和 s1|zu ∗ |1zus Λªkρ€ s1||| |l∀平均回收率 kν € yl分别为 ||1{xh k• ≥⁄
u1sh l和 tss1{zh k• ≥⁄ t1yh l∀归属了银翘药对主要色谱峰的来源 o定量了绿原酸和连翘酯苷 „的含量 o定性
地比较了以下色谱峰所代表的成分在 w个供试品中含量的多少 o色谱峰 ®o°o±}金银花 合并 混煎 ~色谱峰 ªo«}
连翘 合并 混煎 ~色谱峰 §o o¨¬}混煎 金银花 o混煎 合并 ∀结论 }金银花和连翘单煎 !单煎后合并及混煎 w个
供试品的 • °2‹ °≤图有异同表明银翘药对的物质基础和金银花 !连翘单用的物质基础有异同 o为进一步研究课题
/银翘药对的药效物质基础研究 0提供了方向 o为临床和制药提供了一些实验依据 o同时也为中药复方研究提供了
参考 o具有一定的理论和实践意义 ∀
≈关键词   • °2‹ °≤~银翘药对 ~金银花 ~连翘 ~合并 ~混煎 ~中药复方
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlut2uuws2sw
≈收稿日期   ussz2st2us
≈基金项目   国家自然科学基金项目 kvsyzuystl
≈通讯作者   3 王智民 oר¯i ƒ¤¬}kstsl{wstwtu{o∞2°¤¬¯}½«2
°ºtuvƒ uyvq± ·¨
金银花为忍冬科植物忍冬 Λονιχερα ϕαπονιχα
׫∏±¥q的干燥花蕾或带初开的花 ~连翘为木犀科植物
连翘 Φορσψτηια συσπενσε k׫∏±¥ql ∂ ¤«¯ 的干燥果
实 ≈t  ∀金银花气味芳香 o清热解毒 o既可清风温之热 o
又可解血中之毒 o性平稳而功显著 o偏于上半身之热 ~
而连翘轻清而浮 o善清心而去上焦诸热 o散结消肿而
治疮 o便于透达全身之热 ∀二药配伍 o并走于上 o轻清
升浮宣散 o清气凉血 o清热解毒力量倍增 o流通气血以
消肿散结止痛 ≈u  ∀二药配伍之功效与二者单用有异
同 o说明银翘药对的物质基础和二者单用的物质基础
有异同 ∀且银翘药对是临床上公认的常用药对 o把银
翘药对的物质基础研究清楚有利于很多含银翘药对
的复方研究 o意义重大 ∀考虑到传统的用药途径是水
煎 o因此作者主要利用 • °2‹°≤对金银花和连翘的
水煎液 o金银花和连翘水煎后的合并液及金银花和连
翘的混煎液 w个供试品进行分析 ∀
1 仪器与试剂
• ¤·¨µ¶uy|x pu||y高效液相色谱系统 o∞°³²º µ¨
工作站 k• ¤·¨µ¶公司 lo含四元梯度泵 !自动进样器 ~
…°tt⁄型电子分析天平 ~|{ p t p …型电子调温电
热套 ∀连翘苷 !绿原酸对照品 k中国药品生物制品
检 定 所 o批 号 分 别 为 tts{ut2usswsvo ttszxv2
usswtvlo连翘酯苷 „k中药固体制剂制造技术国家
工程研究中心 ottyw2syszuso纯度 ∴ |{h l~乙腈 !甲
醇为色谱纯 kƒ¬¶«¨ µ公司 l~水为重蒸水 o本所自制 ~
醋酸为分析纯 k北京化工厂 l∀金银花 !连翘药材购
自北京卫仁中药材饮片公司 k批号 utvss{tstlo经
中国中医科学院中药研究所生药室何希荣主管技师
鉴定 ∀
2 方法与结果
2q1 色谱条件
„¯¯·¨¦«2≤t{ kw1y °° ≅ uxs °°ox Λ°l色谱柱 o
流速 t1s °# °¬±pt o检测波长 u{s ±°o柱温为室
温 o进样体积 ts ˏo流动相采用 „乙腈 2…水 k含
s1uh醋酸 l系统梯度洗脱 }s ∗ x °¬± oxh „~x ∗ ux
°¬±oxh ∗ {h „~ux ∗ ws °¬±o{h „~ws ∗ tsx °¬±o
