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RP-HPLC Determination of Mangiferin in the Leafs of Folium mangiferae Sampled in Different Months and Regions

RP-HPLC法测定芒果叶中芒果苷的含量



全 文 :4 q4 经本实验研究 o半夏药材的鉴别成分次黄嘌呤
核苷为一核苷类成分 o该成分水溶性强 o对热稳定 o
在与其他药材成分的比较中仅半夏药材中含有 o且
在植物体内几乎很少存在 o为何在半夏药材中存在
值得继续研究 ∀本实验小组将继续报告后续研究的
结果 ∀
4 q5 本实验将常与半夏配伍的药材与半夏药材进
行比较 o是从新药研究的角度考虑 o以便为以后含有
半夏的新药的质量控制打下基础 ∀
≈参考文献 
≈t  ≥¤§·¯¨µ• ¶¨¨¤µ¦« ¤¥²µ¤·²µ¬¨¶q≥·¤±§¤µ§Œ±©µ¤µ¨§ °µ¬¶° ≥³¨ ¦·µ¤q
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∆ιστινχτιϖε Χοµ πουνδ ιν Ρηιζοµε οφ Πινελλια τερνατα
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ²¯²®©²µ¤±§§¨·¨µ°¬±¨ ·«¨ §¬¶·¬±¦·¬√¨¦²°³²∏±§¬± Πινελλια τερνατα q Μετηοδ : • ¬·« ׏≤ o ‹°≤ o
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¤±¤¯¼¶¬¶¤±§³«¼¶¬¦²2¦«¨ °¬¦¤¯ ³µ²³¨µ·¬¨¶qΡεσυλτ : × «¨ ¦²°³²∏±§ º¤¶¬§¨ ±·¬©¬¨§¤¶¬±²¶¬±¨ qΧονχλυσιον : Œ±²¶¬±¨ ¬¶·«¨ §¬¶·¬±¦·¬√¨¦²°2
³²∏±§¬± • «¬½²°¨²© Π. τερνατα o¤±§¬·º¤¶¬¶²¯¤·¨§©µ²° …¤±¬¬¤©²µ·«¨ ©¬µ¶··¬°¨q
[ Κεψ ωορδσ] Πινελλια τερνατα ~§¬¶·¬±¦·¬√¨¦²°³²∏±§
≈责任编辑 李 禾 
• °2‹°≤ 法测定芒果叶中芒果苷的含量
黄海滨 o李学坚 o梁秋云
k广西中医学院 制药厂 o广西 南宁 xvssuvl
≈摘要  目的 }建立芒果叶中芒果苷的含量测定方法 ~测定不同产地和月份芒果叶中芒果苷的含量 ∀方法 }采
用 • °2‹°≤ 法 o内标法定量 o≥«¬° ³¤¦® ≤≤2’⁄≥柱分离 o流动相 }甲醇2s qsx °²¯#p t ‹v°’wk三乙胺调 ³‹ 为 v qxl
yxΒtvw o检测波长 ux{ ±° o柱温为室温 o流速 t °#°¬±p t ∀从广西南宁市 !钦州市和田阳县分别采集芒果叶供试
品 ~测定南宁市 t ∗ tu月份同一株芒果树的芒果叶中芒果苷的含量 ∀结果 }所建立的 • °2‹°≤ 含测方法平均回收
率 || qu h o• ≥⁄€ t qsx h k ν € xl ∀不同产地和月份的芒果叶中芒果苷的含量存在差异 ∀结论 }所建立的 • °2‹°≤
