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Effects of Puerarin on Fatty Superoxide in Aged Mice Induced by D-galactose

葛根素抗D-半乳糖致衰老小鼠的脂质过氧化作用



全 文 :制 ∀本实验结果表明 }糖微康胶囊治疗组 ‹¥„t¦显
著低于模型组 o具有减轻糖尿病大鼠非酶糖基化 o从
而有改善肾组织缺氧 !保护肾功能的作用 ∀ ≈ 改善
脂代谢 }糖尿病血脂异常升高与糖尿病肾病呈正相
关 o高脂血症是糖尿病肾病的危险因素 ∀本研究提
示 o糖尿病大鼠出现肾损害与脂代谢紊乱程度及病
程有关 ∀治疗前血脂水平升高 o以胆固醇增高为主 o
糖微康治疗后明显下降 ∀提示糖微康能降低血脂是
保护肾功能的重要机制之一 ∀ …改善糖尿病大鼠的
血液流变性 o促进肾脏血液循环 ∀研究提示 o糖微康
小 !中 !大剂量组血液流变学指标 o较模型组显著降
低 ∀
≈参考文献 
≈t  林 兰 q中西医结合糖尿病学 q北京 }中国医药科技出版社 o
t||| qxvv q
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中医 ot||w otx kzl }vuz q
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护作用的实验研究 q中国糖尿病杂志 ot||| ozktl }vx q
≈x  刘 敏 o朱章志 o熊曼琪 o等 q三黄糖肾安对 ≥ם 糖尿病大鼠早
期肾脏病变的影响 q中国医药学报 ot||| otw kul }uy q
≈责任编辑 方文贤 
葛根素抗 ∆2半乳糖致衰老小鼠的脂质过氧化作用
徐晓虹
k浙江师范大学 生命与环境科学学院 o浙江 金华 vutssw l
≈摘要  目的 }探讨葛根素对 ∆2半乳糖致衰老小鼠抗氧化能力的影响 ∀方法 }用 ∆2半乳糖制备衰老模型小
鼠 o同时腹腔注射不同剂量的葛根素给予治疗 ∀六周后 o用开阔行为模型检测小鼠在新异环境中的自发行为 o用紫
外分光光度计和荧光分光光度计分别检测衰老小鼠血清 !脑和肝组织 ≥’⁄o ⁄„ 水平 o以及脑和肝组织脂褐素含
量 ∀结果 }tss °ª#®ªp t和 xs °ª#®ªp t葛根素均可显著增加 ∆2半乳糖致衰老小鼠在新异环境中的自发活动和探究
行为 o可以显著提高衰老小鼠血清 !脑和肝组织 ≥’⁄的活性 o并使衰老小鼠体内  ⁄„ 和脂褐素含量明显下降 ∀
结论 }葛根素可显著提高 ∆2半乳糖致衰老小鼠的抗氧化能力 ∀
≈关键词  葛根素 ~ ∆2半乳糖 ~≥’⁄~  ⁄„ ~脂褐素
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvlst2ssyy2sw
∆2半乳糖致小鼠亚急性衰老模型因其衰老变
化明显 o模型稳定 o在抗衰老研究中被广泛应用≈t  ∀
一般认为 o∆2半乳糖引起的代谢紊乱使机体过氧化
反应增强是其致老化反应的重要因素≈u  ∀葛根素
k³∏¨µ¤µ¬±l是葛根的主要有效成分 o为一种异黄酮化
合物 ∀葛根素具有多种药理作用 o可扩张脑血管 o改
善微循环 o对抗脑缺血再灌注引起的脑损伤≈v  ~对谷
氨酸兴奋毒引起的神经元损伤和星型胶质细胞损伤
均有保护作用≈w ox  ~能治疗动物脑损伤引起的脂质
过氧化反应≈y  ∀那么 o葛根素能否通过抑制 ∆2半乳
糖导致的过氧化反应因而对抗其致衰老作用呢 ‚目
≈收稿日期  ussu2st2ty
≈基金项目  浙江省分析测试基金项目kstus{ l
≈通讯作者  ר¯ }ksxz|lusxuz{t ∞°¤¬¯}­«¬∏¬¬¤²«²±ªƒ ¥·¤2
°¤¬¯q±¨ ·q¦±
前鲜见这方面的报道 ∀本文对这一问题进行了探
讨 ∀