{h ∗ uth „~tsx ∗ tux °¬±outh ∗ uwh „o理论塔板
数以绿原酸计不低于 t ssso以连翘酯苷 „计不低
#swuu#
第 vu卷第 ut期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ ut
‘²√ °¨¥¨ µo ussz
于 { sss∀按上述的梯度条件 o可使供试品中大部分
色谱峰得到充分分离且峰形较好 o见图 t∀
2q2 溶液制备
2q2q1 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸 !连翘
酯苷 !及连翘苷对照品适量 o加 xsh 乙醇制成对照
品溶液 o得 s1uwxos1uwvos1tus °ª# °pt溶液 ∀
2q2q2 供试品溶液的制备 称金银花粉末 k过 z
号筛 l约 t ªo精密称定 o加水 tss °o煮沸后 zs ε
保持沸腾 tx °¬±o放凉后抽滤 o抽滤后的干药粉用
水再淋洗抽滤 v次 o合并滤液 o取滤液 tru浓缩至
干 o用 xsh 乙醇溶解并定容于 ux °量瓶中 o摇
匀 os1uu Λ°微孔滤膜滤过 o作为金银花单煎的供
试品溶液 ∀
称连翘粉末 k过 z号筛 l约 t ªo精密称定 o处理
方法同上 o作为连翘单煎的供试品溶液 ∀
将上述金银花 !连翘各自所剩的 tru滤液合并
在一起 o放置使其混合均匀 o浓缩至干 o用 xsh乙醇
溶解并定容于 ux °量瓶中 o摇匀 os1uu Λ°微孔滤
膜滤过 o作为金银花 !连翘合并的供试品溶液 ∀
称金银花 !连翘各约 s1x ªo精密称定 o处理方法
同上 o作为金银花 !连翘混煎的供试品溶液 ∀
2q3 标准曲线绘制
取绿原酸和连翘酯苷 „对照品溶液分别进 wo
{otso txousouxovsowsoxs ˏo按上述色谱条件测
定峰面积 o以峰面积积分值为纵坐标 kΨlo进样量
kΛªl为横坐标 kΞlo得回归方程 o结果见表 t∀
表 t 各组分线性回归方程
成分 τr°¬± 回归方程 ρ 线性范围 rΛª
绿原酸 v{1xy{ Ψ € {|y1vxs n t xtu {vs1tvwΞ s1||| | s1|{s ∗ |1{ss
连翘酯苷 „ |t1txs Ψ € p z sxy1{{w n {zw yz|1vz{Ξ s1||| | s1|zu ∗ |1zus
2q4 精密度试验
2q4q1 对照品精密度试验 精密吸取上述绿原酸
和连翘酯苷 „对照品溶液各 ts ˏo连续进样 y次 o
测定峰面积 o两者的 • ≥⁄分别为 t1yh ot1sh ∀
2q4q2 供试品精密度试验 精密吸取供试品溶液
ts ˏo连续进样 y次 o测定绿原酸 !连翘酯苷峰面
积 o两者的 • ≥⁄分别为 t1wh os1{h ∀
2q5 稳定性考察
2q5q1 对照品稳定性考察 取绿原酸和连翘酯苷 „
对照品溶液各 ts ˏo分别于 so{otyouwovyow{ «测定
绿原酸和连翘酯苷 „的峰面积 ∀在 w{ «内其 • ≥⁄值
分别为 t1yh ot1sh ∀说明 u种对照品在 w{ «内稳定 ∀
2q5q2 供试品稳定性考察 取同一供试品溶液 ts
ˏo分别于 so{otyouwovyow{ «测定绿原酸和连翘
酯苷 „的峰面积 ∀在 w{ «内其 • ≥⁄分别为 t1|h o
t1xh ∀说明处理后的样品在 w{ «内稳定 ∀
2q6 重复性试验
取同一批样品 x份 o按 2q2q2项下方法制备合并
的供试品溶液 o按上述色谱条件测定 o结果绿原酸 !连
翘酯苷 „的平均质量分数 kν € xl分别为 z1usvo
z1xwy °ª# ªpt ~两者的 • ≥⁄分别为 t1uh和 s1|h ∀
2q7 回收率试验
取已知含量的金银花和连翘粉末 o精密称取样