含测方法灵敏度高 o准确 o快速 o专属性强 o重现性好 ∀南宁市和田阳县芒果叶中芒果苷的含量相差不大 o均明显比
钦州的高 ∀z ∗ ts月份的芒果苷含量较高 o最高的为 |月 o最低的为 u月份 ∀
≈关键词  • °2‹°≤ ~芒果叶 ~芒果苷 ~磺胺甲 唑
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvls|2s{v|2sv
芒果叶系漆树科植物芒果 Μανγιφεραινδιχα q
≈收稿日期  ussv2sy2s|
≈基金项目  广西科技厅攻关项目k桂科攻 suvxsuv2{l
≈通讯作者  ר¯ }kszztlx{zzuuw ƒ¤¬}kszztlx{xxt{|
的叶子 o在广西有丰富的资源 o是生产芒果止咳片的
主要原料≈t  ∀研究表明 o芒果苷是芒果叶止咳 !化痰
的主要活性成分≈u  ∀芒果叶为广西地方习用药材 o
收载于5广西中药材标准6t||s年版≈v  o标准中只建
立了/性状0项 o尚未建立含量测定标准 ∀曾有文献
#|v{#
第 u{卷第 |期
ussv年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ |≥ ³¨·¨°¥¨µoussv
报道有关芒果苷的含量测定方法≈w2z  o但关于芒果叶
中芒果苷的含量测定尚未见报道 ∀本文建立反相高
效液相色谱内标法测定芒果叶中芒果苷含量的方
法 o并对不同产地及不同月份的芒果叶进行考察 o为
提高芒果叶的质量标准和进一步研究开发芒果叶 !
开展 Š„°种植提供科学依据 ∀
1 仪器与试药
‹° ttss系列高效液相色谱仪k包括 Š ttvt四
元泵 oŠ tvtv自动进样器 oŠ ttvt脱气机 oŠ tvtw„
紫外可见检测器 oŠ tvty柱温箱 o配备 ‹°工作站l ∀
≤ Š ty2 • 高速微量离心机k北京医用离心机厂l ∀
芒果苷标准对照品 o第二军医大学提供 k经
‹°≤ 检测为单一峰l ∀磺胺甲 唑 o购自中国药品
生物制品检定所k批号 sux2|usul ∀芒果叶 o经广西
中医学院中药鉴定教研室林安平副教授鉴定为 Μ.
ινδιχα的叶子 ∀甲醇为色谱纯 o水为去离子重蒸水 o
其余试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件 ≥«¬° ³¤¦® ≤≤2’⁄≥色谱柱ky qs
°° ≅ txs °° ox Λ°l ~柱温为室温 ~流动相甲醇2
s qsx °²¯#pt ‹v°’wk三乙胺调 ³‹ v qxlyxΒtvw ~流
速 t °# °¬±p t ~检测波长 ux{ ±° ~进样量 ts ˏ∀
此条件下芒果苷理论塔板数不低于 v sss ∀对照品
及样品色谱图见图 t ou ∀
图 t 芒果苷对照品 ‹°≤ 图
t q磺胺甲 唑 u q芒果苷k图 u同l
图 u 样品 ‹°≤ 图
2 q2 溶液的配制
内标溶液的制备 称取磺胺甲 唑适量 o甲醇
溶解 o稀释成 s qxs ª#pt溶液 ∀
对照品溶液的制备 取芒果苷对照品约 us °ªo精
密称定 o置 ux °量瓶中 o加甲醇溶解并稀释至刻
度 o得浓度为 s q{s ª#pt的溶液 ∀
2 q3 线性关系 精密吸取对照品溶液t qs ou qs o
v qs ow qs ox qs °o置 ts °量瓶中 o分别精密加入
w qs °内标溶液 o用甲醇稀释至刻度 o摇匀 !离心 !
