全 文 :灵芝抗癌活性及放化疗对 2zzsu
细胞的保护作用
王丹花 o翁新楚 3
k上海大学 生命科学学院 o上海 usswwwl
≈摘要 目的 }研究灵芝精粉 k灵芝醇提物 n水提物 l!灵芝精粉氯仿提取物 !氯仿提取后的醋酸乙酯提取物 !
u次提取后的剩余物对肝癌
∞2zwsu和胃癌 ≤ 2{sv细胞的抑制效果及其对 2zzsu细胞顺铂损伤 !ys ≤²Χ射线
辐射损伤的修复与保护作用 ∀方法 }采用 ××法检测灵芝抗癌活性及放化疗时对 2zzsu细胞保护作用 ∀结果 }
灵芝氯仿提取物的抗癌活性为最强 }在 s1tux °ª# °pt时 o对癌细胞的抑制率已超过 xsh ∀对已受顺铂损伤的
2zzsu细胞 ow种提取物未能显示出修复作用 o但氯仿提取物预处理可显著降低其损伤程度 ∀对受辐射的 2
zzsu细胞 o仅氯仿提取物对中 !高剂量照射下的辐射损伤体现一定的修复作用 ~但 w种提取物预处理均可降低其辐
射损伤的程度 ∀结论 }灵芝氯仿提取物对癌细胞的抑制作用 o对正常细胞放化疗损伤的保护作用 o均体现了显著的
效果 ∀
≈关键词 灵芝 ~抗癌 ~辐射 ~放疗 ~化疗
≈中图分类号 u{x1x ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylt|2tyt{2sx
≈收稿日期 ussx2tu2us
≈基金项目 上海市科学技术委员会科研计划项目课题
ksw⁄t|{wzl
≈通讯作者 3 翁新楚 oר¯}ksutlxyvvt{|{o∞2°¤¬¯} • ±¨ª
÷¬±≤«∏ ¶¬±¤q¦²°
灵芝 Γανοδερµ α λυχιδυµ 为担子菌纲多孔菌科
灵芝属药用真菌 o具滋补强身 !扶正固本之功效 ≈t ∀
近年来国内外学者已从灵芝中分离出 txs余种化合
物 o其中苦味三萜类化合物为灵芝主要有效成分 o具
有护肝保肝 ≈u !抑制肿瘤细胞增殖等作用 ≈v2x ∀
本研究通过比较灵芝精粉 !灵芝精粉氯仿提取
物 !灵芝精粉氯仿提取后的醋酸乙酯提取物 !u次提
取后的剩余物对癌细胞的抑制效果和对正常细胞放
化疗损伤的保护作用 o旨在进一步研究并证实三萜
类化合物的抗癌活性 o为进一步将其开发为新型高
效的天然抗肿瘤药物和细胞保护剂奠定基础 ∀
1 材料与方法
111 细胞株
正常人肝细胞 2zzsu!人肝癌细胞
¨¯2zwsu!