品各 y份 o分别精密加入一定量绿原酸和连翘酯苷
„对照品 o按 2q2q2项制成供试品溶液 o按上述色谱
条件进样 o测定峰面积 o计算含量 o结果见表 u∀
表 u 绿原酸和连翘酯苷加样回收率 kν € yl
成分 称样量 rª 样品中含量 r°ª 加入量 r°ª 测得量 r°ª 回收率 rh 平均值 rh • ≥⁄rh
绿原酸 s1uw| y u1s|t t t1||z y w1tsu z tss1z ||1{x u1s
s1ux| | u1tzz w u1sss u w1tux y |z1w
s1uw{ z u1s{v y t1|{| z w1ttx t tsu1t
s1uxw z u1tvv | u1st| u w1t|t w tst1|
s1uxs u u1s|y u t1||s t w1sxs w |{1u
s1uxv u u1tut v u1sss { w1s|{ t |{1{
连翘酯苷 „ s1uxx w u1ztw t u1yxv { x1wt{ w tst1| tss1{z t1y
s1uw{ | u1ywx u u1yxt | x1u{| t ||1z
s1uxx v u1ztv t u1yw| | x1wuv | tsu1v
s1uw| { u1yxw y u1yxs s x1vzs | tsu1x
s1uxt | u1yzy | u1yxu t x1u{| v |{1x
s1uxs { u1yyx u u1yxt t x1vuw v tss1v
#twuu#
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图 t 金银花 !连翘不同煎煮方法 ‹ °≤图
tq绿原酸 ~uq连翘酯苷 „~vq连翘苷 ~„q绿原酸对照品 ~…q连翘酯苷 „对照品 ~≤q连翘苷对照品 ~⁄q金银花 ~∞q连翘 ~ƒq合并 ~Šq混煎
2q8 样品中绿原酸和连翘酯苷 „的测定
按照上述方法和色谱条件 o对金银花单煎 !连翘
单煎 !金银花和连翘单煎后 tΒt合并 !金银花和连翘
tΒt混煎 w个供试品进行含量测定 o每批平行测定 x
份 o根据回归方程计算含量 ∀结果见表 v∀
表 v 样品含量测定 kν € xl °ª# ªpt
供试品 绿原酸 连翘酯苷 „
金银花 {1vz{ p
连翘 p ts1yuz
合并 z1tzx z1xtw
混煎 z1yu| z1tzu
2q9 样品中其他主要色谱峰的归属和定性分析
合并和混煎中的主要色谱峰都能归属到单煎的
药材中 }合并和混煎中的色谱峰 ¤o¥o¦o®o°o±来自
于单煎的金银花样品 ~合并和混煎中的色谱峰 §o o¨
©oªo«o¬o­o o¯²来自于单煎的连翘样品 o说明在合并
和混煎的过程中并没有产生量比较大的成分 ∀
主要色谱峰所代表的成分含量在 w个供试品中
是有差异的 }色谱峰 ®o°o±}金银花 合并 混煎 ~
色谱峰 ªo«}连翘 合并 混煎 ~色谱峰 §o o¨¬}混
煎 金银花 o混煎 合并 ∀
3 讨论
试验中前期摸索条件时参考了 ussx年版 5中国
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药典 6≈t 及相关文献 ≈vow 对流动相 !波长进行了选
择 o结果显示 o乙腈 2水 ks1uh 醋酸 l比甲醇 2水
ks1uh醋酸 l分离好 ~uxw ±°波长部分色谱峰重叠 o
vux ±°波长色谱峰较少 ou{s ±°波长大部分色谱峰
能在图谱中真实体现 o因此以 u{s ±°波长检测较
妥 ∀为了保证被测的 u种成分能提取完全 o煮后的
药粉抽滤后 o再用水淋洗 !抽滤 v次 ∀
本试验采用 • °2‹°≤方法来研究金银花和连
翘单煎 o单煎后合并以及混煎样品 o结果提示 }金银