进样 ∀以对照品与内标峰面积的比值为纵坐标 o对
照品进样量kΛªl为横坐标进行线性回归 o得回归方
程 }Ψ € t .syx n u .svx Ξ , ρ€ s .||| |( ν € xl ∀结果
表明 }芒果苷在 s q{ ∗ w qs Λª线性关系良好 ∀
2 q4 精密度试验 精密吸取对照品溶液 v qs °和
内标溶液 w qs °o置 ts °量瓶中 o加甲醇稀释至
刻度 ∀在上述色谱条件下 o连续进样 x次 o对照品与
内标峰面积比值的 • ≥⁄为 s qxv h ∀
2 q5 稳定性试验 取同一批供试品溶液 o分别于
s ou ow oy o{ ots otu ouw «对样品进行分析 ∀结果表
明 o芒果叶中芒果苷的峰面积与内标峰面积的比值
变化不大 o• ≥⁄€ s q|{ h o日内稳定性较好 ∀
2 q6 重现性试验 取同一批样品共 x份 o每份 t qs
ªo精密称定 o按/样品测定0项下方法制备供试品溶
液 o测定并计算芒果苷含量 o结果 • ≥⁄为 s qwx h ∀
2 q7 加样回收试验 取已知含量的同一批样品共
x份 o每份 s qx ªo精密称定 ∀分别精密加入对照品 o
按/样品测定0项下方法制备供试品溶液 o测定并计
算芒果苷的含量 o结果见表 t ∀
表 t 芒果叶加样回收率试验测定结果k ν € xl
样品中含量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
• ≥⁄
r h
s qy| t qxs tss qz
s qy{ t qwz || qv
s qy{ t qwy |{ qy || qu t qs
s qyw t qwt |z q|
s qy| t qw{ || qv
注 }加入对照品的量均为 s q{s °ª
2 q8 样品测定 分别取不同月份和不同产地的芒
果叶细粉 t qs ªo精密称定 o置索氏提取器中 o加石油
醚kvs ∗ ys ε ltss °o回流 u «o弃去石油醚 ∀再用
乙醇 tss °回流提取至无色 o将提取液浓缩至干 o
加甲醇溶解 o置 ts °量瓶中 o精密加入内标储备液
w °o加甲醇至刻度 o摇匀 o离心 o按上述色谱条件
测定 o测得样品与内标峰面积之比 o由回归方程计算
出芒果叶中芒果苷的含量 ∀测定结果见表 u ov ∀
#sw{#
第 u{卷第 |期
ussv年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ |≥ ³¨·¨°¥¨µoussv
表 u 南宁市郊芒果叶中芒果苷的含量k ν € vl
月份
平均含量
r h
• ≥⁄
r h 月份
平均含量
r h
• ≥⁄
r h
t t qws s q{| u t qvx t qv
v t qwt t qt w t qws t qt
x t qwz s q|u y t qxs t qs
z t qzs t qw { t qzw t qu
| t q{v t qt ts t qzw s q||
tt t qxz t qu tu t qww t qu
表 v 不同产地芒果叶中芒果苷含量测定结果kx月l
k ν € vl
产地 平均含量r h • ≥⁄r h
广西南宁市 t q{v s q|v
广西田阳县 t q|u t qs
广西钦州市 t qxv t qu
3 讨论
3 q1 利用反相高效液相色谱法测定芒果叶中芒果
苷含量具有灵敏度高 !快速 !准确 !专属性强 !重现性
好的特点 ~选定的流动相对芒果苷 !内标及杂质有良
好的分离效果 ∀
3 q2 提取方法的选择 o曾对渗漉法 !热回流法和索
氏提取法等方法进行考察 o结果表明 o索氏提取法中
芒果苷得率最高 o且操作简便 ~曾用乙醇对样品进行
直接提取及制备供试液 o结果发现溶剂及杂质峰干
扰严重 o而用石油醚对样品进行处理 o其除杂质效果
显著 o用甲醇制备供试液溶剂峰干扰较小 ∀
3 q3 南宁市和/芒果之乡0田阳县的芒果叶中芒果
苷的含量差异不大 o但与钦州市的有一定的差异 ∀
提示选购原料时应考虑不同产地的差异 o至于其差
异的原因有待今后进一步研究 ∀
3 q4 z ∗ ts月份的芒果叶中芒果苷含量较高 o此期
间已完成果实采收 o为修枝 !培土 !施肥的养护期 o可
大量利用修枝剪下的叶子 ∀芒果苷含量最高的为 |
月份 o最低的为 u月份 ∀这为药材采收提供了参考 ∀
