全 文 ：º¤√¨¯ ±¨ª·«²©utx ±° q׫¨ ©¯²º µ¤·¨ º¤¶t1s °#°¬±p t ¤±§·«¨ ¦²¯∏°±·¨°³¨µ¤·∏µ¨ º¤¶°¤¬±·¤¬±¨ §¤·µ²²°·¨°³¨µ¤·∏µ¨ qΡεσυλτ : ׫¨ ° ¤¨±
µ¨¦²√ µ¨¼ º¤¶k||1y ? t1{l h ©²µ¶¦²³²¯¤°¬±¨ ¤±§ktss1w ? t1xl h ©²µ¤·µ²³¬±¨ q Χονχλυσιον : ׫¬¶° ·¨«²§º¤¶¶¬°³¯¨o¤¦¦∏µ¤·¨ ¤±§¶¨±¶¬2
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[ Κεψ ωορδσ] ƒ¯ ²¶⁄¤·∏µ¤¨ ~¶¦²³²¯¤°¬¨±~¤·µ²³¬±¨ ~ °2°≤
≈责任编辑 鲍 雷
≈收稿日期 ussx2s{2tt
≈通讯作者 3 王峥涛 oר¯ } ksutl xtvuuxsz oƒ¤¬} ksutl
xtvuuxt| o∞2°¤¬¯}º¤±ª½«· «²·°¤¬¯1¦²°
°2°≤测定乳癖消片中三七皂苷 t和
人参皂苷 ªt的含量
徐国兵t ou ov o王峥涛t ou 3 o潘 涅w o赵 w
kt1 中国药科大学 o江苏 南京 utssv{ ~u1 上海中药标准化研究中心 o上海 ustusv ~
v1 安徽省药品检验所 o安徽 合肥 uvssyt ~w1 沈阳中药制药有限公司 o辽宁 沈阳 ttsswwl
≈摘要 目的 }应用 °2°≤测定乳癖消片中三七皂苷 t和人参皂苷 ªt的含量 ∀方法 }以乙腈2s1sx h磷酸
溶液kusΒ{sl为流动相 o采用 µ²°¤¶¬¯ ≤t{柱 o在 usv ±°波长进行测定 ∀结果 }三七皂苷 t在 s1|wt ∗ |1wt Λª!人参皂
苷 ªt在 t1swv ∗ ts1wv Λª线性关系良好 o平均回收率分别为 |z1v h o|z1| h ∀结论 }该方法简便 !准确 !可靠 o可以用
于该制剂的质量控制 ∀
≈关键词 高效液相色谱法 ~乳癖消片 ~三七皂苷 t ~人参皂苷 ªt ~含量测定
≈中图分类号 u{w1t ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussyltv2tsyz2sv
乳癖消片由鹿角 !蒲公英等 tx味中药材制成 o
具有软坚散结 !活血消痈 !清热解毒的功能 o临床用
于乳癖结块 !乳痈初起 !乳腺囊性增生病及乳腺炎前
期 ∀5中国药典6usss年版一部的乳癖消片质量标
准中 o只收载有三七皂苷 t和人参皂苷 ¥t oªt为
对照品进行 ×≤ 鉴别 o未建立含量测定项≈t ~国家
药品监督管理局国家药品标准 • ≥v2svuk2svul2
usstkl乳癖消胶囊质量标准≈u 中 o采用薄层扫描法
测定制剂中人参皂苷 ªt含量 o由于杂质干扰 o薄层
色带颜色深 o结果重复性较差 ∀为了更好的控制本
制剂质量 o作者建立了高效液相色谱法测定乳癖消
片中三七皂苷 t和人参皂苷 ªt含量的方法 o方法
简便 !准确 o重复性较好 o可以用于该制剂的质量控
制 ∀
1 仪器与试药
≥≥ °≤ p usss型高效液相色谱仪 }²§¨¯usss二
元高压泵 oxss型可变波长检测器 o≥× 色谱工作
站 ∀乙腈为色谱纯 o中国医药集团上海化学试剂公
司 o水为自制重蒸馏水 ∀三七皂苷 t和人参皂苷
ªt对照品由中国药品生物制品检定所提供k批号
zwx2|ssv ottszsv2ussvuu o供含量测定用l ~乳癖消片
由沈阳中药厂提供 ∀
2 方法
