全 文 ：谱法等 o其中以成像法和薄层色谱法使用较为普
遍≈x o因此我们采用简便有效的成像法和薄层色谱
法进行鉴别 ∀
2 q5 q1 显微成像法 取含挥发油的包合物与按制
备方法制备的不加任何药物的空白包合物各少许 o
用水装片置光学显微镜下观察kts ≅ ts倍l o结果 }
空白包合物为规则的半透明板状结晶 o含油的包合
物为不规则的粉末状或内含黑色物质的不透明的块
状物 ∀证明挥发油与 Β2环糊精确已形成包合物 ∀
2 q5 q2 薄层层析法 将挥发油和回收后的挥发油
加无水乙醇溶液kxs h oς/ ςl oΒ2环糊精及 Β2环糊精
挥发油包合物制成饱和溶液 o吸取上述 w种溶液各
ts Λ分别点于同一硅胶 薄层板上 o以正己烷2氯
仿kvΒul为展开剂展开 o喷以 x h香草硫酸溶液 otsx
ε 烘至斑点显色清晰 o羌活挥发油和回收后的挥发
油分别显 w个相同颜色的斑点 oΒ2环糊精挥发油包
合物和 Β2环糊精都在原点未展开 o表明挥发油包合
后确已形成包合物而非混合物 ∀
2 q6 加速试验
分别将挥发油包合后干法制粒的颗粒k定量加
入含 u °油的包合物l和将挥发油直接喷洒制备的
颗粒k定量加入 u °油l各 us ª放置于蒸发皿中 o
于 ys ε 恒温箱烘 w{ «o取出 o作为加速试验样品 o测
定挥发油保留率 ∀挥发油经包合保留了 |w h o ≥⁄
s qw| h k ν vl ~不经包合的保留了 tv qx h o ≥⁄
v qz h k ν vl ∀
3 小结与讨论
3 q1 本实验通过 v种包合方法的比较 o胶体磨法的
挥发油利用率较高 o并且从生产操作来说此法最为
实用 o较搅拌法 !超声法快速 !简便 o尤其适合工业化
生产 ∀
3 q2 挥发油经 Β2环糊精包合后能增加挥发油的溶
解性 o降低其挥发性 o并且通过加速实验表明 o包合
后能大大提高制剂的稳定性和挥发油的利用率 ∀
3 q3 挥发油包合物的物相鉴别 o显微镜成像为不规
则的粉末状或内含黑色物质的不透明的块状物 o薄
层层析表明包合物在原点未被展开 o此外通过加速
实验后 o包合后挥发油的保留率为 |w h o未经包合
的挥发油的保留率为 tv qx h o以上说明确已形成包
合物而非混合物 ∀
≈参考文献
≈t 郑虎占 o董泽宏 o余 靖 q中药现代研究与应用 q北京 }学苑出版
社 ot||{ qvssx q
≈u 何 进 o毕殿洲 o刘宝庆 q大蒜油 Β2环糊精包合物的稳定性考
察 q中国药学杂志 ot||z ovukwl }uty q
≈v 张春华 q数理统计方法 q山东 }山东大学出版社 ot||x qtxt q
≈w 张典瑞 o张兆旺 o孙秀梅 q四神茶挥发油 Β2环糊精包合物的实验
研究 q中成药 ot||{ ouskttl }v q
≈x 白云娥 o漆小梅 qΒ2环糊精在中药方面的应用 q中国医院药学杂
志 ousss ouskwl }uvz q
≈责任编辑 李 禾
高效毛细管电泳法测定脑得生胶囊中葛根素含量
张 琦u o赵 因t
kt q四川恩威中医药研究所 o四川 成都 ytsswt ~u q西南民族学院 o四川 成都 ytsswtl
≈摘要 目的 }采用高效毛细管电泳法的毛细管区带电泳k≤∞l模式分离测定脑得生胶囊中葛根素含量并与
°≤ 法测定结果比较 ∀方法 }电泳分离条件 }毛细管柱 zx Λ° ≅ yw qx ¦°k有效长度 xy ¦°l ~运行缓冲液 }硼酸2硼
砂缓冲系统k³ | quwl ~压力进样 us ®°¤~运行电压 tx ®∂ k n l p k p l ~柱上检测 Κ uyt ±° ~毛细管柱温 us ε ∀
结果 }葛根素进样浓度在 v qstu ∗ vy qtx Λª#°p t线性关系良好 oρ s q|||z o平均加样回收率为 tsu qv h o ≥⁄