人胃癌细胞 ≤ 2{svk中国科学院上海细胞所 l∀
112 主要药品与试剂
灵芝精粉 ≈上海绿谷 k集团 l公司生物医药研究
所赠送 o顺氯氨铂 k山东齐鲁制药厂 lo醋酸乙酯
k分析纯 l!氯仿 k分析纯 l≈中国医药 k集团 l上海化
学试剂公司 o ° tyws培养基 ! ××k美国 ≥¬ª°¤
公司 lo二甲基亚砜 k⁄ ≥l!青霉素 !链霉素 k上海
生工生物工程有限公司 lo小牛血清 k杭州四季青生
物工程公司 l∀
113 主要仪器
二氧化碳培养箱 k美国 ׫¨ µ°² ƒ²µ°¤公司 lo倒
置相差显微镜 k日本 ¬®²±公司 loxxs型酶标仪 k美
国
¬²2 ¤§公司 loys ≤²辐射源 k上海农业科学院西
喔辐照公司 l∀
114 灵芝精粉的索氏抽提
秤取灵芝精粉 us ªo加入氯仿 uxs °进行索氏
抽提 o水浴温度 zx ε o抽提时间 uw «∀提取完毕后 o
将提取液减压浓缩至浸膏得氯仿提取物 ∀氯仿提取
过的残留物用同样的方法用醋酸乙酯进行索氏抽提
得醋酸乙酯提取物 ∀
115 细胞培养及辐照
细胞培养见文献 ≈yoz o取对数生长期的细胞
用于实验 ∀培养细胞用 ys ≤²Χ射线一次性照射 ≈{ o
照射时间 ts °¬±o照射剂量及样品距源高度随实验
所设剂量确定 ∀
116 细胞增殖活性测定
用 ××比色法测定细胞增殖活性 ∀处于对数
#{tyt#
第 vt卷第 t|期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ t|
¦·²¥¨ µoussy
生长期的细胞用 s1uxh胰酶溶液 2s1suh ∞⁄×溶
液消化后 o按实验所需浓度接种在 |y孔细胞培养板
上 o每孔 tss Λo置 ≤u培养箱内孵育 o经不同实验
处理的细胞在加入 ××溶液 tss Λ后继续培养 w
«o然后弃去上清 o各孔加入 ⁄ ≥ txs Λo摇床上
震荡 tx °¬±o酶联免疫仪 w|s ±°波长处检测各孔吸
光度 kΑl∀每组有 w个平行样 o并以培养液作空白
对照 ∀计算不同处理方式对细胞生长的抑制率 ∀
抑制率 kh l kt p Α实验组 / Α空白组 l ≅ tssh
117 对正常人肝细胞 2zzsu化疗药物顺铂
k⁄⁄°l损伤的保护作用
11711 药物对已受顺铂损伤的 2zzsu细胞增殖
活性影响 细胞 k数量 tsx # °pt l接种于 |y孔板 o
uw «贴壁后 o倾去培养液 o实验组先加 u1x Λª#
°pt顺铂作用于细胞 tu «后 o换用不同剂量提取物
培养 uw «~对照组则先用顺铂作用后换用完全培养
液培养 uw «~空白组始终用完全培养液培养 vy «∀
11712 药物预处理对顺铂化疗损伤的防护作用
接种后的细胞贴壁后 o实验组先用不同剂量提取物
培养 uw «o再加入 u1x Λª# °pt ⁄⁄°作用 tu «~对
照组先用完全培养液培养后换用顺铂培养 tu «∀
118 对 2zzsu细胞 ys ≤²Χ射线辐射损伤的保护作
用研究
11811 药物对受照 2zzsu细胞增殖活性影响
接种后的细胞贴壁后 o用 ys ≤²Χ射线照射 ts °¬±o剂
量分别为 uso vso xs ¼∀照射后换用不同剂量提
取物培养 uw «o另设不照射板为空白 ∀
11812 药物预处理对不同剂量辐射损伤的防护作
用 接种后的细胞贴壁后 o以不同剂量提取物培养
uw «后 o分别以不同剂量 ys ≤²Χ射线照射 o受照后继
续培养 u «后测值 ∀
2 结果
211 不同提取物对癌细胞增殖活性的影响