花 !连翘及该药对的主要指标性成分绿原酸和连翘
酯苷 „在药对中的含量均低于在单位药中的含量 o
而药效学研究中发现药对的药效要好于单位药 o这
提示着药对的物质基础并不完全是由单位药的物质
基础或指标性成分所决定 o它们之间的物质基础有
异同 ∀药对混煎中的主要色谱峰都能归属到单煎的
药材中 o这可能意味着功效的相同之处 ~药对混煎中
面积最大的色谱峰 tk绿原酸 louk连翘酯苷 „loªo
«o®o°o±所代表的成分含量比合并和单煎的变少
且各峰比例也不一样 o这可能意味着银翘药对混煎
与金银花和连翘单煎以及金银花和连翘单煎后合并
的功效不同 ∀那么将药对混煎中面积最大的色谱峰
tk绿原酸 louk连翘酯苷 „loªo«o®o°o±所代表的
成分按其在药对中的比例配伍在药效方面能否等同
银翘药对呢 ‚当然药对混煎中的色谱峰 §o o¨¬所代
表的成分比合并和单煎的增多 o尽管其峰面积比色
谱峰 tk绿原酸 louk连翘酯苷 „loªo«o®o°o±小很
多 o甚至还有一些没有标出的变化的小峰 o这些成分
的药效就能忽视吗 ‚这些问题都需要实验来证明 ∀
本试验的结果为进一步研究课题 /银翘药对的
药效物质基础研究 0提供了方向 o为临床和制药提
供了一些实验依据 o同时也为中药复方研究提供了
参考 o具有一定的理论和实践意义 ∀
≈参考文献  
≈t  中国药典 ≈≥ q一部 qussx}ttzotxuq
≈u  苗明三 o王智民 q对药的化学 !药理与临床 ≈   q北京 }军事医
学出版社 oussu}tvzq
≈v  赵文华 o石任兵 o刘 斌 o等 q• °2‹°≤测定连翘病毒清胶囊中连
翘酯苷和连翘苷的含量 ≈ q中国中药杂志 oussxovsktl}vyq
≈w  崔燕岩 o冯少勇 o赵 光 o等 q连翘有效成分的 ‹ °≤法测定
≈ q药学学报 ot||uouzk{l}ysvq
Ρ Π2ΗΠΛΧ Αναλψσισ οφ σινγλε, µ εργινγ , ανδ βοιλεδ τογετηερ
Λονιχερα ϕαπονιχα ανδ Φορσψτηια συσπενσε
Œ‘¬2° ¬¨o • „‘Š «¬2°¬±o • „‘Š • ¬¨2«¤²o Œ≤«∏±o ≤„’ ¬±ª2¯¬o ‹ „‘Š ÷¬¤²2ª∏¤±ª
(Ινστιτυτε οφΜατερια Μεδιχα, Χηινα Αχαδεµ ψ οφ Χηινεσε ΜεδιχαλΣχιενχεσ, Βειϕινγ tsszss, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ˜·¬¯¬½¬±ª • °2‹ °≤ ¤±¤¯¼¶¬¶²©¶¬±ª¯ o¨ ° µ¨ª¬±ª¤±§¶¬°∏¯·¤± ²¨∏¶¯¼ ¥²¬¯¨ § Λονιχερα ϕαπονιχα ¤±§ Φορ2
σψτηια συσπενσε ·²©¬±§²∏··«¨ ¬µ¬§¨ ±·¬·¼ ¤±§§¬©©¨µ¨±¦¨q Μετηοδ : ≥¤°³¯ ¶¨º µ¨¨ ¶¨³¤µ¤·¨§¥¼ „¯¯·¨¦«2≤t{ ¦²¯∏°± kw1y °° ≅ uxs °°o
x Λ°l º¬·«¤°¬¬·∏µ¨ ¶²¯∏·¬²± ²©¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ 2º¤·¨µk¦²±·¤¬±¬±ªs1uh ·¨«¤±²¬¦¤¦¬§l ¤¶°²¥¬¯¨ ³«¤¶¨o t1s °# °¬±pt ¤¶©¯²º2µ¤·¨o
u{s ±° ¤¶§¨ ·¨¦·¨§º¤√ 2¨¯ ±¨ª·«o µ²²° ·¨°³¨ µ¤·∏µ¨ ¤¶·¨°³¨ µ¤·∏µ¨ ²©¦²¯∏°±o ts ˏ¤¶¬±­¨¦·¨§√²¯∏° q¨ Ρ εσυλτ: ׫¨ ¬¯± ¤¨µµ¤±ª¨ ¶²©