u qt{ h k± yl ∀结论 }该法可用于脑得生胶囊的质量控制 ∀
≈关键词 ≤∞ ~葛根素 ~脑得生胶囊
≈中图分类号 u{v ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsu2stts2sw
≈收稿日期 usss2s{2tx
≈作者通讯 电话 }ksu{lxt{tvzs
#stt#
第 uz卷第 u期
ussu年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qu
ƒ ¥¨qoussu
脑得生胶囊系5中国药典6成方制剂脑得生片的
剂改产品 o方中葛根含有多种异黄酮类化合物 o如葛
根素k³∏¨µ¤µ¬±l !木糖苷k³∏¨µ¤µ¬±¬¼¯ ²¶¬§¨ l !大豆黄
酮k§¤¬§½¨ ¬±l !大豆黄酮苷k§¤¬§½¬±l等 ∀具有代表性
的有效成分葛根素的含量测定方法主要有紫外分光
光度法 !薄层层析2比色法 !高效液相色谱法
k°≤l !薄层扫描法k×≤≥l等≈t ∀本文报道用高
效毛细管电泳法分离测定脑得生胶囊中葛根素的含
量 ∀其结果与 °≤法相比无显著性差异kΑ
s qsxl o但本法具有柱子不易污染 !有机溶剂消耗少 !
分析费用低廉等优点 o可用于生产的快速常规检测 ∀
1 仪器与实验条件
°≤∞}惠普 v⁄≤∞毛细管电泳仪k附二极管阵
列检测器及惠普色谱工作站l o融熔石英毛细管 zx
Λ° ≅ yw qx ¦°k有效长度 xy ¦°l k河北永年光纤
厂l ~检测波长 uyt ±° ~压力进样 us ®°¤~运行电压
tx ®∂ k n l p k p l o柱温 us ε o缓冲液 }硼酸2硼砂缓
冲系统k³ | quwl ∀每次进样前分别用 s qt °²¯ #
pt¤ o水及缓冲液冲洗毛细管 t ou ov °¬±∀
°≤ } • ¤·¨µ¶xtx色谱泵 ~• ¤·¨µ¶w{y紫外检
测器 ~• ¤·¨µ¶柱温箱 ~工作站 }¦«µ²°·¨®色谱数据系
统 ∀ • ¤·¨µ¶²√¤2°¤® ≤t{柱kv q| °° ≅ txs °°l ~
• ¤·¨µ¶²√¤2°¤® ≤t{保护柱 ∀流动相甲醇Βt h 冰
乙酸水溶液kuxΒzxl ~流速 s qx °# °¬±p t ~检测波
长 uzs ±° ~柱温 vs ε ~ ƒ≥ s qt ∀
赛多利斯
° uts⁄型 trts万电子分析天平 ~台
式冷冻高速离心机k德国贺利氏
¬²©∏ª¨ u{ ≥l ~雷磁
³酸度计k上海分析仪器厂l ~过滤装置k津腾牌l及
微孔滤膜ks qwx Λ°l ∀
2 试剂和药品
葛根素对照品k供含量测定用化学对照品l由中
国药品生物制品检定所提供 ~脑得生胶囊系本公司
研究所进行剂改的研制样品 o所用葛根原料经华西
医科大学药学院生药教研室王曙副教授鉴定为粉葛
Πυεραρια τηοµσονιι
¨ ±·«q~葛根购于成都中药材站
及成都荷花池中药材市场 ∀脑得生片剂为市售品 o
乙腈为色谱纯 o水为高纯水k购于西南物理研究所l o
其余试剂均为分析纯 ∀
3 实验方法与结果
3 q1 葛根素的紫外吸收光谱 用二极管阵列检测
器k⁄⁄l在线检测对照品和样品中葛根素在硼酸2
硼砂缓冲系统中的光谱 o确定葛根素在 uyt ±°处有
最大吸收峰 o故采用 uyt ±°波长检测 ∀
3 q2 方法可行性考察 取葛根素对照品 !空白样品
k缺葛根脑得生样品l !葛根药材和脑得生胶囊供试
品分别制备成对照品溶液 !空白对照溶液和供试品
溶液 o在 1 q1 项实验条件下测得 w种溶液电泳分离
图谱 o见图 t ∀
图 t 葛根及脑得生胶囊高效毛细管电泳图
q葛根药材
q脑得生胶囊
≤ q葛根素对照品 ⁄q空白样品 ¤q葛根素
3 q3 标准曲线及最低检测限 精密称取葛根素对