w种提取物对癌细胞的抑制作用均存在一定的
量效关系 o结果见表 touo其中以氯仿提取物的抑制
效果最为显著 o而且胃癌细胞比肝癌细胞对氯仿提
取物更加敏感 ∀在 s1tux °ª# °pt时 o对肝癌细胞
的抑制率达到了 xwh o而对胃癌细胞的抑制率已达
到 zz1xh o但还不足以与经典化疗药物 k⁄⁄°l的抑
制效果相比 o后者在 x Λª# °pt的剂量下 o已经超
过 {sh的抑瘤率 ∀三萜类成分主要富集于氯仿提
取物中 o这为三萜类的抗癌活性提供了有力的证据 ∀
表 t 不同提取物对肝癌细胞
∞2zwsu细胞
增殖活性的影响 kcξ ? σ, ν w l
样品
剂量
r°ª# °pt
Α 抑制率rh
空白 p squzs ? sqsuz s
醋酸乙酯提取物 sqtux sqtzx ? sqswy vxqu
squx sqty{ ? sqstz vzqz
sqx sqtwx ? sqsts wyqv
t sqsuw ? sqssy |tqs
氯仿提取物 sqtux sqtuw ? sqss| xwqs
squx sqsz{ ? sqstt ztqu
sqx sqsv| ? sqsty {xqz
t sqsu| ? sqssy {|qw
u次提取剩余物 tqux squtz ? sqss{ t|qz
uqx sqtxs ? sqssy wwqu
x sqttw ? sqsut xzqy
ts sqsvw ? sqssx {zqy
全粉 tqux squs| ? sqss{ uuqy
uqx sqty{ ? sqsty vzq{
x sqsxx ? sqssz z|qz
ts sqsuz ? sqssw |sqs
⁄⁄° sqsst ux squt{ ? sqstt t|qu
sqssu x sqtz| ? sqssy vvqz
sqssx sqsxs ? sqssv {tqv
sqst sqsvy ? sqssy {yqx
表 u 不同提取物对胃癌细胞 ≤ 2{sv
细胞增殖的影响 kcξ ? σ, ν wl
样品
剂量
r°ª# °pt
Α 抑制率rh
空白 p sqx{y ? sqsuu s
二次提取剩余物 tqux sqxx| ? sqsvv wqy
uqx sqvvs ? sqssw wvqy
x sqsxw ? sqsut |sqz
ts sqsxv ? sqssy |tqs
全粉 tqux sqxxs ? sqsuv yqt
uqx sqwuu ? sqsvu uzq|
x sqsx{ ? sqstw |squ
ts sqsyt ? sqsts {|qy
醋酸乙酯提取物 sqtux sqw|{ ? sqszz txqs
squx sqwz{ ? sqswy t{qx
sqx sqszs ? sqss{ {{qs
t sqsyw ? sqsuw {|qs
氯仿提取物 sqtux sqtvu ? sqsv{ zzqx
squx sqs|| ? sqstu {vqt
sqx sqs|s ? sqss| {wqz
t sqsxy ? sqssx |sqw
⁄⁄° sqsst ux sqvz{ ? sqstt vxqz
sqssu x sqvsx ? sqssy wzq|
sqssx sqsz| ? sqssv {yqx
sqsst sqsww ? sqssy |uqx
212 不同提取物对已受顺铂损伤的 2zzsu细胞
的修复作用
结果发现 o化疗药物 ⁄⁄°对正常细胞的杀伤作
#|tyt#
第 vt卷第 t|期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ t|
