全 文 ：xyur⁄ 细胞 ⁄ 具有明显的逆转作用 o显示了
良好的临床应用前景 ∀本研究亦证实 o四物合剂逆
转肿瘤细胞 ⁄ 的药效为多成分协同增效作用的
结果 o其他活性成分的发现和各活性成分协同作用
规律还有待于进一步深入研究 ∀
≈参考文献
≈t o≥∞° o≤∞ ≠ ≠1 §¨±·¬©¬¦¤·¬²±¤±§§¨·¨µ°¬±¤·¬²±
²©·«¨ °¤²µ¦²±¶·¬·∏¨±·¶¬± ·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ≥¬2 • ∏2פ±ª
¥¼ °≤ ¦²∏³¯ §¨ º¬·« ⁄⁄ ¤±§ ∞≥2≥1 ϑ Πηαρµαχευτ Βιοµεδ o
ussw ovw }zsx1
≈u 夏 蕾 o沈 朋 1 四物合剂对人红白血病细胞株 xyur⁄ 多
药耐药性的逆转作用研究 1 中国中药杂志 oussw ou|k{l }z|u1
≈v 魏小明 o符 红 o万幼平 1 硫酸蒽酮比色法测定鹿龟酒中多糖
的含量 1 中成药 ousss ouukxl }v{s1
∆ισχοϖερψ οφ τηε µαιν αχτιϖε χονστιτυεντσ οφ Σιωυ µιξτυρεφορ ρεϖερσινγ τηε
µ υλτιδρυγ ρεσιστανχε οφ ηυµαν ερψτηροχψτελευκεµιχ χελλλινε Κxyu/ Α∆ Μ
≥∞°¨ ±ªt o ÷ ¨¬u o ¤¬2¬¤±ªu
(t1 Τηε Φιρστ Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλ, Χολλεγε οφ Μεδιχινε , Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtsssv , Χηινα ;
u1 ∆επαρτµεντ οφ Χηινεσε Μεδιχινε Σχιενχε ανδ Ενγινεερινγ , Χολλεγε οφ Πηαρµαχευτιχαλ Σχιενχεσ ,
Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssuz , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ °¤¬± ¤¦·¬√¨¦²±¶·¬·∏¨±·¶²©≥¬º∏ °¬¬·∏µ¨ ©²µµ¨√ µ¨¶¬±ª·«¨ °∏¯·¬§µ∏ªµ¨¶¬¶·¤±¦¨ k⁄ l ²©«∏°¤±
µ¨¼·«µ²¦¼·¨ ¯¨ ∏®¨ °¬¦¦¨¯¯ ¬¯±¨ xyur⁄1 Μετηοδ : ¤¦µ²³²µ²∏¶µ¨¶¬± º¤¶∏¶¨§·²¶¨³¤µ¤·¨ ≥¬º∏°¬¬·∏µ¨ ¤±§¤± ιν ϖιτρο °²§¨¯ º¤¶∏¶¨§·²
√¨¤¯∏¤·¨·«¨ µ¨√ µ¨¶¤¯ ¬±§¨¬²© ¤¨¦«©µ¤¦·¬²±©²µ§¬¶¦²√ µ¨¼ ²©¤¦·¬√¨©µ¤¦·¬²±1 °≤2≥ º¤¶∏¶¨§©²µ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¬±ª·«¨ °¤¬± ¤¦·¬√¨¦²±¶·¬·∏¨±·¶²©
≥¬º∏ °¬¬·∏µ¨1 Ρεσυλτ : ׫¨ µ¨√ µ¨¶¤¯ ¬±§¨¬²©·«¨ ªµ²¶¶³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ²© Ρεηµαννια γλυτινοσα º¤¶¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ «¬ª«¨µ·«¤±·«¤·²©¥¯¤±®¦²±·µ²¯
k Π s1stl1 ׫¨ µ¨ º¤¶ ¬¯·¯¨§¬©©¨µ¨±¦¨ ¥¨·º¨¨ ±·«¨ µ¨√ µ¨¶¤¯ ©¨©¨¦·²©·«¨ ªµ²¶¶³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ²© Ρεηµαννια γλυτινοσα ¤±§·«¤·²©·«¨ ¤¦·¬√¨