照品 2 qwt °ªo用提取液溶解定容至 ts °o精密吸
取 s qux os qx ot qs ot qx ou qs ou qx ov qs °o加入内标
物k对羟基苯甲酸乙酯l适量 o分别配制成浓度为 v q
stu oy qsux otu qsx ot{ qszx ouw qts ovs qtux ovy qtx °ª
#pt的葛根素标准溶液 o以葛根素与内标物峰面积
比k Α¶r Α¶¬l对葛根素标准液浓度k °ª#p tl作标
准曲线 ∀其回归方程为 Α¶r Α¶¬ s qsxw|xz Χ n
s .stt|sy , ρ s q|||z o线性关系良好 ∀当进样量为
us ®°¤时 o以信噪比等于 v计 o葛根素的最低检测
限为 s qysu °ª#pt ∀
3 q4 ≤∞测定脑得生胶囊中葛根素的条件优化
3 q4 q1 运行电压的选择k制备欧姆定律曲线l 分
离体系最佳外加电压值与缓冲溶液浓度k离子强度
l及毛细管内径和长度有关 o为了尽可能使用高电压
而不产生过多的焦耳热 o我们作了欧姆定律曲线k2
∂ 曲线l ∀取硼酸2硼砂缓冲溶液 o按不同设置的运
行电压kv ox o{ ots otv otx ot{ ous ouv ou{ ®∂ l测试其
电流值 o结果分别为 tt qw ot| qu ovt qw ows qs oxv qx o
yv qs oz| q{ o|v qs ottw qv otvu qs Λ ∀据此绘制成欧
姆定律曲线k见图 ul ∀由图 u 可知当电压大于 tx
®∂ 时开始偏离线性段 o其相应的电流偏大 o故确定
tx ®∂ 为操作电压 ∀
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图 u 硼酸2硼砂缓冲液的 ®∂2Λ关系图
3 q4 q2 缓冲溶液 ³ 值对分离的影响 用不同 ³
值的硼酸2硼砂缓冲系统k³ z qvy ∗ | quwl o对同一
供试品进行分析 o考察 ³ 范围对分析行为的影响 ∀
结果其样品目标峰的迁移时间随操作缓冲液的 ³
值增加而增加k见图 vl o其原因系苯环上羟基随 ³
值的增加而解离度增加 ∀但内标峰的增加幅度更
大 o故当 ³ 值大于 { qy时 o其内标峰从葛根素峰的
前面移至后面 ∀
图 v 缓冲液 ³ 值的优选
¤q葛根素 ¥q内标k图 w同l
综合考虑葛根素峰 !内标峰 !杂质峰的分离情况
和分析时间 o确定硼酸2硼砂缓冲系统的³值为
| quw ∀
3 q4 q3 缓冲溶液离子强度筛选 分别取不同浓度
kux ∗ zs °°²¯#ptl硼酸2硼砂缓冲溶液测定同一脑
得生胶囊供试液 o其迁移时间随操作缓冲液的离子
强度增加而增加k见图 wl ∀考虑到葛根素 !内标和杂
质的分离度和峰形等因素 o选择 xs °°²¯#pt硼酸2
硼砂缓冲溶液为分析缓冲液 ∀
图 w 缓冲溶液离子强度与迁移时间的关系
3 q5 样品测定方法 将 ts 粒脑得生胶囊内容物
k每粒 s qw ªl于乳钵之中研细 o取 s qsux ª左右 o精密
称定 o加内标 t °oyy h乙腈k含 s qw h ¤≤ l¯提取液
| °o超声波溶解提取 tx °¬±o高速离心kty sss ªl
{ °¬±o取上清液经 s qwx Λ°滤膜过滤后上毛细管电
泳仪分析测定 ∀葛根药材和脑得生片除超声时间为
vs °¬±外 o其余同脑得生胶囊 ∀
3 q6 精密度试验 对同一脑得生胶囊供试品溶液
分别连续进样x次 o测得峰面积比分别为t qyyw o
t qy{s ot qyyx ot qyxw ot qyyv o ≥⁄ s qxy h ~对同一
葛根素对照品溶液分别连续进样 x次 o测得峰面积
比的 ≥⁄ s q{| h ∀
3 q7 重现性实验 称取脑得生胶囊 k 批号为