¦·²¥¨ µoussy
用相比于癌细胞更为显著 }在 u1x Λª# °pt时已超
过 xsh抑制率 ∀受损细胞仅在氯仿和醋酸乙酯提
取物在低剂量时表现些微的促增殖作用 o而在其他
剂量组均未能观察到促增殖效应 k图 tl∀结果表
明 o灵芝作为治疗药物促进化疗药物 ⁄⁄°损伤细胞
的修复 o其效果可能不佳 ∀
图 t 不同提取物对受顺铂损伤的
2zzsu细胞增殖影响
¤1剂量 ≅ tspt k图 u ∗ {同 l
213 药物预处理对顺铂损伤的防护作用
结果发现 o在氯仿提取物剂量为 s1uxo s1x °ª
# °pt时表现为显著的促增殖作用 k图 ul∀提示
灵芝氯仿提取物预处理可降低化疗药物对 2zzsu
细胞的损伤程度 ∀
图 u 不同提取物预处理对 2zzsu细胞
顺铂损伤的防护作用
214 不同提取物对受照 2zzsu细胞增殖活性影
响
结果发现 o对于 us ¼的低剂量辐射 o所有提取
物均不具备促进辐射损伤细胞的修复作用 k图 vl~
对 vs ¼的中剂量辐射 o低剂量的氯仿提取物显示
了促增殖作用 k图 wl~对 xs ¼的高剂量辐射 o氯仿
提取物才表现出显著的促增殖作用 k图 xl∀
215 不同提取物预处理 2zzsu细胞的辐射效应
结果发现 o药物预处理有显著的辐射损伤防护
作用 o尤其是在受到较大剂量辐照 k剂量大于 us
¼l时作用尤为显著 k图 y ∗ {l∀结果提示 o灵芝预
图 v 不同提取物对 us ¼受照 2zzsu细胞增殖影响
图 w 不同提取物对 vs ¼受照 2zzsu细胞增殖影响
图 x 不同提取物对 xs ¼受照 2zzsu细胞增殖影响
图 y 不同提取物预处理 2zzsu细胞后的辐射效应
处理可降低 2zzsu细胞的辐射敏感性 ∀
3 讨论
本实验证实了灵芝提取物对肝癌
∞2zwsu和
胃癌 ≤ 2{sv细胞具有显著的抗癌活性 o呈剂量依
赖型抑制作用 o其中以灵芝氯仿提取物的抑制效果
为最佳 }在 s1tux °ª# °pt时 o已经超过 xsh的抑
制率 ∀研究进一步显示对已受顺铂损伤的 2zzsu
细胞 ow种提取物未能显示出期待的修复作用 o但灵
芝氯仿提取物预处理可显著降低 2zzsu细胞的
#suyt#
第 vt卷第 t|期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ t|
¦·²¥¨ µoussy
图 z 不同提取物预处理 2zzsu细胞后的辐射效应
图 { 不同提取物预处理 2zzsu细胞后的辐射效应
化疗药物损伤程度 ∀实验还发现 o对受照的 2
zzsu细胞 ow种提取物的修复效果不佳 o仅氯仿提取
物对中 !高剂量照射下的辐射损伤体现一定的修复
作用 ~但灵芝预处理可降低 2zzsu细胞辐射损伤
的敏感性即提高其辐射抗性 o这一作用在受到中 !高
剂量辐照时更为显著 o而且提取物在低剂量时的防
护效果强于高剂量 o说明高剂量的灵芝提取物对正
常细胞也存在一定的细胞毒作用 ∀这表明 o在肿瘤
放疗中预防性地合理应用灵芝可能对减轻辐射损伤
的毒副作用具有重要应用价值 ∀而且有对辐射损伤
机体的恢复治疗作用 ∀
基于本实验体外培养细胞所获得的结果 o无论
对癌细胞的抑制效果还是对正常细胞放化疗损伤的
修复或保护作用 o灵芝氯仿提取物均体现了显著的
效果 o而三萜类成分主要富集于氯仿提取物中 o当然
是否这一切是三萜类成分在起作用 o还有待证实 ∀
作者将进一步分离氯仿提取物 o进行较深入 !系统的