1 材料和方法
1 q1 实验动物和仪器药品 昆明品系 u 月龄小鼠
体重kuz qx ? u qslªoα ⎯ 各半 o浙江省医科院动物中
心提供 ∀ ∆2半乳糖 o上海试剂二厂产品 ∀葛根素注
射液 o 康恩贝集团制药有限公司产品 o批号 }
||s|ts ∀其余药品均为国产分析纯 ∀zxu 紫外分光
光度计k上海分析仪器总厂l o• ƒ2xws 荧光分光光度
计k日本岛津公司l ∀
1 q2 动物分组和衰老模型建立 动物随机分 x 组 }
空白对照组 !∆2半乳糖对照组 !v 种不同剂量的葛根
素治疗组 ∀小鼠适应实验室 v §后 o∆2半乳糖对照
组和葛根素处理组按文献报道的方法建立亚急性衰
老模型≈z  }每日¶¦s qtu ª#®ªp t体重的 ∆2半乳糖k新
#yy#
第 u{卷第 t期
ussv年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o‘²qt
¤±±∏¤µ¼ oussv
鲜配制l ∀空白对照组 ¶¦等量生理盐水 ∀连续 y
周 ∀在以上处理的同时 o分别给 v 个葛根素处理组
¬³us oxs otss °ª#®ªp t体重 v种剂量的葛根素 o空白
对照组和模型组¬³等量生理盐水 o连续 y 周 ∀
1 q3 开阔行为k’³¨ ±©¬¨ §¯¥¨ «¤√¬²µl≈{ 观察 最后 t
次给药后第 u 天进行 ∀开场环境底面划分为 tv 格 o
记录小鼠 v °¬± 内由底面中心开始跑动k ²¯¦²°²2
·¬²±l所穿越的格数k同时记录开始后 t °¬± 内的跑
动格数l o后腿站立kµ¨¤µ¬±ªo包括扶壁和自由站立l
次数 o理毛kªµ²²°¬±ªl次数 ∀比较治疗组与对照组
小鼠在新异环境中自发行为表现的差异 ∀
1 q4 脑组织 ≥’⁄活性的测定 行为检测结束的次
日上午眼眶取血后 o立即断头取全脑和肝脏 o用冰冷
kw ε l生理盐水分别制成 us h 的脑匀浆液和 ts h
的肝匀浆液 o按邻苯三酚自氧化法≈| 用 zxu 紫外分
光光度计测定血清 !脑匀浆液和肝匀浆液中的 ≥’⁄
活性 o检测波长为 vux ±° o数据换算成 ≥’⁄活力单
位 ∀
1 q5 脑组织  ⁄„含量的测定 取血清 !脑匀浆液
和肝匀浆液 o按硫代巴比妥酸法≈ts 用 zxu 紫外分光
光度计测定 o检测波长为 xvu ±° o换算出  ⁄„ 含
量 ∀
1 q6 脑脂褐素含量的测定 按文献报道的方法≈tt 
用荧光分光光度计测定其荧光值k激发波长 vyx
±° o发射波长 wux ±°l o以 t Λª#°p t硫酸奎宁k新
鲜配制l为标准物 o计算每克脑和肝组织的脂褐素含
量 ∀
1 q7 数据处理 各组数据采用 τ检验统计处理 ∀
2 结果
2 q1 葛根素对 ∆2半乳糖致衰老小鼠开阔行为的影
响 从表 t 可知 o在开阔行为中 o模型组小鼠 t ov
°¬±内的跑动格数和后肢站立次数明显少于空白对
照组k Π s .sx 和 Π s qstl o理毛次数也有一定程
度的减少 ∀腹腔注射葛根素后 ov 种剂量的葛根素
对 ∆2半乳糖致衰老小鼠的以上各种开阔行为都有
不同程度的促进作用 o特别是 xs °ª#®ªp t和 tss °ª
#®ªp t的葛根素使衰老小鼠的跑动格数 !站立次数均
显著增加k Π s qsx 和 Π s qstl ∀表明葛根素可增
强 ∆2半乳糖致衰老小鼠在新异环境中的自发活动
和探究行为 ∀
表 t 葛根素对 ∆2半乳糖致衰老小鼠 v分钟内开阔行为的影响k ξ ? σl
组别
剂量
r°ª#®ªp t
ν
跑动格数
t°¬± v°¬±
站立次数 理毛次数
空白对照组 s tu vs qu ? tt q{tl zu qt ? vs qytl ty qt ? z q|ul v qt ? t qz
模型组 s tt tx qx ? y qv vz q{ ? ty qx y qv ? v qz t qz ? t qu