¦«¯²µ²ª¨ ±¬¦¤¦¬§¤±§©²µ¶¼·«²¶¬§¨ „ º µ¨¨ s1|{s2|1{ss Λªkρ€ sq||| |l ¤±§s1|zu2|1zus Λªkρ€ sq||| |lo µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼q ׫¨ ¤√ µ¨2
¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¬¨¶²©¦«¯²µ²ª¨ ±¬¦¤¦¬§¤±§©²µ¶¼·«²¶¬§¨ „ º µ¨¨ ||1{xh kν € yo • ≥⁄ u1sh l¤±§tss1{zh kν € yo • ≥⁄ t1yh lo µ¨¶³¨ ¦2
·¬√¨¯¼q  ¤­²µ³¨ ¤®¶º µ¨¨ ¦²±©¬µ° §¨·²·«¨ ·º²¦²°³²± ±¨·«¨ µ¥¶o ¦²±·¨±·¶²©¦«¯²µ²ª¨ ±¬¦¤¦¬§¤±§©²µ¶¼·«²¶¬§¨ „ º µ¨¨ §¨ ·¨µ°¬±¤·¨§o ¬±2
ªµ¨§¬¨±·¶º µ¨¨ µ¨³µ¨¶¨±·¨§¥¼ ©²¯ ²¯º¬±ª³¨ ¤®¶º µ¨¨ ¦²°³¤µ¨§ ∏´¤¯¬·¤·¬√¨¯¼} ³¨ ¤®¶®o °o ±} Λ1 ϕαπονιχα  ° µ¨ª¬±ª¶¤°³¯¨ ¥²¬¯¨ §¶¤°2
³¯ ~¨ ³¨ ¤®¶ªo «} ƒ²µ¶¼·«¬¤¶∏¶³¨ ±¶¨  ° µ¨ª¬±ª¶¤°³¯¨ ¥²¬¯¨ §¶¤°³¯ ~¨ ³¨ ¤®¶§o o¨ ¬} ¥²¬¯¨ §¶¤°³¯¨ Λ1 ϕαπονιχαo ¥²¬¯¨ §¶¤°³¯¨
° µ¨ª¬±ª¶¤°³¯ q¨ Χονχλυσιον: ⁄¬©©¨µ¨±¦¨ ¤±§¬§¨ ±·¬·¬¨¶¤°²±ªw ¬¨³¨ µ¬° ±¨·¤¯ ¶¤°³¯ ¶¨²©• °2‹ °≤ ¶¨³¤µ¤·¬²±¶¶«²º ·«¤·≠¬± ¬´¤²o Λ1
ϕαπονιχα ¤±§Φ1 συσπενσε. ¶∏¥¶·¤±¦¨¶¤µ¨ §¬©©¨µ¨±¦¨ ¤±§¬§¨ ±·¬·¬¨¶o º«¬¦«²©©¨µ¨§§¬µ¨¦·¬²± ©²µ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¬±ª©∏µ·«¨ µ·«¨ ·²³¬¦2³«¤µ°¤¦²2
§¼±¤°¬¦¶∏¥¶·¤±¦¨ ²©≠¬± ¬´¤²o ³µ²√¬§¨ §¬±¦µ¨¤¶¬±ª ¬¨³¨ µ¬° ±¨·¤¯ √¨¬§¨ ±¦¨ ©²µ¦¯¬±¬¦° §¨¬¦¬±¨¤±§³«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¶¤±§¶∏³³¯¬¨§µ¨©¨ µ¨±¦¨
©²µ·«¨ ¦²°³¯ ¬¨ ³µ¨¶¦µ¬³·¬²± ²©·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬± ¶¨¨ ° §¨¬¦¬± q¨
[ Κεψ ωορδσ] • °2‹ °≤~ ¦²∏³¯ 2¨≠¬± ¬´¤²~ Λονιχερα ϕαπονιχα; Φορσψτηια συσπενσε~ ° µ¨ª¬±ª¶¤°³¯ ~¨ ¶¬°∏¯·¤± ²¨∏¶¯¼ ¥²¬¯¨ §¶¤°2
³¯ ~¨ ¦²°³¯ ¬¨ ³µ¨¶¦µ¬³·¬²± ²©·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬± ¶¨¨ ° §¨¬¦¬±¨ ≈责任编辑 鲍 雷  
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