|zswtz ls qsux ªo精密称定 o平行操作 x份 o按样品
测定方法项下分析 o含量分别为tu qwv otu qzz o
tu qwu otu qwz otu qzz °ª#ªp t o平均 tu qxz °ª#ªp t o
≥⁄ t qwx h ∀
3 q8 稳定性实验 取葛根素对照品溶液于配制当
日和放置 x §后分别进样 o测得其平均峰面积比值 ξ
u qwsv o ≥⁄ t q|s h k ν wl ∀说明标准品冰箱放
置 x §基本稳定 ∀另取脑得生供试液于当日和次日
分别测定 o其含量为 tt q{z ott q|w °ª#ªp t o说明 uw
«基本稳定 ∀
3 q9 加样回收实验 取已知含量的脑得生胶囊k批
号 |zswtz o随行测定含量为 tu qx| °ª#ªp tl适量 o加
入葛根素标准溶液一定量 o按上法测定 o结果见表
t o其平均回收率为 tsu qv h o ≥⁄ u qt{ h ∀
表 t 脑得生胶囊中葛根素加样回收实验结果
样品量
rª
葛根素含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
s qstvww s qty|t s qtxus s qvuvv tst qw
s qstu|u s qtyux s qtxus s qvt{s tsu qv
s qstyzy s quts{ s qtxus s qvysw |{ qw
s qstvyx s qtztz s qtxus s qvu|u tsv qy
s qsuwuv s qvsw{ s qvsws s qyt{z tsv qv
s qsuxuz s qvtz| s qvsws s qyvyy tsw q{
注 }平均回收率为 tsu qv h o ≥⁄为 u qt{ h
3 q10 样品含量测定结果 测得脑得生胶囊中葛根
素含量见表 u ∀同时测得四川产葛根药材的葛根素
含量为 s q{zu h k ν ul o广西产葛根药材的葛根素
含量随购买地点及等级不同分别为s quxv h o
squyz h os qvv qh os qv{s h os qwvu h os qysx h o
s qyyy h ot qyx h ot q{y h ot q{{ h k ν ul ∀
4 讨论与结论
4 q1 本实验在进行提取溶媒选择时 o曾比较了 yy h
乙腈k含 s qw h ¤≤ l¯提取液≈u o运行缓冲液 o运行缓
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表 u 样品中葛根素含量测定结果 °ª#ªp t
样品名称 批号 ≤∞ °≤
脑得生胶囊 |zszvt tt qx{ tt qtu
脑得生胶囊 |zsttz tv q|u tv qsw
脑得生胶囊 |zswtz tu qsw tt qxx
脑得生片 不详 u qv| u qvs
注 }经成对比较的 τ检验处理 o两种分析结果无显著性差异kΑ
s qsxl
冲液加等量甲醇 o运行缓冲液加等量乙醇 o运行缓冲
液加等量乙腈等不同溶媒的提取效果 o结果以文献
报道的 yy h乙腈k含 s qw h ¤≤ l¯作溶媒提取效果最
佳 ∀
4 q2 在提取方法筛选时 o比较了 tx ovs owx oys ozx
°¬±等不同超声时间对提取效果的影响 o结果超声
时间长短对脑得生胶囊中葛根素的含量影响不大 o
这与本胶囊中葛根系水提制备有关 ∀考虑到脑得生
片等的测定 o故超声时间定为 tx °¬±或 vs °¬±k药
材和脑得生片l ∀
4 q3 本实验用 ≤∞法直接测定脑得生胶囊 o其测
定值与 °≤ 法相比无显著性差异k采用统计学处
理中成对比较的 τ检验 o置信系数 Α s qsxl o但本
法具有有机溶剂消耗少 o自动化程度高 o操作简便 !