©µ¤¦·¬²± k Π s1sxl1 Χονχλυσιον : ׫¨ ªµ²¶¶³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ²© Ρεηµαννια γλυτινοσᬶ²±¨ ²©·«¨ °¤¬± ¤¦·¬√¨¦²±¶·¬·∏¨±·¶²©≥¬º∏°¬¬·∏µ¨1
[ Κεψ ωορδσ] ≥¬º∏ °¬¬·∏µ¨ ~µ¨√ µ¨¶¬²± ²© ⁄ ~¦¨¯¯ ¬¯±¨ xyur⁄ ~³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨
≈责任编辑 李 禾
°2°≤测定石蒜中加兰他敏含量
吴芳丽 3 o李爱珍 o毛慧芳
k浙江一新制药股份有限公司 o浙江 兰溪 vuttssl
≈摘要 目的 }建立测定石蒜中加兰他敏含量的 °≤ 方法 ∀方法 }采用 ⁄≥色谱柱kw1y °° ≅ txs °° ox Λ°l o
以磷酸盐缓冲液k³ v ∗ wl2甲醇k|vΒzl为流动相 o流速 t1s °#°¬±p t o二极管阵列检测器于 u{| ±°测定 ∀结果 }加
兰他敏在 v ∗ vs Λª#°pt线性关系良好kρ s1||| zl o最低检测限为 s1vs ±ªo测定加兰他敏的平均回收率为 ||1x h o
≥⁄s1x h ∀结论 }方法操作简便 o结果可靠 o重复性好 o专属性强 o将为石蒜的质量控制提供科学依据 ∀
≈关键词 高效液相色谱法 ~加兰他敏 ~石蒜
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussxlsz2sxuv2sv
≈收稿日期 ussv2tt2ts
≈通讯作者 3吴芳丽 oר¯ }ksxz|l{{yxtyt
石蒜为石蒜科植物 o虽然目前尚未被5中国药
典6收载 o但其中生物活性成分较多 o特别是生物碱
类 o加之石蒜的品种繁多 o每种中各成分含量不一 o
因此对石蒜中具生物活性成分建立合适的含量测定
方法是必要的 ∀石蒜中加兰他敏具治老年痴呆症功
能之功效≈t o文献报道有采用分光光度法≈u !薄层扫
#vux#
第 vs卷第 z期
ussx年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs o¶¶∏¨ z
³µ¬¯oussx
描法及 °≤≈v 测定石蒜中加兰他敏含量 o但方法繁
杂 o准确性差 ∀本研究对石蒜中加兰他敏采用反相
高效液相色谱法进行含量测定 o分析时间短 o操作简
单 o结果准确 o未见文献报道 ∀
1 仪器与试药
美国 ª¯¬¨±·°ttss 高效液相色谱仪 o° p
ttss紫外多波长检测器 o°色谱工作站 ∀石蒜原
料由一新制药股份有限公司分公司九泰中药饮片公
司提供k产地安徽滁洲l o加兰他敏对照品k纯度为
||1{ h o≥2⁄≤ ≤²1l o磷酸 !甲醇为色谱
纯 o水为超纯水 o磷酸二氢钾 !氨水 !三乙胺均为分析
纯 ∀
2 色谱条件
≠ ≤2°¤¦® ⁄≥ 色谱柱 kw1y °° ≅ txs °° ox
Λ°l ~流动相磷酸盐缓冲液k³ v ∗ wl2甲醇k|vΒzl
k磷酸盐缓冲液 }称取磷酸二氢钾 u1zu ªo加水 tss
°使溶解 o加三乙胺 t1w °o用磷酸调 ³至 v ∗ w o
加水至 t sss °o摇匀 o即得l ~柱温 vs ε o流速 t1s
°#°¬±pt o检测波长 u{| ±° o进样量 us Λ∀
3 方法与结果
311 溶液制备
31111 对照品溶液制备 精密称取加兰他敏对照
品适量 o用水配成 s1tx °ª#°pt的溶液 o作为对照
品溶液 ∀
31112 供试品溶液制备 取干燥药材适量 o粉碎 o
精密称取药材细粉约 t1s ªo置索氏提取器中 o用乙
醇 {s °o加热回流 v «o提取液水浴蒸干 o残渣用稀
盐酸 vs °溶解 o用垂熔玻璃漏斗过滤 o滤液用氨水
调 ³到 ts o再用氯仿萃取 v次 o每次 tx °o合并氯
