全 文 :ΤηεΙνηιβιτιϖε Εφφεχτ οφ Τεα Πολψπηενολσ ον
Οξιδιζεδ Λοω ∆ενσιτψ Λιποπροτειν Ιντακειν Χυλτυρεδ Ρατ Μεσανγιαλ Χελλσ
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≈责任编辑 古云霞
佛手和枸杞提取物对小鼠
皮肤胶原蛋白 !≥⁄含量及毛发生长的影响
邵邻相
k浙江师范大学 生命与环境科学学院 o浙江 金华 vutsswl
≈摘要 目的 }研究佛手和枸杞提取物对小鼠皮肤和毛发生长的作用 ∀方法 }将佛手和枸杞提取液涂抹于小鼠脱
毛皮肤部位 o观察涂抹部位毛发生长情况 owu §后取涂抹部位皮肤 o测定超氧化物歧化酶 ≥⁄活性 !胶原蛋白和丙二
醛的含量 ∀结果 }与空白对照组比较 o佛手和枸杞提取液都能显著提高小鼠皮肤中 ≥⁄的活性k Π s qsxl o增加皮肤
中胶原蛋白的含量k Π s qsstl o明显减少脂质过氧化产物丙二醛的含量k Π s qsxl o促进毛发的生长k Π s qsstl ∀
结论 }佛手和枸杞提取物具有良好营养皮肤和促进毛发生长的作用 ∀
≈关键词 佛手 ~枸杞 ~皮肤 ~毛发 ~超氧化物歧化酶
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvls{2szyy2sv
佛手又名五指柑 o为芸香科植物佛手柑的果实 ∀
佛手具有理气化痰 !止呕消胀 !舒肝健脾 !和胃等多
种药用功能 ∀佛手的近代药理学研究多侧重于胃
肠 !呼吸系统和心血管系统的研究≈t ou ∀枸杞为茄
科枸杞属植物枸杞或宁夏枸杞的成熟果实 o具有补
≈收稿日期 ussu2sz2vs
≈基金项目 浙江金华市科委资助项目kusst2t2tuxl
≈通讯作者 ר¯ }ksxz|luu{vwss ∞°¤¬¯}¶«¤²¯¬±¬¬¤±ª ¶¬±¤q
¦²°
肾益精 !润肺养肝之功效 o具有抗衰老延寿的作
用≈v ow ∀但有关佛手和枸杞对皮肤组织和毛发生长
的影响鲜见报道 ∀本文着重探讨佛手营养皮肤 !促
进毛发生长的作用 o为佛手在外用药和化妆品方面
的开发利用提供参考 ∀
1 材料和方法
1 q1 材料 佛手购自浙江森禾种业有限公司 ~枸杞
购自金华市医药公司 ∀经本校植物学教研室陈建华
博士分别鉴定为金华佛手 Χιτρυσ µεδιχα q√¤µqσαρ2
χοδαχτψλισ k²²·ql≥º¬±ª¯¨和枸杞 Λψχιυ µ χηινενσε
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第 u{卷第 {期
ussv年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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¬¯¯ µ¨q∀
佛手提取液的制备 }取鲜金华佛手果 yss ªo切
片 o加入蒸馏水 txs °o于榨汁机中充分匀浆 o过
滤 o然后加热蒸发浓缩成 tx °k每毫升提取液相当
于鲜佛手果 ws ªl ∀
枸杞提取液的制备 }取 tss ª干宁夏枸杞子加
入 z倍量蒸馏水 o煮沸 u «o过滤 o滤渣加入 x倍量蒸
馏水继续煮沸 t «o过滤 o合并两次滤液 o加热蒸发浓
缩成 tss °k每毫升提取液相当于 t ª枸杞子l ∀
佛手和枸杞混合液的制备 }取佛手提取液和枸
杞提取液 o按体积 tΒt配成 ∀
1 q2 试剂与仪器 硫代巴比妥酸k×
l !连苯三
酚为 ≥¬ª°¤公司产品 ~羟脯氨酸 !氯胺 × o过氯酸 o对
二氨基苯甲醛 o乙二胺四乙酸二钠 o正丁醇等均为国
产分析纯 ∀zxus紫外分光光度计 o
¨ ¦®°¤±低温高
速离心机 ∀
1 q3 动物处理 ≤ 小鼠 ws只 o鼠龄 y ∗ {周 o体