研究 o为探索高效 !低毒且经济的天然抗肿瘤药物和
细胞保护剂做出有意义的尝试 ∀
≈参考文献
≈t 林志彬 q灵芝的现代研究 ≈ q北京 }北京医科大学出版社 o
ussu}wq
≈u 王明宇 o刘 强 o车庆明 o等 q灵芝三萜类化合物对 v种小鼠
肝损伤模型的影响 ≈ q药学学报 o ussso vxkxl}vuyq
≈v ¬± ≤ o ײ°¨• «¨ ¼2³¬°q ²√¨¯ ¦¼·²·²¬¬¦³µ¬±¦¬³¯ ¶¨²©ƒ²µ°²¶¤±
Γανοδερµ α λυχιδυµ q ¤·°µ²§¨·o t||to xwkwl} ||{q
≈w «∏ ≥o ≠¤±ª ÷¬±2¯¬±o • ¤±ª¬2¥²o ·¨¤¯q ∞©©¨¦·¶²© ¬¨·µ¤¦·¶
©µ²° ¶³²µ²§¨ µ°2¥µ²®¨ ± ¶³²µ¨¶ ²© Γανοδερµ α λυχιδυµ ²± ¨¯¤
¦¨¯¯¶q ≤¨¯¯
¬²¯ ײ¬¬¦²¯o ussso ty} ustq
≈x ¬± ≥
o ¬≤ o ¨¨≥ ≥o ·¨¤¯q ×µ¬·¨µ³¨ ± 2¨¨ ±µ¬¦«¨ § ¬¨·µ¤¦·¶©µ²°
Γανοδερµ α λυχιδυµ ¬±«¬¥¬·ªµ²º·«²©«¨ ³¤·²°¤¦¨¯¯¶√¬¤¶∏³³µ¨¶¶2
¬±ª³µ²·¨¬± ®¬±¤¶¨ ≤o ¤¦·¬√¤·¬±ª°¬·²ª¨ ±2¤¦·¬√¤·¨§³µ²·¨¬± ®¬±¤¶¨¶
¤±§u2³«¤¶¨ ¦¨¯¯ ¦¼¦¯¨¤µµ¨¶·q ¬©¨ ≥¦¬o ussvo zu} uv{tq
≈y 司徒镇强 o吴军正 q细胞培养 ≈ q西安 }世界图书出版公司 o
usst}zwq
≈z ≥ ¬¯√¤⁄o ¤¥¤µµ¨µ¨ ≤ o ≥ ¬¯√²∏¤ ∂ o ·¨¤¯q ¤±²§¨ µ°¤ ∏¯¦¬§∏° ¶∏³2
³µ¨¶¶¨¶°²·¬¯¬·¼ ²©«¬ª«¯¼ ¬±√¤¶¬√¨¥µ¨¤¶·¤±§³µ²¶·¤·¨¦¤±¦¨µ¦¨¯¯¶q
¬²¦«¨ °
¬²³«¼¶ ¶¨≤²°°∏±o ussuo u|{kwl}ysvq
≈{ 王小华 o周 舟 o朱光旭 o等 q角质细胞生长因子对肠上皮细胞
辐射损伤的防护作用 ≈ q第三军医大学学报 o usssouuk{l}
ztvq
Αντιτυµ ορ αχτιϖιτψ οφ εξτραχτσ οφ Γανοδερµ α λυχιδυµ ανδ τηειρ προτεχτιϖε
εφφεχτσ ον δαµ αγεδ ΗΛ2zzsu χελλσ ινδυχεδ βψ ραδιοτηεραπψ ανδ χηεµ οτηεραπψ
• ⁄¤±2«∏¤o • ∞ ÷¬±2¦«∏
(Σχηοολοφ Λιφε Σχιενχεσ, Σηανγηαι Υνιϖερσιτψ, Σηανγηαι usswww, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ¬±«¬¥¬·²µ¼ ©¨©¨¦·²©Γανοδερµ α λυχιδυµ o ·«¨ ¬¨·µ¤¦·²©¦«¯²µ²©²µ°o ·«¨ ¬¨·µ¤¦·²© ·¨«¼¯ ¤¦¨2
·¤·¨ ¤±§·«¨ µ¨°¤¬±¶¤©·¨µ·º²2·¬°¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ²±
∞2zwsu ¤±§ ≤ 2{sv ¦¨¯¯¶¤±§·«¨ ¬µ³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·¶²± 2zzsu ¦¨¯¯¶³µ¨2¤±§