≈参考文献 
≈t  中国卫生部药典委员会 q药品标准k中药成方制剂第五分册l q
t||u qxs q
≈u  邓家刚 o郑作文 o曾春晖 q芒果苷的药效学实验研究 q中医药学
刊 oussu ozktul }vz q
≈v  广西壮族自治区卫生厅 q广西中药材标准 q广西 }广西科学技术
出版社 ot||s qxw q
≈w  李 洁 o童玉懿 q石韦有效成分的高效液相色谱测定 q药学学
报 ot||u ou|kul }txv q
≈x  刘华钢 o黄海滨 o陈燕军 q‹°≤ 法测定芒果止咳片中芒果甙的
含量 q中成药 ot||z ot|ktsl }tw q
≈y  刘训红 o潘金火 o王玉玺 q晶珠肝泰舒胶囊的质量标准研究 q中
国药学杂志 ousss okvl }t|y q
≈z  戴荣华 o高 钧 o王 玺 o等 q反相高效液相色谱法测定滋肾丸
中芒果苷 !盐酸小檗碱含量 q沈阳药科大学学报 oussu okxl }
vvu q
ΡΠ2ΗΠΛΧ ∆ετερµινατιον οφ Μανγιφεριν ιν τηε Λεαφσ οφ Φολιυµ µ ανγιφεραε
Σαµ πλεδ ιν ∆ιφφερεντ Μοντησ ανδ Ρεγιονσ
‹ ˜„‘Š ‹¤¬2¥¬±oŒ ÷∏¨2­¬¤± oŒ‘Š ±¬∏2¼∏±
k°«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¤¯ ©¤¦·²µ¼ ²© Š∏¤±ª¬¬×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨  §¨¬¦¤¯ ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o ‘¤±±¬±ª xvssuv o Š∏¤±ª¬¬o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ §¨ √¨¯²³¤ ±¨ º ° ·¨«²§©²µ§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²© ¤±ª¬©¨µ¬±¬± ·«¨ ¯¨ ¤©¶²© Φολιυ µ µ ανγιφεραε q…¼ ·«¬¶
±¨ º ° ·¨«²§o ¤±ª¬©¨µ¬±¬± Φ. µ ανγιφεραε ¶¤°³¯ §¨¬± §¬©©¨ µ¨±·°²±·«¶¤±§¬± §¬©©¨ µ¨±·µ¨ª¬²±¶º¤¶§¨·¨µ°¬±¤·¨§q Μετηοδ : „ • °2
‹°≤ ° ·¨«²§ º¤¶¶¨·∏³o∏¶¬±ª≥«¬° ³¤¦® ≤≤2’⁄≥ ¦²¯∏°± o ° ·¨«¤±²¯2s qsx °²¯#p t ‹v°’wkyxΒtvw o³‹ v qxl ¤¶°²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ o
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Š∏¤±ª¬¬³µ²√¬±¦¨ ¤±§¶¤°³¯ §¨ µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼ ¬± ¤±∏¤µ¼ ·² ⁄¨ ¦¨ °¥¨µ º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¤·¨§q Ρεσυλτ : × «¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¼ ²©·«¨ • °2
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¶¤°³¯ 2¨µ¨ª¬²±¶²µ¶¤°³¯ 2¨·¬°¨qΧονχλυσιον : ׫¬¶• °2‹°≤ ° ·¨«²§¬¶¶¬°³¯¨o¶³¨ ¦¬©¬¦¤±§ ¬¨¤¦·q׫¨ ¦²±·¨±·¶²© ¤±ª¬©¨µ¬±¬±·«¨
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≈责任编辑 李 禾 
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