211 色谱条件 µ²°¤¶¬¯ ≤t{色谱柱kw1y °° ≅ txs
°° ox Λ°l ~流动相乙腈2s1sx h磷酸溶液kusΒ{sl ~流
速 t1u °#°¬±pt ~柱温室温 ~检测波长为 usv ±° ~进
样量 us Λ∀理论塔板数按人参皂苷 ªt峰计算不
低于 v sss ∀
212 对照品溶液制备 精密称取经五氧化二磷真
空干燥 uw «的三七皂苷 t和人参皂苷 ªt对照品适
量 o加流动相溶解制成每 t °含三七皂苷 t约 s1t
°ª和人参皂苷 ªt约 s1u °ª的溶液 o即得 ∀
213 供试品溶液制备 取本品 us片 o精密称定 o研
细 o取约 s1y ªo精密称定 o加甲醇索氏回流提取 x «o
提取液蒸干 o残渣加水 us °使溶解 o转移至分液漏
斗中 o用水饱和的正丁醇萃取 w次 o每次 us °o合并
#zyst#
第 vt卷第 tv期
ussy年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ tv
∏¯¼ oussy
正丁醇提取液 o用正丁醇饱和的氨试液洗涤 v次 o每
次 us °o弃去氨洗液 o正丁醇液再用正丁醇饱和的
水洗涤 u次 o每次 us °∀弃去水洗液 o正丁醇液蒸
干 o残渣加流动相使溶解并转移置 x °量瓶中 o加
流动相稀释至刻度 o摇匀 o用 s1wx Λ°滤膜过滤 ∀取
续滤液作为供试品溶液 ∀
214 阴性对照样品溶液的制备 按照处方比例 o取
除三七外的其余药材 o依原工艺制成不含三七的阴
性对照样品 o照供试品溶液的制备项下的方法 o制成
阴性对照样品溶液 ∀
215 测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品
溶液各 us Λo注入高效液相色谱仪 o测定峰面积积
分值 ∀按外标法以峰面积计算 o即得 ∀
3 结果
311 色谱分离结果 在上述色谱条件下 o三七皂
苷 t和人参皂苷 ªt的保留时间分别约为 tv1x
°¬± ot|1x °¬±o与共存的其他化学成分达到良好的
分离 o且阴性对照样品无干扰 o见图 t ∀其与相邻
杂质峰的分离度为 t1{ ~拖尾因子为 t1sx ~理论板
数k νl按人参皂苷 ªt峰计 o仪器实测为 y {yt ∀以
三七皂苷 t和人参皂苷 ªt对照品进样 o重复性试
验结果 ≥⁄分别为 t1w h os1y h ~最低检出限分别
为 vz1y ovt1u ±ª∀
图 t 乳癖消片 °≤图
1三七皂苷 t和人参皂苷 ªt对照品 ~
1样品 ~≤1 阴性
312 标准曲线的制备 精密称取三七皂苷 t和人
参皂苷 ªt对照品 o加流动相制成每 t °含三七皂
苷 ts1wzs w °ª和人参皂苷 ªts1xut y °ª的溶液 o
作为对照品贮备液 ∀精密吸取 s1x ot1s ou1s ov1s o
w1s ox1s °o分别加入 x °量瓶中 o加流动相稀释
至刻度 o摇匀 ∀分别精密吸取上述溶液各 us Λo依
次注入高效液相色谱仪 o计算峰面积积分值 ∀由溶
液质量浓度k ΧoΛª#°ptl对峰面积k Αl线性回归 o
得回归方程 Α t p t1u|| ≅ tsv n t1x{t ≅ tsv Χoρ
s1||| uk ν yl ~Αªt p y1wsz ≅ tsv n u1tu{ ≅ tsx Χ,
ρ s1||| |k ν yl ∀实验结果表明 o三七皂苷 t在
进样 s1|wt ∗ |1wt Λª!人参皂苷 ªt在进样 t1sw ∗
ts1w Λª线性关系较好 ∀
313 精密度试验 取同一份供试品溶液 o按上述色
谱条件 o连续进样 y次 o测定峰面积积分值 o三七皂