重为kuu q{ ? u qxl ªo清洁级 o雌雄各半 o由金华市实
验动物饲养中心提供 ∀先分雌雄 o按体重随机分为
o
o≤ o⁄ w组 ∀背部脱毛 o暴露约 u ¦°u皮肤 o组
涂蒸馏水 o
组涂佛手提取液 o≤ 组涂枸杞提取液 o⁄
组涂佛手和枸杞混合液 ∀每天 t次 o连续涂试验品
wu §后处死 o立刻取涂抹部位皮肤用于测定 ≥⁄活
性 !胶原蛋白和丙二醛的含量 ∀
1 q4 胶原蛋白的测定 取涂抹部位皮肤 o刮去皮
下脂肪 o乙醚吸干后剪成碎块 o精密称取 us °ª做试
样品 o置于 ts °具塞刻度试管中 o加 u °y °²¯#
pt ≤¯混匀 o密塞后 o放于 tux ε 恒温酸解 v «o调
³ y o加水定容至 ts qs °o取 s qt °水解液按氯
胺 × 氧化法≈x 测定羟脯氨酸的含量 ∀样品中胶原
蛋白的含量以胶原蛋白中羟脯氨酸含量为 tv h进
行计算 ∀
1 q5 ≥⁄活性和丙二醛含量的测定 取涂抹部位
皮肤 o电子天平称重 ∀按 tΒtskt ª皮肤组织加入 ts
°蒸馏水l匀浆 ∀取 tss Λ匀浆液用于丙二醛的
测定 o一部分在 w ε 下 ts sss µ#°¬±p t离心 ts °¬±o
取上清液用于 ≥⁄含量的测定 ∀连苯三酚自氧化
法≈y 测定 ≥⁄的活性 ~ ⁄2×
比色法≈z 测定丙
二醛的含量 ∀
1 q6 毛发长度评分及测量 按文献≈{ 方法对每
只小鼠进行毛发长度评分及测量 ∀自涂佛手和枸杞
提取液后 o隔日对每小鼠脱毛区新毛生长状况评分
t次 o连续观察 ty §∀评分标准为 }≠ 无毛生长为 s
分 ~浅毛生长满脱毛区为 t分 ~≈新生毛长度及密
度为未脱毛区的一半为 u分 ~…新毛生长与未脱毛
区无差别为 v分 ∀在涂佛手和枸杞提取液后第 ty
§o每只小鼠背部脱毛区相同位置取毛 ts根 o放大镜
下用游标卡尺量长度 ∀
1 q7 统计方法 统计数据用 ∞¬¦¨¯软件进行成对
τ检验 ∀
2 结果
2 q1 佛手和枸杞对小鼠皮肤中 ≥⁄活性和丙二醛
含量的影响 与对照组相比较 o佛手提取液 !枸杞
提取液和两者混合液均能显著提高皮肤中 ≥⁄活
性 o降低丙二醛的含量 ∀但佛手组 !枸杞组和佛手枸
杞组三者之间在 ≥⁄活性 !丙二醛含量上无显著差
异 ∀见表 t ∀
表 t 佛手和枸杞对小鼠皮肤
中 ≥⁄活性和丙二醛含量的影响k ν ts o ξ ? σl
组别
≥⁄活性
r#ªp t
丙二醛
rΛª#ªp t
对照组 ust qx ? ut qu v qxu ? s qxs
佛手组 uuw qy ? uy q{tl u q{s ? s qx{tl
枸杞组 uux qt ? u{ qytl u q{{ ? s qwutl
佛手枸杞组 uuy qv ? u| qxtl u qzx ? s qvutl
注 }与对照组相比 tl Π s qsx
2 q2 佛手和枸杞对小鼠皮肤胶原蛋白含量的影响
与对照组相比较 o佛手提取液 !枸杞提取液和两
者混合液均能极显著增加皮肤组织中胶原蛋白的含
量 ∀而佛手 !枸杞和两者混合液三者之间皮肤组织
中胶原蛋白的含量无显著差异 ∀见表 u ∀
表 u 佛手和枸杞对小鼠皮肤中
胶原蛋白含量的影响k ν ts , ξ ? σl °ª#ªp t
组别 羟脯氨酸 胶原蛋白
对照组 vy qxu ? y qvu u{s q|x ? w{ qyx
佛手组 xw qvu ? { qzuul wtz q|s ? yz qtzul
枸杞组 xx qyy ? w qtzul wu{ qt| ? vu qtwul
佛手枸杞组 xy qvt ? v qzuul wvv qt{ ? u{ qyuul
注 }与对照组相比 ul Π s qsst
2 q3 佛手和枸杞对小鼠毛发生长的影响 涂佛手
和枸杞提取液后第 ty §对小鼠新生毛长度测量表
明 o对照组kv qu ? t qwl °° o佛手组ky qx ? u qzl
°° o枸杞组kz qt ? t q{l °° o佛手枸杞组kz qu ?