葛根素低剂量组 us tu t{ qz ? { q| wu q{ ? ut qw | qs ? w qt t qz ? t qt
葛根素中剂量组 xs tt u| qz ? ts qztl x{ qx ? t| qwtl tu q{ ? w q|tl t q| ? t qu
葛根素高剂量组 tss tt u| qt ? | qvtl yv q| ? uu q|tl tw qt ? y qzul u qv ? t qy
注 }与 ∆2半乳糖对照组相比 tl Π s .sx u) Π s qst
2 q2 葛根素对 ∆2半乳糖致衰老小鼠血清 !脑和肝
组织 ≥’⁄活性和  ⁄„ 含量的影响 从表 u 可见 o
∆2半乳糖组小鼠血清 !脑和肝组织 ≥’⁄活性明显降
低 o ⁄„ 含量则显著升高 ∀经葛根素处理后 o特别
是 xs otss °ª#®ªp t的葛根素使衰老小鼠体内 ≥’⁄
活性明显回升 o ⁄„ 含量也显著下降 ∀
表 u 葛根素对 ∆2半乳糖致衰老小鼠血清 !脑和肝组织 ≥’⁄活性和  ⁄„ 含量的影响 k ξ ? σl
组别
剂量
r°ª#®ªp t
ν
≥’⁄r˜#°p t
血清
≥’⁄r˜#°ªp t
脑 肝
 ⁄„r±°²¯#°p t
血清 脑 肝
空白对照组 s tt tvv qx ? uy qtul yxt q{ ? ttz qwul {wy qt ? twz qztl y qw{ ? t qutul u qsu ? s qutul v quy ? s qyvtl
模型组 s ts tsw qv ? u{ qz w{w qv ? ttv qz yz| qs ? tvx qz { qvz ? t qyz u qvu ? s qt| v qzw ? s qyu
葛根素低剂量组 us tt tsz qy ? u| qu xux qz ? |x qv yxs qu ? tu| qy { qyt ? t qxv u qu| ? s quv v qxw ? s qxx
葛根素中剂量组 xs ts tu| qs ? vt q{tl x|w qt ? {y qvtl |xw qw ? twu qsul z qst ? t qtutl u qtx ? s quwtl v quz ? s qwytl
葛根素高剂量组 tss ts tvz q{ ? vs qtul yt{ qs ? tsz q|tl |uw qy ? tvw qtul z qtv ? t qs|tl u qtx ? s qt|ul v qtw ? s qvzul
注 }与 ∆2半乳糖对照组相比 tl Π s .sx u) Π s qst
#zy#
第 u{卷第 t期
ussv年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o‘²qt
¤±±∏¤µ¼ oussv
2 q3 葛根素对 ∆2半乳糖致衰老小鼠脑和肝组织脂
褐素含量的影响 从表 v可见 o∆2半乳糖组小鼠脑
和肝组织脂褐素水平均明显升高 o经较高剂量葛根
素处理后 o脂褐素水平则显著降低 ∀
表 v 葛根素对 ∆2半乳糖致衰老小鼠脑和
肝组织脂褐素含量的影响 k ξ ? σl
组别
剂量
°ª#®ªp t
ν
脂褐素rΛª#ªp t组织
脑 肝
空白对照组 s tt ut qx ? w qxtl vsw qy ? wv q|tl
模型组 s tt uy q{ ? x qw vwv qy ? wt qv
葛根素低剂量组 us ts uv qt ? y qs vut qs ? vz qw
葛根素中剂量组 xs ts t| qz ? w quul u|x qv ? w| qwtl
葛根素高剂量组 tss ts t| qy ? v q{ul uys qv ? vw q{ul
注 }与 ∆2半乳糖对照组相比 tl Π s .sx u) Π s qst