苷 t和人参皂苷 ªt的 ≥⁄分别为 u1w h ou1s h ∀
表明仪器精密度较好 ∀
314 稳定性试验 取同一份样品溶液 o放置 s ot ou o
w oy o{ «o按上述色谱条件 o分别测定峰面积积分值 o
三七皂苷 t和人参皂苷 ªt的 ≥⁄分别为 t1w h o
u1s h ∀表明供试样品溶液在放置 { «内稳定 ∀
315 重复性试验 精密称取同一批号的样品 y份 o
按上述方法试验 o分别测定样品中三七皂苷 t和人
参皂苷 ªt的含量 o结果 cξ t s1uu{ yk°ªr片l o ≥⁄
u1| h k ν yl ~cξ ªt t1wtvk°ªr片l o ≥⁄ s1zx h k ν
yl ∀表明本法的重复性较好 ∀
316 加样回收率试验 取已知含量的同一批号样
品 o研细 o精密称取 y份 o每份约 s1w ªk相当于含三
七皂苷 t约 s1u °ª和人参皂苷 ªt约 s1{ °ªl o分别
精密加入预先制备好的对照品溶液各 ts1s °k含
三七皂苷 t约 s1u °ª和人参皂苷 ªt约 s1z °ªl o按
上述方法试验 o分别测定样品中三七皂苷 t和人参
皂苷 ªt的含量 o结果平均回收率分别为 |z1v h o
|z1| h o ≥⁄分别为 v1w h ov1t h k ν yl ∀表明本法
较准确 !可靠 ∀
317 x批乳癖消片中三七皂苷 t 和人参皂苷 ªt
的含量测定 按拟订的方法 o分别测定 x批样品中
三七皂苷 t和人参皂苷 ªt的含量 o见表 t ∀
表 t 样品中三七皂苷 t !人参皂苷 ªt含量 °ªr片
批号 三七皂苷 t 人参皂苷 ªt 总含量
swsxtv s quwz t qxw t qz|
swsysy s quxt t qwu t qyz
swszsz s quwz t qw| t qzw
sws{st s quw| t qwz t qzu
sws{tv s quws t qv{ t qyu
4 讨论
411 曾采用薄层扫描法 o测定制剂中三七皂苷 t
和人参皂苷 ªt的含量 o由于供试品溶液中化学成
分复杂 o各成分相互干扰 o硫酸乙醇显色后的薄层
板 o背景干扰较大 o样品斑点边缘不整齐 ~且显色后
的薄层板易吸湿 o使人参皂苷 ªt斑点稳定性较差 o
从而直接导致测定结果不准确 !重复性差 ∀本法与
薄层扫描法相比 o样品处理方法较简单 o灵敏度高 o
更适合作乳癖消片的质量控制指标 ∀
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第 vt卷第 tv期
ussy年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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412 本品为 tx味药组成的中药复方 o成分复杂 o且
工艺中有部分生药直接用细粉入药 o增加了含量测
定样品前处理的难度 ∀在提取分离条件的摸索过程
中 o作者比较了甲醇 !乙醇为提取溶剂 ~采用以甲醇
为提取溶剂 o比较了超声提取 v次 !索氏回流至无色
u种不同的提取方法 o并对水饱和的正丁醇提取次
数进行比较试验 ∀同时 o由于正丁醇提取液颜色较
深 o在 °≤图中 o有较大的干扰峰kτ在 s ∗ { °¬±l o
作者又增加了正丁醇饱和的氨试液洗 v次 !正丁醇
饱和水洗 u次的步骤 o以降低杂质的干扰和对色谱
柱的污染 ∀实验结果表明 }甲醇索氏回流提取至无
色 o甲醇提取液蒸干 o残渣加水使溶解 o正丁醇提取
w次 o正丁醇液依次用正丁醇饱和的氨试液洗 v次 !