分析费用低廉等优点 o可用于脑得生胶囊的质量控
制 ∀
≈参考文献
≈t 李正国 o王宝琴 q葛根及其制剂中异黄酮类成分测定方法的研
究进展 q中药新药与临床药理 ot||| otskxl }vs| q
≈u ≥«¬«¤¥¬ o ∏·¨ × o ¤µ¦¬¤ o ·¨¤¯ q ±¤¯¼¶¬¶²©¶²©¯¤√²±¨ ¶
¥¼ ≤¤³¬¯¯¤µ¼ ∞¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶q ≤«µ²°¤·²ªµ ot||w oy{s }t{t q
≈责任编辑 李 禾
鲜益母草胶囊中水苏碱的含量测定
虞和永t o何 翱u o陈 仙u
kt q浙江大学医学院附属妇产科医院 o浙江 杭州 vtsssy ~
u q浙江大德制药有限公司 o浙江 义乌 vuusssl
≈摘要 目的 }对鲜益母草胶囊进行质量标准的研究 ∀方法 }采用 ×≤≥法对鲜益母草胶囊中的水苏碱进行
含量测定 ∀结果 }鲜益母草胶囊中的水苏碱含量为不少于每粒 z qs°ª∀结论 }以上方法简单 !可靠 !有效地控制了
制剂的质量 ∀
≈关键词 鲜益母草胶囊 ~薄层扫描法 ~盐酸水苏碱
≈中图分类号 u{v ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsu2sttv2su
浙江大德制药有限公司研究的鲜益母草胶囊是
以鲜品益母草k也称童子益母草l为原料的四类新
药 ∀本品为单制剂 o具有调经≈t o促进子宫复原≈u 及
止血作用 o治疗产后腹痛 !产后高血压≈v 等 ∀前人已
对益母草中水苏碱含量测定有过报道≈w ∗ y o现对鲜
益母草胶囊中水苏碱用薄层扫描法进行测定 o该方
法干扰少 o重复性好 o有效地控制了产品质量 ∀
1 仪器和试药
岛津k≤≥2|sssl型薄层扫描仪k岛津l ∀盐酸水
苏碱对照品k中国药品生物制品检定所 o含量测定
用l ∀所用的试剂均为分析纯 ∀
≈收稿日期 usst2tt2tx
≈作者通讯 电话 }ksxztl{zs{zvzs
2 方法与结果
取本品约 t ªo精密称定 o置沙氏提取器中 o加无
水乙醇 ys °o于水浴上加热回流 y «o提取液蒸干 o
残渣加甲醇溶解并定容至 x °o作为供试品溶液 ∀
另取盐酸水苏碱对照品 o加甲醇制成 x °ª#°p t的
溶液 o作为对照品溶液 ∀精密吸取上述供试品溶液
x Λt !对照品溶液 u ow Λt o分别交叉点于同一 s qx h
羧甲基纤维素钠制备的硅胶 薄层板上 o以正丁醇2
盐酸2水kwΒt qxΒs qxl为展开剂 o层析缸预平衡 us
°¬±o上行展开 tu ¦° o取出 o晾干 o喷以改良碘化铋
钾试液 o在薄层上覆盖同样大小的玻璃板 o周围用胶
布固定 o进行扫描 o测定波长 Κ≥ xts ±° oΚ yys
±° o测量供试品吸收度积分值与对照吸收度积分
值 o计算 o即得 ∀
#vtt#
第 uz卷第 u期
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qu
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