仿液 o水浴蒸干 o残渣用水溶解并转移至 ts °量瓶
中 o用水稀释至刻度 o摇匀 o用滤膜ks1wx Λ°l滤过后
作为供试品溶液 ∀
312 系统适用性试验
取含量为 tw1{{ Λª#°pt对照品溶液进样 o以加
兰他敏计理论板数为 z z{z o拖尾因子为 s1|y o样品
与最近峰的分离度为 w1u ∀应用仪器的峰纯度检测
功能对加兰他敏色谱峰纯度进行分析 o结果加兰他
敏色谱峰的匹配因子大于阈值 o表明为单一成分色
谱峰 o色谱分离良好 o见图 t ∀
313 最低检测限
在选定的色谱条件下 o当信噪比为 v时对最低
检测限进行测定 o结果表明 o加兰他敏的最低检测限
为 s1v ±ª∀
314 线性关系考察
取加兰他敏对照品约 s1stx ªo精密称定 o置 tss
°量瓶中 o加适量超纯水使溶解 o并用超纯水稀释
至刻度 o摇匀 ∀精密量取 t1s ou1s ow1s ox1s o{1s ots1s
°分别置 xs °量瓶中 o加超纯水至刻度 o摇匀 ∀
精密量取 us Λ注入液相色谱仪 o记录峰面积 o以 v
次测定的峰面积平均值做线性回归 o结果为 }Ψ
u1ux n uz1sv Ξkρ s1||| zl o表明在 v ∗ vs Λª#°pt
峰面积与含量呈良好的线性关系 ∀
图 t 石蒜的 °≤ 谱图
1 对照品 ~
1供试品
315 稳定性试验
取 tw1{{ Λª#°pt的加兰他敏对照品溶液 o分别
于 s ou ow oy o{ «时 o精密量取 us Λ注入液相色谱
仪 o记录峰面积 o考察溶液的稳定性 o结果平均峰面
积为 tvy1w{v o ≥⁄s1zu h o即对照品溶液至少在 { «
内稳定 ∀
316 精密度试验
精密吸取 tw1{{ Λª#°pt的加兰他敏对照品溶
液 us Λo重复进样 x次 o测定加兰他敏的峰面积 o结
果 ≥⁄s1z h o表明精密度好 ∀
317 重复性试验
取同一批号ksutstul样品 y份 o按样品含量测
定方法分别测定加兰他敏含量 o平均值为 s1st{ h o
≥⁄s1yx h ∀
318 加样回收率试验
精密称定已知含量的样品 x份k批号为 sutstu o
加兰他敏含量为 s1t{ °ª#ªptl o每份约 s1x ªo精密
加入加兰他敏对照品溶液k含量为 tw{1{ Λª#°ptl
s1x °o照 31112项下方法制备溶液 o按上述色谱条
件测定 o计算回收率 ∀结果见表 t ∀
#wux#
第 vs卷第 z期
ussx年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs o¶¶∏¨ z
³µ¬¯oussx
表 t 石蒜样品中加兰他敏的加样回收率k ν xl
样品量
rª
样品中
含量r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
≥⁄
r h
s1xs{ | s1s|t y s1tyx x ||1v
s1xsy u s1s|t t s1tyw z |{1|
s1xts t s1s|t { s1tyy v tss1t ||1x s1xs
s1xsx y s1s|t s s1tyw { ||1u
s1xsw { s1s|s | s1tyx u ||1|
注 }加入量均为 s1szw z °ª
319 样品测定
分别取供试品溶液及对照品溶液各 us Λo注入
液相色谱仪 o依照色谱条件测定峰面积 o按外标法计
算 ov批样品测定结果见表 u ∀
表 u 样品含量k ν xl
批号 含量r h ≥⁄r h
sutstu s1st{ s1zz
sutsut s1sut s1{u
sutsu{ s1st| s1zw
4 讨论
411 加兰他敏溶于水 !乙醇 !醋酸乙酯 !氯仿等 o用
水提取药粉易糊化 o采用 zs h乙醇提取不完全 o而
用醋酸乙酯或氯仿提取杂质干扰较大 ∀故采用乙醇
提取 o提取率最高且可排除一些杂质干扰 o获得较好
的色谱分离效果 ∀
412 为选择最适提取时间 o分别以索氏提取器加热
回流 t ou ov ow ox «后 o样液进行含量测定 ∀结果表