3 讨论
∆2半乳糖亚急性中毒法建立的衰老动物模型与
正常老化相似 ∀崔旭等发现 ∆2半乳糖可诱导大 !小
鼠学习记忆功能减退 o使体外培养大鼠胎脑神经元
胞体增长缓慢 o突起脱落 o细胞死亡率升高 o缩短果
蝇和家蝇的平均寿命 o并且认为自由基介导的脂质
过氧化可能是 ∆2半乳糖致老化模型的主要原
因≈tu  ∀本实验复制的 ∆2半乳糖致衰老小鼠行动迟
缓 o在新异环境中的自发活动和探究行为显著减少 o
小鼠皮毛松散无光泽 o体重增加量明显下降 ~同时血
清 !脑和肝组织的 ≥’⁄活性显著降低 o ⁄„ 和脂褐
素水平则明显升高 ∀一般认为给动物连续注射 ∆2
半乳糖后 o因其代谢产物半乳糖醇不能进一步代谢
而堆积在细胞内 o导致细胞肿胀 o致使动物组织细胞
出现衰老时的退行性变以及功能的改变 ∀同时 ∆2
半乳糖在体内氧化产生的大量自由基超过机体的清
除能力 o引发脂质过氧化的链式反应 o并且过氧化脂
质k°’l的分解终产物k如  ⁄„l可与 ⁄‘„ o• ‘„ o
蛋白质 !磷脂等物质结合 o损伤细胞膜 o引起神经系
统的功能障碍≈tv  ∀本实验结果表明 o一定剂量的葛
根素能对抗 ∆2半乳糖的致老化作用 o使衰老鼠的自
发活动明显增多 ∀同时 o体内超氧化物歧化酶
k≥’⁄l活性显著提高 o ⁄„ 和脂褐素水平则下降 ∀
因而推测葛根素可能通过提高体内 ≥’⁄活性k≥’⁄
是清除灭活自由基的重要酶系之一l o增强其对自由
基的清除能力 o抑制脂质过氧化 o减少脂褐素类物质
在脑组织的堆积 o从而起到保护脑组织的作用 o对抗
∆2半乳糖所致衰老退行性变 ∀
≈参考文献 
≈t  张 熙 o李文彬 o张炳烈 q ∆2半乳糖亚急性中毒大鼠拟衰老生
化变化 q中国药理学与毒理学杂志 ot||s owkwl }vs| q
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ª¨ ± ⁄¤°¤ª¨ ¤±§  ∏·¤¬·¬²± ¬± ¬±¦«²±§µ¬¤¯ ⁄‘„ ¬± ‹∏°¤±
‹ ¤¨µ·¶q…¬²¦«¨ ° …¬²³«¼¶• ¶¨≤²°°∏±ot||u ot{|kul }|z| q
≈v  郭建平 o孙其荣 o周 全 q葛根药理作用研究进展 q中草药 o
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≈w  ⁄²±ª° o • ¤±ª × ≠ q∞©©¨ ¦·¶²©°∏¨µ¤µ¬± „ª¤¬±¶·Š¯ ∏¤°¤·¨ ∞¬2
¦¬·²·²¬¬¦¬·¼ ²± ≤∏¯·∏µ¨§  ²∏¶¨ ≤ µ¨¨¥µ¤¯ ≤²µ·¬¦¤¯ ‘¨ ∏µ²±¶q „¦·¤
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和脂质过氧化影响差异的研究 q中国应用生理学杂志 ot||| o
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‘¨ ∏µ²¶¦¬…¬²¥¨ «¤√ • √¨ ot|{x o| }vz q
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由基生物学导论 q合肥 }中国科学技术出版社 ot||| quxy q
Εφφεχτσ οφ Πυεραριν ον Φαττψ Συπεροξιδειν Αγεδ ΜιχεΙνδυχεδ βψ ∆2γαλαχτοσε
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第 u{卷第 t期
ussv年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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[ Κεψ ωορδσ] ³∏¨µ¤µ¬± ~∆2ª¤¯¤¦·²¶¨ ~≥’⁄~  ⁄„ ~ ¬¯³²©∏¶¦¬±