³²¶·2¨ ¬³²¶¨§·²¦¬¶³¯¤·¬± k⁄⁄°l ¤±§ √¤µ¬²∏¶§²¶¨¶²©ys ≤² Χ ¬µµ¤§¬¤·¬²±q Μετηοδ : ׫¨ ¤±·¬·∏°²µ¤¦·¬√¬·¼ ¤±§ ³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·¶²±
§¤°¤ª¨ §2zzsu ¦¨ ¯¯¶¬±§∏¦¨§¥¼ µ¤§¬²·«¨ µ¤³¼ ¤±§¦«¨ °²·«¨ µ¤³¼ ²©γανοδερµ α λυχιδυµ º µ¨¨ §¨ ·¨µ°¬± §¨¥¼ ×× ·¨¦«±¬´∏¨ q Ρ εσυλτ:
׫¨ ¤±·¬¦¤±¦¨µ¤¦·¬√¬·¼ ²©·«¨ ¬¨·µ¤¦·²©¦«¯²µ²©²µ° Γανοδερµ α λυχιδυµ º¤¶·«¨ ¥¨ ¶·} ¤··«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²©s1tux °ª# °pt o ·«¨ ¬±2
«¬¥¬·²µ¼ µ¤·¨ º¤¶²√ µ¨xsh 1ײ·«¨ 2zzsu ¦¨ ¯¯¶§¤°¤ª¨ §¥¼ ⁄⁄°o ©²∏µ®¬±§¶²© ¬¨·µ¤¦·¶§¬§±π·¨ ¬¨ µ·µ¨¶·²µ¬±ª ©¨©¨¦·o ¥∏··«¨ ³µ¨·µ¨¤·2
° ±¨·º¬·«·«¨ ¬¨·µ¤¦·²©¦«¯²µ²©²µ° µ¨§∏¦¨§·«¨ §¤°¤ª¨ §§¨ ªµ¨¨¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼1 ײ·«¨ ys ≤²Χ¬µµ¤§¬¤·¨§2zzsu ¦¨¯¯¶o ²± ¼¯ ·«¨ ¬¨·µ¤¦·
²©¦«¯²µ²©²µ° ¬¨¨ µ·¨§µ¨¶·²µ¬±ª ©¨©¨¦··²¶²°¨ ¬¨·¨±·º«¨ ± ¬¨³²¶¨§·² °¬§§¯¨²µ«¬ª«§²¶¨ ²©¬µµ¤§¬¤·¬²±1 ׫¨ ³µ¨2¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²± ²©©²∏µ
#tuyt#
第 vt卷第 t|期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ t|
¦·²¥¨ µoussy
®¬±§¶²© ¬¨·µ¤¦·¶µ¨§∏¦¨§·«¨ §¤°¤ª¨ §§¨ ªµ¨¨¥¼ µ¤§¬¤·¬²±1 Χονχλυσιον: ׫¨ ¬¨·µ¤¦·²©¦«¯²µ²©²µ° ¬¨¨ µ·¶±²·¤¥¯¨¤±·¬·∏°²µ ©¨©¨¦·¶²±
¦¤±¦¨µ¦¨¯¯¶¤±§³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·¶²± §¤°¤ª¨ §±²µ°¤¯ ¦¨ ¯¯¶¬±§∏¦¨§¥¼ µ¤§¬²·«¨ µ¤³¼ ¤±§¦«¨ °²·«¨ µ¤³¼1
[ Κεψ ωορδσ] Γανοδερµ α λυχιδυµ ~ ¤±·¬·∏°²µ~ ¬µµ¤§¬¤·¬²±~ µ¤§¬²·«¨ µ¤³¼~ ¦«¨ °²·«¨ µ¤³¼
≈责任编辑 古云侠
≈收稿日期 ussy2su2t|
≈基金项目 河北省卫生厅 ussw年医学科学研究重点项目计
划课题 kswsysl
≈通讯作者 3 刘福英 oר¯} ksvttl{yuyxxz|o ∞2°¤¬¯} ©¯¼
«¨ ¥°∏1 §¨∏1¦±
复肝春 y号对小鼠肝癌的抑制作用及