正丁醇饱和水洗 u次 o制备的供试品的溶液 o三七皂
苷 t和人参皂苷 ªt提取分离效果较好 ∀
413 关于 °≤ 测定三七中皂苷类成分的含量方
法 o文献报道较多 ∀有采用不同比例的乙腈2s1sx h
磷酸溶液≈v ow !乙腈2水≈x 或甲醇2水≈z 等度洗脱 o也
有用乙腈2水≈z o{ 或乙腈2s1sx h 磷酸溶液梯度洗
脱≈| 等 ∀作者在流动相的摸索过程中 o通过不同比
例的乙腈2s1sx h磷酸溶液和乙腈2水梯度洗脱比较 o
结果以乙腈2s1sx h 磷酸溶液kusΒ{sl为流动相 o人
参皂苷 ªt和三七皂苷 t峰的相对保留时间适中 o
分离效果较好 ∀
414 由于三七皂苷 t和人参皂苷 ªt的最大吸收
波长为 usv ±° o属紫外末端吸收 o基线噪音较大 o使
紫外检测器的检测灵敏度较低 o最低检出限偏高 ∀
制备对照品 !供试品 !阴性对照样品溶液的溶剂峰 o
对色谱图影响较大 o故选用色谱醇试剂 o以流动相直
接制备上述溶液 o最大限度的减少溶剂峰的干扰 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qusss }w|| q
≈u 国家药品监督管理局国家药品标准k新药转正标准l q第 vt
册 q • ≥v2svuk2svul2usstkl qussv qzs q
≈v 潘桂香 o高秀梅 o张伯礼 q °≤测定复方丹参方中三七皂苷
类成分的含量 q中药新药与临床药理 oussv otwkwl }ttu q
≈w 王超凡 o吴新辉 q °≤ 测定三七片中人参皂苷 ªt的含量 q
中南药学 oussw oukvl }tx| q
≈x 毛春芹 o陆兔林 o叶定江 q °≤法测定三七不同饮片中人参
皂苷 ªt的含量 q中成药 oussu ouwktul }|wu q
≈y 权丽辉 o赵淑平 o薛 岚 o等 q °≤ 法测定金森脑泰粉针剂
中三七皂苷 t的含量 q中草药 ousst ovukyl }xsu q
≈z 刘华钢 o赖茂祥 o梁秋云 o等 q三七含量测定方法研究 q中国
实验方剂学杂志 oussw otskxl }tw q
≈{ 王 梅 o范亚刚 o高文分 q °2°≤ 梯度洗脱法同时测定三
七总皂苷及血塞通注射液中 v种皂苷的含量 q药物分析杂
志 ousss ouskyl }wts q
≈| 沈国芳 o伍永江 o程翼宇 q °2°≤法测定血栓通注射液中 w
种皂苷的含量 q中国中药杂志 oussv ou{k|l }y|{ q
∆ετερµινατιον οφ νοτογινσενοσιδε Ρt ανδ γινσενοσιδε Ργt ιν
Ρυπιξιαο ταβλετσ βψ ΗΠΛΧ
÷ ∏²2¥¬±ªtou ov o • «¨ ±ª2·¤²tou o°¬¨w o «¨ w
(t . Χηινα Πηαρµαχευτιχαλ Υνιϖερσιτψ, Νανϕινγ utsss| , Χηινα ;
u . Σηανγηαι Ρεσεαρχη Χεντερφορ Στανδαρδιζατιον οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινεσ , Σηανγηαι ustusv , Χηινα ;
v . Ανηυι Ινστιτυτε φορ ∆ρυγ Χοντρολ, Ηεφει uvssyt , Χηινα ;
w . Σηενψανγ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε Χο . Λτδ , Σηενψανγ ttssww , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ §¨·¨µ°¬±¨ ·«¨ ¦²±·¨±·²© ±²·²ª¬±¶¨±²¶¬§¨ t ¤±§ª¬±¶¨±²¶¬§¨ ªt ¬± ∏³¬¬¬¤²·¤¥¯ ·¨¥¼ µ¨√ µ¨¶¨2³«¤¶¨ «¬ª«
³¨µ©²µ°¤±¦¨ ¬¯´∏¬§¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼q Μετηοδ : µ²°¤¦¬¯ ≤t{ ¦²¯∏°± º¤¶∏¶¨§º¬·«¤°¬¬·∏µ¨ ²©¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ ¤±§s1sx h ³«²¶³«²µ¬¦¤¦¬§¶²¯∏2
·¬²± kusΒ{sl ¤¶·«¨ °²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ ¤·¤©¯²º µ¤·¨ ²©t1u °#°¬±p t º¬·«·«¨ §¨·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·«¤·usv ±° q Ρεσυλτ : ׫¨ ° ¤¨¶∏µ¨° ±¨·³µ²√ §¨
·² ¥¨ ¬¯±¨ ¤µ²√ µ¨·«¨ µ¤±ª¨ ²©s1|wt2|1wt ª©²µ±²·²ª¬±¶¨±²¶¬§¨ t ¤±§t1sw2ts1w ª©²µª¬±¶¨±²¶¬§¨ ªt q׫¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¼ ²©·«¬¶° ·¨«²§
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·«¬¶³µ¨³¤µ¤·¬²±q
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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