≈责任编辑 方文贤 
化瘀补肾方提取物干预大鼠子宫内膜异位症
洪 敏 o华永庆 o余 黎 o孙小玉 o李晓冬 o朱 荃
k南京中医药大学 规范化中药药理实验室 o江苏 南京 utssu|l
≈摘要  目的 }研究化瘀补肾方k× ≤ ×≥l提取物对内异症模型大鼠的作用 ∀方法 }在手术造成大鼠子宫内膜异位
症模型上 o观察异位内膜组织的重量 !病理变化及血清卵巢激素和垂体激素的变化 ∀结果 }× ≤ ×≥ tt qu ª#®ªp t ouu qx ª
#®ªp t能明显减小异位内移植物重量k抑制率分别为 xs q| h oxv qz h l o内膜移植物腔内面上皮不发达 !固有膜变薄 !固
有膜的基质细胞 !腺体样结构减少或消失 ∀同时 × ≤ ×≥ 能使模型大鼠升高的血清 ∞u oƒ≥‹ o‹ 降低 ∀结论 }表明
× ≤ ×≥提取物能够抑制异位内膜组织的生长 o使其退化 !缩小 ∀并且这种作用与血清激素水平的变化有关 ∀
≈关键词  化瘀补肾方 ~子宫内膜异位症 ~激素
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvlst2ssy|2sw
子宫内膜异位症k内异症l的治疗主要有手术治
疗和药物治疗 o手术治疗由于生育要求等受到很大
限制 ∀现代药物治疗主要是激素或激素调节剂治
疗 o对症治疗通常采用非甾体抗炎镇痛等治疗方法 o
激素的副作用也使其应用受到限制 ∀中医药治疗内
异症积累丰富的临床经验 o本研究在临床经验方的
基础上 o根据化瘀益肾 !舒肝止痛的治则 o拟定了包
括肉桂 !三棱 !莪术 !夏枯草等 {味中药的复方化瘀
补肾方k× ≤ ×≥l o研究了它对子宫内膜异位症模型大
鼠移植异位内膜的影响 o并观察了该复方对模型大
鼠血清激素水平变化的影响以探讨其作用机制 ∀
1 实验材料
1 q1 动物
≥⁄大鼠 o雌性 o南京中医药大学动物中心 o合格
证号 }≥≤ ÷ Žk苏 usst2sssvl ∀
≈收稿日期  ussu2sy2uy
≈基金项目  国家科技部/十五0攻关项目kusst…„zst„u|l
≈通讯作者  ר¯ }ksuxlyz|{t{w
1 q2 试剂
苯甲酸雌二醇 o上海第九制药厂 o批号 ||s{st ~
戊巴比妥钠 o中国医药k集团l上海化学试剂公司 o进
口分装 o|zttsw ∀雌二醇k∞ul !孕酮k°l !卵泡刺激素
kƒ≥‹l !黄体生成素k‹l测定试剂盒 o天津德普公
司放免试剂盒k⁄°≤ • Œ„l ∀其余试剂均为分析纯 ∀
1 q3 处方
肉桂 ≤²µ·¨¬ ≤¬±±¤°²±¬o大黄 • «¬½²°¤ ·¨• ¤§¬¬
• «¨¬°¤¯ °¤·¬o莪术 • «¬½²°¤ ≤∏µ¦∏°¤¨ „ µ¨∏ª¬±²¶¤¨ o
三棱 • «¬½²°¤ ≥³¤µª¤±¬¬≥·²¯²±¬©¨µ¬o延胡索 • «¬½²°¤
≤²µ¼§¤¯¬¶o白芥子 ≥¨° ±¨ ≥¬±¤³¬¶„ ¥¯¤¨ o夏枯草 ≥³¬¦¤
°µ∏±¨ ¯¯¤¨ ∂ ∏¯ª¤µ¬¶o甘草 • ¤§¬¬ Š¯ ¼¦¼µµ«¬½¤¨ ˜µ¤¯ ±¨2
¶¬¶∀药材购于南京中医药大学中西医结合门诊部 o
由王春根教授鉴定 ∀
2 方法
2 q1 × ≤ ×≥的提取制备
肉桂 !莪术提挥发油 !大黄 !三棱 !延胡索用
zs h醇提 o余药及药渣水提 ∀提取物制成干浸膏备
用 ∀v qzx ª#®ªp tk下文所用剂量均以生药表示l ∀
#|y#
第 u{卷第 t期
ussv年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o‘²qt
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