u q|l °° o佛手 !枸杞和两者混合液组小鼠新生毛
的长度均明显地长于对照组k Π s qsstl ∀而 v种
试验品之间新生毛长度无明显差异 ∀
#zyz#
第 u{卷第 {期
ussv年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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观察脱毛区新生毛的生长过程k见图 tl表明 o
佛手和枸杞都促进小鼠新生毛的生长 o混合液优于
佛手和枸杞的单一组分 ∀
图 t 佛手和枸杞对小鼠毛发生长过程的影响
3 讨论
生物体内的活性氧自由基是细胞氧化代谢的产
物 o它不断的产生 o同时又不断的被清除 o因此在正
常生理条件下是处于动态平衡状态 ∀随着机体的衰
老 o体内组织细胞中自由基代谢平衡失调 o机体对自
由基的防御能力下降 ∀过量的自由基能引起结缔组
织中胶原蛋白的相互交联 o导致胶原蛋白溶解度降
低 o胶原代谢降低 o胶原组织中游离肽或结合肽中的
羟脯氨酸含量降低 ∀过量的自由基可使生物膜脂质
双层中的不饱和脂肪酸过氧化生成产物丙二醛
k ⁄l o从而使膜功能和结构发生障碍 ∀超氧化物
歧化酶k≥⁄l是需氧生物体内唯一以氧自由基为底
物的酶 o清除超氧化物阴离子自由基 o从而使机体细
胞和组织免受伤害 ∀结果表明佛手和枸杞提取液都
显著提高小鼠皮肤中 ≥⁄的活性 o增加皮肤中胶原
蛋白含量 o减少脂质过氧化产物丙二醛的含量 o说明
佛手和枸杞提取物具有延缓皮肤衰老的作用 ∀
毛发的生长不仅要受到生长区域外部各种不良
因子的影响 o而且与毛发生长区的血液循环 !毛囊生
长及皮脂腺分泌代谢有很大的关系 ∀佛手和枸杞提
取液显著地促进脱毛区新生毛的生长 o体现佛手和
枸杞都具有活血作用 o改善皮肤新陈代谢 o促进皮肤
的血液循环 ∀说明佛手和枸杞提取物具有良好的促
进毛发生长的作用 ∀
佛手 !枸杞单用时 o两者对小鼠皮肤中 ≥⁄活
性 !丙二醛和胶原蛋白含量无明显差异 o且佛手 !枸
杞单用与两者合用k佛手提取液和枸杞提取液 o按体
积 tΒt配成l无差异 o提示两者作用皮肤的生理机制
和药理作用相似 ∀
≈参考文献
≈t 王浴生 o邓文龙 o薛春生 q中药药理与应用 q第 u版 q北京 }人民
卫生出版社 ousss qxxz q
≈u 徐晓虹 o金晓玲 o章子贵 q金华佛手提取液对小鼠记忆 !耐力和
免疫机能的影响 q浙江师范大学学报 ousss ouvkul }t{s q
≈v 徐曼妮 o第欣文 o徐思红 q枸杞胶囊对果蝇的延缓衰老的作用 q
同济大学学报k医学版l ousst ouukwl }y otv q
≈w 张 敏 o赵太济 o张新华 o等 q枸杞子抗衰老保肝等实验研究综
述 q时珍国医国药 ousss ottkwl }vzv q
≈x 李 鹃 o李 静 o吕春平 q黄芪抗皮肤衰老作用实验研究 q日用
化学工业 ousss ouktl }yt q
≈y 谢卫华 o姚菊芳 o袁勤生 q连苯三酚自氧化测定超氧化物歧化
酶活性的改进 q医药工业 ot|{{ ot|kxl }utz q
≈z 李仪奎 o王钦茂 q中药药理实验方法学 q上海 }上海科学技术出
版社 ot||t qusv q
≈{ 陈 勤 q中药美容保健品的研究与开发 q北京 }中国医药科技
出版社 ot||| qusx q
Εφφεχτσ οφ τηε Εξτραχτ φροµ
Βεργαµ οτ ανδ Βοξτηορν ον τηε ∆ελαψ οφ Σκιν Αγινγ ανδ Ηαιρ Γροωτη ιν Μιχε
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第 u{卷第 {期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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≈责任编辑 古云霞
血汗净口服液对小鼠免疫功能的影响
秦大莲 o肖顺汉 o章 卓 o李 华 o李 亮 o黄兴武
k泸州医学院 药理教研室 o四川 泸州 ywysssl
≈摘要 目的 }观察血汗净口服液对小鼠免疫功能的影响 ∀方法 }测定胸腺 !脾重量和腹腔巨噬细胞吞噬功能 ~并
用微量全血法 !免疫比浊法和 × × 染色法 o分别观察溶血素抗体 !血清免疫球蛋白和补体产生及 × 淋巴细胞增殖状
况 ∀结果 }血汗净口服液能提高胸腺 !脾指数和腹腔巨噬细胞吞噬率 ~增加血清免疫球蛋白kª和 ª l的含量 o并促
进溶血素抗体的生成和 × 淋巴细胞的增殖 ∀结论 }血汗净口服液能增强小鼠的免疫功能 ∀
≈关键词 血汗净口服液 ~小鼠 ~免疫功能
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvls{2szy|2sv
血汗净口服液为燕麦草k原植物名野燕麦 oΑϖε2
να φατυα ql的水煎醇沉口服制剂 o燕麦草在川渝
一带常用于治疗吐血 !咯血 !血崩及失血后体弱 !盗
汗 !自汗等症 ∀中医认为 }上述诸症均与肝肾阴虚 !