对荷瘤小鼠免疫功能的影响
李秀娟 t o毛宇湘 u o张焕铃 t o王俊霞 t o刘福英 t3
kt1河北医科大学 实验动物学部 分子生物学研究室 o河北 石家庄 sxsstz~
u1河北省中医院 肝胆科 o河北 石家庄 sxssttl
≈摘要 目的 }研究复肝春 y号 kƒ≤ 2yl的抗肝癌作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响 ∀方法 }将接种 uu肝
癌细胞的小鼠分为模型组 !x2氟尿嘧啶组 kx2ƒ∏组 l!ƒ≤ 2y高 !中 !低剂量组 k含生药量 zsovxotx ª# ®ªpt lo另设正
常对照组 o连续给药 ts §∀观察小鼠瘤重 !体重 !细胞杀靶活性 !淋巴细胞增殖活性及脾细胞白细胞介素 uk2
ul分泌量的变化 ∀制备 ƒ≤ 2y含药血清 o以 ××法和生长曲线法观察该含药血清对体外培养 uu细胞的增殖抑
制作用 ∀结果 }ƒ≤ 2y高剂量可明显抑制荷瘤小鼠移植瘤的生长 o且 ƒ≤ 2y含药血清对 uu细胞增殖有明显的抑
制作用 o呈时间和浓度依赖性 ∀模型组荷瘤小鼠的 细胞杀靶活性和脾细胞 2u分泌量均明显低于正常对照组
kΠ s1sxl~而 ƒ≤ 2y高剂量组荷瘤小鼠的 细胞杀靶活性 !脾细胞 2u分泌量和淋巴细胞增殖活性均得到明
显改善 oƒ≤ 2y中剂量治疗使荷瘤小鼠的脾细胞 2u分泌能力增强 o与模型组比较差异显著 kΠ s1sxl∀结论 }
ƒ≤ 2y可明显抑制 uu细胞的生长 o改善荷瘤小鼠的免疫功能 ∀
≈关键词 复肝春 y号 ~抗肿瘤 ~免疫调节
≈中图分类号 u{x1x ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylt|2tyuu2sw
复肝春 y号 kƒ≤ 2yl方剂是由河北省中医院毛
宇湘主任医师根据多年临床经验拟定 o在临床治疗
中观察到该方药可明显延长患者生存期 !减轻病人
痛苦 !改善患者生存质量 o这些作用可能与 ƒ≤ 2y
抑制肿瘤细胞增殖及提高患者的免疫功能有关 ∀为
了证实该方药的抗肝肿瘤作用及初步研究其抗肿瘤
机制 o本实验观察了 ƒ≤ 2y对 uu小鼠肝癌的抑瘤
作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响 ∀
1 材料
111 实验用药
ƒ≤ 2y方中各单味中药 k黄芪 !女贞子 !白花蛇
舌草 !半枝莲 !薏苡仁 !鳖甲 !牡蛎 !桔梗 !莪术 !露蜂
房 !葶苈子等 l均购自乐仁堂大药房 o配伍后 o冷水
浸泡 t «o水煎 u次后混匀 o过滤并浓缩 o制成含生药
为 v1x ª# °pt的液体 ow ε 冰箱储存备用 ∀ x2氟尿
嘧啶注射液 kx2ƒ∏l}上海旭东海普药业有限公司生
产 o批号 svttsw∀
112 动物与瘤株
小鼠 o清洁级 o体重 t{ ∗ uu ªo雄性 o由本校
实验动物学部提供 k合格证号 ⁄swtu2stvxl∀小鼠
肝癌 uu细胞株和 ≠¤¦2t细胞株均由本校实验动物
学部实验动物研究室保存 ∀
113 试剂
刀豆蛋白 k≤²±lo噻唑蓝 k ××l}美国 ≥¬ª°¤
公司产品 ~小鼠 2u ∞≥检测试剂盒 }上海森雄
科技实业公司产品 ∀ th °2ws液按常规配制 ≈t ∀
2 方法
211 荷瘤小鼠模型的建立
#uuyt#
第 vt卷第 t|期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ t|
¦·²¥¨ µoussy