明 o回流 v «加兰他敏基本提取完全 ∀
413 取同一批样品 x份 o对供试品制备过程中调
³进行了比较 o提取液经垂熔玻璃漏斗过滤后分别
将其 ³调至 { o| ots ott otu o结果 ³为 { o| ots时加
兰他敏的提出率呈梯度增加 o³ 为 ts ott otu时的
提出率基本相同 o趋于稳定 o但 ³ 为 tt otu时杂质
量明显增多 o故确定将其 ³调至 ts ∀
414 曾比较了不同系统和比例的流动相 o有甲醇2
冰醋酸2水 !乙腈2冰醋酸2水 !磷酸缓冲液2甲醇等系
统 ∀结果表明磷酸缓冲液k³ v ∗ wl2甲醇k|vΒzl为
流动相 o加兰他敏与其他杂质之间的分离效果最好 ∀
415 本研究考察了缓冲液 ³对加兰他敏峰与相邻
峰的分离度及其峰形的影响 o当 ³在 v ∗ w时 o加兰
他敏峰峰形明显改善 o同时三乙胺的加入 o保留时间
明显缩短 o柱效显著提高 ∀
≈参考文献
≈t 马广恩 1 加兰他敏治疗老年痴呆的研究概况 1 药学进展 o
t||{ ouukvl }txv1
≈u 方 玲 o郝素娥 o叶铭龙 1 紫外分光光度法测定氢溴酸加兰他
敏片的含量及含量均匀度 1 上海医药 ot||{ ot|k|l }vx1
≈v 张俊梅 o马广恩 o洪山梅 1 石蒜科生物碱的研究 ¿1 薄层色谱
鉴别和高效液相色谱法测定加兰他敏含量 1 药物分析杂志 o
t||| ot|kyl }v||1
∆ετερµινατιον οφ γαλαντηαµινειν βυλβ οφ Λψχορισραδιατα βψ ΡΠ2ΗΠΛΧ
• ƒ¤±ª2¯¬o ¬2½«¨ ±o ∏¬2©¤±ª
( Ζηεϕιανγ Ψιξιν Πηαρµαχευτιχαλ Χο1 ΛΤ∆ , Λανξι vuttss , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«¤ ° ·¨«²§©²µ§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©ª¤¯¤±·«¤°¬±¨ ¬± Λψχορισ ραδιατα1 Μετηοδ : °≤ ¶¨³¤µ¤·¬²± º¤¶
¦¤µµ¬¨§²± ¤¦²¯∏°± ²© ⁄≥ kw1y °° ≅ txs °° ox Λ°l oº¬·«·«¨ °²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ ²©³«²¶³«¤·¨ ¥∏©©¨µk³ v2wl2° ·¨«¤±²¯ k|vΒzl ¤··«¨ ©¯²º
µ¤·¨ ²©t1s °#°¬±pt o¤±§·«¨ §¨·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·«º¤¶¶¨·¤·u{| ±°1 Ρεσυλτ : ¤¯¤±·«¤°¬±¨ µ¨√ ¤¨¯ §¨ ¬¯±¨ ¤µ¬·¼ º¬·«¬±·«¨ µ¤±ª¨ ²©v2vs Λª#
°ptkρ s1||| zl o·«¨ §¨·¨¦·¬²± ¬¯°¬·º¤¶s1v ±ª1 ׫¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¼ º¤¶||1x h k ≥⁄ s1x h l1 Χονχλυσιον : ׫¨ ° ·¨«²§¬¶ ¤¨¶¼·²
²³¨µ¤·¨ ¤±§·«¨ µ¨¶∏¯·¶²©·«¨ §¨·¨µ°¬±¤·¬²± ¤µ¨ ¤¦¦∏µ¤·¨o¬·¦¤± ¥¨ ∏¶¨§·² √¨¤¯∏¤·¨·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ²© Λ1 ραδιατα1
[ Κεψ ωορδσ] °≤ ~ª¤¯¤±·«¤°¬±¨ ~ Λψχορισραδιατα
≈责任编辑 李 禾
#xux#
第 vs卷第 z期
ussx年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs o¶¶∏¨ z
³µ¬¯oussx