脾不统血 !气血亏虚有关 ∀现代医学认为各种虚证
与机体免疫力低下有关 ∀研究发现 o失血过多会导
致机体免疫力下降≈t ou ∀而燕麦草有收敛止血 !固
表止汗 !温补之功效≈v o由此推测由燕麦草制成的
血汗净可能具有增强机体免疫功能作用 ∀
1 材 料
1 q1 动物 小鼠 o体重kty ? ul ªo雌雄各半 o
由泸州医学院动物科提供 ∀
1 q2 药品与试剂 血汗净 os qssw ª#pt o由泸州医
学院药物研究所提供 o批号 ||sysz o临用时稀释 w
倍 ~黄芪精 ots °r支 o江苏杨子江药业有限公司生
产 o批号 ussts{st ~ ° 2tyws培养液k美国 ¬¥¦²
公司产品l ~四甲基偶氮唑盐k × ×l染液k瑞士 ƒ ∏¯2
®¤¦«¨ °¬¦公司l ~抗小鼠 ª oª oª 抗体及
抗体标准品 o补体 ≤v o≤w试剂盒k上海生物制品研究
所l ∀
1 q3 仪器 zuu分光光度计 o上海精密仪器有限公
司仪器总厂生产 ~∞≥2型电子分析天平 o沈阳龙腾电
≈收稿日期 ussu2s{2us
≈基金项目 四川省教委资助项目k|y2w2{l
≈通讯作者 ר¯ }ks{vslvtytyzv ∞2°¤¬¯} ¬´±§¤¯¬¤± ¶²«∏q¦²°
子称量有限公司生产 ~∞÷2{ss 型酶标仪 o美国
2×∞公司生产 ∀
2 方法
2 q1 分组及给药 各项实验分别取 ws只小鼠 o随
机分为血汗净 { q|x otz q|s ovx q{t ª#®ªp t组k每 t
°含生药 t ªl o黄芪精 tz q| °#®ªp t和对照组 o给
药组连续灌胃给药 z §o对照组给等容量的生理盐
水 o末次药后 u «o进行实验 ∀
2 q2 对小鼠免疫器官的影响 根据文献≈w 取胸
腺和脾脏称重 o并计算胸腺指数及脾指数 ∀
2 q3 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 根据
文献≈w o用油镜观察并记录 uss个巨噬细胞中所吞
噬鸡红细胞的巨噬细胞数和被吞噬的鸡红细胞数 o
计算出吞噬百分率 !吞噬指数 ∀
吞噬率k h l 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数russ个巨噬
细胞 ≅ tss h
吞噬指数 被吞噬的鸡红细胞数总数russ个巨噬细胞
2 q4 对小鼠血清免疫球蛋白 !补体的影响 采用速
率散射免疫比浊法 o取血按说明书测定血清免疫球
蛋白 ª oª oª o补体 ≤v o≤w ∀
2 q5 对小鼠溶血素生成的影响 采用微量全血
法≈x o取血测溶血素生成量 o以 值表示 ∀
2 q6 对小鼠淋巴细胞增殖的影响 采用微量全血
× ×染色法≈y o取血加 ° 2tyws o培养 y{ «o再
加 × × 继续培养 y «o然后加入适量酸性异丙醇混
#|yz#
第 u{卷第 {期
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